【優(yōu)化指導(dǎo)】2014高考?xì)v史總復(fù)習(xí) 專題一 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課件 新人教版選修1

1、專題一微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用專題一微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用選修1知識(shí)內(nèi)容知識(shí)內(nèi)容考綱要求考綱要求1.微生物的分離與培養(yǎng)微生物的分離與培養(yǎng)2.某種微生物數(shù)量的測(cè)定某種微生物數(shù)量的測(cè)定3.培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用4.利用微生物發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微利用微生物發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應(yīng)用生物在其他方面的應(yīng)用知識(shí)點(diǎn)一：微生物的分離與培養(yǎng)知識(shí)點(diǎn)一：微生物的分離與培養(yǎng)1培養(yǎng)基培養(yǎng)基判斷正誤判斷正誤(1)據(jù)物理狀態(tài)的不同，培養(yǎng)基只有液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)據(jù)物理狀態(tài)的不同，培養(yǎng)基只有液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基兩種類型?；鶅煞N類型。( )(2)培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)

2、鹽四種成培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽四種成分。分。 ( )(3)在配制培養(yǎng)基時(shí)，除滿足營(yíng)養(yǎng)需求外，還應(yīng)考慮在配制培養(yǎng)基時(shí)，除滿足營(yíng)養(yǎng)需求外，還應(yīng)考慮pH、O2及特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求。及特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求。( )2無(wú)菌技術(shù)無(wú)菌技術(shù)連線連線倒平板倒平板 滅菌滅菌 稱量稱量 (2)純化大腸桿菌的方法：純化大腸桿菌的方法：常用的微生物接種方法有常用的微生物接種方法有 和和 。平板劃線法：是通過(guò)平板劃線法：是通過(guò) 在瓊脂固體培養(yǎng)基表在瓊脂固體培養(yǎng)基表面面 操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。面。稀釋涂布平板法：是將菌液進(jìn)行一系列的稀釋涂布平板

3、法：是將菌液進(jìn)行一系列的 ，然后將不同稀釋度的菌液分別然后將不同稀釋度的菌液分別 到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面。到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面。平板劃線法平板劃線法稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法接種環(huán)接種環(huán)連續(xù)劃線連續(xù)劃線梯度稀釋梯度稀釋涂布涂布1微生物的營(yíng)養(yǎng)微生物的營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要素營(yíng)養(yǎng)要素來(lái)源來(lái)源功能功能碳碳源源無(wú)機(jī)無(wú)機(jī)碳源碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳無(wú)機(jī)物等含碳無(wú)機(jī)物構(gòu)成細(xì)胞中的物質(zhì)和一些代謝構(gòu)成細(xì)胞中的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物；產(chǎn)物；有機(jī)碳源既是碳源又是能源有機(jī)碳源既是碳源又是能源有機(jī)有機(jī)碳源碳源糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、石油、花生粉餅等機(jī)酸、石油、花生粉餅等氮氮源源無(wú)機(jī)無(wú)機(jī)

4、氮源氮源無(wú)機(jī)氮：無(wú)機(jī)氮：NH3、銨鹽、硝、銨鹽、硝酸鹽、酸鹽、N2等等將無(wú)機(jī)氮合成含氮的代謝產(chǎn)物將無(wú)機(jī)氮合成含氮的代謝產(chǎn)物有機(jī)有機(jī)氮源氮源牛肉膏、蛋白胨、核酸、牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸尿素、氨基酸合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝產(chǎn)物產(chǎn)物生長(zhǎng)因子生長(zhǎng)因子維生素、氨基酸、堿基維生素、氨基酸、堿基酶和核酸的組成成分；酶和核酸的組成成分；參與參與代謝過(guò)程中的酶促反應(yīng)代謝過(guò)程中的酶促反應(yīng)2.培養(yǎng)基的類型及作用培養(yǎng)基的類型及作用劃分標(biāo)準(zhǔn)劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基種類特點(diǎn)特點(diǎn)用途用途物理性質(zhì)物理性質(zhì)液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基不加凝固劑不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)半固體培養(yǎng)基

5、基加凝固劑，加凝固劑，如瓊脂如瓊脂觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分類鑒定觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分類鑒定固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、保微生物分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、保藏菌種藏菌種用途用途選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基允許特定種類的允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)他微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)、分離出特定微生物，如培養(yǎng)培養(yǎng)、分離出特定微生物，如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽在培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在

6、培養(yǎng)謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類的微生物，如用伊紅鑒別不同種類的微生物，如用伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌中是否有大腸桿菌(若有，菌落呈若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤深紫色，并帶有金屬光澤)3.消毒與滅菌消毒與滅菌(1)消毒和滅菌的區(qū)別消毒和滅菌的區(qū)別條件條件結(jié)果結(jié)果常用的方法常用的方法消消毒毒較為溫和的較為溫和的物理或化學(xué)物理或化學(xué)方法方法僅殺死物體表面或僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物有害的微生物(不包不包括芽孢和孢子括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴煮沸消毒法、巴

7、氏消毒法、紫外氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消線或化學(xué)藥物消毒法毒法滅滅菌菌強(qiáng)烈的理化強(qiáng)烈的理化因素因素殺死物體內(nèi)外所有殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽的微生物，包括芽孢和孢子孢和孢子灼燒滅菌、干熱灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌、高壓蒸汽滅菌滅菌 用酒精消毒時(shí)，用酒精消毒時(shí)，70%的酒精殺菌效果最好，原因的酒精殺菌效果最好，原因是：濃度過(guò)高，使菌體表面蛋白質(zhì)凝固成一層保護(hù)膜，乙醇分是：濃度過(guò)高，使菌體表面蛋白質(zhì)凝固成一層保護(hù)膜，乙醇分子不能滲入其中；濃度過(guò)低，殺菌力減弱。子不能滲入其中；濃度過(guò)低，殺菌力減弱。(2)無(wú)菌技術(shù)主要操作要求無(wú)菌技術(shù)主要操作要求實(shí)驗(yàn)前應(yīng)對(duì)操作空間、操作人員消毒，對(duì)所用器

8、具和培實(shí)驗(yàn)前應(yīng)對(duì)操作空間、操作人員消毒，對(duì)所用器具和培養(yǎng)基滅菌。養(yǎng)基滅菌。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行時(shí)需在酒精燈火焰周圍無(wú)菌區(qū)操作，另外要避實(shí)驗(yàn)進(jìn)行時(shí)需在酒精燈火焰周圍無(wú)菌區(qū)操作，另外要避免已滅菌處理材料再次污染。免已滅菌處理材料再次污染。解析：解析：滅菌是指殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和滅菌是指殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子，而消毒僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生孢子，而消毒僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物物(不包括芽孢和孢子不包括芽孢和孢子)。答案：答案：B2下列常用的無(wú)菌操作中錯(cuò)誤的是下列常用的無(wú)菌操作中錯(cuò)誤的是()A無(wú)菌操作的目的是防止雜菌污染無(wú)菌操作的目的是防止雜

9、菌污染B用酒精擦拭雙手的方法對(duì)操作者進(jìn)行消毒用酒精擦拭雙手的方法對(duì)操作者進(jìn)行消毒C實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行D玻璃器皿玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿吸管、培養(yǎng)皿)可用酒精擦拭可用酒精擦拭解析：解析：對(duì)操作者應(yīng)用較溫和的方法進(jìn)行消毒。實(shí)驗(yàn)操作過(guò)對(duì)操作者應(yīng)用較溫和的方法進(jìn)行消毒。實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。程應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。對(duì)無(wú)菌操作用到的玻璃器皿要用干熱滅菌的方法徹底消滅其中對(duì)無(wú)菌操作用到的玻璃器皿要用干熱滅菌的方法徹底消滅其中的微生物，用酒精擦拭不能達(dá)到目的。的微生物，用酒精擦拭不能達(dá)到目

10、的。答案：答案：D知識(shí)點(diǎn)二：土壤中分離尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)知識(shí)點(diǎn)二：土壤中分離尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)1土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)判斷正誤判斷正誤(1)只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。( )(2)篩選分解尿素的細(xì)菌應(yīng)以尿素作為培養(yǎng)基中的唯一碳篩選分解尿素的細(xì)菌應(yīng)以尿素作為培養(yǎng)基中的唯一碳源。源。 ( )(3)統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌一般用平板劃線法。統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌一般用平板劃線法。 ( )(4)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變藍(lán)，則說(shuō)明篩選到分解尿素的細(xì)

11、菌。示劑變藍(lán)，則說(shuō)明篩選到分解尿素的細(xì)菌。( )復(fù)合酶復(fù)合酶 C1酶、酶、CX酶和葡萄糖苷酶酶和葡萄糖苷酶 纖維二糖纖維二糖 (2)篩選方法篩選方法方法：方法： 染色法，即通過(guò)是否產(chǎn)生染色法，即通過(guò)是否產(chǎn)生 來(lái)來(lái)篩選纖維素分解菌。篩選纖維素分解菌。培養(yǎng)基：以培養(yǎng)基：以 為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。剛果紅剛果紅透明圈透明圈纖維素纖維素(3)實(shí)驗(yàn)流程實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣：富含土壤取樣：富含 的環(huán)境的環(huán)境選擇培養(yǎng)：用選擇培養(yǎng)：用 培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的數(shù)量的數(shù)量梯度稀釋梯度稀釋纖維素纖維素選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基涂布平板：將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上

12、涂布平板：將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落：產(chǎn)生挑選產(chǎn)生透明圈的菌落：產(chǎn)生 的菌落周圍出的菌落周圍出現(xiàn)透明圈現(xiàn)透明圈纖維素酶纖維素酶1微生物的純化培養(yǎng)一平板劃線法與稀釋涂布平板法微生物的純化培養(yǎng)一平板劃線法與稀釋涂布平板法方法方法平板劃線法平板劃線法稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法注意注意事項(xiàng)事項(xiàng)(1)接種環(huán)的灼燒：接種環(huán)的灼燒：第一次劃線前：殺死接種環(huán)上的第一次劃線前：殺死接種環(huán)上的微生物，避免污染培養(yǎng)物微生物，避免污染培養(yǎng)物每次劃線前：殺死殘留菌種，保每次劃線前：殺死殘留菌種，保證每次劃線菌種來(lái)自上次劃線末端證每次劃線菌種來(lái)自上次劃線末端劃線結(jié)束后：殺死殘留菌種，避劃

13、線結(jié)束后：殺死殘留菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者免污染環(huán)境和感染操作者(2)灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后再進(jìn)灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后再進(jìn)行操作，以免溫度太高殺死菌種行操作，以免溫度太高殺死菌種(3)劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連域相連(4)劃線用力要大小適當(dāng)，防止用力劃線用力要大小適當(dāng)，防止用力過(guò)大將培養(yǎng)基劃破過(guò)大將培養(yǎng)基劃破(1)稀釋操作時(shí)：每支試管及其中的稀釋操作時(shí)：每支試管及其中的9 mL水、移液管等均需滅菌；操作水、移液管等均需滅菌；操作時(shí)，試管口和移液管應(yīng)在離火焰時(shí)，試管口和移液管應(yīng)在離火焰12 cm處處(2)涂布平板時(shí)：涂布平板時(shí)：涂布器用體積分?jǐn)?shù)為涂布

14、器用體積分?jǐn)?shù)為70%酒精消酒精消毒，取出時(shí)，讓多余酒精在燒杯中毒，取出時(shí)，讓多余酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃器在酒精燈火焰上引燃不要將過(guò)熱的涂布器放在盛放酒不要將過(guò)熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精精的燒杯中，以免引燃其中的酒精酒精燈與培養(yǎng)皿距離要合適，移酒精燈與培養(yǎng)皿距離要合適，移液管管頭不要接觸任何物體液管管頭不要接觸任何物體2.統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法(1)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法顯微鏡直接計(jì)數(shù)法原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積

15、的樣品中微生物的數(shù)量。下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。(2)間接計(jì)數(shù)法間接計(jì)數(shù)法(活菌計(jì)數(shù)法活菌計(jì)數(shù)法)原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。菌落數(shù)就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。操作操作a設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。b為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌

16、落數(shù)在為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30300的平板的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。進(jìn)行計(jì)數(shù)。3兩種剛果紅染色法的比較兩種剛果紅染色法的比較優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)顯示出的顏色反應(yīng)顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分基本上是纖維素分解菌的作用解菌的作用操作簡(jiǎn)便，不存在菌落混雜問(wèn)操作簡(jiǎn)便，不存在菌落混雜問(wèn)題題缺點(diǎn)缺點(diǎn)操作繁瑣，加入剛操作繁瑣，加入剛果紅溶液會(huì)使菌落果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜之間發(fā)生混雜(1)由于在纖維素粉、瓊脂和土由于在纖維素粉、瓊脂和土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì)，可豆汁中都含有淀粉類物質(zhì)，可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)；出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)；(2)有些微生有些微生物具有降解色素的

17、能力，長(zhǎng)時(shí)物具有降解色素的能力，長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)會(huì)降解剛果紅，從而形間培養(yǎng)會(huì)降解剛果紅，從而形成明顯的透明圈，這些微生物成明顯的透明圈，這些微生物與纖維素分解菌不易區(qū)分與纖維素分解菌不易區(qū)分(1)選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的濃度，選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的濃度，確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物。確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物。(2)涉及到的微生物技術(shù)主要有：培養(yǎng)基的配制、無(wú)菌操作涉及到的微生物技術(shù)主要有：培養(yǎng)基的配制、無(wú)菌操作技術(shù)、稀釋涂布平板法、選擇培養(yǎng)基的作用、土壤取樣等。技術(shù)、稀釋涂布平板法、選擇培養(yǎng)基的作用、土壤取樣等。3可以鑒定出分解尿素的細(xì)菌的方法是可以鑒定出分解

18、尿素的細(xì)菌的方法是 ()A以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑B以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑C以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹試劑試劑D以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑解析：解析：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中，不能分解尿素獲在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中，不能分解尿素獲得氮源的細(xì)菌不能生長(zhǎng)，而分解尿素的細(xì)菌能利用尿素作氮得氮源的細(xì)菌不能生長(zhǎng)，而分解尿素的細(xì)菌能利用尿素作氮源，將尿素分解為氨，使源，將尿素分解為氨，使pH

19、升高。若培養(yǎng)基中加入酚紅指示升高。若培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，指示劑將變紅。此培養(yǎng)基既屬于選擇培養(yǎng)基，又屬于鑒別劑，指示劑將變紅。此培養(yǎng)基既屬于選擇培養(yǎng)基，又屬于鑒別培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。答案：答案：A4.如圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序?yàn)槿鐖D是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序?yàn)?2345。下。下列操作方法正確的是列操作方法正確的是()A操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B劃線操作須在火焰上進(jìn)行劃線操作須在火焰上進(jìn)行C在在5區(qū)域中才可以得到所需菌落區(qū)域中才可以得到所需菌落D在在12345區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌解析：解析：本題

20、考查平板劃線操作方法。在每次劃線前后都要本題考查平板劃線操作方法。在每次劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼燒，接對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼燒，接種時(shí)劃線操作是在火焰邊進(jìn)行。在種時(shí)劃線操作是在火焰邊進(jìn)行。在5個(gè)區(qū)域中，只要有單個(gè)活細(xì)個(gè)區(qū)域中，只要有單個(gè)活細(xì)菌，通過(guò)培養(yǎng)即可獲得所需菌落。菌，通過(guò)培養(yǎng)即可獲得所需菌落。答案：答案：D (2012北京高考北京高考)高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，在接種時(shí)不進(jìn)行高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，在接種時(shí)不進(jìn)行嚴(yán)格無(wú)菌操作對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響最大的一項(xiàng)是嚴(yán)格無(wú)菌操作對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響最大的一項(xiàng)是A將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中將少許干酵母加入到新

21、鮮的葡萄汁中B將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上C將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無(wú)菌培養(yǎng)基上將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無(wú)菌培養(yǎng)基上D將土壤浸出液涂布在無(wú)菌的選擇培養(yǎng)基上將土壤浸出液涂布在無(wú)菌的選擇培養(yǎng)基上解析：解析：生產(chǎn)果酒和腐乳時(shí)對(duì)無(wú)菌的要求不是很高，接種不生產(chǎn)果酒和腐乳時(shí)對(duì)無(wú)菌的要求不是很高，接種不需要進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作；土壤浸出液中含有多種雜菌，所以需要進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作；土壤浸出液中含有多種雜菌，所以利用選擇培養(yǎng)基篩選土壤浸出液中特定微生物時(shí)，不進(jìn)行嚴(yán)格利用選擇培養(yǎng)基篩選土壤浸出液中特定微生物時(shí)，不進(jìn)行嚴(yán)格無(wú)菌操作也不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；植物組織培養(yǎng)技術(shù)成功的關(guān)鍵無(wú)菌

22、操作也不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；植物組織培養(yǎng)技術(shù)成功的關(guān)鍵是無(wú)菌條件，若接種時(shí)不進(jìn)行嚴(yán)格無(wú)菌操作將可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失是無(wú)菌條件，若接種時(shí)不進(jìn)行嚴(yán)格無(wú)菌操作將可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，故敗，故C項(xiàng)符合題意。項(xiàng)符合題意。答案：答案：C (1)高溫加熱滅菌，其原理就是使細(xì)菌體內(nèi)蛋白高溫加熱滅菌，其原理就是使細(xì)菌體內(nèi)蛋白質(zhì)變性，而達(dá)到殺滅細(xì)菌的作用。質(zhì)變性，而達(dá)到殺滅細(xì)菌的作用。(2)化學(xué)藥劑的滅菌消毒方法，其作用原理是使細(xì)菌體內(nèi)蛋化學(xué)藥劑的滅菌消毒方法，其作用原理是使細(xì)菌體內(nèi)蛋白質(zhì)變性，但是化學(xué)物質(zhì)很難透過(guò)孢子或芽孢的堅(jiān)硬外層進(jìn)入白質(zhì)變性，但是化學(xué)物質(zhì)很難透過(guò)孢子或芽孢的堅(jiān)硬外層進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，因此化學(xué)方法難以消滅孢子和芽

23、孢。細(xì)胞內(nèi)，因此化學(xué)方法難以消滅孢子和芽孢。(3)培養(yǎng)基的制作是否合格的驗(yàn)證：如果未接種的培養(yǎng)基在培養(yǎng)基的制作是否合格的驗(yàn)證：如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫恒溫箱中保溫12天后無(wú)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功天后無(wú)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。的，否則需要重新制備。(4)平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的溫度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更的溫度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)；又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。好地?fù)]發(fā)；又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基

24、，造成污染。(5)菌種的保藏菌種的保藏短期保存：固體斜面培養(yǎng)基上短期保存：固體斜面培養(yǎng)基上4保存，菌種易被污染或保存，菌種易被污染或產(chǎn)生變異。產(chǎn)生變異。長(zhǎng)期保存：長(zhǎng)期保存：20甘油管在冷凍箱中保藏。甘油管在冷凍箱中保藏。請(qǐng)回答：請(qǐng)回答：(1)在配制培養(yǎng)基時(shí)，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因?yàn)樵谂渲婆囵B(yǎng)基時(shí)，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因?yàn)镠p含有含有_，它能以尿素作為氮源；若有，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周，則菌落周圍會(huì)出現(xiàn)圍會(huì)出現(xiàn)_色環(huán)帶。色環(huán)帶。(2)下列對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是下列對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是_滅滅菌。菌。A高壓蒸汽高壓蒸汽B紫外燈照射紫外燈照射C70%酒

25、精浸泡酒精浸泡 D過(guò)濾過(guò)濾(3)步驟步驟X表示表示_。在無(wú)菌條件下操作時(shí)，先將菌。在無(wú)菌條件下操作時(shí)，先將菌液稀釋，然后將菌液液稀釋，然后將菌液_到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得目的是為了獲得_菌落。菌落。(4)在培養(yǎng)時(shí)，需將培養(yǎng)皿倒置并放在在培養(yǎng)時(shí)，需將培養(yǎng)皿倒置并放在_中。若不中。若不倒置培養(yǎng)，將導(dǎo)致倒置培養(yǎng)，將導(dǎo)致_。(5)臨床上用臨床上用14C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)人體是否感染呼氣試驗(yàn)檢測(cè)人體是否感染Hp，其基本原，其基本原理是理是Hp能將能將14C標(biāo)記的標(biāo)記的_分解為分解為NH3和和14CO。 解析：解析：(1)幽門(mén)螺桿菌幽門(mén)螺桿菌(Hp)含有脲酶，能以尿素為

26、氮源，在含有脲酶，能以尿素為氮源，在加入尿素和酚紅指示劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)加入尿素和酚紅指示劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)Hp，由于尿素經(jīng)脲酶的，由于尿素經(jīng)脲酶的降解可產(chǎn)生堿性的降解可產(chǎn)生堿性的NH3，NH3能使培養(yǎng)基中的酚紅由紅黃色變成能使培養(yǎng)基中的酚紅由紅黃色變成紅色，故菌落周圍會(huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶。紅色，故菌落周圍會(huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶。(2)由于尿素加熱會(huì)分解，由于尿素加熱會(huì)分解，對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌最好用對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌最好用G6玻璃砂漏斗過(guò)濾。玻璃砂漏斗過(guò)濾。(3)微生物的分微生物的分離和培養(yǎng)步驟是：配制培養(yǎng)基離和培養(yǎng)步驟是：配制培養(yǎng)基滅菌、倒平板滅菌、倒平板接種接種培養(yǎng)。培養(yǎng)。為獲得單菌落，接種操作前應(yīng)先將菌液

27、稀釋，然后將菌液涂布為獲得單菌落，接種操作前應(yīng)先將菌液稀釋，然后將菌液涂布到培養(yǎng)基平面上即可。到培養(yǎng)基平面上即可。 (4)微生物培養(yǎng)時(shí)需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫培養(yǎng)箱中，若微生物培養(yǎng)時(shí)需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫培養(yǎng)箱中，若不倒置培養(yǎng)，則無(wú)法形成單菌落。不倒置培養(yǎng)，則無(wú)法形成單菌落。(5)幽門(mén)螺桿菌能將幽門(mén)螺桿菌能將14C標(biāo)記的標(biāo)記的尿素分解為尿素分解為NH3和和14CO2，故臨床上常用，故臨床上常用14C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)人體內(nèi)呼氣試驗(yàn)檢測(cè)人體內(nèi)幽門(mén)螺桿菌的存在。幽門(mén)螺桿菌的存在。答案：答案：(1)脲酶紅脲酶紅(2)D(3)接種涂布單接種涂布單(4)恒溫培養(yǎng)箱無(wú)法形成單菌落恒溫培養(yǎng)箱無(wú)法形成單菌落(5)

28、尿素尿素選擇培養(yǎng)基及應(yīng)用實(shí)例選擇培養(yǎng)基及應(yīng)用實(shí)例(1)選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)需要的微生物的生長(zhǎng)，目的是從眾需要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)需要的微生物的生長(zhǎng)，目的是從眾多微生物中分離所需要的微生物。多微生物中分離所需要的微生物。(2)選擇培養(yǎng)基應(yīng)用實(shí)例選擇培養(yǎng)基應(yīng)用實(shí)例培養(yǎng)基中加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌。培養(yǎng)基中加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌。培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球菌。培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球菌。培養(yǎng)基中缺乏氮源時(shí)，可以分離固氮微生物，因?yàn)榉枪膛囵B(yǎng)基中缺乏氮源

29、時(shí)，可以分離固氮微生物，因?yàn)榉枪痰⑸锊荒茉诖伺囵B(yǎng)基上生存。氮微生物不能在此培養(yǎng)基上生存。當(dāng)培養(yǎng)基的某種營(yíng)養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時(shí)，也具有分當(dāng)培養(yǎng)基的某種營(yíng)養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時(shí)，也具有分離效果。如石油是唯一碳源時(shí)，可以抑制不能利用石油的微生離效果。如石油是唯一碳源時(shí)，可以抑制不能利用石油的微生物的生長(zhǎng)，使能夠利用石油的微生物生存，達(dá)到分離能消除石物的生長(zhǎng)，使能夠利用石油的微生物生存，達(dá)到分離能消除石油污染的微生物的目的。油污染的微生物的目的。改變微生物的培養(yǎng)條件，也可以達(dá)到分離微生物的目改變微生物的培養(yǎng)條件，也可以達(dá)到分離微生物的目的，如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生的，如將

30、培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物。物。 1(2012山東基本能力測(cè)試山東基本能力測(cè)試)除了高溫加熱以外，其它滅菌除了高溫加熱以外，其它滅菌方法還有方法還有()A紫外線照射紫外線照射B真空包裝真空包裝C用保鮮膜密閉用保鮮膜密閉 D添加防腐劑添加防腐劑解析：解析：滅菌是使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微滅菌是使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物生物(包括芽孢和孢子包括芽孢和孢子)。本題中真空包裝、添加防腐劑、用保鮮。本題中真空包裝、添加防腐劑、用保鮮膜密閉都起到了抑菌作用，紫外線照射使細(xì)菌的蛋白質(zhì)變性，膜密閉都起到了抑菌作用，紫外線照射使細(xì)菌的蛋白質(zhì)變性，核酸受破壞，是滅菌

31、方法。核酸受破壞，是滅菌方法。答案：答案：A2(2011重慶高考重慶高考)下列有關(guān)細(xì)菌培養(yǎng)的敘述，正確的是下列有關(guān)細(xì)菌培養(yǎng)的敘述，正確的是()A在瓊脂固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的單個(gè)菌落含有多種細(xì)菌在瓊脂固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的單個(gè)菌落含有多種細(xì)菌B在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制真菌而促進(jìn)細(xì)菌生長(zhǎng)在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制真菌而促進(jìn)細(xì)菌生長(zhǎng)C向液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進(jìn)破傷風(fēng)桿菌的生長(zhǎng)向液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進(jìn)破傷風(fēng)桿菌的生長(zhǎng)D在半固體培養(yǎng)基中接種細(xì)菌培養(yǎng)后可以觀察其運(yùn)動(dòng)在半固體培養(yǎng)基中接種細(xì)菌培養(yǎng)后可以觀察其運(yùn)動(dòng)解析：解析：?jiǎn)蝹€(gè)菌落中只含有一種細(xì)菌；青霉素能抑制細(xì)菌生單個(gè)菌落中只含有一種細(xì)菌；青霉素能抑制細(xì)菌

32、生長(zhǎng)，而對(duì)真菌沒(méi)有影響；破傷風(fēng)桿菌是厭氧型細(xì)菌，通入氧氣長(zhǎng)，而對(duì)真菌沒(méi)有影響；破傷風(fēng)桿菌是厭氧型細(xì)菌，通入氧氣會(huì)抑制其生長(zhǎng)。會(huì)抑制其生長(zhǎng)。答案：答案：D3(2012上海高考上海高考)回答下列關(guān)于微生物和酶的問(wèn)題?；卮鹣铝嘘P(guān)于微生物和酶的問(wèn)題。高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過(guò)程如從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過(guò)程如圖所示。圖所示。(1)過(guò)程稱為過(guò)程稱為_(kāi)，過(guò)程是為了過(guò)程是為了_。(2)I號(hào)培養(yǎng)基稱為號(hào)培養(yǎng)基稱為_(kāi)(按功能分按功能分)；該培養(yǎng)基中除了加；該培養(yǎng)基中

33、除了加入淀粉外，還需加入另一種重要的營(yíng)養(yǎng)成分入淀粉外，還需加入另一種重要的營(yíng)養(yǎng)成分_。A瓊脂瓊脂B葡萄糖葡萄糖C硝酸銨硝酸銨D碳酸氫鈉碳酸氫鈉(3)一般對(duì)配制的培養(yǎng)基采用高壓滅菌，其中一般對(duì)配制的培養(yǎng)基采用高壓滅菌，其中“高壓高壓”是為是為了了_。在高溫淀粉酶運(yùn)用到工業(yè)生產(chǎn)前，需對(duì)該酶的最佳溫度范在高溫淀粉酶運(yùn)用到工業(yè)生產(chǎn)前，需對(duì)該酶的最佳溫度范圍進(jìn)行測(cè)定。圖中的曲線圍進(jìn)行測(cè)定。圖中的曲線表示酶在各種溫度下酶活性相對(duì)最表示酶在各種溫度下酶活性相對(duì)最高酶活性的百分比。將酶在不同溫度下保溫足夠長(zhǎng)的時(shí)間，再高酶活性的百分比。將酶在不同溫度下保溫足夠長(zhǎng)的時(shí)間，再在酶活性最高的溫度下測(cè)其殘余酶活性，由此

34、得到的數(shù)據(jù)為酶在酶活性最高的溫度下測(cè)其殘余酶活性，由此得到的數(shù)據(jù)為酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，即圖中的曲線的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，即圖中的曲線。(4)根據(jù)圖中的數(shù)據(jù)，判斷該酶使用的最佳溫度范圍是根據(jù)圖中的數(shù)據(jù)，判斷該酶使用的最佳溫度范圍是_。A4050 B5060C6070 D7080(5)據(jù)圖判斷下列敘述錯(cuò)誤的是據(jù)圖判斷下列敘述錯(cuò)誤的是_。A該酶只能在最佳溫度范圍內(nèi)測(cè)出活性該酶只能在最佳溫度范圍內(nèi)測(cè)出活性B曲線曲線35數(shù)據(jù)點(diǎn)是在數(shù)據(jù)點(diǎn)是在80時(shí)測(cè)得的時(shí)測(cè)得的C曲線曲線表明表明80是該酶活性最高的溫度是該酶活性最高的溫度D曲線曲線表明該酶的熱穩(wěn)定性在表明該酶的熱穩(wěn)定性在70之后急劇下降之后急劇下降解析：解析：欲

35、培養(yǎng)和分離嗜熱菌單個(gè)菌落可采用稀釋涂布平板欲培養(yǎng)和分離嗜熱菌單個(gè)菌落可采用稀釋涂布平板法；法；為稀釋過(guò)程，為稀釋過(guò)程，為篩選過(guò)程；為篩選過(guò)程；I號(hào)培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，號(hào)培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，加入硝酸銨的目的主要是補(bǔ)充氮元素；高溫滅菌的目的是殺死加入硝酸銨的目的主要是補(bǔ)充氮元素；高溫滅菌的目的是殺死包括細(xì)菌芽孢等在內(nèi)的全部生物；據(jù)圖可知，工業(yè)生產(chǎn)中該酶包括細(xì)菌芽孢等在內(nèi)的全部生物；據(jù)圖可知，工業(yè)生產(chǎn)中該酶的最佳溫度范圍為的最佳溫度范圍為6070。答案：答案：(1)稀釋單個(gè)菌落的篩選稀釋單個(gè)菌落的篩選(或篩選或篩選)(2)選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基C(3)殺死培養(yǎng)基中的細(xì)菌芽孢殺死培養(yǎng)基中的細(xì)菌芽孢(4)

36、C(5)A4(2011山東高考山東高考)研究發(fā)現(xiàn)柚皮精油和乳酸菌素研究發(fā)現(xiàn)柚皮精油和乳酸菌素(小分子小分子蛋白質(zhì)蛋白質(zhì))均有抑菌作用，兩者的提取及應(yīng)用如圖所示。均有抑菌作用，兩者的提取及應(yīng)用如圖所示。(1)柚皮易焦糊，宜采用柚皮易焦糊，宜采用_法提取柚皮精油，該過(guò)法提取柚皮精油，該過(guò)程得到的糊狀液體可通過(guò)程得到的糊狀液體可通過(guò)_除去其中的固體雜質(zhì)。除去其中的固體雜質(zhì)。(2)篩選乳酸菌篩選乳酸菌A時(shí)可選用平板劃線法或時(shí)可選用平板劃線法或_接種。接種。對(duì)新配制的培養(yǎng)基滅菌時(shí)所用的設(shè)備是對(duì)新配制的培養(yǎng)基滅菌時(shí)所用的設(shè)備是_。實(shí)驗(yàn)前需。實(shí)驗(yàn)前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行_處理。處理。(3)培養(yǎng)基

37、中的尿素可為乳酸菌培養(yǎng)基中的尿素可為乳酸菌A生長(zhǎng)提供生長(zhǎng)提供_。電。電泳法純化乳酸菌素時(shí)，若分離帶電荷相同的蛋白質(zhì)，則其分子泳法純化乳酸菌素時(shí)，若分離帶電荷相同的蛋白質(zhì)，則其分子量越大，電泳速度量越大，電泳速度_。(4)抑菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，在長(zhǎng)滿致病菌的平板上，會(huì)出現(xiàn)以抑菌物抑菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，在長(zhǎng)滿致病菌的平板上，會(huì)出現(xiàn)以抑菌物質(zhì)為中心的透明圈?？赏ㄟ^(guò)測(cè)定透明圈的質(zhì)為中心的透明圈?？赏ㄟ^(guò)測(cè)定透明圈的_來(lái)比較柚來(lái)比較柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。解析：解析：柚皮精油宜采用壓榨法進(jìn)行提取，要除去其中雜質(zhì)柚皮精油宜采用壓榨法進(jìn)行提取，要除去其中雜質(zhì)可采用過(guò)濾法。培養(yǎng)基中的尿素可為乳酸菌提供氮源。電泳法可采用過(guò)濾法。培養(yǎng)基中的尿素可為乳酸菌提供氮源