規(guī)章制度-婦科千金方化學(xué)成分的研究

1、婦科千金方化學(xué)成分的研究婦科千金方化學(xué)成分的研究 本文關(guān)鍵詞：千金方，婦科，化學(xué)成分，研究 婦科千金方化學(xué)成分的研究 本文簡(jiǎn)介：摘要：復(fù)方中藥婦科千金方由千斤撥、功勞木、穿心蓮、金櫻根、單面針、當(dāng)歸、雞血藤和黨參組成，該文系統(tǒng)研究了婦科千金方的化學(xué)組成。采用硅膠、SephadexLH20、大孔吸附樹脂和反相高效液相等柱色譜方法對(duì)婦科千金方的提取物浸膏進(jìn)行分離純化，通過化合物的譜學(xué)數(shù)據(jù)鑒定其結(jié)構(gòu)。共分離得到38個(gè)化合物，分別鑒 婦科千金方化學(xué)成分的研究 本文內(nèi)容： 摘要：復(fù)方中藥婦科千金方由千斤撥、功勞木、穿心蓮、金櫻根、單面針、當(dāng)歸、雞血藤和黨參組成， 該文系統(tǒng)研究了婦科千金方的化學(xué)組成。采用

2、硅膠、Sephadex LH 20、大孔吸附樹脂和反相高效液相等柱色譜方法對(duì)婦科千金方的提取物浸膏進(jìn)行分離純化， 通過化合物的譜學(xué)數(shù)據(jù)鑒定其結(jié)構(gòu)。共分離得到38個(gè)化合物， 分別鑒定為Z-3-丁烯基苯酞 （1） 、Z-藁本內(nèi)酯 （2） 、洋川芎內(nèi)酯I （3） 、洋川芎內(nèi)酯H （4） 、香草醛 （5） 、7-O-甲基漢黃芩素 （6） 、漢黃芩素 （7） 、穿心蓮素 （8） 、19-羥基-8 （17） , 13-對(duì)映-半日花二烯-15, 16-內(nèi)酯 （9） 、新穿心蓮內(nèi)酯苷元 （10） 、穿心蓮內(nèi)酯 （11） 、脫水穿心蓮內(nèi)酯 （12） 、異穿心蓮內(nèi)酯 （13） 、穿心蓮黃酮 （14） 、鷹嘴豆芽素

3、A （15） 、5-羥基-7, 8, 2, 5-四甲氧基黃酮 （16） 、芒柄花素 （17） 、大豆苷元 （18） 、染料木素 （19） 、苯甲酸 （20） 、香草酸 （21） 、反式阿魏酸 （22） 、水楊酸 （23） 、大豆苷 （24） 、染料木素-7-O-D-呋喃芹糖基- （16） -O-D-吡喃葡萄糖苷 （25） 、芹菜素-7-O-D-葡萄糖醛酸苷 （26） 、穿心蓮黃酮苷C （27） 、芹菜素-7-O-D-葡萄糖醛酸苷-6“-甲酯 （28） 、新穿心蓮內(nèi)酯 （29） 、染料木苷 （30） 、穿心蓮內(nèi)酯苷 （31） 、14-去氧-11, 12-二去氫穿心蓮內(nèi)酯苷 （32） 、黨參炔苷

4、（33） 、表兒茶素 （34） 、兒茶素 （35） 、巴馬汀 （36） 、小檗堿 （37） 、藥根堿 （38） .結(jié)合之前單味藥研究結(jié)果來判斷， 來源于大葉千斤拔的有黃酮類化合物17, 19, 24, 30;來源于功勞木的有生物堿類化合物3638;來源于穿心蓮的有黃酮類化合物68, 14, 16, 27, 有二萜類化合物913, 29, 31, 32;來源于單面針的有酚類化合物5;來源于當(dāng)歸的有苯酞類化合物14和苯丙素類化合物22;來源于黨參的有炔類化合物33;來源于雞血藤的有黃酮類化合物15, 1719和酚酸類化合物21;而黃烷醇類的化合物34和35既可能來源于雞血藤， 也可能來源于金櫻根。

5、中藥復(fù)方化學(xué)成分具有可溯源性， 此為中藥復(fù)方化學(xué)成分物質(zhì)基礎(chǔ)研究提供了范例?；衔?5, 26和28迄今未見從組方單味藥中分離鑒定。 關(guān)鍵詞：婦科千金方； 中藥復(fù)方； 化學(xué)成分； 物質(zhì)基礎(chǔ)； 中藥物質(zhì)基礎(chǔ)研究是中藥繼承、發(fā)展、創(chuàng)新的關(guān)鍵科學(xué)問題， 中藥復(fù)方是中醫(yī)藥基本理論的物質(zhì)載體， 藥有個(gè)性之特長(zhǎng)， 方有合群之妙用， 中藥復(fù)方才是研究中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的良好切入點(diǎn)1.在對(duì)通脈方、左金方和都梁丸17等的系列研究中， 發(fā)現(xiàn)所含化合物之間有相互作用。本文以國(guó)家中藥保護(hù)品種婦科千金方為載體， 首先研究其物質(zhì)基礎(chǔ)， 為制定其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和研究藥味和/或化學(xué)成分之間的相互作用奠定基礎(chǔ)。婦科千金方有婦科千金片和

6、婦科千金膠囊兩個(gè)中成藥品種， 藥味組成相同， 由千斤拔、功勞木、穿心蓮、金櫻根、單面針、當(dāng)歸、雞血藤和黨參組成， 收載于中華人民共和國(guó)藥典；具有清熱除濕， 益氣化瘀的功效， 臨床主要用于慢性盆腔炎、子宮內(nèi)膜炎、慢性宮頸炎等18.該方臨床單獨(dú)應(yīng)用或聯(lián)合其他藥物應(yīng)用19, 療效確切， 市場(chǎng)前景良好， 已列入國(guó)家中藥標(biāo)準(zhǔn)化提高項(xiàng)目。關(guān)于其物質(zhì)基礎(chǔ)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)， 僅見婦科千金片HPLC特征指紋圖譜及多成分含量測(cè)定的報(bào)道20. 1材料 Bruker AV400型核磁共振波譜儀 （Bruker Bio Spin AG Facilities, Fallanden, Switzerland） , TMS為內(nèi)標(biāo)；

7、Trace ISQ LT GC-MS （EI-MS;Thermo Fisher Scientific, West Palm Beach, FL, USA） ;MDS SCIEX API QSTAR型質(zhì)譜儀 （ESI-TOF-MS;Applied Biosystems/MDS Scies., Foster City, CA, USA） ;LC 3000半制備型高效液相色譜 （SP-HPLC） 儀系統(tǒng) （北京創(chuàng)新通恒科技有限公司） , 配置P3050二元泵， CXTH-3000色譜工作站；ODS反相柱色譜硅膠為德國(guó)Merck公司產(chǎn)品；正相柱色譜硅膠 （200300目， 青島海洋化工廠） , Sep

8、hsdex LH-20為Pharmacia公司產(chǎn)品；MCI-gel CHP 20 （75150m） 為日本三菱化學(xué)產(chǎn)品；GF254薄層色譜 （TLC） 硅膠板分別為青島海洋化工廠和Merch公司 （Darmastadt, Germany） 產(chǎn)品。色譜級(jí)甲醇 （Me OH） 和乙腈 （ACN） 為美國(guó)Fisher Chemical產(chǎn)品；分析純乙醇、Me OH、乙酸乙酯 （Et OAc） 、三氯甲烷 （CHCl3） 、丙酮、環(huán)己烷、正丁醇 （Bu OH） 等均為北京化工廠產(chǎn)品。 組方8味藥材定點(diǎn)采購(gòu)， 由北京大學(xué)藥學(xué)院天然藥物學(xué)系楊秀偉教授鑒定， 生藥標(biāo)本保存在株洲千金藥業(yè)股份有限公司質(zhì)量部標(biāo)本室

9、和北京大學(xué)藥學(xué)院。穿心蓮為爵床科植物Andrographis paniculata （Burm.f.） Nees的干燥地上部分， 黨參為桔梗科植物Codonopsis pilosula （Franch.） Nannf.的干燥根， 當(dāng)歸為傘形科植物Angelica sinensis （Oliv.） Diels的干燥根；穿心蓮由廣西， 黨參和當(dāng)歸由甘肅相應(yīng)的規(guī)范化種植基地供應(yīng)。野生藥材大葉千斤拔為豆科植物Moghania macrophylla （Willd.） O.Kuntze的干燥根， 功勞木為小檗科植物Mahonia fortunei （Lindl.） Fedde.的干燥莖， 雞血藤為豆科植

10、物Spatholobus suberectus Dunn的干燥藤莖， 定點(diǎn)采購(gòu)于云南；金櫻根為薔薇科植物Rosa laevigata Michx.的干燥根， 單面針為蕓香科植物Zanthoxylum dissitum Hemsl.的干燥根， 定點(diǎn)采購(gòu)于湖南。 2提取與分離 按中國(guó)藥典2015年版婦科千金片/膠囊項(xiàng)下方法18由株洲千金藥業(yè)股份有限公司提取、制備婦科千金方提取物干膏 （FKQJ） 2.0 kg.將此干膏用3倍體積的Et OAc和Bu OH分別萃取8次， 得到Et OAc萃取物 （FKQJE, 156 g） 和Bu OH萃取物 （FKQJB, 203 g） . 取Et OAc萃取物

11、（FKQJE, 142.2 g） 硅膠拌樣后經(jīng)硅膠 （1 kg, 200300目） 柱色譜， 環(huán)己烷-Et OAc （9:1, 8:2, 7:3, 6:4, 5:5） 梯度洗脫， TLC檢識(shí)合并相似流分， 共得到10個(gè)亞流分 （Fr.110） .Fr.1 （橙色油狀物， 4.4 g） 經(jīng)硅膠柱色譜 （環(huán)己烷-Et OAc 100:1, 50:1, 20:1） 梯度洗脫， TLC檢識(shí)合并相同的流分， 得到3個(gè)流分 （Fr.1-1Fr.1-3） .Fr.1-2 （1.2 g） 經(jīng)硅膠柱色譜 （環(huán)己烷-Et OAc 20:1） 洗脫， 得到化合物1 （25 mg） 和2 （63 mg） .Fr.2

12、（1.2 g） 經(jīng)硅膠柱色譜 （環(huán)己烷-乙酸乙酯20:1, 10:1, 5:1） 梯度洗脫， TLC檢識(shí)合并相同流分， 得到3個(gè)流分 （Fr.2-1Fr.2-3） .Fr.3 （2.8 g） 經(jīng)硅膠柱色譜 （環(huán)己烷-Et OAc 20:1, 10:1, 5:1, 1:1） , 得到6個(gè)亞流分 （Fr.3-13-6） .Fr.3-2經(jīng)SP-HPLC （ACN-H2O 30:70） 得到化合物3 （8 mg） 和4 （10 mg） .Fr.4為墨綠色粉末， 通過TLC檢識(shí)， 在紫外燈下為一條粉色條帶， 含有大量葉綠素， 故通過MCI柱色譜除去色素 （Me OH-H2O 5:5, 6:4, 7:3,

13、 8:2, 9:1） , TLC檢識(shí)合并相似流分， 共得到4個(gè)亞流分 （Fr.4-14-4） .Fr.4-1經(jīng)SP-HPLC （ACN-H2O 50:50） 得到化合物5 （10mg） 和6 （45 mg） .Fr.4-4 （1.3 g） 經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜， 最終經(jīng)SP-HPLC （ACN-H2O 50:50） 得到化合物7 （12 mg） .Fr.5 （11 g） 通過MCI柱色譜除去色素 （Me OH-H2O 5:5, 6:4, 7:3, 8:2, 9:1） , TLC檢識(shí)合并相似流分， 共得到3個(gè)亞流分 （Fr.5-15-3） .Fr.5-1 （1.1 g） 經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜分離 （環(huán)己

14、烷-Et OAc 30:1, 10:1, 5:1, 1:1） , 最終經(jīng)SP-HPLC （CAN-H2O 45:55） 得到化合物8 （30 mg） , 9 （5 mg） , 10 （85 mg） .Fr.5-2 （3.5 g） 經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜分離 （環(huán)己烷-Et OAc 30:1, 10:1, 5:1, 1:1） , 最終經(jīng)SP-HPLC （ACN-H2O 35:65;流動(dòng)相A） 得到化合物11 （112 mg） , 12 （10 mg） , 13 （12 mg） .Fr.5-3 （0.7 g） 經(jīng)硅膠柱色譜分離 （環(huán)己烷-Et OAc 30:1, 10:1, 5:1, 1:1, v/v）

15、 , 得到2個(gè)亞流分 （Fr.5-3-1和5-3-2） , Fr.5-3-1經(jīng)SP-HPLC （ACN-H2O 45:55） 得到化合物14 （4 mg） 和15 （6 mg） .Fr.5-3-2經(jīng)SP-HPLC, 流動(dòng)相A洗脫， 得到化合物16 （3 mg） .Fr.6 （3.2 g） 通過MCI柱色譜 （Me OH-H2O 5:5, 6:4, 7:3, 8:2, 9:1） 除色素， TLC檢識(shí)合并相似流分， 共得到4個(gè)亞流分 （Fr.6-16-4） .Fr.6-2 （1.1 g） 經(jīng)硅膠柱色譜分離， 最終經(jīng)SP-HPLC （ACN-H2O 45:55） 得到化合物17 （3 mg） 和18

16、 （6 mg） .Fr.6-3經(jīng)SP-HPLC （ACN-H2O 35:65） 得到化合物19 （10 mg） .Fr.6-4經(jīng)制備性TLC （環(huán)己烷-Et OAc 5:1） 得到化合物20 （10 mg） .Fr.7 （5.6 g） 通過MCI柱色譜除色素 （Me OH-H2O5:5, 6:4, 7:3, 8:2, 9:1） , TLC檢識(shí)合并相似流分， 共得到2亞流分 （Fr.7-1和7-2） .Fr.7-1中析出白色粉末， 為化合物21 （5 mg） .Fr.7-2經(jīng)SP-HPLC （ACN-H2O 28:72） 得到化合物22 （6 mg） 和23 （10 mg） . Bu OH萃取物

17、 （FKQJB, 203.5 g） 加水溶解后， 采用D-101型大孔吸附樹脂富集FKQJB化學(xué)成分， 并依次用3倍柱體積水， 10%, 30%, 50%, 75%, 95%乙醇水洗脫， 分別得到水 （FKQJB0, 100.3 g） 、10%乙醇 （FKQJB 15, 15.3 g） 、30%乙醇 （FKQJB 30, 21.4 g） 、50%乙醇 （FKQJB 50, 30.8 g） 、75%乙醇 （FKQJB 75, 11.2 g） 、95%乙醇 （FKQJB 95, 10.4 g） 水洗脫物。通過TLC檢識(shí)對(duì)30%, 50%乙醇水洗脫物進(jìn)行化學(xué)成分的分離。 取FKQJB 30部位 （2

18、1.4 g） 用ODS拌樣后， 通過SP-HPLC, 流動(dòng)相A洗脫， 得到5個(gè)亞流分 （Fr.1Fr.5） .Fr.2 （0.3 g） 經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離 （Me OH洗脫） , 得到6個(gè)亞流分 （Fr.2-12-6） .Fr.2-6通過SP-HPLC （ACN-H2O-HCOOH 16:84:0.1） 得到化合物24 （35 mg） .Fr.3 （0.2 g） 經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離 （Me OH洗脫） , 得到4個(gè)亞流分 （Fr.3-13-4） .Fr.3-4通過SP-HPLC （ACN-H2O-HCOOH17:83:0.1） 得到化合物25 （8

19、mg） 和26 （35 mg） . 取FKQJB 50部位 （30.8 g） 用硅膠拌樣后， 經(jīng)硅膠柱色譜 （200300目， 200 g） , CHCl3-Me OH-H2O （50:1:0, 30:1:0, 92.5:15:1.5, 85:15:1.5） 梯度洗脫， TLC檢識(shí)合并相似流分， 共得到10個(gè)亞組分 （Fr.1Fr.10） .Fr.2 （2.1 g） 經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離 （CHCl3-Me OH 1:1） , 得到4個(gè)亞流分 （Fr.2-12-4） .Fr.2-2通過SP-HPLC, 流動(dòng)相A洗脫， 得到化合物27 （8 mg） , Fr.2-3通過SP-

20、HPLC, 流動(dòng)相A洗脫， 得到化合物28 （5 mg） .Fr.3 （1.5 g） 經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離 （CHCl3-Me OH 1:1;流動(dòng)相B） , 得到4個(gè)亞流分 （Fr.3-13-4） .Fr.3-2 （65 mg） 經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離， 流動(dòng)相B洗脫， 最終經(jīng)SP-HPLC, 流動(dòng)相A洗脫， 得到化合物29 （15 mg） .Fr.3-3 （125 mg） 經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離， 流動(dòng)相B洗脫， 最終經(jīng)SP-HPLC, 流動(dòng)相A洗脫， 得到化合物30 （38 mg） .Fr.4 （2.7 g） 經(jīng)Sephadex LH

21、-20柱色譜分離， 流動(dòng)相B洗脫， 得到5個(gè)亞流份 （Fr.4-14-5） .Fr.4-2 （0.7 g） 經(jīng)Sephadex LH 20柱色譜分離， 流動(dòng)相B洗脫， 最終經(jīng)SP-HPLC （CAN-H2O 25:75） 得到化合物31 （85 mg） 和32 （15 mg） .Fr.4-4 （212 mg） 經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離 （CHCl3-Me OH 1:1） , 最終經(jīng)制備液相 （ACN-H2O 18:82） 得到化合物33 （5mg） .Fr.5 （2.2 g） 經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離， 流動(dòng)相B洗脫， 得到6個(gè)亞流份 （Fr.5-15-6） .

22、Fr.5-2 （1.3 g） 經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離， 流動(dòng)相B洗脫， 最終經(jīng)SP-HPLC, 流動(dòng)相A洗脫， 得到化合物34 （30 mg） 和35 （25 mg） .Fr.6 （3.4 g） 經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離， 流動(dòng)相B洗脫， 得到4個(gè)亞流分 （Fr.6-16-4） .Fr.6-3 （0.6 mg） 經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離， 流動(dòng)相B洗脫， 最終經(jīng)SP-HPLC （ACN-H2O23:77） 得到36 （15 mg） ） 和37 （30 mg） .Fr.6-4 （223 mg） 經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離， 流動(dòng)相B

23、洗脫， 最終經(jīng)SP-HPLC （ACN-H2O 19:81） 得到化合物38 （24 mg） . 3結(jié)構(gòu)鑒定 化合物1淡黃色油狀物；EI-MS m/z 189M+H;H-NMR （CDCl3, 400 MHz） ：7.64 （1H, dd, J=7.9, 1.0 Hz, H-4） , 7.67 （1H, ddd, J=7.9, 7.7, 1.0 Hz, H-5） , 7.50 （1H, ddd, J=8.0, 7.7, 1.0 Hz, H-6） , 7.89 （1H, td, J=7.7 Hz, H-7） , 5.64 （1H, t, J=7.8 Hz, H-8） , 2.46 （2H, dd

24、, J=15.0, 7.5 Hz, H2-9） , 1.55 （2H, dd, J=15.0, 7.4 Hz, H2-10） , 0.99 （3H, t, J=7.4 Hz, H3-11） ;C-NMR （CDCl3, 100 MHz） ：167.3 （C-1） , 139.6 （C-3） , 145.9 （C-3a） , 119.6 （C-4） , 134.2 （C-5） , 129.3 （C-6） , 125.3 （C-7） , 124.5 （C-7a） , 109.5 （C-8） , 27.8 （C-9） , 22.5 （C-10） , 13.8 （C-11） .NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)21報(bào)道

25、的數(shù)據(jù)對(duì)比， 鑒定化合物1為Z-3-丁烯基苯酞。 化合物2黃色油狀物；EI-MS m/z 191M+H;H-NMR （CDCl3, 400 MHz） ：2.62 （1H, dd, J=10.6, 2.0Hz, Ha-4） , 2.59 （1H, dd, J=10.6, 1.0 Hz, Hb-4） , 2.432.51 （2H, m, H2-5） , 6.01 （1H, td, J=9.6, 4.3 Hz, H-6） , 6.27 （1H, td, J=9.7, 2.0 Hz, H-7） , 5.24 （1H, t, J=8.0 Hz, H-8） , 2.38 （1H, t, J=7.6 Hz,

26、 Ha-9） , 2.36 （1H, t, J=7.6Hz, Hb-9） , 1.53 （1H, t, J=7.6 Hz, Ha-10） , 1.48 （1H, t, J=7.4 Hz, Hb-10） , 0.96 （3H, t, J=7.4 Hz, H3-11） ;C-NMR （CDCl3, 100 MHz） ：167.6 （C-1） , 148.6 （C-3） , 147.2 （C-3a） , 18.6 （C-4） , 22.4 （C-5） , 130.0 （C-6） , 117.1 （C-7） , 124.0 （C-7a） , 112.9 （C-8） , 28.2 （C-9） , 22.

27、5 （C-10） , 13.8 （C-11） .NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)21報(bào)道的數(shù)據(jù)對(duì)比， 鑒定化合物2為Z-藁本內(nèi)酯。 化合物3黃色油狀物， EI-MS m/z 224M;H-NMR （CD3OD, 400 MHz） ：2.57 （1H, m, Ha-4） , 2.51 （1H, m, Hb-4） , 1.98 （1H, m, Ha-5） , 1.94 （1H, m, Hb-5） , 3.95 （1H, m, H-6） , 4.25 （1H, d, J=3.4 Hz, H-7） , 5.45 （1H, t, J=7.9 Hz, H-8） , 2.36 （1H, t, J=7.4 Hz, Ha-9）

28、 , 2.34 （1H, t, J=7.4 Hz, Hb-9） , 1.53 （2H, ddd, J=15.0, 12.3, 7.4Hz, H2-10） , 0.97 （3H, t, J=7.4 Hz, H3-11） ;C-NMR （CD3OD, 100 MHz） ：170.8 （C-1） , 155.3 （C-3） , 150.0 （C-3a） , 18.1 （C-4） , 25.0 （C-5） , 71.0 （C-6） , 65.4 （C-7） , 126.5 （C-7a） , 114.4 （C-8） , 29.0 （C-9） , 23.3 （C-10） , 14.1 （C-11） .NM

29、R數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)17, 22報(bào)道的數(shù)據(jù)對(duì)比， 鑒定化合物3為洋川芎內(nèi)酯I. 化合物4黃色油狀物；H-NMR （CDCl3, 400 MHz） ：2.39 （1H, dt, J=12.3, 5.8 Hz.Ha-4） , 2.66 （1H, dt, J=12.3, 4.3 Hz.Hb-4） , 2.15 （1H, m, Ha-5） , 1.82 （1H, m, Hb-5） , 4.08 （1H, m, H-6） , 4.62 （1H, d, J=2.6 Hz, H-7） , 5.31 （1H, t, J=7.9 Hz, H-8） , 2.37 （1H, t, J=7.5 Hz, Ha-9） , 2.3

30、6 （1H, t, J=7.6 Hz, Hb-9） , 1.50 （2H, ddd, J=15.1, 12.3, 7.5 Hz, H-10） , 0.95 （3H, t, J=7.5 Hz, H-11） ;C-NMR （CDCl3, 100 MHz） ：169.4 （C-1） , 153.4 （C-3） , 148.2 （C-3a） , 18.5 （C-4） , 25.6 （C-5） , 67.5 （C-6） , 63.4 （C-7） , 125.5 （C-7a） , 114.4 （C-8） , 28.1 （C-9） , 22.3 （C-10） , 13.8 （C-11） .NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)1

31、7, 22報(bào)道的數(shù)據(jù)對(duì)比， 鑒定化合物4為洋川芎內(nèi)酯H. 化合物5白色粉末；EI-MS m/z 152M;H-NMR （CDCl3, 400 MHz） ：9.84 （1H, s, CHO） , 7.43 （1H, br s, H-2） , 7.06 （1H, d, J=8.4 Hz, H-5） , 7.44 （1H, br d, J=8.4 Hz, H-6） , 3.98 （3H, s, OMe） .以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)17, 22報(bào)道的數(shù)據(jù)對(duì)比， 故鑒定化合物5為香草醛。 化合物6淡黃色針晶 （環(huán)己烷） , mp 183184；EI-MS m/z 298M;H-NMR （CDCl3, 400 MH

32、z） ：6.70 （1H, s, H-3） , 6.46 （1H, s, H-6） , 7.96 （2H, dd, J=7.9, 1.6 Hz, H-2, H-6） , 7.57 （2H, dd, J=7.9, 7.0 Hz, H-3, H-5） , 7.56 （1H, m, H-4） , 3.97 （6H, s, 7-OMe, 8-OMe） , 12.59 （1H, s, 5-OH） ;C-NMR （CDCl3, 100 MHz） ：163.9 （C-2） , 105.4 （C-3） , 182.7 （C-4） , 157.6 （C-5） , 95.9 （C-6） , 158.8 （C-7）

33、 , 129.1 （C-8） , 149.5 （C-9） , 105.0 （C-10） , 131.4 （C-1） , 126.3 （C-2, 6） , 129.1 （C-3, 5） , 131.9 （C-4） , 56.3 （7-OMe） , 61.7 （8-OMe） .NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)23報(bào)道的數(shù)據(jù)對(duì)比， 鑒定化合物6為7-O-甲基漢黃芩素。 化合物7黃色針晶；EI-MS m/z 284M;H-NMR （DMSO-d6, 400 MHz） ：7.00 （1H, s, H-3） , 6.32 （1H, s, H-6） , 8.07 （2H, d, J=8.0 Hz, H-2, 6） , 7.

34、617.63 （3H, m, H-3, 4, 5） , 3.86 （3H, s, 8-OMe） , 12.51 （1H, s, 5-OH） , 10.83 （1H, s, 7-OH） ;C-NMR （DMSO-d6, 100 MHz） ：163.2 （C-2） , 105.2 （C-3） , 182.2 （C-4） , 156.4 （C-5） , 99.3 （C-6） , 157.5 （C-7） , 128.0 （C-8） , 149.8 （C-9） , 103.9 （C-10） , 131.0 （C-1） , 126.4 （C-2, 6） , 129.4 （C-3, 5） , 132.2 （

35、C-4） , 61.2 （8-OMe） .NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)24報(bào)道的數(shù)據(jù)對(duì)比， 鑒定化合物7為漢黃芩素。 化合物8黃色針晶 （甲醇） , mp 254255；EI-MS m/z 314M;H-NMR （DMSO-d6, 400 MHz） ：7.11 （1H, s, H-3） , 6.60 （1H, s, H-6） , 7.08 （1H, br d, J=8.7 Hz, H-3） , 7.43 （1H, t, J=7.6 Hz, H-4） , 7.05 （1H, t, J=7.6 Hz, H-5） , 7.89 （1H, br d, J=8.0 Hz, H-6） , 3.92 （3H, s, 7

36、-OMe） , 3.82 （3H, s, 8-OMe） , 10.90 （1H, s, 2-OH） , 12.71 （1H, s, 5-OH） ;C-NMR （DMSO-d6, 100 MHz） ：161.7 （C-2） , 109.0 （C-3） , 182.5 （C-4） , 156.8 （C-5） , 96.0 （C-6） , 158.6 （C-7） , 128.6 （C-8） , 149.1 （C-9） , 104.1 （C-10） , 117.3 （C-1） , 157.1 （C-2） , 117.4 （C-3） , 133.2 （C-4） , 119.8 （C-5） , 128.4

37、 （C-6） , 56.7 （7-OMe） , 61.3 （8-OMe） .NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)25報(bào)道的數(shù)據(jù)對(duì)比， 鑒定化合物8為穿心蓮素。 化合物9無色針狀結(jié)晶 （Me OH） , mp 153154；EI-MS m/z 318M+H;H-NMR （CDCl3, 400 MHz） ：1.05 （1H, m, Ha-1） , 1.78 （1H, m, Hb-1） , 1.55 （2H, m, H2-2） , 1.27 （1H, br d, J=12.7 Hz, Ha-3） , 1.40 （1H, dd, J=12.7, 4.1 Hz, Hb-3） , 1.55 （1H, dd, J=10.8,

38、3.3 Hz, H-5） , 1.32 （1H, m, Ha-6） , 1.59 （1H, m, Hb-6） , 2.06 （1H, m, Ha-7） , 2.34 （1H, m, Hb-7） , 1.66 （1H, m, H-9） , 1.80 （1H, m, Ha-11） , 1.64 （1H, m, Hb-11） , 2.56 （1H, m, Ha-12） , 2.28 （1H, m, Hb-12） , 5.87 （1H, t-like, J=1.6 Hz, H-14） , 4.75 （1H, d, J=1.6 Hz, Ha-16） , 4.73 （1H, d, J=1.6 Hz, Hb

39、-16） , 4.89 （1H, br s, Ha-17） , 4.48 （1H, br s, Hb-17） , 1.01 （3H, s, H3-18） , 3.77 （1H, br d, J=10.9 Hz, Ha-19） , 3.42 （1H, br d, J=10.9 Hz, Hb-19） , 0.70 （3H, s, H3-20） ;C-NMR （CDCl3, 100 MHz） ：39.1 （C-1） , 18.9 （C-2） , 38.5 （C-3） , 39.7 （C-4） , 56.1 （C-5） , 24.4 （C-6） , 35.3 （C-7） , 147.4 （C-8） ,

40、 56.2 （C-9） , 38.9 （C-10） , 21.4 （C-11） , 27.4 （C-12） , 174.2 （C-13） , 115.2 （C-14） , 170.9 （C-15） , 73.1 （C-16） , 106.7 （C-17） , 27.1 （C-18） , 65.0 （C-19） , 15.2 （C-20） .H-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)26, C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)27報(bào)道的數(shù)據(jù)對(duì)比， 鑒定化合物9為19-羥基-8 （17） , 13-半日花二烯-15, 16-內(nèi)酯。 化合物10無色針狀結(jié)晶 （Me OH） , mp 238239；EI-MS m/z 318M;H-NMR

41、 （pyridine-d5, , 400MHz） ：1.72 （1H, m, Ha-1） , 1.04 （1H, td, J=12.8, 4.0 Hz, Hb-1） , 1.62 （1H, m, Ha-2） , 1.46 （1H, m, Hb-2） , 2.25 （1H, m, Ha-3） , 1.01 （1H, td, J=13.3, 3.8 Hz, Hb-3） , 1.26 （1H, dd, J=13.0, 2.5 Hz, , H-5） , 1.85 （1H, m, Ha-6） , 1.46 （1H, ddd, J=13.0, 10.1, 2.5 Hz, Hb-6） , 2.40 （1H,

42、 ddd, J=12.6, 4.4, 2.5 Hz, Ha-7） , 2.00 （1H, td, J=12.6, 5.1 Hz, Hb-7） , 1.69 （1H, m, H-9） , 1.80 （1H, br dd, J=11.5, 3.5 Hz, Ha-11） , 1.68 （1H, m, Hb-11） , 2.56 （1H, m, Ha-12） , 2.22 （1H, m, Hb-12） , 7.19 （1H, t-like, J=1.6 Hz, H-14） , 4.76 （2H, dd, J=4.4, 1.6 Hz, , H2-15） , 4.95 （1H, d, J=1.0 Hz,

43、Ha-17） , 4.74 （1H, d, J=1.0 Hz, Hb-17） , 1.21 （3H, s, H3-18） , 3.99 （1H, br d, J=10.7 Hz, Ha-19） , 3.62 （1H, br d, J=10.7 Hz, Hb-19） , 0.73 （3H, s, H3-20） , 5.68 （1H, br s, 19-OH） ;C-NMR （pyridine-d5, , 100 MHz） ：39.4 （C-1） , 19.4 （C-2） , 36.0 （C-3） , 39.9 （C-4） , 56.3 （C-5） , 24.7 （C-6） , 38.8 （C-7

44、） , 148.4 （C-8） , 56.7 （C-9） , 39.2 （C-10） , 22.2 （C-11） , 25.0 （C-12） , 134.2 （C-13） , 145.3 （C-14） , 70.6 （C-15） , 174.6 （C-16） , 106.9 （C-17） , 28.0 （C-18） , 63.8 （C-19） , 15.4 （C-20） .NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)28報(bào)道的數(shù)據(jù)對(duì)比， 鑒定化合物10為新穿心蓮內(nèi)酯苷元。 化合物11無色片狀結(jié)晶 （Me OH） , mp 237239；EI-MS m/z 350M;H-NMR （DMSO-d6, 400 MHz） ：1.

45、761.60 （4H, m, Ha-1, Ha-2, Hb-2, Ha-6） , 3.23 （1H, m, H-3） , 1.20 （2H, m, Hb-1, H-5） , 1.35 （1H, m, Hb-6） , 2.32 （1H, br d, J=12.5 Hz, Ha-7） , 1.94 （1H, td, J=12.5, 3.7 Hz, Hb-7） , 1.88 （1H, br t, J=9.2 Hz, H-9） , 2.49 （2H, m, H2-11） , 6.62 （1H, t, J=6.5 Hz, H-12） , 4.91 （1H, br d, J=4.6 Hz, H-14） ,

46、 4.40 （1H, dd, J=9.9, 4.6 Hz, Ha-15） , 4.04 （1H, br d, J=9.9 Hz, Hb-15） , 4.82 （1H, br s, Ha-17） , 4.63 （1H, br s, Hb-17） , 1.09 （3H, s, H3-18） , 3.85 （1H, d, J=10.8 Hz, Ha-19） , 3.26 （1H, d, J=10.8 Hz, Hb-19） , 0.66 （3H, s, H3-20） ;C-NMR （DMSO-d6, 100 MHz） ：36.7 （C-1） , 28.1 （C-2） , 78.7 （C-3） , 42

47、.5 （C-4） , 54.6 （C-5） , 24.1 （C-6） , 37.7 （C-7） , 147.8 （C-8） , 55.7 （C-9） , 38.8 （C-10） , 24.1 （C-11） , 146.4 （C-12） , 129.2 （C-13） , 64.7 （C-14） , 74.5 （C-15） , 170.1 （C-16） , 108.4 （C-17） , 23.2 （C-18） , 62.8 （C-19） , 14.9 （C-20） .NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)29-30報(bào)道的數(shù)據(jù)對(duì)比， 鑒定化合物11為穿心蓮內(nèi)酯。 化合物12無色針狀結(jié)晶 （Me OH） , mp 2032

48、04；EI-MS m/z 332M;H-NMR （pyridine-d5, 400MHz） ：1.52 （1H, m, Ha-1） , 1.13 （1H, m, Hb-1） , 1.96 （2H, m, H2-2） , 3.66 （1H, dd, J=11.0, 4.0 Hz, H-3） , 1.24 （1H, dd, J=12.9, 1.8 Hz, H-5） , 1.80 （1H, m, Ha-6） , 1.36 （1H, br dd, J=12.9, 4.0 Hz, Hb-6） , 2.41 （2H, m, H2-7） , 2.39 （1H, d, J=10.1 Hz, H-9） , 7.

49、18 （1H, dd, J=15.8, 10.1 Hz, H-11） , 6.29 （1H, d, J=15.8 Hz, H-12） , 7.35 （1H, br t, J=2.0 Hz, H-14） , 4.80 （2H, br d, J=17.7 Hz, H2-15） , 4.88 （1H, br s, Ha-17） , 4.77 （1H, br s, Hb-17） , 1.54 （3H, s, H3-18） , 4.50 （1H, d, J=11.8 Hz, Ha-19） , 3.68 （1H, d, J=11.8 Hz, Hb-19） , 0.91 （3H, s, H3-20） , 3

50、.66 （1H, s, 3-OH） , 4.95 （1H, s, 19-OH） ;C-NMR （pyridine-d5, 100 MHz） ：38.8 （C-1） , 28.7 （C-2） , 80.0 （C-3） , 43.1 （C-4） , 54.5 （C-5） , 23.4 （C-6） , 36.8 （C-7） , 149.0 （C-8） , 61.5 （C-9） , 39.2 （C-10） , 135.4 （C-11） , 121.7 （C-12） , 128.6 （C-13） , 144.9 （C-14） , 70.1 （C-15） , 172.6 （C-16） , 108.6 （C

51、-17） , 23.4 （C-18） , 64.0 （C-19） , 15.8 （C-20） .NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)31報(bào)道的數(shù)據(jù)對(duì)比， 鑒定化合物12為脫水穿心蓮內(nèi)酯。 化合物13無色針狀結(jié)晶 （Me OH） , mp 210211；EI-MS m/z 350M;H-NMR （pyridine-d5, 400MHz） ：1.41 （1H, m, Ha-1） , 1.19 （1H, m, Hb-1） , 1.96 （2H, m, H2-2） , 3.66 （1H, dd, J=11.0, 6.0 Hz, H-3） , 1.19 （1H, dd, J=12.9, 2.2 Hz, H-5） , 1.8

52、0 （1H, m, Ha-6） , 1.36 （1H, qd, J=12.8, 4.0 Hz, Hb-6） , 2.02 （2H, m, H2-7） , 1.97 （1H, dd, J=10.4, 3.2 Hz, H-9） , 3.15 （1H, dd, J=15.8, 6.0 Hz, Ha-11） , 3.02 （1H, ddd, J=15.8, 10.4, 7.0 Hz, Hb-11） , 6.73 （1H, br t, J=7.0 Hz, H-12） , 5.08 （1H, br s, H-14） , 4.55 （1H, dd, J=9.5, 6.2 Hz, Ha-15） , 4.41

53、（1H, dd, J=9.5, 3.4 Hz, Hb-15） , 4.90 （1H, br s, Ha-17） , 4.73 （1H, br s, Hb-17） , 1.51 （3H, s, H3-18） , 4.46 （1H, d, J=10.9Hz, Ha-19） , 3.63 （1H, br d, J=10.9 Hz, Hb-19） , 0.74 （3H, s, H3-20） ;C-NMR （pyridine-d5, 100 MHz） ：37.0 （C-1） , 28.8 （C-2） , 79.7 （C-3） , 43.0 （C-4） , 55.2 （C-5） , 24.2 （C-6）

54、, 38.1 （C-7） , 148.2 （C-8） , 56.5 （C-9） , 39.1 （C-10） , 23.5 （C-11） , 148.0 （C-12） , 129.6 （C-13） , 68.9 （C-14） , 74.1 （C-15） , 169.7 （C-16） , 107.9 （C-17） , 23.5 （C-18） , 64.0 （C-19） , 15.1 （C-20） .NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)31報(bào)道的數(shù)據(jù)對(duì)比， 鑒定化合物13為異穿心蓮內(nèi)酯。 化合物14黃色粉末；EI-MS m/z 328M;H-NMR （CDCl3, 400 MHz） ：6.44 （1H, s, H-3）

55、 , 7.05 （1H, s, H-6） , 7.16 （1H, dd, J=8.7, 1.0 Hz, H-3） , 7.52 （1H, td, J=8.7, 7.0, 1.7 Hz, H-4） , 7.14 （1H, dd, J=7.0, 1.0 Hz, H-5） , 7.99 （1H, dd, J=7.8, 1.7 Hz, H-6） , 3.96 （3H, s, 7-OMe） , 3.96 （3H, s, 8-OMe） , 3.93 （3H, s, 2-OMe） , 12.68 （1H, br s, 5-OH） .NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)32報(bào)道的數(shù)據(jù)對(duì)比， 鑒定化合物14為穿心蓮黃酮。 化合物1

56、5黃色粉末；EI-MS m/z 284M;H-NMR （DMSO-d6, 400 MHz） ：8.37 （1H, s, H-2） , 6.23 （1H, s, H-6） , 6.39 （1H, s, H-8） , 7.50 （2H, d, J=8.1 Hz, H-2, 6） , 7.00 （2H, d, J=8.1 Hz, H-3, 5） , 3.79 （3H, s, 4-OMe） , 12.93 （1H, s, 5-OH） , 10.89 （1H, s, 7-OH） ;C-NMR （DMSO-d6, 100 MHz） ：154.4 （C-2） , 123.1 （C-3） , 180.3 （C

57、-4） , 162.2 （C-5） , 99.2 （C-6） , 164.5 （C-7） , 93.9 （C-8） , 157.8 （C-9） , 104.6 （C-10） , 122.1 （C-1） , 130.3 （C-2, 6） , 113.9 （C-3, 5） , 159.3 （C-4） , 55.3 （OMe） .NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)33報(bào)道的數(shù)據(jù)對(duì)比， 鑒定化合物15為鷹嘴豆芽素A. 化合物16黃色針狀結(jié)晶 （三氯甲烷） , mp195197°C;EI-MS m/z 358M;H-NMR （CDCl3, 400 MHz） ：7.11 （1H, s, H-3） , 6.45 （

58、1H, s, H-6） , 7.00 （1H, d, J=9.6 Hz, H-3） , 7.07 （1H, dd, J=9.6, 2.2 Hz, H-4） , 7.56 （1H, d, J=2.2 Hz, H-6） , 3.97 （3H, s, 7-OMe） , 3.94 （3H, s, 8-OMe） , 3.93 （3H, s, 2-OMe） , 3.87 （3H, s, 5-OMe） , 12.67 （5-OH） ;C-NMR （CDCl3, 100 MHz） ：161.0 （C-2） , 110.5 （C-3） , 183.1 （C-4） , 157.5 （C-5） , 95.4 （C-6） , 158.5 （C-7） , 129.0 （C-8） , 149.5 （C-9） , 104.8 （C-10） , 120.7 （C-1） , 152.5 （C-2） , 113.0 （C-3） , 118.3 （C-4） , 153.5 （C-5） , 113.9 （C-6） , 56.3 （7-OMe） , 61.5 （8-OMe） , 56.1 （2-OMe） , 55.7 （5-OMe） .NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)34報(bào)道