農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程-發(fā)芽試驗(yàn)

1、農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程發(fā)芽試驗(yàn)1. 主題內(nèi)容與適用范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了種子發(fā)芽試驗(yàn)的方法。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于農(nóng)作物種子質(zhì)量的檢測(cè)。2 引用標(biāo)準(zhǔn)GB/T 3543.2 農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程 扦樣GB/T 3543.3 農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程 凈度分析3 術(shù)語3.1 發(fā)芽在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)幼苗出現(xiàn)和生長(zhǎng)到達(dá)一定階段， 幼苗的主要構(gòu)造說明在田間的適 宜條件下能否進(jìn)一步生長(zhǎng)成為正常的植株。3.2 發(fā)芽率在規(guī)定的條件和時(shí)間內(nèi) 見表 1長(zhǎng)成的正常幼苗數(shù)占供檢種子數(shù)的百分率。3.3 幼苗的主要構(gòu)造 因種而異，由根系、幼苗中軸 上胚軸、下胚軸或中胚軸 、頂芽、子葉和芽 鞘等構(gòu)造組成。3.4 正常幼苗在良好土壤及適宜水分、 溫度和光照

2、條件下， 具有繼續(xù)生長(zhǎng)發(fā)育成為正常植 株的幼苗。3.5 不正常幼苗 生長(zhǎng)在良好土壤及適宜水分、 溫度和光照條件下， 不能繼續(xù)生長(zhǎng)發(fā)育成為正 常植株的幼苗。3.6 復(fù)胚種子單位 能夠產(chǎn)生一株以上幼苗的種子單位， 如傘形科未別離的分果， 甜菜的種球等。3.7 未發(fā)芽的種子在表 1規(guī)定的條件下， 試驗(yàn)?zāi)┢谌圆荒馨l(fā)芽的種子， 包括硬實(shí)、新鮮不發(fā)芽 種子、死種子 通常變軟、變色、發(fā)霉，并沒有幼苗生長(zhǎng)的跡象 和其他類型 如 空的、無胚或蟲蛀的種子 。3.8 新鮮不發(fā)芽種子由生理休眠所引起， 試驗(yàn)期間保持清潔和一定硬度， 有生長(zhǎng)成為正常幼苗潛 力的種子。4 發(fā)芽床按表 1規(guī)定，通常采用紙和砂作為發(fā)芽床。 除

3、 6.2 條所述的特殊情況外， 土 壤或其他介質(zhì)不宜用作初次試驗(yàn)的發(fā)芽床。 濕潤發(fā)芽床的水質(zhì)應(yīng)純潔、無毒無 害， pH 值為 6.0-7.5 。4.1 紙床4.1.1 一般要求 具有一定的強(qiáng)度、質(zhì)地好、吸水性強(qiáng)、保水性好、無毒無菌、清潔干凈，不含可溶性色素或其他化學(xué)物質(zhì)，pH值為6.0-7.5 。可以用濾紙、吸水紙等作為 紙床。4.1.2 生物毒性測(cè)定利用梯牧草、 紅頂草、 彎葉畫眉草、 紫羊茅和獨(dú)行菜等種子發(fā)芽時(shí)對(duì)紙中有 毒物質(zhì)繁感的特性， 將品質(zhì)不明和品質(zhì)合格的紙進(jìn)行發(fā)芽比擬試驗(yàn)， 依據(jù)幼苗根 的生長(zhǎng)情況進(jìn)行鑒定。 在表 1 規(guī)定的第一次計(jì)數(shù)時(shí)或提前觀察根部病癥。 假設(shè)根縮 短有時(shí)出現(xiàn)根尖

4、變色，根從紙上翹起，根毛成束或禾本科幼苗的芽鞘扁平縮 短等病癥，那么表示該紙含有有毒物質(zhì)。4.2 砂床421般要求砂粒大小均勻，其直徑為。無毒無菌無種子。持水力強(qiáng)，pH值為。使用前必須進(jìn)行洗滌和高溫消毒?；瘜W(xué)藥品處理過的種子樣品發(fā)芽所用的砂子，不再重復(fù)使用。4.2.2 生物毒性測(cè)定4.3 土壤土質(zhì)疏松良好、無大顆粒、不含種子、無毒無菌、持水力強(qiáng)、pH值為。 使用前，必須經(jīng)過消毒，一般不重復(fù)使用。5儀器與試劑5.1 儀器5.1.1 數(shù)種設(shè)備數(shù)粒板、活動(dòng)數(shù)粒板、真空數(shù)種器或電子自動(dòng)數(shù)粒儀等。5.1.2 發(fā)芽器具a. 發(fā)芽箱：有光照、控溫范圍10-40 C。b. 雅可勃遜發(fā)芽器。c. 發(fā)芽室：室內(nèi)具

5、有可調(diào)節(jié)溫度和光照的條件。d. 發(fā)芽器皿：發(fā)芽皿、發(fā)芽盤等。5.1.3 冰箱5.2 試劑硝酸、硝酸鉀、赤霉酸、雙氧發(fā)。6試驗(yàn)程序6.1 數(shù)取試驗(yàn)樣品從經(jīng)充分混合的凈種子中，用數(shù)種設(shè)備或手工隨機(jī)數(shù)取400粒。通常以100 粒為一次重復(fù)，大粒種子或帶有病原菌的種子，可以再分為50粒、甚至25粒為 一副重復(fù)。6.2 選用發(fā)芽床各種作物的適宜發(fā)芽床已在表1中作了規(guī)定。通常小粒種子選用紙床；大粒 種子選用砂床或紙間；中粒種子選用紙床、砂床均可。表1農(nóng)作物種子發(fā)芽的技術(shù)規(guī)定種名學(xué)名發(fā)芽床溫度初次計(jì) 數(shù)天數(shù)d末次計(jì) 數(shù)天數(shù)d附加 說明124玉米Zea mays L.紙間砂20-30 20 25476.2.1

6、 紙床紙床包括紙上和紙間。紙上TP是將種子放在一層或多層紙上發(fā)芽，紙可放在:a. 培養(yǎng)皿內(nèi)。b. 光照發(fā)芽箱內(nèi)，箱內(nèi)的相對(duì)濕度接近飽和。c. 雅可勃遜發(fā)芽器上。紙間 (BP) 是將種子放在兩層紙中間?？捎靡韵路椒ǎ篴. 另外用一層紙松松地蓋在種子上。b. 紙卷，把種子均勻置放在濕潤的發(fā)芽紙上， 再用另一張同樣大小的發(fā)芽紙 覆蓋在種子上，然后卷成紙卷，兩端用皮筋扣住，豎放。 紙間可直接放在保濕的發(fā)芽箱盤內(nèi)。6.2.2 砂床砂床包括：a. 砂上 (TS) ：種子壓入砂的外表。b.砂中(S):種子播在一層平整的濕砂上，然后根據(jù)種子大小加蓋10-20mm厚度的松散砂。6.2.3 土壤當(dāng)在紙床上幼苗出現(xiàn)

7、植物中毒病癥或?qū)τ酌玷b定發(fā)生疑心時(shí)， 為了比擬或有 某些研究目的，才采用土壤作為發(fā)芽床。6.3 置床培養(yǎng)按 6.2 的要求，將數(shù)取的種子均勻地排在濕潤的發(fā)芽床上， 粒與粒之間應(yīng)保 持一定的距離。 在培養(yǎng)器具上貼上標(biāo)簽，按表 1 規(guī)定的條件進(jìn)行培養(yǎng)。發(fā)芽期 間要經(jīng)常檢查溫度、 水分和通氣狀況。 如有發(fā)霉的種子應(yīng)取出沖洗， 嚴(yán)重發(fā)霉的 應(yīng)更換發(fā)芽床。見表1控制發(fā)芽條件水分和通氣根據(jù)發(fā)芽床和種子特性決定發(fā)芽床的加水量。 如砂床加水為其飽和含水量的 60%-80%(禾谷類等中小粒種子為 60%，豆類等大粒種子為 80%)；如紙床， 吸足水 分后，瀝去多余水即可；如用土壤作發(fā)芽床，加水至手握土粘成團(tuán)，再

8、手指輕輕 一壓就碎為宜。 發(fā)芽期間發(fā)芽床必須始終保持濕潤。 發(fā)芽應(yīng)使種子周圍有足夠 的空氣，注意通氣。尤其是在紙卷和砂床中應(yīng)注意:紙卷須相當(dāng)疏松；用砂床和 土壤試驗(yàn)時(shí)，覆蓋種子的砂或土壤不要緊壓。溫度發(fā)芽應(yīng)按表 1 規(guī)定的溫度進(jìn)行， 發(fā)芽器、發(fā)芽箱、發(fā)芽室的溫度在發(fā)芽期間 應(yīng)盡可能一致。 表 1 規(guī)定的溫度為最高限度， 有光照時(shí)，應(yīng)注意不應(yīng)超過此限度。 儀器的溫度變幅不應(yīng)超過土 C。當(dāng)規(guī)定用變溫時(shí)，通常應(yīng)保持低溫 16h及高溫8h。對(duì)非休眠的種子，可以 在3h內(nèi)逐漸變溫。如是休眠種子，應(yīng)在1h或更短時(shí)間內(nèi)完成急劇變溫或?qū)⒃囼?yàn) 移到另一個(gè)溫度較低的發(fā)芽箱內(nèi)。光照表1中大多數(shù)種的種子可在光照或黑暗

9、條件下發(fā)芽， 但一般采用光照。 需光 種子的光照強(qiáng)度為 750-1 250 勒克司 (Lx) ，如在變溫條件下發(fā)芽，光照應(yīng)在 8h 高溫時(shí)進(jìn)行。休眠種子和處理當(dāng)試驗(yàn)結(jié)束還存在硬實(shí)或新鮮不發(fā)芽種子時(shí)， 可采用以下一種或幾種方法進(jìn) 行處理(詳見表 1)。破除生理休眠的方法a. 預(yù)先冷凍表2各種作物種子加熱枯燥的溫度和時(shí)間作物名稱溫度，c時(shí)間,d大麥，小麥30-353-5高粱302水稻405-7花生4014大豆300. 5向日葵3017:棉花401煙草30-407-10胡羅卜、芹菜、菠菜、洋 蔥、黃瓜、甜瓜、西瓜303-5破方法除硬實(shí)的b.機(jī)械損傷除去抑制物質(zhì)的方法甜菜、菠菜等種子單位的果皮或種皮內(nèi)

10、有發(fā)芽抑制物質(zhì)時(shí)， 可把種子浸在溫 水或流水中預(yù)先洗滌，甜菜復(fù)胚種子洗滌 2h，遺傳單胚種子洗滌4h，菠菜種子 洗滌1-2h。然后將種子枯燥，枯燥最高溫度不得超過 25C。幼苗鑒定試驗(yàn)持續(xù)時(shí)間每個(gè)種的試驗(yàn)持續(xù)時(shí)間詳見表1。試驗(yàn)前或試驗(yàn)間用于破除休眠處理所需時(shí) 間不作為發(fā)芽試驗(yàn)時(shí)間的一局部。如果樣品在規(guī)定試驗(yàn)時(shí)間內(nèi)只有幾粒種子開始發(fā)芽，那么試驗(yàn)時(shí)間可延長(zhǎng)7d, 或延長(zhǎng)規(guī)定時(shí)間的一半。根據(jù)試驗(yàn)情況，可增加計(jì)數(shù)的次數(shù)。反之，如果在規(guī)定 試驗(yàn)時(shí)間結(jié)束前，樣品已到達(dá)最高發(fā)芽率，那么該試驗(yàn)可提前結(jié)束。鑒定每株幼苗都必須按附錄A補(bǔ)充件規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行鑒定。鑒定要在主要構(gòu)造 已發(fā)育到一定時(shí)期進(jìn)行。在計(jì)數(shù)過程中，

11、發(fā)育良好的正常幼苗應(yīng)從發(fā)芽床中揀出，對(duì)可疑的或損傷、 畸形或不均衡的幼苗，通常到末次計(jì)數(shù)。嚴(yán)重腐爛的幼苗或發(fā)霉的種子應(yīng)從發(fā)芽 床中除去，并隨時(shí)增加計(jì)數(shù)。重新試驗(yàn)當(dāng)試驗(yàn)出現(xiàn)以下情況進(jìn)，應(yīng)重新試驗(yàn)。a. 疑心種子有休眠即有較多的新鮮不發(fā)芽種子，可采用表2或6.5所述的 方法進(jìn)行試驗(yàn)，將得到的最正確結(jié)果填報(bào)，應(yīng)注明所用的方法。b. 由于真菌或細(xì)菌的蔓延而使試驗(yàn)結(jié)果不一定可 *時(shí)，可采用砂床或土壤進(jìn) 行試驗(yàn)。如有必要，應(yīng)增加種子之間的距離。c. 當(dāng)正確鑒定幼苗數(shù)有困難時(shí)，可采用表1中規(guī)定的一種或幾種方法在砂床 或土壤上進(jìn)行重新試驗(yàn)。d. 當(dāng)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)條件、幼苗鑒定或計(jì)數(shù)有過失時(shí)，應(yīng)采用同樣方法進(jìn)行重新試

12、 驗(yàn)。e. 當(dāng)100粒種子重復(fù)間的差距超過表3最大容許差距時(shí)，應(yīng)采用同樣的方法 行重新試驗(yàn)。如果第二次結(jié)果與第一次結(jié)果相一致，即其差異不超過表4中所示 的容許差距，那么將兩次試驗(yàn)的平均數(shù)填報(bào)在結(jié)果單上。 如果第二次結(jié)果與第一次 結(jié)果不相符合，其差異超過表4所示的容許差距，那么采用同樣的方法進(jìn)行第三次 試驗(yàn)，填報(bào)符合要求的結(jié)果平均數(shù)。表3同一發(fā)芽試驗(yàn)四次重復(fù)間的最大容許差距2.5%顯著水平的兩尾測(cè)定平均發(fā)芽率最大容許差 距50%以上50%以 下9925983697479658956993-947-81091-929-101189-9011-121287-8813-141384-8615-1714

13、81-8318-201578-8021-231673-7724-281767-7229-341856-6635-451951-5546-5020表4同一或不同實(shí)驗(yàn)室來自相同或不同送驗(yàn)樣品間發(fā)芽試驗(yàn)的容許差距2.5%顯著水平的兩尾測(cè)定平均發(fā)芽率最大容許差 距50%上50%以 下98-992-3295-974-63:91-947-10485-9011-16577-84 :17-24660-7625-41751-5942-5087 結(jié)果計(jì)算和表示試驗(yàn)結(jié)果以粒數(shù)的百分率表示。當(dāng)一個(gè)試驗(yàn)的四次重復(fù)每個(gè)重復(fù)以100粒計(jì)，相鄰的副重復(fù)合并成100粒的重復(fù)正常幼苗百分率都在最大容許差距內(nèi)表 3，那么其平均數(shù)表示發(fā)芽百分率。不正常幼苗、硬實(shí)、新鮮不發(fā)芽種子和死種子 的百分率按四次重復(fù)平均數(shù)計(jì)算。正常幼苗、不正常幼苗和未發(fā)芽種子百分率的 總和必須為100，平均數(shù)百分率修約到最近似的整數(shù)，修約0.5進(jìn)入最大值中。8 結(jié)果報(bào)告填報(bào)發(fā)芽結(jié)果時(shí)，須填報(bào)正常幼苗、不正常幼苗、硬實(shí)、新鮮不發(fā)芽種子和 死種子的百分率。假設(shè)其中任何一項(xiàng)結(jié)果為零，那么將符號(hào)“-0- 填入該格中。同時(shí)還須填報(bào)采用的發(fā)芽床和溫度、試驗(yàn)持續(xù)時(shí)間以及為促進(jìn)發(fā)芽所采用的 處理方法。表5同一或不同實(shí)驗(yàn)室不同送驗(yàn)樣品間發(fā)芽試驗(yàn)的容許差距5%顯著水平的一尾測(cè)定平均發(fā)芽率最大容許差距50%以上50%以 下99,2297-98