第二章藥物的純度檢查和鑒別方法

1、第二章第二章 藥物的純度檢查和鑒別方法藥物的純度檢查和鑒別方法 藥品質(zhì)量的評(píng)價(jià)藥品質(zhì)量的評(píng)價(jià) 從三方面考查：從三方面考查： 真?zhèn)握鎮(zhèn)?純度純度 品質(zhì)優(yōu)良度品質(zhì)優(yōu)良度 性狀性狀 鑒別鑒別 檢查檢查 含量測(cè)定含量測(cè)定性狀外觀：指藥物的聚集狀態(tài)、晶形、色澤以及嗅味等性質(zhì)。溶解度：藥物的一種物理性質(zhì)，在一定程度上反映了藥物的純度理化常數(shù)：吸光系數(shù)、熔點(diǎn)、晶形、相對(duì)密度、折光率、黏度、比旋度、酸值、碘值等2.1 藥物的鑒別試驗(yàn)Identification Test性狀和鑒別兩個(gè)項(xiàng)目1 溶解度 準(zhǔn)確稱取研成細(xì)粉的供試品或量取液體供試品（準(zhǔn)確度2），加入一定量溶劑，在252 下，每隔5min強(qiáng)力振搖30s，

2、觀察30min內(nèi)的溶解情況，如看不到溶質(zhì)顆?；蛞旱螘r(shí)，視為完全溶解。 溶解度極易溶解易溶溶解略溶微溶極微溶解不溶g/ml1.00.110.0330.10.0330.010.010.0010.0010.00010.00012 吸光系數(shù)吸光物質(zhì)在單位濃度及單位厚度時(shí)對(duì)紫外可見(jiàn)光的吸光程度。特征常數(shù)方法方法：1 五臺(tái)以上不同型號(hào)的紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) 2 溶劑在所用波長(zhǎng)處不得有大的干擾 3 最大吸收波長(zhǎng)的校對(duì) 4 測(cè)定要求：以配置供試品的溶劑為空白，吸收池臨用前配對(duì)，樣品應(yīng)干燥，樣品溶液先配成吸光度值在0.60.8之間的濃度測(cè)定，然后再稀釋一倍測(cè)定。樣品應(yīng)同時(shí)測(cè)定兩份，偏差1。五臺(tái)儀器的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差1

3、.5。3 熔點(diǎn)4 晶型初熔和全熔2.2 藥物的鑒別方法要求：專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好，靈敏度高，簡(jiǎn)便快速等方法：方法：光譜鑒別法：紅外 用于原料藥 紫外色譜鑒別法：薄層色譜 氣相色譜 高效液相色譜 用于制劑化學(xué)鑒別法：呈色反應(yīng)鑒別法 沉淀反應(yīng)鑒別法 熒光反應(yīng)鑒別法 氣體生成反應(yīng)鑒別法2.3 檢查藥物的純度檢查藥物純度的概念：指藥物的純潔程度藥物純度的評(píng)價(jià)：主要通過(guò)藥物中的雜質(zhì)來(lái)評(píng)定，但應(yīng)和藥物的性狀、理化常數(shù)、含量測(cè)定等作為一個(gè)有聯(lián)系的整體來(lái)評(píng)價(jià)。一、藥物的純度二、二、藥物中的雜質(zhì)藥物中的雜質(zhì)雜質(zhì)雜質(zhì)(impurity)：藥物中存在的無(wú)治療作用，影響藥物的療效和穩(wěn)定性，甚至對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，稱為

4、藥物的雜質(zhì)雜質(zhì)的來(lái)源：雜質(zhì)的來(lái)源：生產(chǎn)過(guò)程中引入：原料、中間體、副產(chǎn)物、原料、中間體、副產(chǎn)物、異構(gòu)體、有機(jī)溶劑殘留等異構(gòu)體、有機(jī)溶劑殘留等儲(chǔ)藏過(guò)程中引入：降解產(chǎn)物、氧化產(chǎn)物降解產(chǎn)物、氧化產(chǎn)物（生產(chǎn)中也能同時(shí)產(chǎn)生）（生產(chǎn)中也能同時(shí)產(chǎn)生）一般雜質(zhì)一般雜質(zhì) 多數(shù)是無(wú)機(jī)雜質(zhì)，多數(shù)是無(wú)機(jī)雜質(zhì)，Cl-、SO42-、As、 Fe、重金屬等、重金屬等特殊雜質(zhì)特殊雜質(zhì) 多數(shù)為有機(jī)雜質(zhì)多數(shù)為有機(jī)雜質(zhì) 有關(guān)物質(zhì)項(xiàng)有關(guān)物質(zhì)項(xiàng) 原料、中間體、降解產(chǎn)原料、中間體、降解產(chǎn)物物雜質(zhì)的分類雜質(zhì)的分類：一般雜質(zhì)一般雜質(zhì)是指在自然界中分布較廣泛，在多種藥物的生產(chǎn)和貯藏過(guò)程中容易引入的雜質(zhì) 特殊雜質(zhì)特殊雜質(zhì)指在個(gè)別藥物的生產(chǎn)和貯藏過(guò)

5、程中容易引入的雜質(zhì)限度試驗(yàn)限度試驗(yàn) limit testlimit test雜質(zhì)限量 藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量，叫做雜質(zhì)限量。通常用百分之幾或百萬(wàn)分之幾（ppm）來(lái)表示。對(duì)照法 靈敏度法 吸光度法藥物雜質(zhì)限量檢查雜質(zhì)限量雜質(zhì)限量（L L）計(jì)算計(jì)算%100%供試品量允許雜質(zhì)存在的最大量雜質(zhì)限量 NaCl中中Br-的檢查的檢查供試管供試管 NaCl樣樣 2.0g +H2O10ml對(duì)照管對(duì)照管 標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)KBr（1.0mg Br-/ml）1.0ml各加各加HCl 3d，氯仿，氯仿1.0ml，加，加2%氯胺氯胺T液液 3d 操作注意點(diǎn)：平行原則，用納氏比色管操作注意點(diǎn)：平行原則，用納氏比色管%05.0

6、%10020001mgmg（一一）對(duì)照法）對(duì)照法對(duì)照管對(duì)照管 供試管供試管對(duì)照管對(duì)照管 供試管供試管例2-1對(duì)乙?；又械穆然锏臋z查：已知：S=2.0g25/100；C=10g/ml；V=5.0ml求： L = ？ 解：L = CV/S100% = 105.0/（2.010625/100）100% = 0.01%（二二）靈敏度法）靈敏度法 供試品液中加入試劑，不得有正反應(yīng)出供試品液中加入試劑，不得有正反應(yīng)出現(xiàn)，判斷符合規(guī)定?，F(xiàn)，判斷符合規(guī)定。 NaBr中中I-檢查檢查 不需對(duì)照品不需對(duì)照品色振搖，氯仿層不得顯紫氯仿試液數(shù)滴水 mlFeClmlg101035 . 0（三三）吸收度限度法）吸收度

7、限度法 供試液的吸收度不得超過(guò)一定值供試液的吸收度不得超過(guò)一定值 鹽酸去氧腎上腺素中酮體檢查鹽酸去氧腎上腺素中酮體檢查 2.0mg/ml 310nm下下 A 0.20 不需對(duì)照品不需對(duì)照品 三、一般雜質(zhì)檢查三、一般雜質(zhì)檢查信號(hào)雜質(zhì)信號(hào)雜質(zhì)一般無(wú)害，但其含量的多少可以反映出藥物的純度水平，氯化物、硫酸鹽等就屬于信號(hào)雜質(zhì)。有害雜質(zhì)有害雜質(zhì)，如重金屬、砷鹽、氰化物等，對(duì)人體有害，在藥品標(biāo)準(zhǔn)中必須嚴(yán)格控制。氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽重金屬、砷鹽溶液澄清度與顏色、溶液酸堿度、溶液澄清度與顏色、溶液酸堿度、熾灼殘?jiān)?、干燥熾灼殘?jiān)⒏稍锸е厥е?、水分、水分一般雜質(zhì)檢查規(guī)則一般雜

8、質(zhì)檢查規(guī)則藥品檢驗(yàn)操作標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：1 遵循平行操作原則遵循平行操作原則 （1）儀器的配對(duì)性。如納氏比色管應(yīng)配對(duì)）儀器的配對(duì)性。如納氏比色管應(yīng)配對(duì) （2）對(duì)照品與供試品同步操作）對(duì)照品與供試品同步操作2 正確的取樣及稱量正確的取樣及稱量3 正確的比色、比濁正確的比色、比濁4 檢查結(jié)果不符合規(guī)定或在邊緣時(shí)，應(yīng)對(duì)供試管和檢查結(jié)果不符合規(guī)定或在邊緣時(shí)，應(yīng)對(duì)供試管和對(duì)照管各復(fù)查二份對(duì)照管各復(fù)查二份（一一） 氯化物（氯化物（Chlorides）的檢查）的檢查 ChP（2005）二部附錄）二部附錄 A 供試管供試管 樣品樣品x g + 水水 25ml 對(duì)照管對(duì)照管 標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)NaCl液液(10 g Cl-/ml

9、) x ml 各加稀硝酸各加稀硝酸10ml，加水至，加水至40ml，加入，加入AgNO3試試液液1ml，加水至刻度，于暗處放置，加水至刻度，于暗處放置5min，比濁，比濁，在黑色背景下由上向下觀察。在黑色背景下由上向下觀察。 AgClAgClHNO3（二二）硫酸鹽（）硫酸鹽（sulfates）檢查法）檢查法 ChP（2005） 二部附錄二部附錄 B 供試管供試管 樣樣 x g + 水水 對(duì)照管對(duì)照管 標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)K2SO4 (100 g SO42-/ml) x ml 各加水至各加水至40 ml，加稀，加稀HCl 2ml，25%BaCl2 5ml，然后加水至，然后加水至50ml，放置，放置10分鐘，

10、比濁。分鐘，比濁。 4224BaSOBaSOHCl?。ㄈ╄F鹽（）鐵鹽（ iron salt ）檢查法）檢查法 ChP（2005） 二部二部 附錄附錄 G 硫氰酸鹽法硫氰酸鹽法 n=16 供試管供試管 樣樣x g 對(duì)照管對(duì)照管 標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)Fe3+ 10 g /ml x ml 加水加水25ml，稀，稀HCl 4ml，過(guò)硫酸銨，過(guò)硫酸銨50mg，30%硫氰酸銨液硫氰酸銨液3ml，加水至，加水至50ml，比色。，比色。 加過(guò)硫酸銨目的：加過(guò)硫酸銨目的：nnHClSCNFenSCNFe33)( 32FeFe24424382242)(2)(2SOSONHFeOSNHFeH（四四）重金屬（）重金屬（Hea

11、vy Metals)檢查法檢查法 ChP （2005） 二部二部 附錄附錄 H 重金屬重金屬 如如: Ag、Pb、Hg、Cu、Bi、Cd、Sb、Sn、As、Ni、Co等。等。 測(cè)定以測(cè)定以Pb為代表。為代表。 ChP（2005）有四種方法，常用）有四種方法，常用1和和2第一法第一法 適用于溶于水、稀酸和乙醇的適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物，最常用。藥物，最常用。 硫代乙酰胺硫代乙酰胺 供試管供試管 供試液供試液 25ml 對(duì)照管對(duì)照管 標(biāo)準(zhǔn)鉛標(biāo)準(zhǔn)鉛 10 g Pb/ml x ml 各加各加pH3.5醋酸鹽緩沖液醋酸鹽緩沖液 2ml，硫代乙酰胺，硫代乙酰胺試液試液 2ml，放置，放置2分鐘，比色

12、。分鐘，比色。第二法第二法 適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸及乙醇的有機(jī)藥物。于水、稀酸及乙醇的有機(jī)藥物。 本法先將樣品熾灼破壞（本法先將樣品熾灼破壞（500600熾灼灰化），取熾灼殘?jiān)?xiàng)下的殘熾灼灰化），取熾灼殘?jiān)?xiàng)下的殘?jiān)?，處理后再檢查。渣，處理后再檢查。（五五）砷鹽（）砷鹽（Arsenic）檢查法）檢查法 ChP2005. 附錄附錄 J古蔡氏法（古蔡氏法（Gutzeit）原理：原理：（棕黑色）（棕色）（黃色）快）323323332332234322333233)()(3)(2)(3344114(3393333HgAsHBrAsHHgBrAsHgBrAsHAs

13、HHgBrAsHgBrAsHBrHgBrAsHAsHOHZnHZnAsOAsHOHZnHZnAsOAsHZnHZnAs 標(biāo)準(zhǔn)砷斑標(biāo)準(zhǔn)砷斑 標(biāo)準(zhǔn)砷溶液（As2O3）1 g As/ml 2ml 樣品砷斑樣品砷斑 與標(biāo)準(zhǔn)砷斑比較，不得更深 加KI、SnCl2的目的使AsO43-轉(zhuǎn)變?yōu)锳sO33-，因?yàn)锳sO33-生成AsH3的速度比AsO43-快。標(biāo)準(zhǔn)砷斑攝氏度水浴至密塞粒分鐘放置滴試液酸性試液水min454025210552152gZnSnClmlKImlmlHCl同上供試液試液mlKI5（六六）酸堿度檢查法）酸堿度檢查法 （Acidity or Alkalinity) ChP （2005） 二部

14、二部 附錄附錄 A原料藥一般均進(jìn)行酸堿度檢查。原料藥一般均進(jìn)行酸堿度檢查。液體制劑也均進(jìn)行酸堿度檢查。液體制劑也均進(jìn)行酸堿度檢查。酸度酸度 檢查時(shí)采用堿液滴定或規(guī)定的檢查時(shí)采用堿液滴定或規(guī)定的pH值小于值小于7.0堿度堿度 檢查時(shí)采用酸液滴定或規(guī)定的檢查時(shí)采用酸液滴定或規(guī)定的pH值大于值大于7.0酸堿度酸堿度 檢查時(shí)先后用堿、酸液分別進(jìn)行滴定或檢查時(shí)先后用堿、酸液分別進(jìn)行滴定或pH范范 圍在圍在7.0兩側(cè)。兩側(cè)。pH1.pH值測(cè)定法值測(cè)定法 用電位法測(cè)定供試品溶液的pH值 如 注射用水 pH值應(yīng)為5.07.0 青霉素鈉鹽、鉀鹽 pH值應(yīng)為5.07.5 紅霉素 pH值應(yīng)為8.010.5 2005

15、年版藥典 pH值測(cè)定法 見(jiàn)附錄 H2. 指示液法指示液法 將一定量的指示液加入供試品中，將一定量的指示液加入供試品中，根據(jù)指示液的顏色變化來(lái)控制酸堿性雜根據(jù)指示液的顏色變化來(lái)控制酸堿性雜質(zhì)的限量質(zhì)的限量 。 例：例：純化水的酸堿度純化水的酸堿度取取10ml，加甲基紅指示劑，加甲基紅指示劑 2 d，不得顯紅色，不得顯紅色另取另取10ml，加溴麝香草酚蘭，加溴麝香草酚蘭 5 d，不得顯蘭色，不得顯蘭色純化水的純化水的 pH值為值為4.27.6 3. 酸堿滴定法酸堿滴定法 在一定的指示液下，用酸或堿滴定液在一定的指示液下，用酸或堿滴定液滴定供試品溶液中堿性或酸性雜質(zhì)，以消滴定供試品溶液中堿性或酸性雜

16、質(zhì)，以消耗酸或堿滴定液的毫升數(shù)作為限度指標(biāo)。耗酸或堿滴定液的毫升數(shù)作為限度指標(biāo)。例：例： 苯甲酸鈉的酸堿度苯甲酸鈉的酸堿度 本品本品1.0g，加水，加水20ml，酚酞，酚酞2d 如顯淡紅色，加硫酸滴定液如顯淡紅色，加硫酸滴定液0.25ml（0.05mol/L）,淡紅色應(yīng)消失。淡紅色應(yīng)消失。 如顯無(wú)色，加如顯無(wú)色，加NaOH滴定液滴定液0.25ml（0.1mol/L）,應(yīng)顯淡紅色。應(yīng)顯淡紅色。 表明本品表明本品1g中所含酸、堿性雜質(zhì)的限量分別為中所含酸、堿性雜質(zhì)的限量分別為0.025mmol。（七七）澄清度檢查法）澄清度檢查法 （Clarity of Solution） ChP 2005年版附錄

17、年版附錄 B 檢查藥品中存在的不溶性雜質(zhì)檢查藥品中存在的不溶性雜質(zhì) 對(duì)原料藥、口服制劑均有要求對(duì)原料藥、口服制劑均有要求原理：原理： 硫酸肼與烏洛托品反應(yīng)制備標(biāo)準(zhǔn)比濁液硫酸肼與烏洛托品反應(yīng)制備標(biāo)準(zhǔn)比濁液 n1.0%硫酸肼硫酸肼+10.0%烏洛托品烏洛托品濁度標(biāo)準(zhǔn)貯濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液備液-濁度標(biāo)準(zhǔn)原液濁度標(biāo)準(zhǔn)原液 (15ml1000ml) 供試品液供試品液 比濁用玻璃管比濁用玻璃管 黑色背景上黑色背景上濁度標(biāo)準(zhǔn)液濁度標(biāo)準(zhǔn)液 液面高液面高4cm 從上向下觀察從上向下觀察未超過(guò)未超過(guò)0.5級(jí)濁度標(biāo)準(zhǔn)液級(jí)濁度標(biāo)準(zhǔn)液 或與所用溶劑相同或與所用溶劑相同大于大于0.5級(jí)，小于級(jí)，小于1級(jí)級(jí) 0.5級(jí)濁度級(jí)濁度

18、澄清澄清（八八）溶液顏色檢查法）溶液顏色檢查法 （Color of Solution） ChP2005年版年版 二部附錄二部附錄 A 控制有色雜質(zhì)限量的一種方法控制有色雜質(zhì)限量的一種方法1. 目視比色法目視比色法 供試液與標(biāo)準(zhǔn)液比較，不得更深供試液與標(biāo)準(zhǔn)液比較，不得更深 黃色原液黃色原液 K2Cr2O7 液液 紅色原液紅色原液 CoCl2 6H2O 液液 藍(lán)色原液藍(lán)色原液 CuSO4 5H2O 液液 配成黃綠色、黃色、橙黃色、橙紅色和棕紅色配成黃綠色、黃色、橙黃色、橙紅色和棕紅色5種標(biāo)準(zhǔn)貯備液，再分別配成種標(biāo)準(zhǔn)貯備液，再分別配成10種色號(hào)。共計(jì)種色號(hào)。共計(jì)50種種標(biāo)準(zhǔn)比色液。標(biāo)準(zhǔn)比色液。例：例

19、： 鹽酸異丙嗪（抗組胺藥）鹽酸異丙嗪（抗組胺藥） 溶液的澄清度與顏色溶液的澄清度與顏色 取本品取本品1.0 g，加水加水10ml溶解后，溶液應(yīng)澄清無(wú)色；如顯渾溶解后，溶液應(yīng)澄清無(wú)色；如顯渾濁，與濁，與1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液（附錄號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液（附錄 B）比較，不）比較，不得更深；如顯色，與黃色得更深；如顯色，與黃色2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液（附號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液（附錄錄 A）比較，不得更深。）比較，不得更深。 2. 分光光度法分光光度法 在某波長(zhǎng)下，測(cè)定溶液的吸收度，并規(guī)定其在某波長(zhǎng)下，測(cè)定溶液的吸收度，并規(guī)定其吸收度不得超過(guò)某一限度。吸收度不得超過(guò)某一限度。 例：華法林鈉（抗凝血藥）例：華法林鈉（抗凝血藥） 丙酮溶液的

20、澄清度與顏色丙酮溶液的澄清度與顏色 取本品取本品0.20 g，加丙，加丙酮酮10ml溶解后，溶液應(yīng)澄清無(wú)色；如顯渾濁，與溶解后，溶液應(yīng)澄清無(wú)色；如顯渾濁，與1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液比較，不得更濃；如顯色，置號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液比較，不得更濃；如顯色，置4cm吸吸收池中，在收池中，在460nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，不得過(guò)的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，不得過(guò)0.12。 （九）干燥失重測(cè)定法（九）干燥失重測(cè)定法 （Loss on Drying） ChP （2005） 二部二部 附錄附錄 L 干燥失重指藥品在規(guī)定條件下，經(jīng)干燥后減失的量干燥失重指藥品在規(guī)定條件下，經(jīng)干燥后減失的量 測(cè)揮發(fā)性雜質(zhì)，主要為水測(cè)揮發(fā)性雜質(zhì)，主要為水%10

21、0%100%SWS試樣重干燥失重量干燥失重例：葡萄糖干燥失重例：葡萄糖干燥失重扁平稱量瓶扁平稱量瓶 t1 t2 t+s t+w1 t+w2 （放在干燥器內(nèi)冷卻（放在干燥器內(nèi)冷卻30分鐘）分鐘）恒重恒重: t1 - t2 0.3mg (t+w1) (t+w2) 0.3mg 指物品連續(xù)兩次干燥或灼燒后稱得的指物品連續(xù)兩次干燥或灼燒后稱得的重量相差小于重量相差小于0.3mg，稱為，稱為達(dá)恒重達(dá)恒重。小時(shí)攝氏度1105小時(shí)攝氏度1105s稱葡萄糖攝氏度小時(shí)1052小時(shí)攝氏度11051. 常壓恒溫干燥法常壓恒溫干燥法 如葡萄糖如葡萄糖 常用烘箱常用烘箱105或以上?；蛞陨?。2. 干燥劑干燥法干燥劑干燥法

22、 用于受熱不穩(wěn)定，易揮發(fā)用于受熱不穩(wěn)定，易揮發(fā)的藥物。干燥器放的藥物。干燥器放P2O5。3. 減壓干燥法減壓干燥法 用于受熱不穩(wěn)定、水分難用于受熱不穩(wěn)定、水分難趕除的藥物。趕除的藥物。20mmHg以下壓力，恒溫減壓干以下壓力，恒溫減壓干燥箱燥箱4. 熱重法熱重法 Thermogravimetry TG 熱天平上分析熱天平上分析 是在程序控是在程序控制溫度下借助熱天平制溫度下借助熱天平以獲得物質(zhì)的質(zhì)量與以獲得物質(zhì)的質(zhì)量與溫度關(guān)系得一種熱分溫度關(guān)系得一種熱分析技術(shù)。析技術(shù)。葡萄糖熱重圖吸附水兩個(gè)結(jié)晶水一個(gè)結(jié)晶水2.82.83 33.23.23.43.43.63.63.83.84 44.24.24.44.40攝氏度50攝氏度105攝氏度0攝氏度50攝氏度105攝氏度（十十）熾灼殘?jiān)鼨z查法）熾灼殘?jiān)鼨z查法 （Residue on Ignition） ChP （2005） 二部二部 附錄附錄 N 有機(jī)藥物熾灼炭化，再加硫酸濕潤(rùn)，低溫加熱有機(jī)藥物熾灼炭化，再加硫酸濕潤(rùn)，低溫加熱至硫酸蒸氣除盡后