李萍《紫外線殺菌試驗(yàn)》

1、紫外線殺菌試驗(yàn)生物科學(xué) 121李萍 12640112一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、了解紫外線的殺菌作用原理。2、學(xué)習(xí)紫外線殺菌試驗(yàn)方法。二、實(shí)驗(yàn)原理1）紫外線殺菌屬于射線殺菌的一種；2）殺菌波長(zhǎng) 240nm-280nm,265nm-266nm范圍最強(qiáng)，此范圍與DNA吸收光譜一致；3）其殺菌機(jī)制：短波的紫外線引起細(xì)胞核酸變性導(dǎo)致微生物死亡。不同的菌，紫外線的殺菌時(shí)間不同，殺菌的效果不同。不同的菌，紫外線的殺菌時(shí)間不同，對(duì)于一般的細(xì)菌只要很短的時(shí)間，對(duì)于有芽孢的菌，它本身抗逆性非常強(qiáng)，因此殺滅的時(shí)間會(huì)相對(duì)更長(zhǎng)一些4)特點(diǎn)：殺菌作用強(qiáng)、穿透能力很弱、適用于空間消毒和表面消毒三、實(shí)驗(yàn)材料和用具培養(yǎng) 24-48h的大

2、腸桿菌5 皿牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基接種環(huán)酒精燈紫外燈四、實(shí)驗(yàn)步驟（ 1）制平板 -取無(wú)菌平皿 5 個(gè)，將已熔化并冷卻至 50左右的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基按無(wú)菌操作法倒入平皿中，使冷凝成平板。（ 2）標(biāo)記 -在平板底部標(biāo)記姓名、日期、班級(jí)、實(shí)驗(yàn)室號(hào)及紫外照射時(shí)間(30s,60s,90s,120s,150s）。（ 3）接種 -用接種環(huán)取細(xì)菌密集接種于培養(yǎng)基上。（ 4）紫外線處理 -將紫外燈光開(kāi)燈預(yù)熱 3min。再將上述平皿置于紫外燈下，將平板按照時(shí)間順序在紫外燈下方擺成一排，并用平皿蓋遮住細(xì)菌涂布面的一半。（ 5）培養(yǎng) -每隔 30s取出一塊平皿，放入 37溫箱中孵育 18-24h，注意事項(xiàng)1.在

3、使用過(guò)程中，應(yīng)保持紫外燈表面的清潔。2 紫外線對(duì)皮膚和眼睛有損傷作用，應(yīng)注意防護(hù)。五、預(yù)期結(jié)果：1.蓋子蓋住的瓊脂表面，可見(jiàn)大腸桿菌形成的菌落。2.直接暴露于紫外線下的瓊脂表面無(wú)菌生長(zhǎng)或只有少量菌生長(zhǎng)，且隨著照射時(shí)間的延長(zhǎng)，殺菌效果越好，殘余菌越少。六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析大腸桿菌無(wú)皿蓋有皿蓋30s60s90s120s150s結(jié)果分析：紫外線對(duì)微生物有強(qiáng)烈的致死作用，其殺菌機(jī)制是短波的紫外線引起細(xì)胞核酸變性導(dǎo)致微生物死亡。五皿培養(yǎng)皿左半邊為無(wú)皿蓋，右半邊為有皿蓋，由圖可知，從 30s-150s，所長(zhǎng)菌從多到少，但長(zhǎng)得都較多。紫外燈照射時(shí)間不同，效果不同， 30s下，紫外燈照射對(duì)菌生長(zhǎng)無(wú)明顯影響，長(zhǎng)的菌都較多。隨著時(shí)間增加，紫外燈照射對(duì)菌生長(zhǎng)有了抑制作用，起到的殺菌效果增強(qiáng)。從設(shè)置的時(shí)間上看， 90s 后效果開(kāi)始明顯。對(duì)比有蓋和無(wú)蓋，當(dāng)紫外燈照射相同時(shí)間，無(wú)皿蓋的菌長(zhǎng)的比有皿蓋少。說(shuō)明有蓋能減弱紫外線對(duì)菌的殺菌作用，但從 150s下的那個(gè)皿可以看出，紫外燈對(duì)菌殺菌作用即使在有皿蓋保護(hù)情況下，也會(huì)隨著時(shí)間增加而增強(qiáng)?？偠灾?，紫外線殺菌，且隨著照射時(shí)間的延長(zhǎng)，殺菌效果越好，殘余菌越少。加皿蓋能削弱紫外線對(duì)菌的殺菌作用。不足點(diǎn)：1、雖然