李萍《紫外線殺菌試驗》

1、紫外線殺菌試驗生物科學(xué) 121李萍 12640112一、實(shí)驗?zāi)康?、了解紫外線的殺菌作用原理。2、學(xué)習(xí)紫外線殺菌試驗方法。二、實(shí)驗原理1）紫外線殺菌屬于射線殺菌的一種；2）殺菌波長 240nm-280nm,265nm-266nm范圍最強(qiáng)，此范圍與DNA吸收光譜一致；3）其殺菌機(jī)制：短波的紫外線引起細(xì)胞核酸變性導(dǎo)致微生物死亡。不同的菌，紫外線的殺菌時間不同，殺菌的效果不同。不同的菌，紫外線的殺菌時間不同，對于一般的細(xì)菌只要很短的時間，對于有芽孢的菌，它本身抗逆性非常強(qiáng)，因此殺滅的時間會相對更長一些4)特點(diǎn)：殺菌作用強(qiáng)、穿透能力很弱、適用于空間消毒和表面消毒三、實(shí)驗材料和用具培養(yǎng) 24-48h的大

2、腸桿菌5 皿牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基接種環(huán)酒精燈紫外燈四、實(shí)驗步驟（ 1）制平板 -取無菌平皿 5 個，將已熔化并冷卻至 50左右的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基按無菌操作法倒入平皿中，使冷凝成平板。（ 2）標(biāo)記 -在平板底部標(biāo)記姓名、日期、班級、實(shí)驗室號及紫外照射時間(30s,60s,90s,120s,150s）。（ 3）接種 -用接種環(huán)取細(xì)菌密集接種于培養(yǎng)基上。（ 4）紫外線處理 -將紫外燈光開燈預(yù)熱 3min。再將上述平皿置于紫外燈下，將平板按照時間順序在紫外燈下方擺成一排，并用平皿蓋遮住細(xì)菌涂布面的一半。（ 5）培養(yǎng) -每隔 30s取出一塊平皿，放入 37溫箱中孵育 18-24h，注意事項1.在

3、使用過程中，應(yīng)保持紫外燈表面的清潔。2 紫外線對皮膚和眼睛有損傷作用，應(yīng)注意防護(hù)。五、預(yù)期結(jié)果：1.蓋子蓋住的瓊脂表面，可見大腸桿菌形成的菌落。2.直接暴露于紫外線下的瓊脂表面無菌生長或只有少量菌生長，且隨著照射時間的延長，殺菌效果越好，殘余菌越少。六、實(shí)驗結(jié)果及分析大腸桿菌無皿蓋有皿蓋30s60s90s120s150s結(jié)果分析：紫外線對微生物有強(qiáng)烈的致死作用，其殺菌機(jī)制是短波的紫外線引起細(xì)胞核酸變性導(dǎo)致微生物死亡。五皿培養(yǎng)皿左半邊為無皿蓋，右半邊為有皿蓋，由圖可知，從 30s-150s，所長菌從多到少，但長得都較多。紫外燈照射時間不同，效果不同， 30s下，紫外燈照射對菌生長無明顯影響，長的菌都較多。隨著時間增加，紫外燈照射對菌生長有了抑制作用，起到的殺菌效果增強(qiáng)。從設(shè)置的時間上看， 90s 后效果開始明顯。對比有蓋和無蓋，當(dāng)紫外燈照射相同時間，無皿蓋的菌長的比有皿蓋少。說明有蓋能減弱紫外線對菌的殺菌作用，但從 150s下的那個皿可以看出，紫外燈對菌殺菌作用即使在有皿蓋保護(hù)情況下，也會隨著時間增加而增強(qiáng)。總而言之，紫外線殺菌，且隨著照射時間的延長，殺菌效果越好，殘余菌越少。加皿蓋能削弱紫外線對菌的殺菌作用。不足點(diǎn)：1、雖然