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1、.學(xué)軍中學(xué)2019屆高三空中課堂生物講義第5講 植物的克隆一、知識(shí)梳理1植物組織培養(yǎng)的一般程序配制培養(yǎng)基: 和 的半固體培養(yǎng)基(凝固劑 )切取 的組織塊獲得愈傷組織:由相對(duì)沒有分化的活的薄壁細(xì)胞團(tuán)組成的新生組織誘導(dǎo)新植株2.植物細(xì)胞的全能性(1)全能性:植物體的每個(gè)生活細(xì)胞都具有 上的全能性,因而都具有發(fā)育成 的潛能。(2)全能性表達(dá)的表現(xiàn)2植物細(xì)胞培養(yǎng)和器官培養(yǎng)3原生質(zhì)體培養(yǎng)與植物細(xì)胞工程(1)原生質(zhì)體培養(yǎng) (2)植物細(xì)胞工程的操作過程4植物克隆技術(shù)的應(yīng)用(1) 培育。(2)細(xì)胞 的生產(chǎn)。(3) 育種。(4)誘發(fā)、篩選突變體?;A(chǔ)練習(xí)題型一植物細(xì)胞的全能性和組織培養(yǎng)方法1如圖表示植物組織培養(yǎng)
2、過程。據(jù)圖分析下列敘述正確的是()A植株根尖細(xì)胞的全能性比植株根尖細(xì)胞的強(qiáng)B試管的培養(yǎng)基中含有植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,不含有機(jī)物C試管中的細(xì)胞具有細(xì)胞質(zhì)豐富、細(xì)胞核和液泡都大的特性D調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的比例可誘導(dǎo)產(chǎn)生不同的植物器官2下圖為某二倍體植株花藥中未成熟花粉在適宜培養(yǎng)基上形成完整植株的過程。下列有關(guān)敘述正確的是()A過程表示脫分化,過程表示再分化B過程、需要避光,過程需要照光C過程說明花粉細(xì)胞具有全能性D過程獲得的完整植株自交后代不會(huì)發(fā)生性狀分離3下圖為玉米植物(2n20)組織培養(yǎng)的簡(jiǎn)略表示,下列有關(guān)說法不正確的是()A的培養(yǎng)基中需要加入一定配比的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素,還要加入瓊脂和蔗糖
3、等B的分化程度比低,全能性比高C若是花藥,則是單倍體植株,將的種子用一定濃度的秋水仙素處理可獲得純合子D若將在搖床上進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng)可以獲得細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小而細(xì)胞核大的胚性細(xì)胞4下圖表示利用棉花葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體培養(yǎng)進(jìn)行遺傳改良的過程,據(jù)圖分析錯(cuò)誤的是()A過程需在適宜條件下用纖維素酶和果膠酶的混合物處理B過程能定向誘導(dǎo)原生質(zhì)體產(chǎn)生優(yōu)良性狀的突變C過程中葉肉細(xì)胞失去了其特有的結(jié)構(gòu)和功能D過程需用適宜配比的植物激素處理5辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域。利用生物工程技術(shù)生產(chǎn)辣椒素的途徑如下圖所示。下列判斷錯(cuò)誤的是()A圖中和分別需要用不同濃度配比的植物激素誘導(dǎo),如生長(zhǎng)素類、細(xì)
4、胞分裂素類B細(xì)胞分化是因?yàn)榧?xì)胞中遺傳物質(zhì)改變C若要生產(chǎn)脫毒苗,一般選用離體的根尖或莖尖作為外植體D此途徑中形成單細(xì)胞進(jìn)而培養(yǎng)成高產(chǎn)細(xì)胞系的過程屬于植物細(xì)胞克隆當(dāng)堂檢測(cè) 真題模擬1(2019年4月選考)(二)兔肝細(xì)胞中的基因E編碼代謝甲醛的酶,擬利用基因工程技術(shù)將基因E轉(zhuǎn)入矮牽牛中,以提高矮牽牛對(duì)甲醛的代謝能力,請(qǐng)回答: (1)從兔肝細(xì)胞中提取mRNA,在_酶的作用下形成互補(bǔ)DNA,然后以此DNA為模板擴(kuò)增得到基因E。在相關(guān)酶的作用下,將基因E與Ti質(zhì)粒連接在一起,形成_,再導(dǎo)入用氯化鈣處理的_,侵染矮牽牛葉片。將被侵染的葉片除菌后進(jìn)行培養(yǎng),最終得到轉(zhuǎn)基因矮牽牛。其中培養(yǎng)過程正確的是_(A.葉片
5、在含適宜濃度生長(zhǎng)素的培養(yǎng)基上分化形成愈傷組織 B.愈傷組織在含細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素配比較高的培養(yǎng)基上形成芽 C.再生的芽在細(xì)胞分裂素含量較高的培養(yǎng)基上生根 D.愈傷組織在含適宜濃度植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基上脫分化形成再生植株)。 (2)取轉(zhuǎn)基因矮牽牛葉片,放入含MS液體培養(yǎng)基和適宜濃度甲醛且密封的試管中。將試管置于_上,進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng)液。一段時(shí)間后測(cè)定培養(yǎng)基中甲醛的含量,以判斷基因E是否在轉(zhuǎn)基因矮牽牛中正常表達(dá)。培養(yǎng)過程中液體培養(yǎng)基的作用:一是提供營養(yǎng);二是_,從而使葉片保持正常的形態(tài)。 2.(2019年10月選考32題)某小組欲進(jìn)行煙草原生質(zhì)體分離與培養(yǎng)的研究,請(qǐng)回答:(1)原生質(zhì)體的分離:在
6、無菌條件才,取煙草無菌苗的葉片,放入含有0.5mol/L的甘露醇(維持較高滲透壓)的 混合液處理,經(jīng)過離心純化后獲得原生質(zhì)體。(2)原生質(zhì)體的培養(yǎng):將原生質(zhì)體進(jìn)行培養(yǎng),重新長(zhǎng)出細(xì)胞壁,形成胚性細(xì)胞,此時(shí),應(yīng)該 培養(yǎng)基中甘露醇的濃度,以利于胚性細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細(xì)胞團(tuán),然后經(jīng)兩次途徑形成再生植株。途徑一:細(xì)胞團(tuán)形成球胚、 和胚狀體,最好發(fā)育成植株。途徑二:細(xì)胞團(tuán)增殖為愈傷組織,然后在發(fā)芽培養(yǎng)基上又到出芽,切割芽經(jīng)過生根后形成完整植株。上述發(fā)芽培養(yǎng)基中含量相對(duì)較高的激素是 、胚性細(xì)胞的主要特點(diǎn)是 。(A. 液泡小、細(xì)胞核小 B. 液泡大、細(xì)胞核大 C.液泡大、細(xì)胞核小 D. 液泡小、細(xì)胞核大)(3)
7、為了對(duì)煙草的某些性狀進(jìn)行改良,分離得到兩種煙草的原生質(zhì)體,通過 方法將它們的遺傳物質(zhì)組合在一起,經(jīng)培養(yǎng)獲得具有新性狀的再生植株,提取再生植株的DNA,采用 擴(kuò)增相關(guān)基因,來鑒定遺傳物質(zhì)是否成功重組。3、(2019年11月選考第32題 )回答與植物克隆和動(dòng)物克隆有關(guān)的問題: (1) 利用植物愈傷組織獲得再生植株主要有兩條途徑:一是由愈傷組織的細(xì)胞先分化產(chǎn)生芽和根后再形成一個(gè)完整植株的_途徑,二是由愈傷組織細(xì)胞產(chǎn)生胚狀體后再萌發(fā)形成完整植株的胚胎發(fā)生途徑。另外也可不通過愈傷組織階段而直接采用帶腋芽的 莖段培養(yǎng)成叢狀苗,再誘導(dǎo)生根獲得再生植株,其原因是腋芽中存在_。
8、160; (2) 利用植物克隆培育新品種,一方面可利用帶有目的基因的_侵染植株,通過的_方法導(dǎo)入植物細(xì)胞、組織、器官獲得轉(zhuǎn)基因,另一方面利用異源植株的_ 進(jìn)行融合產(chǎn)生雜種植株,或利用異源植株在試管內(nèi)進(jìn)行_,對(duì)其產(chǎn)生的胚進(jìn)行培養(yǎng)產(chǎn)生雜種植株。 (3) 下列屬于植物克隆和動(dòng)物克隆共有培養(yǎng)方法是( ) A.懸浮培養(yǎng)、器官培養(yǎng) B.貼壁培養(yǎng)、傳代培養(yǎng) C.器官培養(yǎng)、愈傷組織培養(yǎng) D.原生質(zhì)體培養(yǎng)、傳代培養(yǎng) 4.(2019年4月選考32節(jié)選)(二
9、)回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問題:(3)取田間不同品種水稻的幼胚,先進(jìn)行_,然后接種到培養(yǎng)基中培養(yǎng),幼胚發(fā)生_形成愈傷組織,并進(jìn)行繼代培養(yǎng)。用含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染愈傷組織,再培養(yǎng)愈傷組織,以便獲得抗蟲的轉(zhuǎn)基因水稻。影響愈傷組織能否成功再生出植株的因素有:培養(yǎng)條件如光溫、培養(yǎng)基配方如植物激素配比、以及_ (答出2點(diǎn)即可)。5.(2019年10月稽陽聯(lián)考)利用基因工程技術(shù)將突變的IPA1基因轉(zhuǎn)入水稻細(xì)胞中從而獲得某水稻新品種。 (1)培育該轉(zhuǎn)基因水稻新品種的核心是構(gòu)建_。該過程需要用到的工具酶有_ _。本實(shí)驗(yàn)中常用CaCl2處理土壤農(nóng)桿菌其目的是,增加其 的通透性,便于重組質(zhì)粒的導(dǎo)入。(2)
10、在含目的基因的水稻細(xì)胞培育成植株過程中可以將含有愈傷組織的培養(yǎng)物放在搖床上,通過_培養(yǎng)分散成單細(xì)胞。在該水稻的培養(yǎng)過程中,相關(guān)敘述正確的是_(A.配制只含有適當(dāng)營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基,倒在滅菌試管中凝固成半固體 B.從滅菌的根、莖或葉上切取一些小組織塊,進(jìn)行培養(yǎng) C.這種單細(xì)胞具有細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡大、細(xì)胞核大的特征 D.水稻體細(xì)胞與這種單細(xì)胞的全能性表達(dá)程度大不相同)(3)利用水稻細(xì)胞制備原生質(zhì)體時(shí),需在0.50.6mol/L的甘露醇溶液中進(jìn)行處理,該溶液濃度與水稻細(xì)胞中的_濃度相當(dāng)。6. 鐵皮石斛是我國名貴中藥,生物堿是其有效成分之一。應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)鐵皮石斛擬原球莖(簡(jiǎn)稱PLBs,類似愈
11、傷組織)生產(chǎn)生物堿的實(shí)驗(yàn)流程如下:在固體培養(yǎng)基上,PLBs的重量、生物堿含量隨增殖培養(yǎng)時(shí)間的變化如圖所示,請(qǐng)回答下列問題: (1)選用新生營養(yǎng)芽為外植體的原因是 ,誘導(dǎo)外植體形成PLBs的過程稱為。 (2)與黑暗條件下相比,PLBs在光照條件下生長(zhǎng)的優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在 ,(3)脫落酸(ABA)能提高生物堿含量,但會(huì)抑制PLBs的生長(zhǎng)。若采用液體培養(yǎng),推測(cè)添加適量的ABA可提高生物堿產(chǎn)量。同學(xué)們擬開展探究實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證該推測(cè),在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案時(shí)探討了以下問題: ABA的濃度梯度設(shè)置和添加方式:設(shè)4個(gè)ABA處理組,1個(gè)空白對(duì)照組,3次重復(fù)。因ABA受熱易分解,故一定濃度的無菌ABA母液應(yīng)在各組液體培養(yǎng)基 后按比例加入。 實(shí)驗(yàn)進(jìn)程和取樣:實(shí)驗(yàn)50天完成,每10天取一次樣,將樣品(PLBs)稱重(g/瓶)后再測(cè)定生物堿含量。若初始(第0天)數(shù)據(jù)已知,實(shí)驗(yàn)過程中還需測(cè)定的樣品數(shù)為 。 依據(jù)所測(cè)定的數(shù)據(jù)確定適宜濃度的ABA和培養(yǎng)時(shí)間:當(dāng)某3個(gè)樣品(重復(fù)樣)的 時(shí),其對(duì)應(yīng)的ABA濃度為適宜濃度,對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)時(shí)間是適宜培養(yǎng)時(shí)間。 7.(2019年金華)(二)下圖中的代表通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育新植株的三條途徑,請(qǐng)回答(1)外植體a、b、c來自同種植株,植株A、B、C中的細(xì)胞,全能性表達(dá)程度 (填“相同”、“可能不同”)。(2)途徑
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