大學(xué)無機及分析化學(xué)蛋白質(zhì)課件第三章 蛋白質(zhì)的通性 純化和表征_第1頁
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1、基質(zhì)：基質(zhì)：葡聚糖凝膠（葡聚糖凝膠（Sephadex）、瓊脂糖凝膠）、瓊脂糖凝膠（Sepharose）或聚丙烯酰胺。）或聚丙烯酰胺。鹽溶：鹽溶：在鹽濃度很稀的范圍內(nèi)，隨著在鹽濃度很稀的范圍內(nèi)，隨著鹽濃度的增加，球狀蛋白質(zhì)的溶解度鹽濃度的增加，球狀蛋白質(zhì)的溶解度升高。升高。鹽析：鹽析：隨著溶液中的鹽濃度升高，蛋隨著溶液中的鹽濃度升高，蛋白質(zhì)的溶解度逐漸降低，蛋白質(zhì)分子白質(zhì)的溶解度逐漸降低，蛋白質(zhì)分子相互聚集發(fā)生沉淀。相互聚集發(fā)生沉淀。(NH4)2SO4分級沉淀：分級沉淀：不同蛋白質(zhì)在不同蛋白質(zhì)在不同鹽濃度中溶解度有差別。不同鹽濃度中溶解度有差別。第四節(jié)第四節(jié) 蛋蛋白質(zhì)的分白質(zhì)的分離與鑒定離與鑒定

2、被分離的物質(zhì)保持天然的結(jié)構(gòu)，被分離的物質(zhì)保持天然的結(jié)構(gòu)，具有生物活性具有生物活性遷移率取決于荷質(zhì)比（遷移率取決于荷質(zhì)比（q/r）樣品不處理，直接點樣樣品不處理，直接點樣SDS：十二烷基硫酸鈉第四節(jié)第四節(jié) 蛋蛋白質(zhì)的分白質(zhì)的分離與鑒定離與鑒定等電聚焦電泳等電聚焦電泳SDS-PAGE特點：特點：分辨率高分辨率高考馬斯亮藍染色：一種染料，結(jié)合在蛋考馬斯亮藍染色：一種染料，結(jié)合在蛋白質(zhì)的堿性基團上，檢測靈敏度為白質(zhì)的堿性基團上，檢測靈敏度為0.20.5g銀染：銀離子被還原，成黑銀染：銀離子被還原，成黑色色,靈敏度比考馬斯高靈敏度比考馬斯高倍倍第四節(jié)第四節(jié) 蛋蛋白質(zhì)的分白質(zhì)的分離與鑒定離與鑒定配體：配體：能與某種蛋白質(zhì)專一結(jié)合的分子能與某種蛋白質(zhì)專一結(jié)合的分子如：如： 酶與輔酶、酶與專一性抑制劑、酶與輔酶、酶與專一性抑制劑、抗體與抗原、激素與受體等抗體與抗原、激素與受體等常用的陰離子交換劑常用的陰離子交換劑適合分離等電點大于適合分離等電點大

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