病原體檢查PPT課件

1、北京中醫(yī)藥大學(xué)北京中醫(yī)藥大學(xué)東 直 門(mén) 醫(yī) 院 檢 驗(yàn) 科東 直 門(mén) 醫(yī) 院 檢 驗(yàn) 科 姚興姚興偉偉1主要內(nèi)容一、概一、概 述述二、標(biāo)本采集和運(yùn)送二、標(biāo)本采集和運(yùn)送三、微生物形態(tài)學(xué)檢查三、微生物形態(tài)學(xué)檢查四、細(xì)菌分離、培養(yǎng)與鑒定四、細(xì)菌分離、培養(yǎng)與鑒定五、藥物敏感性實(shí)驗(yàn)五、藥物敏感性實(shí)驗(yàn)六、細(xì)菌的耐藥性六、細(xì)菌的耐藥性七、醫(yī)院感染與管理七、醫(yī)院感染與管理21 概念 病原體指可造成人或動(dòng)物感染疾病的微生物（包括細(xì)菌、細(xì)菌、病毒、支原體、衣原體、螺旋體、真菌、寄生蟲(chóng)）。 凡是由病原微生物引起的疾病統(tǒng)稱(chēng)為感染性疾病。感染性疾病。一、概述32 臨床微生物檢查的任務(wù)（1）為臨床提供快速、準(zhǔn)確的病原學(xué)診

2、斷。（2）指導(dǎo)臨床合理使用抗生素。（3）對(duì)醫(yī)院感染進(jìn)行監(jiān)控。一、概述43 臨床微生物學(xué)檢查的程序一、概述5 采集標(biāo)本是病原學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷的第一步，留取標(biāo)本的質(zhì)量關(guān)系到實(shí)驗(yàn)診斷的結(jié)果正確與否。 實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 室室二、標(biāo)本采集和運(yùn)送6（一）呼吸道標(biāo)本 鼻/咽拭子、痰、通過(guò)氣管收集的標(biāo)本均可作為呼吸道標(biāo)本。1.送檢指征（1）上呼吸道標(biāo)本病毒性普通感冒伴有明顯咽痛時(shí)，懷疑為咽部鏈球菌感染，應(yīng)做細(xì)菌培養(yǎng)。細(xì)菌性咽扁桃體炎：明顯咽痛、畏寒、發(fā)熱，體溫可達(dá)39以上。（2）下呼吸道標(biāo)本咳嗽、咳痰?？┭?、呼吸困難。發(fā)熱。胸痛。二、標(biāo)本采集和運(yùn)送上呼吸道下呼吸道72.采集注意事項(xiàng)（1）用藥前采集（2）晨起為宜（3）清潔

3、口腔（4）咳深部痰注：作結(jié)核分枝桿菌檢查，痰量要多或留取注：作結(jié)核分枝桿菌檢查，痰量要多或留取2424小時(shí)痰液，小時(shí)痰液，以提高陽(yáng)性檢出率。以提高陽(yáng)性檢出率。二、標(biāo)本采集和運(yùn)送83.標(biāo)本采集方法（1）鼻、咽拭子：鼻拭子鼻拭子：讓病人頭部自然放松，將拭子貼鼻孔壁慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)進(jìn)入病人一鼻孔內(nèi)，至鼻腭處，然后邊擦拭邊旋轉(zhuǎn)慢慢取出。以同一拭子，用同樣的方法擦拭另一鼻孔。咽拭子咽拭子：囑患者用清水反復(fù)漱口，讓病人頭部微仰，嘴張大，并發(fā)“啊”音，露出兩側(cè)咽扁桃體，手持拭子在病人兩側(cè)咽扁桃體稍微用力來(lái)回擦拭至少3次，然后再在咽后壁上下擦拭至少3次。二、標(biāo)本采集和運(yùn)送9二、標(biāo)本采集和運(yùn)送（2）下呼吸道標(biāo)本(1)自

4、然咳痰法(2)氣管吸出物（氣管插管患者） (3)支氣管鏡采集法 支氣管肺泡灌洗液 防污染毛刷采集上呼吸道下呼吸道10痰標(biāo)本鏡下分類(lèi)痰標(biāo)本鏡下分類(lèi)注：注：A、B兩種情況的痰標(biāo)本適合做培養(yǎng)，兩種情況的痰標(biāo)本適合做培養(yǎng)，C級(jí)標(biāo)本為不合級(jí)標(biāo)本為不合格標(biāo)本，應(yīng)重新留??！格標(biāo)本，應(yīng)重新留??！分級(jí)分級(jí)白細(xì)胞（個(gè)白細(xì)胞（個(gè)/LP/LP）鱗狀上皮細(xì)胞（個(gè)鱗狀上皮細(xì)胞（個(gè)/LP/LP）A252525C25二、標(biāo)本采集和運(yùn)送11二、標(biāo)本采集和運(yùn)送鱗狀上皮細(xì)胞鱗狀上皮細(xì)胞102525個(gè)個(gè)/ /每低倍視野每低倍視野合格合格12二、標(biāo)本采集和運(yùn)送鱗狀上皮細(xì)胞鱗狀上皮細(xì)胞2525個(gè)個(gè)/ /每低倍視野每低倍視野 白細(xì)胞白細(xì)胞

5、1020/20/分或分或COCO2 2分分壓壓32mmHg10.010.010109 9/ L/ L，特別，特別是有是有“核左移核左移”時(shí)）；時(shí)）；(4)(4)粒細(xì)胞減少（粒細(xì)胞減少（1.0 A+B）（2）相加作用:兩種藥物聯(lián)合作用時(shí)的活性等于兩種單獨(dú)抗菌活性之和。 （AB=A+B） （3）無(wú)關(guān)作用:兩種藥物聯(lián)合作用的活性等于其單獨(dú)活性。(A=B)（4）拮抗作用:兩種藥物聯(lián)合作用顯著低于單獨(dú)抗菌活性。(ABB AB)五、藥物敏感性實(shí)驗(yàn)協(xié)同協(xié)同 相加相加 無(wú)關(guān)無(wú)關(guān) 拮抗拮抗668 抗生素聯(lián)合應(yīng)用的效果（1）+ 協(xié)同或相加作用。 （2）+ 拮抗作用。（3）+ 無(wú)關(guān)作用。（4）+ 協(xié)同或相加作用。

6、（5）+協(xié)同或相加作用。（6）+相加作用。類(lèi)類(lèi)繁殖期殺菌劑繁殖期殺菌劑類(lèi)類(lèi)靜止期殺菌劑靜止期殺菌劑類(lèi)類(lèi)速效抑菌劑速效抑菌劑類(lèi)類(lèi)慢效抑菌劑慢效抑菌劑五、藥物敏感性實(shí)驗(yàn)協(xié)同協(xié)同 相加相加 無(wú)關(guān)無(wú)關(guān) 拮抗拮抗67六、細(xì)菌的耐藥性1 細(xì)菌耐藥性 細(xì)菌耐藥性又稱(chēng)抗藥性，系指細(xì)菌對(duì)于抗菌藥物作用的耐受性。 耐藥性根據(jù)其發(fā)生原因可分為天然耐藥性和獲得耐藥性。前者是染色體DNA突變而致，后者往往是質(zhì)粒、噬菌體及其他遺傳物質(zhì)攜帶外來(lái)DNA片段導(dǎo)致產(chǎn)生的耐藥性。682 細(xì)菌耐藥性機(jī)制（1）產(chǎn)生針對(duì)抗生素的滅活酶和鈍化酶： -內(nèi)酰胺酶、超廣譜-內(nèi)酰胺酶 氨基糖苷類(lèi)產(chǎn)生鈍化酶 其他酶類(lèi)：金屬酶等（2）抗生素作用的靶位

7、改變：MRSA（3）改變細(xì)菌外膜通透性：銅綠假單胞菌的亞胺培南通道蛋白OprD缺失后可導(dǎo)致耐藥。（4）主動(dòng)流出系統(tǒng)：細(xì)菌可以將進(jìn)入菌體內(nèi)的藥物泵出體外。注：細(xì)菌的耐藥機(jī)制往往不是單個(gè)存在的！注：細(xì)菌的耐藥機(jī)制往往不是單個(gè)存在的！六、細(xì)菌的耐藥性693 當(dāng)前關(guān)注的耐藥問(wèn)題（1）革蘭陽(yáng)性菌革蘭陽(yáng)性菌 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）、耐萬(wàn)古霉素金黃色葡萄球菌（VRSA）。 耐萬(wàn)古霉素腸球菌（VRE）。 耐青霉素肺炎鏈球菌（PRSP）。（2）革蘭陰性菌革蘭陰性菌 產(chǎn)ESBLs腸桿菌科細(xì)菌：大腸埃希菌、克雷伯菌、奇異變形桿菌。 產(chǎn)AmpC酶腸桿菌科細(xì)菌：陰溝腸桿菌。 多重耐藥的銅綠假單胞菌、不動(dòng)桿

8、菌、嗜麥芽窄食單胞菌。 產(chǎn)碳青霉烯酶的腸桿菌科細(xì)菌。六、細(xì)菌的耐藥性704 MRSA的耐藥機(jī)制、耐藥性及治療原則（1）耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）的主要耐藥機(jī)制是產(chǎn)生青霉素結(jié)合蛋白PBP2a，這種蛋白和-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的親和力降低，導(dǎo)致細(xì)菌耐藥。（2）mecA 基因是PBP2a的編碼基因。（3）MRSA幾乎對(duì)所有的-內(nèi)酰胺類(lèi)抗菌藥物耐藥。（4）目前，首選萬(wàn)古霉素。六、細(xì)菌的耐藥性715 ESBLs的耐藥性和治療原則（1）ESBL（Extended-spectrum-lactamases ）超廣譜-內(nèi)酰胺酶 。（2）主要的產(chǎn)酶細(xì)菌：大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、奇異變形桿菌。六

9、、細(xì)菌的耐藥性72（3）青霉素類(lèi)、頭孢類(lèi)、氨曲南耐藥，碳青霉烯類(lèi)、 內(nèi)酰胺/酶抑制劑、頭霉素類(lèi)可能敏感。（4）用藥原則: 碳青霉烯類(lèi)抗生素是治療產(chǎn)ESBLs菌感染的首選藥物。但國(guó)內(nèi)外已有報(bào)道指出，已經(jīng)分離出耐碳青霉烯類(lèi)的腸桿菌科細(xì)菌，這可能由于碳青霉烯類(lèi)抗菌藥的廣泛應(yīng)用，造成其耐藥菌株逐漸產(chǎn)生。六、細(xì)菌的耐藥性736 耐藥性監(jiān)測(cè)的意義（1）指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物，防止濫用抗生素，延緩細(xì)菌耐藥性發(fā)生。（2）有助于預(yù)防、控制和遏制本地的、地區(qū)的以及全國(guó)的耐藥性發(fā)生發(fā)展。（3）幫助制定修訂經(jīng)驗(yàn)處理和標(biāo)準(zhǔn)化的用藥指南，為修訂國(guó)家藥典提供信息。（4）為研制新的抗菌藥物和改造老抗菌藥物提供信息。六、細(xì)菌

10、的耐藥性741 醫(yī)院感染的概念醫(yī)院感染或醫(yī)院獲得性感染是指病人在入院時(shí)既不存在、亦不處于潛伏期，而在住院期間獲得的感染，包括在醫(yī)院內(nèi)獲得而于出院后發(fā)生的感染。七、醫(yī)院感染與管理752 醫(yī)院感染的分類(lèi)和條件（1） 醫(yī)院感染按其感染來(lái)源分為內(nèi)源性感染和外源性感染兩種。（2）病原體是內(nèi)源性感染和外源性感染的共同的必備條件， 但外源性感染還必須具備： 感染源。 傳播途徑：直接接觸傳播、間接接觸傳播、空氣傳播、共同媒介傳播、生物媒介傳播。 易感宿主。七、醫(yī)院感染與管理763 醫(yī)院感染的常見(jiàn)致病菌（1）革蘭陽(yáng)性球菌：金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、腸球菌和鏈球菌。（2）革蘭陰性桿菌：大腸埃希菌、克雷伯菌、銅綠假單胞菌、不動(dòng)桿菌、腸桿菌等。（3）近來(lái)醫(yī)院感染的病原體特點(diǎn)：正常菌群致病增多，新的病原體不斷出現(xiàn)。七、醫(yī)院感染與管理774 醫(yī)院感染的預(yù)防與控制措施（1）對(duì)具