【創(chuàng)新方案】2013版高考生物二輪復(fù)習(xí) 第一部分 專(zhuān)題21 微生物分離培養(yǎng)及在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中的應(yīng)用 新人教版

1、Good is good, but better carries it.精益求精，善益求善?！緞?chuàng)新方案】2013版高考生物二輪復(fù)習(xí) 第一部分 專(zhuān)題21 微生物分離培養(yǎng)及在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中的應(yīng)用 新人教版【創(chuàng)新方案】2013版高考生物二輪復(fù)習(xí) 第一部分 專(zhuān)題21 微生物分離培養(yǎng)及在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中的應(yīng)用 新人教版 專(zhuān)題21微生物分離培養(yǎng)及在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中的應(yīng)用請(qǐng)根據(jù)當(dāng)?shù)亟虒W(xué)實(shí)際和高考要求選用1果酒制作用到的微生物是酵母菌，其代謝類(lèi)型為異養(yǎng)兼性厭氧型，重要反應(yīng)：C6H12O62C2H5OH2CO2，最適溫度為1825。2果醋制作用到的微生物是醋酸菌，其代謝類(lèi)型為異養(yǎng)需氧型，重要反應(yīng)：C2H5OHO2C

2、H3COOHH2O，最適溫度為3035。3果酒、果醋的制作流程：挑選葡萄沖洗榨汁酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵 果酒果醋4腐乳制作涉及的主要微生物是毛霉，其代謝類(lèi)型為異養(yǎng)需氧型，重要反應(yīng)：蛋白質(zhì)多肽、氨基酸。5泡菜制作用到的微生物是乳酸菌，其代謝類(lèi)型為異養(yǎng)厭氧型，重要反應(yīng)：C6H12O62C3H6O3，最適溫度一般為1820。6培養(yǎng)基按物理狀態(tài)分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基；按功能分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。7常見(jiàn)的兩種接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。8三種常用的滅菌方法有：灼燒滅菌，如接種環(huán)、接種針；干熱滅菌，如玻璃器皿和金屬用具等；高壓蒸汽滅菌，如培養(yǎng)基等。9土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)過(guò)程：土壤

3、取樣樣品的稀釋將稀釋液涂布到以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上篩選能生長(zhǎng)的微生物菌落。10分解纖維素的微生物的分離實(shí)驗(yàn)原理：紅色復(fù)合物1(2012·北京高考)高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，在接種時(shí)不進(jìn)行嚴(yán)格無(wú)菌操作對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響最大的一項(xiàng)是()A將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中B將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上C將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無(wú)菌培養(yǎng)基上D將土壤浸出液涂布在無(wú)菌的選擇培養(yǎng)基上命題立意本題主要考查幾種常見(jiàn)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的無(wú)菌操作要求。知識(shí)依托無(wú)菌操作對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響大小決定于雜菌對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。植物組織培養(yǎng)成功的關(guān)鍵在于無(wú)菌操作，否則將導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。解析選CA項(xiàng)，將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中進(jìn)行

4、釀酒時(shí)，在缺氧、酸性環(huán)境下其他雜菌不能生長(zhǎng)，故不嚴(yán)格滅菌對(duì)其影響不大；B項(xiàng)，腐乳制作中將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上，毛霉生長(zhǎng)繁殖快且抗雜菌能力強(qiáng)，故不嚴(yán)格滅菌對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響不大；C項(xiàng)，進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，植物材料體積小、抗性差，而微生物繁殖快、生長(zhǎng)迅速、會(huì)爭(zhēng)奪培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)，產(chǎn)生的代謝廢物還會(huì)毒害培養(yǎng)材料，故培養(yǎng)材料一旦被微生物(如細(xì)菌)污染，將嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；D項(xiàng)，選擇培養(yǎng)基中已經(jīng)加入了某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物生長(zhǎng)，另外土壤浸出液本身也含有一定量的微生物，因此將土壤浸出液涂布在無(wú)菌的選擇培養(yǎng)基上時(shí)不進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響不大。2(2012

5、·江蘇高考)下列關(guān)于制作果酒、果醋和腐乳的敘述，合理的是(多選)()A在果酒發(fā)酵后期擰開(kāi)瓶蓋的間隔時(shí)間可延長(zhǎng)B條件適宜時(shí)醋酸菌可將葡萄汁中的糖分解成醋酸C果酒發(fā)酵過(guò)程中發(fā)酵液密度會(huì)逐漸減小D將長(zhǎng)滿(mǎn)毛霉的豆腐裝瓶腌制時(shí)，底層和近瓶口處需加大用鹽量命題立意本題主要考查果酒、果醋和腐乳制作的知識(shí)。知識(shí)依托傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)操作中，要提供適合所用微生物生長(zhǎng)發(fā)育的適宜條件，同時(shí)嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，抑制其他雜菌生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中減少不安全因素的發(fā)生。解析選ABC果酒發(fā)酵后期，因營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗、pH改變等原因，酵母菌呼吸產(chǎn)生CO2的量變少，所以可延長(zhǎng)擰松瓶蓋的間隔時(shí)間，A項(xiàng)正確；當(dāng)氧氣、糖源充足時(shí)，醋酸

6、菌可將葡萄汁中的糖分解成醋酸，B項(xiàng)正確；果酒發(fā)酵過(guò)程中不斷消耗葡萄糖產(chǎn)生酒精，導(dǎo)致發(fā)酵液的密度逐漸減小，C項(xiàng)正確。制作腐乳時(shí)，對(duì)長(zhǎng)滿(mǎn)毛霉的豆腐加鹽腌制時(shí)，需逐層加鹽，并隨層數(shù)加高而增加用鹽量，在近瓶口表面要鋪得厚一些，D項(xiàng)錯(cuò)誤。3(2012·浙江自選模塊)幽門(mén)螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后，進(jìn)行分離培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)基本步驟如下：請(qǐng)回答：(1)在配制培養(yǎng)基時(shí)，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因?yàn)镠p含有_，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)_色環(huán)帶。(2)下列對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是_滅菌。A高壓蒸汽B紫外燈照射C70%

7、酒精浸泡 D過(guò)濾(3)步驟X表示_。在無(wú)菌條件下操作時(shí)，先將菌液稀釋?zhuān)缓髮⒕篲到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得_菌落。(4)在培養(yǎng)時(shí)，需將培養(yǎng)皿倒置并放在_中。若不倒置培養(yǎng)，將導(dǎo)致_。(5)臨床上用14C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將14C標(biāo)記的_分解為NH3和14CO2。命題立意本題考查微生物的分離與培養(yǎng)的知識(shí)。知識(shí)依托微生物分離是根據(jù)微生物的營(yíng)養(yǎng)需求及生長(zhǎng)條件，人為控制這些條件，適合目的微生物生長(zhǎng)、抑制其他微生物生長(zhǎng)的方法。微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中要嚴(yán)格無(wú)菌操作。運(yùn)用特定的染色或化學(xué)試劑與微生物代謝產(chǎn)物的特定反應(yīng)，檢驗(yàn)或檢測(cè)目的微生物。解析(1)幽門(mén)螺桿菌(Hp

8、)含有脲酶，能以尿素為氮源，在加入尿素和酚紅指示劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)Hp，由于尿素經(jīng)脲酶的降解可產(chǎn)生堿性的NH3，NH3能使培養(yǎng)基中的酚紅由紅黃色變成紅色，故菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶。(2)由于尿素加熱會(huì)分解，對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌最好用G6玻璃砂漏斗過(guò)濾。(3)微生物的分離和培養(yǎng)步驟是：配制培養(yǎng)基滅菌、倒平板接種培養(yǎng)。為獲得單菌落，接種操作前應(yīng)先將菌液稀釋?zhuān)缓髮⒕和坎嫉脚囵B(yǎng)基平面上即可。(4)微生物培養(yǎng)時(shí)需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫培養(yǎng)箱中，若不倒置培養(yǎng)，則無(wú)法形成單菌落。(5)幽門(mén)螺桿菌能將14C標(biāo)記的尿素分解為NH3和14CO2，故臨床上常用14C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)人體內(nèi)幽門(mén)螺桿菌的存在。答案(1)脲酶

9、紅(2)D(3)接種涂布單(4)恒溫培養(yǎng)箱無(wú)法形成單菌落(5)尿素1從考查內(nèi)容上看，主要考查微生物的純化培養(yǎng)操作與應(yīng)用、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)。2從考查角度上看，聯(lián)系生產(chǎn)生活實(shí)際考查微生物的計(jì)數(shù)、分離和純化培養(yǎng)；結(jié)合發(fā)酵食品制作過(guò)程考查傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)原理及基本操作。3從命題趨勢(shì)上看，預(yù)計(jì)2013年高考命題仍以對(duì)微生物培養(yǎng)與應(yīng)用考查為熱點(diǎn)，主要是和生產(chǎn)生活實(shí)際相聯(lián)系或與實(shí)驗(yàn)結(jié)合對(duì)實(shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)操作進(jìn)行綜合命題考查。微生物的營(yíng)養(yǎng) 例1(2012·青島調(diào)研)在農(nóng)田土壤的表層自生固氮菌較多，用表層土制成的稀泥漿接種到特制的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可將自生固氮菌與其他細(xì)菌分開(kāi)，對(duì)培養(yǎng)基的要求是()加抗生素不加抗生素

10、加氮素不加氮素加葡萄糖不加葡萄糖37恒溫箱中培養(yǎng)2830溫度下培養(yǎng)ABC D解析細(xì)菌對(duì)抗生素敏感，故培養(yǎng)基中應(yīng)不加抗生素；自生固氮菌有固氮功能，故培養(yǎng)基中不需要加氮素；自生固氮菌是異養(yǎng)的，應(yīng)該加葡萄糖，其生長(zhǎng)繁殖的適宜溫度是2830。答案C1微生物的營(yíng)養(yǎng)(1)微生物生長(zhǎng)所需五大營(yíng)養(yǎng)素即碳源、氮源、生長(zhǎng)因子、水和無(wú)機(jī)鹽。(2)微生物最常用的碳源是糖類(lèi)，尤其是葡萄糖；最常用的氮源是銨鹽、硝酸鹽。(3)對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，含C、H、O、N的有機(jī)物既是碳源、又是氮源。2培養(yǎng)基的類(lèi)型及作用劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類(lèi)特點(diǎn)用途液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)物理性質(zhì)半固體培養(yǎng)基加凝固劑，如瓊脂觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分類(lèi)、鑒定

11、固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、保藏菌種化學(xué)成分天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分明確(用化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)配成)分類(lèi)、鑒別用途選擇培養(yǎng)基允許特定種類(lèi)的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)、分離出特定微生物，如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類(lèi)的微生物，如用伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌(若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤)1下表為某培養(yǎng)基的配方，有關(guān)敘述正確的是()成分牛肉膏葡萄糖K2HPO4伊紅

12、美藍(lán)青霉素瓊脂蒸餾水含量10 g10 g2 g0.4 g0.065 g1萬(wàn)單位適量1 000 mLA能在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的大腸桿菌，擬核上有抗青霉素的基因B此培養(yǎng)液是天然鑒別培養(yǎng)基C此培養(yǎng)基可以用來(lái)檢測(cè)自來(lái)水中細(xì)菌含量是否符合飲用水標(biāo)準(zhǔn)D此培養(yǎng)基可以用于選育轉(zhuǎn)基因大腸桿菌菌種的基因工程的操作過(guò)程中解析：選D此表表示鑒定大腸桿菌的合成培養(yǎng)基；能在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的大腸桿菌，其抗性基因位于質(zhì)粒上。2判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用需要設(shè)置的對(duì)照是()A未接種的選擇培養(yǎng)基B未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基D接種了的選擇培養(yǎng)基解析：選C將菌液稀釋相同的倍數(shù)后接種，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基

13、上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，因此應(yīng)以牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對(duì)照。對(duì)照遵循的原則是單一變量原則，所以應(yīng)與選擇培養(yǎng)基一樣接種、培養(yǎng)。微生物培養(yǎng)的基本技術(shù) 例2請(qǐng)回答下列有關(guān)微生物的一些問(wèn)題。(1)微生物的分布：微生物主要分布在富含_的土壤表層；不同微生物對(duì)pH的要求不同，細(xì)菌常生活在酸堿度_的潮濕土壤中。(2)微生物的消毒和滅菌：在菊花組織培養(yǎng)中，對(duì)外植體常用酒精和_進(jìn)行消毒。在微生物培養(yǎng)中，對(duì)培養(yǎng)基常用_方法進(jìn)行滅菌。靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能_。如果要檢測(cè)滅菌是否徹底，可以采用的方法是：_。(3)微生物的應(yīng)用：在葡萄酒的自然發(fā)酵過(guò)程中，

14、運(yùn)用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生酒精，請(qǐng)寫(xiě)出該過(guò)程的化學(xué)反應(yīng)式：_。在果醋制作時(shí)，運(yùn)用醋酸菌在_和糖源充足時(shí)，將糖分解成醋酸。(4)微生物的接種：微生物接種的方法很多，最常用的是_和_。(5)微生物的計(jì)數(shù)：根據(jù)培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數(shù)目和稀釋倍數(shù)計(jì)算得出細(xì)菌數(shù)目往往比實(shí)際的數(shù)目低，原因是_。(6)微生物的鑒定：為檢測(cè)尿素分解菌的存在與否，在以尿素為唯一氮源的_(填“選擇”或“鑒別”)培養(yǎng)基中加入_指示劑，如果存在尿素分解菌，則指示劑將變_色。解析(1)微生物主要分布在有機(jī)質(zhì)豐富的土壤表層，細(xì)菌常生活在酸堿度接近中性的潮濕土壤中。(2)植物組織培養(yǎng)時(shí)，對(duì)外植體常用酒精和氯化汞消毒，對(duì)培養(yǎng)基常用

15、高壓蒸汽滅菌法滅菌；紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)；可通過(guò)在適宜的溫度下放置滅菌過(guò)的培養(yǎng)基看其是否有菌落產(chǎn)生來(lái)確定培養(yǎng)基滅菌是否徹底。(3)醋酸菌為需氧型生物。(4)最常用的微生物接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(5)因一個(gè)菌落可由多個(gè)連在一起的細(xì)菌形成，所以計(jì)算得出的細(xì)菌數(shù)一般低于實(shí)際數(shù)目。(6)用選擇培養(yǎng)基篩選目的菌，加入酚紅指示劑檢測(cè)尿素分解菌，若存在尿素分解菌，指示劑變紅色。答案(1)有機(jī)質(zhì)接近中性(2)氯化汞高壓蒸汽滅菌損傷DNA的結(jié)構(gòu)將滅菌過(guò)的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(3)C6H12O62C2H5OH2CO2能量有氧(4)平板劃

16、線法稀釋涂布平板法(5)當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落(6)選擇酚紅紅1微生物培養(yǎng)技術(shù)中的消毒和滅菌消毒滅菌區(qū)別使用手段較為溫和的物理或化學(xué)方法強(qiáng)烈的理化因素結(jié)果殺死表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)殺死包括芽孢和孢子在內(nèi)的所有微生物常用方法煮沸消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、巴氏消毒法、紫外線消毒法等灼燒滅菌法、干熱滅菌法、高壓蒸汽滅菌法等聯(lián)系都借助理化性質(zhì)，營(yíng)造微生物難以生存的不良環(huán)境；作用實(shí)質(zhì)都是通過(guò)使蛋白質(zhì)變性來(lái)抑制微生物生命活動(dòng)或殺死微生物2微生物純化培養(yǎng)的接種方法(1)平板劃線操作：平板劃線法通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋

17、分散到培養(yǎng)基的表面。平板劃線操作的注意事項(xiàng)：a每次劃線之前都需要灼燒接種環(huán)滅菌。b灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。c劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。d劃線用力大小要適當(dāng)，防止用力過(guò)大將培養(yǎng)基劃破。(3)稀釋涂布平板法：先將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋后涂布平板，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散到培養(yǎng)基的表面，從而在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。如下圖：3某學(xué)者欲研究被石油污染過(guò)的土壤中細(xì)菌數(shù)量，并從中篩選出能分解石油的細(xì)菌。下列操作錯(cuò)誤的是()A利用平板劃線法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)B以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選C采用稀釋涂布平板法分離菌種D稱(chēng)取和稀釋土壤時(shí)應(yīng)在火焰

18、旁解析：選A平板劃線法能對(duì)細(xì)菌分離純化，但不能對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，而稀釋涂布平板法可以分離菌種并進(jìn)行計(jì)數(shù)。4下圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方法，請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題：(1)圖甲是利用_法進(jìn)行微生物接種，圖乙是利用_法進(jìn)行微生物接種。這兩種方法所用的接種工具分別是_和_；對(duì)這兩種接種工具進(jìn)行滅菌和消毒的方法依次是_和酒精消毒。(2)接種操作為什么一定要在火焰附近進(jìn)行？_。(3)下圖是采用上述接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解，其接種方法是_(填“圖甲”或“圖乙”)。解析：圖甲和圖乙分別是平板劃線法和稀釋涂布平板法，這兩種方法所用的接種工具分別是接種環(huán)和涂布器。由于在酒精燈火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域，因此接種常在火

19、焰附近進(jìn)行。在微生物培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生水，對(duì)微生物的生長(zhǎng)造成影響，故需要倒置培養(yǎng)。答案：(1)平板劃線稀釋涂布平板接種環(huán)涂布器灼燒滅菌(2)火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域(3)圖乙傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù) 例3(2012·海南高考)回答下列關(guān)于腐乳制作的問(wèn)題：(1)腐乳是豆腐經(jīng)微生物發(fā)酵后制成的食品。多種微生物參與了該發(fā)酵過(guò)程，其中起主要作用的微生物是_，其產(chǎn)生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質(zhì)水解為_(kāi)和_；其產(chǎn)生的_能將豆腐中的脂肪水解為_(kāi)和_。(2)發(fā)酵完成后需加鹽腌制，加鹽還可以抑制_生長(zhǎng)。(3)腐乳制作的后期可加入由酒和多種香辛料配置而成的鹵湯。鹵湯除具有一定的防腐作用外，還能使腐乳具有獨(dú)特的_。解析(1

20、)腐乳制作發(fā)酵過(guò)程中起作用的微生物有多種，如青霉、酵母菌、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。毛霉產(chǎn)生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質(zhì)水解成多肽和氨基酸，產(chǎn)生的脂肪酶能夠?qū)⒍垢械闹舅鉃楦视秃椭舅帷?2)發(fā)酵過(guò)程中加鹽腌制，不僅可以調(diào)制風(fēng)味，而且能夠抑制雜菌等其他微生物的生長(zhǎng)。(3)腐乳制作后期加入鹵湯，鹵湯不僅可以防腐，還可以使腐乳具有獨(dú)特的風(fēng)味(或香味)。答案(1)毛霉(多)肽氨基酸脂肪酶甘油脂肪酸(2)微生物(3)風(fēng)味微生物在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中的應(yīng)用項(xiàng)目?jī)?nèi)容果酒和果醋的制作腐乳制作并檢測(cè)亞制作泡菜硝酸鹽含量菌種及來(lái)源酵母菌：葡萄皮上野生型酵母菌醋酸菌：空氣或人工接種毛霉、青霉、曲霉、酵母菌

21、等真菌，空氣中的生殖孢子乳酸菌、空氣中的孢子原理無(wú)氧：釀酒C6H12O62C2H5OH2CO2有氧：釀醋C2H5OHO2CH3COOHH2O蛋白質(zhì)小分子肽氨基酸脂肪甘油脂肪酸C6H12O62C3H6O3(無(wú)氧)亞硝酸鹽對(duì)氨基苯磺酸重氮化合物N­1­萘基乙二胺鹽酸鹽玫瑰紅色染料原料選擇新鮮、無(wú)爛籽粒葡萄(或蘋(píng)果)豆腐大白菜、花椰菜等新鮮干凈的蔬菜實(shí)驗(yàn)流程挑選葡萄沖洗榨汁酒精發(fā)酵果酒醋酸發(fā)酵果醋豆腐上長(zhǎng)出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制制泡菜：選材配制鹽水裝壇發(fā)酵成品測(cè)亞硝酸鹽含量：配制溶液制備標(biāo)準(zhǔn)顯色液制備樣品處理液比色操作注意事項(xiàng)材料選擇與處理防止發(fā)酵液污染，控制好發(fā)酵條件材

22、料用量防止雜菌污染控制溫度及酒精含量泡菜壇的選擇腌制條件(無(wú)氧)測(cè)定亞硝酸鹽含量的操作共同點(diǎn)都是天然的發(fā)酵，利用了微生物新陳代謝過(guò)程中代謝產(chǎn)物的作用或直接獲取代謝產(chǎn)物5小李嘗試制作果酒，他將葡萄汁放入已滅菌的發(fā)酵裝置中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)(如右圖)，恰當(dāng)?shù)淖龇ㄊ?)A加入適量的醋酸菌B一直打開(kāi)閥b通氣C一直關(guān)緊閥a，偶爾打開(kāi)閥b幾秒鐘D把發(fā)酵裝置放到4冰箱中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)解析：選C在該發(fā)酵裝置中有發(fā)酵底物(葡萄糖)，但沒(méi)有發(fā)酵生物(酵母菌)，故應(yīng)在裝置中放入適量的酵母菌。將閥a一直關(guān)緊是為了防止氧氣進(jìn)入發(fā)酵裝置；偶爾打開(kāi)閥b幾秒鐘，是為了排出發(fā)酵產(chǎn)生的過(guò)多二氧化碳。如果一直打開(kāi)閥b通氣，則可使氧氣進(jìn)入發(fā)酵裝置而

23、影響發(fā)酵。酵母菌發(fā)酵需要的最適溫度在1825，4時(shí)溫度太低，將影響發(fā)酵的速率。6下列與果酒、果醋和腐乳制作相關(guān)的敘述，正確的是()A腐乳制作所需要的適宜溫度最高B果醋發(fā)酵包括無(wú)氧發(fā)酵和有氧發(fā)酵C使用的菌種分別是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌D使用的菌種都具有細(xì)胞壁、核糖體、DNA 和 RNA解析：選D果醋制作所需要的適宜溫度最高，為3035；果醋制作所用的菌種(醋酸菌)為好氧細(xì)菌，只進(jìn)行有氧呼吸；腐乳制作所用的菌種主要是毛霉；酵母菌、醋酸菌、毛霉等菌種都具有細(xì)胞壁，都既有DNA又有RNA，細(xì)胞中都有核糖體。一、微生物的營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要素來(lái)源功能碳源無(wú)機(jī)碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳無(wú)機(jī)物構(gòu)成細(xì)胞

24、和合成一些代謝產(chǎn)物有些既是碳源又是異養(yǎng)微生物的能源有機(jī)碳源糖、脂肪、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、石油、花生粉餅等氮源無(wú)機(jī)氮源NH3、銨鹽、硝酸鹽、N2等合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝產(chǎn)物有機(jī)氮源牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸等生長(zhǎng)因子(特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì))維生素、氨基酸、堿基酶和核酸的組成成分參與代謝過(guò)程中的酶促反應(yīng)水和無(wú)機(jī)鹽外界攝入水不僅是優(yōu)良溶劑而且可維持生物大分子的穩(wěn)定；無(wú)機(jī)鹽是細(xì)胞內(nèi)的成分和調(diào)節(jié)物質(zhì)等二、微生物的分離與計(jì)數(shù)1土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離(1)篩選菌株：利用選擇培養(yǎng)基篩選。(2)過(guò)程：土壤取樣樣品的稀釋微生物的培養(yǎng)與觀察。2分解纖維素的微生物的分離(1)原理：紅色復(fù)合物即：可根據(jù)是否產(chǎn)生透

25、明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。(2)流程：土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋涂布平板挑選菌落。3鑒定方法鑒定分解尿素的細(xì)菌含酚紅指示劑的尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基細(xì)菌指示劑變紅，則該菌能分解尿素鑒定纖維素分解菌4計(jì)數(shù)方法(1)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血球計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定容積樣品中的細(xì)菌數(shù)量。該方法不能區(qū)分細(xì)菌的死活。(2)間接計(jì)數(shù)法(活菌計(jì)數(shù)法)：常用稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法的理論依據(jù)是：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落即代表一個(gè)活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，每個(gè)稀釋倍數(shù)涂布3個(gè)平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，取平均值。一、選擇題1(2012

26、3;海淀期中)下列關(guān)于微生物培養(yǎng)的敘述，不正確的是()A獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌入侵B高溫滅菌的目的是殺死微生物的細(xì)胞、孢子、芽孢C劃線分離可在培養(yǎng)基上獲得均勻分布的單菌落D稀釋涂布平板法易獲得單菌落和計(jì)數(shù)活菌數(shù)目解析：選C獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌入侵；高溫滅菌的目的是殺死微生物的細(xì)胞、孢子、芽孢；稀釋涂布平板法易獲得單菌落和計(jì)數(shù)活菌數(shù)目；劃線分離可在培養(yǎng)基上獲得單菌落但不是均勻分布的。2從土壤中分離以尿素為氮源的細(xì)菌，下列實(shí)驗(yàn)操作不正確的是()A將土壤用無(wú)菌水稀釋?zhuān)苽?03105土壤稀釋液B將不同濃度的土壤稀釋液涂布于不同平板上C用加入剛果紅指示劑的選擇培養(yǎng)基篩選分解尿

27、素的細(xì)菌D從周?chē)霈F(xiàn)紅色環(huán)帶的菌落中挑取能夠分泌脲酶的菌株解析：選C從土壤中分離以尿素為氮源的細(xì)菌時(shí)，將土壤用無(wú)菌水稀釋?zhuān)苽渫寥老♂屢?，將不同濃度的土壤稀釋液涂布于不同平板上，用加入酚紅指示劑的鑒別培養(yǎng)基可以鑒別分解尿素的細(xì)菌；從周?chē)霈F(xiàn)紅色環(huán)帶的菌落中挑取能夠分泌脲酶的菌株。3(2012·北京西城模擬)組氨酸缺陷型沙門(mén)氏菌是由野生菌種突變形成的，自身不能合成組氨酸。將其接種在缺乏組氨酸的平板培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，有極少量菌落形成。2­氨基芴是一種致突變劑，將沾有2­氨基芴的濾紙片放到上述平板培養(yǎng)基中，再接種組氨酸缺陷型沙門(mén)氏菌進(jìn)行培養(yǎng)，會(huì)有較多菌落出現(xiàn)。以下敘述不

28、正確的是()A在接種前，2­氨基芴和濾紙片須進(jìn)行滅菌處理B若用劃線法接種可以根據(jù)菌落數(shù)計(jì)算活菌數(shù)量C基因突變的可逆性與是否存在致突變劑無(wú)關(guān)D此方法可以用于檢測(cè)環(huán)境中的化學(xué)致突變劑解析：選B在微生物培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)基、實(shí)驗(yàn)材料、實(shí)驗(yàn)用具都要進(jìn)行滅菌處理；計(jì)算活菌的數(shù)目常用稀釋涂布法，而不是用劃線法；2­氨基芴可使沙門(mén)氏菌中野生型增多，缺陷性型減少，如果再由野生型突變?yōu)槿毕菪停瑒t與該突變劑無(wú)關(guān)；根據(jù)菌落的變化情況，可推測(cè)環(huán)境中的化學(xué)致突變劑。4用葡萄制作果酒和果醋是一個(gè)連續(xù)的過(guò)程，下列有關(guān)的敘述中，錯(cuò)誤的是()A制作果酒和果醋的連續(xù)過(guò)程中要保持溫度恒定B制作葡萄酒的過(guò)程中，要定

29、時(shí)擰松瓶蓋放出CO2C葡萄酒的自然發(fā)酵中，起主要作用的是野生型酵母菌D變酸的酒表面常有一層由醋酸菌大量繁殖而形成的菌膜解析：選A果酒制作時(shí)，酒精發(fā)酵一般將溫度控制在1825，在無(wú)氧條件下；而果醋制作則需要將溫度控制在3035，適時(shí)充氣。5下圖中甲是果醋發(fā)酵裝置。發(fā)酵初期不通氣，溶液中有氣泡產(chǎn)生；中期可以聞到酒香；后期接種醋酸菌，適當(dāng)升高溫度并通氣，酒香逐漸變成醋香。圖乙中能表示整個(gè)發(fā)酵過(guò)程培養(yǎng)液pH變化的曲線是()ABC D解析：選B果醋制作的基本過(guò)程是挑選葡萄沖洗榨汁酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵獲得果醋。在酒精發(fā)酵過(guò)程中，產(chǎn)生的CO2溶于水后形成碳酸(酸性較弱)，pH會(huì)下降，但不會(huì)急劇下降；當(dāng)接入醋酸菌

30、后，在有氧的情況下，醋酸菌能將乙醇變成乙醛，再將乙醛變成醋酸，酸性物質(zhì)持續(xù)增加，pH持續(xù)下降，4條曲線中曲線是比較符合pH變化的。6細(xì)菌培養(yǎng)過(guò)程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理，這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌()A接種環(huán)、手、培養(yǎng)基 B高壓鍋、手、接種環(huán)C培養(yǎng)基、手、接種環(huán) D接種環(huán)、手、高壓鍋解析：選C高壓蒸汽滅菌鍋是滅菌設(shè)備，通常用于培養(yǎng)基的滅菌。用酒精擦拭雙手是消毒的一種方法?；鹧孀茻?，可以迅速?gòu)氐椎販缇?，適用于微生物的接種工具，如接種環(huán)。7通過(guò)實(shí)驗(yàn)測(cè)定土壤中的細(xì)菌數(shù)量，下列與此操作有關(guān)的敘述中，不正確的是()A用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒

31、平板B取104、105倍的土壤稀釋液0.1 mL，分別涂布于各組平板上C將培養(yǎng)皿倒置，37恒溫培養(yǎng)2448小時(shí)D選擇菌落數(shù)在300個(gè)以上的培養(yǎng)皿進(jìn)行計(jì)數(shù)解析：選D檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)，用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板，取104、105、106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各0.1 mL，分別涂布于各組平板上，將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，37恒溫培養(yǎng)2448小時(shí)，在確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。8下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和利用的敘述不正確的是()A利用稀釋涂布平板法只能分離微生物不能對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)B接種時(shí)連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單菌落C以尿素為唯

32、一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌D用大白菜腌制泡菜的過(guò)程中亞硝酸鹽含量變化是先增加后減少解析：選A接種劃線可以將菌體分散，最后得到單個(gè)菌體細(xì)胞，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)可以得到單個(gè)菌落；用稀釋涂布平板法可以分離微生物也可以對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)；在泡菜的腌制過(guò)程中，開(kāi)始亞硝酸鹽含量增加，10天后含量開(kāi)始下降；以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌。9下列關(guān)于微生物的培養(yǎng)和分離的敘述中，不正確的是()A細(xì)菌能在液體培養(yǎng)基中以二分裂方式迅速擴(kuò)增B噬菌體或大腸桿菌可在蛋白胨培養(yǎng)基中增殖C滅菌的目的是消滅與培養(yǎng)菌競(jìng)爭(zhēng)的雜菌D稀釋涂布法分散細(xì)菌得到單菌落的效果更好解析：選B細(xì)菌繁殖方式是二分裂，噬

33、菌體是沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的病毒，需要在活細(xì)胞中才能生活，在蛋白胨培養(yǎng)基中不能增殖；想要得到單個(gè)菌落可以用劃線法，如果稀釋后再劃線效果更好；滅菌目的是防止雜菌和培養(yǎng)菌發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)。10果酒、果醋和腐乳等發(fā)酵食品已經(jīng)深入到人們的日常生活當(dāng)中，關(guān)于其制備過(guò)程的描述正確的是()A制備上述發(fā)酵食品的主要微生物的生命活動(dòng)所需能量都主要由其線粒體提供B腐乳制備過(guò)程中毛霉產(chǎn)生的蛋白酶、脂肪酶屬于胞外酶C三種發(fā)酵過(guò)程中都可以通過(guò)控制發(fā)酵溫度實(shí)現(xiàn)對(duì)微生物類(lèi)型的控制D果酒、果醋發(fā)酵在無(wú)氧環(huán)境下進(jìn)行，腐乳發(fā)酵在有氧條件下進(jìn)行解析：選B制備果酒、果醋和腐乳的主要微生物分別是酵母菌、醋酸菌和毛霉，其中醋酸菌是原核微生物，沒(méi)有線粒體

34、；腐乳制備過(guò)程中毛霉產(chǎn)生的蛋白酶、脂肪酶分泌到細(xì)胞外，分解豆腐中的蛋白質(zhì)和脂肪，屬于胞外酶；果醋發(fā)酵在有氧環(huán)境下進(jìn)行。二、非選擇題11(2012·上海高考)回答下列關(guān)于微生物和酶的問(wèn)題。高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過(guò)程如下圖所示。(1)過(guò)程稱(chēng)為_(kāi)，過(guò)程是為了_。(2)號(hào)培養(yǎng)基稱(chēng)為_(kāi)(按功能分)；該培養(yǎng)基中除了加入淀粉外，還需加入另一種重要的營(yíng)養(yǎng)成分_。A瓊脂 B葡萄糖C硝酸銨 D碳酸氫鈉(3)一般對(duì)配制的培養(yǎng)基采用高壓滅菌，其中“高壓”是為了_。在高溫淀粉酶運(yùn)用到工業(yè)生產(chǎn)前，需對(duì)該酶的最佳溫度范圍進(jìn)行測(cè)定。圖中的曲

35、線表示酶在各種溫度下酶活性相對(duì)最高酶活性的百分比。將酶在不同溫度下保溫足夠長(zhǎng)的時(shí)間，再在酶活性最高的溫度下測(cè)其殘余酶活性，由此得到的數(shù)據(jù)為酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，即圖中的曲線。(4)根據(jù)圖中的數(shù)據(jù)，判斷該酶使用的最佳溫度范圍是_。A4050 B5060C6070 D7080(5)據(jù)圖判斷下列敘述錯(cuò)誤的是_。A該酶只能在最佳溫度范圍內(nèi)測(cè)出活性B曲線35數(shù)據(jù)點(diǎn)是在80時(shí)測(cè)得的C曲線表明80是該酶活性最高的溫度D曲線表明該酶的熱穩(wěn)定性在70之后急劇下降解析：欲培養(yǎng)和分離嗜熱菌單個(gè)菌落可采用稀釋涂布平板法；為稀釋過(guò)程，為篩選過(guò)程；號(hào)培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，加入硝酸銨的目的主要是補(bǔ)充氮元素；高溫滅菌的目的是殺死包

36、括細(xì)菌芽孢等在內(nèi)的全部生物；據(jù)圖可知，工業(yè)生產(chǎn)中該酶的最佳溫度范圍為6070。答案：(1)稀釋單個(gè)菌落的篩選(或篩選)(2)選擇培養(yǎng)基C(3)殺死培養(yǎng)基中的細(xì)菌芽孢(4)C(5)A12(2012·南昌一模)尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，需經(jīng)細(xì)菌的分解才能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類(lèi)和數(shù)量繁多，下列是從土壤中分離分解尿素細(xì)菌的有關(guān)問(wèn)題，請(qǐng)分析回答：(1)上圖是利用_法進(jìn)行微生物接種，把聚集的菌種逐步_到培養(yǎng)基的表面。除此方法外，常用的微生物接種方法還有_(寫(xiě)一種)。(2)如果要對(duì)培養(yǎng)的菌落進(jìn)行純化，在培養(yǎng)基上劃線操作中，操作的第一步及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，目的是對(duì)接種環(huán)

37、進(jìn)行_，灼燒的接種環(huán)冷卻后才能接種的原因是_。(3)下面是兩種培養(yǎng)基的配方：表1：A培養(yǎng)基配方KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂H2O1.4 g2.1 g0.2 g10.0 g1.0 g15.0 g1 000 mL表2：B培養(yǎng)基配方纖維素粉NaNO3Na2HPO4·7H2OKH2PO4MgSO4·7H2OKCl酵母浸膏H2O5 g1 g1.2 g0.9 g0.5 g0.5 g0.5 g1 000 mL配制培養(yǎng)基的操作步驟_(用字母順序回答)。a倒平板b計(jì)算c溶化d稱(chēng)量e滅菌通常培養(yǎng)基采用_法滅菌，在制備固體培養(yǎng)基的倒平板操作時(shí)，平板冷凝后，應(yīng)將平板倒置，目的是_。如果要分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)選擇上述_(A、B)配方的培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基中加入_指示劑，可初步鑒定出該種細(xì)菌能否分解尿素。據(jù)B培養(yǎng)基的成分，所培養(yǎng)微生物的同化作用類(lèi)型是_。(4)如果進(jìn)一步從尿素分解菌中提取出DNA，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，則每次循環(huán)復(fù)制可分為_(kāi)三步。而尿素分解菌能分解尿素的直接原因是它們能合成_，該物質(zhì)被提取出后的純化方法通常是_。解析：(1)圖示利用平板劃線法進(jìn)行微生物接種，把聚集的菌種逐步稀釋到培養(yǎng)基的表面。除此方法