3_藥物的雜質(zhì)檢查--

1、1第三章第三章 藥物的雜質(zhì)檢查藥物的雜質(zhì)檢查2 一、掌握一般雜質(zhì)檢查的原理、方法和計一、掌握一般雜質(zhì)檢查的原理、方法和計算。算。 二、熟悉特殊雜質(zhì)檢查的方法和原理。二、熟悉特殊雜質(zhì)檢查的方法和原理。 三、了解熱分析在藥物分析中的應(yīng)用。三、了解熱分析在藥物分析中的應(yīng)用。 藥典中檢查項下包括：藥典中檢查項下包括： 有效性：有效性： 藥物生物利用度藥物生物利用度 均一性均一性 ：含量均勻度、溶出度、重量差異：含量均勻度、溶出度、重量差異 純度檢查：純度檢查： 藥物中雜質(zhì)的控制藥物中雜質(zhì)的控制 安全性：安全性： 異常毒性、熱源、無菌異常毒性、熱源、無菌第一節(jié)第一節(jié) 概概 述述2.2.雜質(zhì)雜質(zhì)(Impu

2、rities) 指藥物中存在的無治療作用或影響藥物的穩(wěn)定性和療效，指藥物中存在的無治療作用或影響藥物的穩(wěn)定性和療效，甚至對機體健康有害的物質(zhì)。甚至對機體健康有害的物質(zhì)。3 3、藥物純度與試劑純度、藥物純度與試劑純度 藥物的純度和化學(xué)試劑的純度在要求上不同：藥物的純度和化學(xué)試劑的純度在要求上不同：藥物只有合格品與不合格品；藥物只有合格品與不合格品；一般化學(xué)試劑分為一般化學(xué)試劑分為4 4個等級（基準試劑、優(yōu)級純、分析純、個等級（基準試劑、優(yōu)級純、分析純、 化學(xué)純）化學(xué)純）一、藥物純度的概念與要求一、藥物純度的概念與要求1.純度（純度（Purities）藥物的純凈程度藥物的純凈程度合成過程中，原料不

3、純或反應(yīng)不完全，中間體、合成過程中，原料不純或反應(yīng)不完全，中間體、副產(chǎn)物在精制中未除盡副產(chǎn)物在精制中未除盡制劑過程制劑過程試劑、溶劑、還原劑殘留試劑、溶劑、還原劑殘留異構(gòu)體、多晶體異構(gòu)體、多晶體使用的金屬器皿、裝置、工具引入的金屬雜質(zhì)使用的金屬器皿、裝置、工具引入的金屬雜質(zhì)生產(chǎn)生產(chǎn)過程過程貯藏貯藏過程過程1雜質(zhì)的來源雜質(zhì)的來源在溫度、濕度、日光、空氣等外界條件影響下，或在溫度、濕度、日光、空氣等外界條件影響下，或因微生物的作用，引起藥物發(fā)生水解、氧化、分解、因微生物的作用，引起藥物發(fā)生水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)變、聚合、潮解和發(fā)霉等變化。異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)變、聚合、潮解和發(fā)霉等變化。l如：具

4、有酯鍵、酰胺、環(huán)酰胺、鹵代烴等藥物易水解；具有如：具有酯鍵、酰胺、環(huán)酰胺、鹵代烴等藥物易水解；具有Ar-OH , -SH , -NO2 , -CHO , C=C-C=C等結(jié)構(gòu)的藥物在空氣中易氧化。等結(jié)構(gòu)的藥物在空氣中易氧化。工業(yè)用工業(yè)用NaCl (Br-、I-、SO42-、K+、Ca2+、Mg2+、Fe3+)BaCl2 , , 過濾（除過濾（除SO42-）濾濾 液液Na2CO3 , ,過濾（除過濾（除Ba2+ 、 Ca2+、Mg2+）濾濾 液液稀稀HCl中和中和蒸發(fā)、重結(jié)晶蒸發(fā)、重結(jié)晶藥用藥用NaCl需檢查項目：需檢查項目： Ba2+ 、SO42- 、Ca2+、Mg2+、酸堿度、澄清度、酸堿度

5、、澄清度、 K+、 I- 、 Br-、鐵鹽、砷鹽、重金屬、鐵鹽、砷鹽、重金屬)鹽酸金霉素鹽酸金霉素-晶型晶型H2O-晶型晶型麻醉乙醚麻醉乙醚日光、空氣日光、空氣醛、過氧化物醛、過氧化物OH-,H2O青霉噻唑酸青霉噻唑酸分解分解青霉醛、青霉胺青霉醛、青霉胺青霉素青霉素按毒性分類按毒性分類毒性雜質(zhì)和信號雜質(zhì)毒性雜質(zhì)和信號雜質(zhì)按來源分類按來源分類按理化性質(zhì)分類按理化性質(zhì)分類工藝雜質(zhì)、降解雜質(zhì)、反應(yīng)工藝雜質(zhì)、降解雜質(zhì)、反應(yīng)物和試劑中混物和試劑中混入的雜質(zhì)入的雜質(zhì)有機雜質(zhì)、無機雜質(zhì)、殘留有機雜質(zhì)、無機雜質(zhì)、殘留溶劑溶劑一般雜質(zhì)一般雜質(zhì)特殊雜質(zhì)特殊雜質(zhì)v一般雜質(zhì)一般雜質(zhì)：在自然界中分布較廣泛，在多種藥物：

6、在自然界中分布較廣泛，在多種藥物的生產(chǎn)和貯存過程中易引入的雜質(zhì)，如酸、堿、的生產(chǎn)和貯存過程中易引入的雜質(zhì)，如酸、堿、水分、水分、Cl-、SO42-、鐵鹽、重金屬、砷鹽、殘渣等。、鐵鹽、重金屬、砷鹽、殘渣等。v 特殊雜質(zhì)特殊雜質(zhì)：根據(jù)藥物的性質(zhì)和一定的生產(chǎn)方法與：根據(jù)藥物的性質(zhì)和一定的生產(chǎn)方法與工藝條件可能引入的雜質(zhì)，是某種藥物所特有的。工藝條件可能引入的雜質(zhì)，是某種藥物所特有的。l定義定義 ：指藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量：指藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量雜質(zhì)限量雜質(zhì)限量=雜質(zhì)最大允許量雜質(zhì)最大允許量供試品量供試品量100%單位通常以單位通常以%或百萬分之幾（或百萬分之幾（ppm , 106)表示。

7、表示。1 1、雜質(zhì)限量、雜質(zhì)限量 雜質(zhì)限量對于不同雜質(zhì)各不相同。如雜質(zhì)限量對于不同雜質(zhì)各不相同。如As對對人體毒性大，其限量規(guī)定較嚴，一般最大限量人體毒性大，其限量規(guī)定較嚴，一般最大限量不超過百萬分之十（不超過百萬分之十（10 ppm）；如）；如Pb重金屬，重金屬，允許存在的最大限量一般不超過百萬分之五十允許存在的最大限量一般不超過百萬分之五十（50 ppm）。）。2 2 限量計算限量計算雜雜質(zhì)質(zhì)限限量量控控制制限量檢查限量檢查對照法對照法靈敏度法靈敏度法比較法比較法定量測定雜質(zhì)含量定量測定雜質(zhì)含量 以待檢雜質(zhì)標準液一定量為對照，以待檢雜質(zhì)標準液一定量為對照，將供試品、對照分別置一支納氏比色管

8、將供試品、對照分別置一支納氏比色管或錐形瓶中，在相同條件處理后，比較或錐形瓶中，在相同條件處理后，比較反應(yīng)結(jié)果。反應(yīng)結(jié)果。 在供試液中直接加入試劑，在一定在供試液中直接加入試劑，在一定反應(yīng)條件下觀察有無反應(yīng)出現(xiàn)。反應(yīng)條件下觀察有無反應(yīng)出現(xiàn)。 取一定量供試品測定特定待檢雜取一定量供試品測定特定待檢雜質(zhì)的參數(shù)與規(guī)定的限量比較。質(zhì)的參數(shù)與規(guī)定的限量比較。l計算：計算： 雜質(zhì)限量雜質(zhì)限量=雜質(zhì)最大允許量雜質(zhì)最大允許量供試品量供試品量 100%=標準溶液濃度標準溶液濃度標準溶液體積標準溶液體積供試品供試品量量100%即：即：L =C VS100%L-雜質(zhì)限量雜質(zhì)限量S-供試品量供試品量C、V-標準液濃度

9、、體積標準液濃度、體積計算時應(yīng)注意：單位換算、供試液或標準液的稀釋倍數(shù)。計算時應(yīng)注意：單位換算、供試液或標準液的稀釋倍數(shù)。示例一 茶苯拉明中氯化物檢查 取本品取本品0.30g 置置200 ml量瓶量瓶中，加水中，加水50ml、氨試液、氨試液3ml和和10%硝酸銨溶液硝酸銨溶液6ml，置，置水浴水浴上加熱上加熱5min，加硝酸銀試液，加硝酸銀試液25ml，搖勻，再置水浴上加熱搖勻，再置水浴上加熱15min，并時時振搖，放冷，加水稀釋至，并時時振搖，放冷，加水稀釋至刻度，搖勻，放置刻度，搖勻，放置15min，濾過，取續(xù)濾液，濾過，取續(xù)濾液25ml置納氏比色管中，置納氏比色管中，加加稀硝酸稀硝酸10

10、ml，加水稀釋至，加水稀釋至50ml，搖勻，在暗處放置，搖勻，在暗處放置5min，與標，與標準氯化鈉溶液準氯化鈉溶液( (10gCl-/ml)1.5 ml制成的對照液比較，求氯化物制成的對照液比較，求氯化物的限量。的限量。示例三 腎上腺素上酮體的檢查 取本品取本品0.2g, ,置置100ml量瓶中，加鹽酸溶液量瓶中，加鹽酸溶液(9-2000)溶解并溶解并稀釋至刻度，搖勻，在稀釋至刻度，搖勻，在310nm處測定吸光度不得超過處測定吸光度不得超過0.05，酮，酮體的百分吸收系數(shù)為體的百分吸收系數(shù)為435，求酮體的限量，求酮體的限量V=100 mlC=A/E=0.05/435=1.1510-4 g/

11、100ml S=0.2 gl（1）國家生產(chǎn)實際情況：工藝條件、設(shè)備等。）國家生產(chǎn)實際情況：工藝條件、設(shè)備等。l（2）雜質(zhì)對人體危害程度：）雜質(zhì)對人體危害程度：As、Pb、CN-等。等。l（3）用藥途徑、周期、劑量：）用藥途徑、周期、劑量： 外用藥外用藥 周期長周期長 限量要求不是很嚴格限量要求不是很嚴格 內(nèi)服藥內(nèi)服藥 劑量大劑量大 限量要求較嚴格限量要求較嚴格 注射用藥注射用藥 限量要求嚴格限量要求嚴格l（4）參考先進國家的藥典）參考先進國家的藥典3 3 雜質(zhì)限量制訂依據(jù)雜質(zhì)限量制訂依據(jù)（一）氯化物（一）氯化物l1、原理、原理： Cl + Ag+l2、檢查法：、檢查法：HNO3 AgCl（渾濁

12、）（渾濁）供供試試品品稀稀HNO310mlH2OAgNO31ml標標準準溶溶液液稀稀HNO310mlH2OAgNO31ml 暗處放置5min(避免AgCl分解)3、反應(yīng)條件、反應(yīng)條件（1）靈敏度（合適的渾濁度）：）靈敏度（合適的渾濁度）： Cl 以以5080m mg/50ml （相當于（相當于 NaCl標準液標準液58ml）為宜，）為宜， AgCl的濁度梯度明顯。的濁度梯度明顯。（2）酸及酸度：）酸及酸度：HNO3 加入量：加入量：10ml稀稀HNO3 或或1 ml濃濃HNO3 /50ml 加入作用：加速加入作用：加速AgCl渾濁的生成，又可防止形成渾濁的生成，又可防止形成Ag2CO3、Ag2

13、O、Ag3PO4。（3）溫度：）溫度：l以以3040 產(chǎn)生的渾濁最大，結(jié)果也穩(wěn)定，但供試液與對照液產(chǎn)生的渾濁最大，結(jié)果也穩(wěn)定，但供試液與對照液相同條件下處理，仍可在室溫進行。相同條件下處理，仍可在室溫進行。（4）避光：暗處放置）避光：暗處放置5分鐘后比較。從比色管上方向下觀察。分鐘后比較。從比色管上方向下觀察。（1）供試液不澄明：）供試液不澄明：l應(yīng)過濾，其濾紙應(yīng)用含應(yīng)過濾，其濾紙應(yīng)用含HNO3 的蒸餾水洗凈。的蒸餾水洗凈。HNO3 + 3Cl- +3H+Cl2 +2H2O +NOClCl2 +NO4 4、干擾及排除、干擾及排除(2) 供試液有色：供試液有色：l可利用本身顏色為背景或外加試劑調(diào)

14、色?？衫帽旧眍伾珵楸尘盎蛲饧釉噭┱{(diào)色。KMnO4 （ Cl- ）C2H5OHMn2+ （ Cl- ）枸櫞酸鐵銨枸櫞酸鐵銨（ Cl- ）兩等份兩等份供試供試對照對照AgNO3過濾過濾標準液標準液AgNO3HNO3渾濁渾濁內(nèi)消色法內(nèi)消色法外消色法外消色法 NaHCO3 （ Cl- ）CO2+Cl-NaI (Cl-)HNO330%H2O2I2Cl-（無色）（無色）（3 3）藥物干擾：）藥物干擾：無機鹵素藥物：無機鹵素藥物：CO32-藥物：藥物：l標準液：標準液：K2SO4 ( 0.1mg SO42-/ml )l靈敏度：標準靈敏度：標準K2SO4 1.0-5.0 ml l酸及酸度：酸及酸度：HCl

15、稀稀HCl 2 ml/50 ml （pH=1)lHCl作用：加速作用：加速BaSO4的生成，又可防止生成的生成，又可防止生成BaCO3、Ba3(PO4)2等。等。SO42-+ Ba2+HClBaSO4(渾濁）渾濁）原理：原理：Fe3+ 6SCN稀稀HClFe(SCN)63- （紅色，比色）（紅色，比色）1 1、原理、原理：2 2、檢查法、檢查法：ChP、USP顯色，立即與同法制成的顯色，立即與同法制成的對照溶液比較對照溶液比較加水溶解加水溶解25ml稀稀HCl4ml過硫酸銨過硫酸銨 50mg加水稀釋加水稀釋35ml30%硫氰酸銨溶液硫氰酸銨溶液3ml加水定容加水定容供試品供試品（2）酸：?。┧?/p>

16、：稀HCll在中性或堿性液中，在中性或堿性液中， Fe3+可水解生成棕色的水合羥基鐵離可水解生成棕色的水合羥基鐵離子或紅棕色的子或紅棕色的Fe(OH)3沉淀，故反應(yīng)應(yīng)在酸性液中進行。沉淀，故反應(yīng)應(yīng)在酸性液中進行。l由于由于HNO3有強氧化性，可能使有強氧化性，可能使SCN被破壞，且被破壞，且HNO3中中含有含有HNO2，能與，能與SCN生成紅色化合物（生成紅色化合物（NOSCN），故不），故不能選用能選用HNO3。3 3、反應(yīng)條件、反應(yīng)條件：（1）供試品取樣量：目視比色）供試品取樣量：目視比色Fe3+以以10-50m mg/50ml為宜，相為宜，相當于當于10 m mg Fe3+ /ml的硫酸

17、鐵銨標準液的硫酸鐵銨標準液15ml，色澤梯度明顯。，色澤梯度明顯。25l HNO3: 必須加熱煮沸除去必須加熱煮沸除去NO，因，因HNO2可能與可能與SCN生生成紅色化合物（成紅色化合物（NOSCN）。）。 （3）加入氧化劑：）加入氧化劑： 使使Fe2+ Fe3+ l 過硫酸銨過硫酸銨：2Fe2+ （NH4)2S2O8HCl2Fe3+（NH4)2SO4SO42-+注意事項：注意事項： 鐵鹽與硫氰酸的反應(yīng)是可逆反應(yīng)，加入過量的硫鐵鹽與硫氰酸的反應(yīng)是可逆反應(yīng)，加入過量的硫氰酸銨，不僅可以增加生成配位離子的穩(wěn)定性，提高氰酸銨，不僅可以增加生成配位離子的穩(wěn)定性，提高反應(yīng)靈敏度，還能消除反應(yīng)靈敏度，還能

18、消除Cl-，PO43-，SO42-，枸櫞酸根，枸櫞酸根陰離子等與鐵鹽形成配合物而引起的干擾。陰離子等與鐵鹽形成配合物而引起的干擾。 若供試液管與對照液管色調(diào)不一致，或所呈硫若供試液管與對照液管色調(diào)不一致，或所呈硫氰酸鐵的顏色較淺不便比較時，可分別轉(zhuǎn)至分液漏氰酸鐵的顏色較淺不便比較時，可分別轉(zhuǎn)至分液漏斗中，各加正丁醇或異戊醇提取，分取醇層比色。斗中，各加正丁醇或異戊醇提取，分取醇層比色。具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機藥物，需經(jīng)具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機藥物，需經(jīng)700700800800熾灼破壞處理后再熾灼破壞處理后再依法檢查。依法檢查。l重金屬：在規(guī)定條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉顯色的金屬，重金屬：在規(guī)定條件下能與硫代

19、乙酰胺或硫化鈉顯色的金屬，如如Ag、Hg、Pb、Cd、Bi、As、Zn、Co、Ni、Cu、Sb、Sn等。其中以等。其中以Pb最為普遍，故以最為普遍，故以Pb為代表。為代表。 第一法第一法第四法第四法重金屬含量低的藥物重金屬含量低的藥物(25m mg)第三法第三法使用范圍使用范圍微孔濾膜法微孔濾膜法硫化鈉法硫化鈉法溶于堿性水溶液而難于溶于稀酸或溶于堿性水溶液而難于溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物在稀酸中生成沉淀的藥物方法方法硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法溶于水、稀酸、乙醇的藥物溶于水、稀酸、乙醇的藥物熾灼后的硫代乙熾灼后的硫代乙酰胺法酰胺法含芳環(huán)、雜環(huán)以及難溶于水、稀酸含芳環(huán)、雜環(huán)以及難溶于水、稀酸、

20、乙醇的藥物、乙醇的藥物第二法第二法ChP1.1.檢查法：檢查法：（1 1） 第一法：第一法： 原理：原理： Pb2+ H2SpH=3.5PbS（黃色（黃色 棕黑色）棕黑色）H2S：原來采用：原來采用 FeS + HClH2S從從ChP(90版版)開始采用開始采用硫代乙酰胺硫代乙酰胺pH=3.5H2S+ CH3CONH2硫代乙酰胺優(yōu)點：無惡臭，濃度易控制。硫代乙酰胺優(yōu)點：無惡臭，濃度易控制。H2O如：苯佐卡因，甲硝唑等如：苯佐卡因，甲硝唑等供試品供試品500600 完全灰化完全灰化HNO3蒸干蒸干HCl金屬氯化物金屬氯化物水浴蒸除水浴蒸除HCl殘渣，調(diào)殘渣，調(diào)pHpH值值緩緩熾灼緩緩熾灼炭化炭化

21、放冷放冷H2SO4 0.5-1.0ml加熱加熱H2SO4 除盡除盡按第一法檢查按第一法檢查注意：做空白試驗注意：做空白試驗 如：磺胺類，巴比妥類等藥物如：磺胺類，巴比妥類等藥物有色供試液有色供試液CABFE濾器下部濾器下部濾器上蓋濾器上蓋連接頭連接頭輔助濾板輔助濾板D濾膜濾膜(直徑直徑10mm, 孔徑孔徑3.0m)墊圈墊圈(外徑外徑10mm,內(nèi)徑內(nèi)徑6mm)（1）適合的酸堿度：）適合的酸堿度： 硫代乙酰胺硫代乙酰胺 ： pH3.5 醋酸醋酸-醋酸鈉緩沖液醋酸鈉緩沖液 硫化鈉硫化鈉 ： 堿性堿性(2) 適合的比色濃度：含適合的比色濃度：含Pb1020 2 2、條件：、條件：32 （1）供試品如有

22、色，需經(jīng)處理后方可檢查。 A. 外消色法：在對照管中加稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液。 B. 內(nèi)消色法 C. 改用第四法，微孔濾膜過濾法3 3 干擾及排除干擾及排除33（2）若供試品中有微量）若供試品中有微量Fe3+存在，會氧化硫化氫生成存在，會氧化硫化氫生成單質(zhì)硫，干擾比色，加入抗壞血酸或鹽酸羥胺（單質(zhì)硫，干擾比色，加入抗壞血酸或鹽酸羥胺（0.51.0g）還原）還原Fe3+為為Fe2+，可消除干擾。，可消除干擾。（3）若供試品為鐵鹽，）若供試品為鐵鹽，F(xiàn)e3+在鹽酸中生成在鹽酸中生成HFeCl 62- ，用乙醚提取除去，剩余微量鐵在氨堿性溶液中，加用乙醚提取除去，剩余微量鐵在氨堿性溶液中，

23、加KCN掩蔽，然后用第三法檢查掩蔽，然后用第三法檢查 （4）若藥物本身能生成不溶性硫化物時，可加入掩蔽）若藥物本身能生成不溶性硫化物時，可加入掩蔽劑消除干擾。如劑消除干擾。如ZnSO4中重金屬的檢查，要在堿性下中重金屬的檢查，要在堿性下加加KCN掩蔽掩蔽Zn2+后，依第三法檢查后，依第三法檢查1 1、古蔡氏法、古蔡氏法 （1）原理）原理砷斑砷斑AsO43-SnCl2KI AsO33- 新生態(tài)新生態(tài)H2AsO33-HgBr2AsH3As3+Pb(AC)2Zn + 2HCl（黃（黃棕色）棕色）l H2：由：由 Zn + 濃濃HCl制備，與三價砷生成制備，與三價砷生成AsH3氣體。氣體。l 酸性酸性

24、SnCl2作用：作用： As5+ As3+ KI被氧化生成的被氧化生成的I2轉(zhuǎn)變?yōu)檗D(zhuǎn)變?yōu)镮-，并與，并與Zn2+形成穩(wěn)定的形成穩(wěn)定的配位化合物，有利于砷化氫氣體的不斷生成。配位化合物，有利于砷化氫氣體的不斷生成。在鋅粒表面形成在鋅粒表面形成ZnSn齊，使氫氣均勻發(fā)生。齊，使氫氣均勻發(fā)生。抑制抑制Sb的干擾。的干擾。各試劑的作用：各試劑的作用：lKI作用：作用： As5+ As3+ 。 被氧化生成的被氧化生成的I2轉(zhuǎn)變?yōu)檗D(zhuǎn)變?yōu)镮-，并與，并與Zn2+形成穩(wěn)定的形成穩(wěn)定的配位化合物，有利于砷化氫氣體的不斷生成。配位化合物，有利于砷化氫氣體的不斷生成。 抑制抑制Sb的干擾。的干擾。l醋酸鉛棉花作用：

25、除去硫化物的干擾。醋酸鉛棉花作用：除去硫化物的干擾。H2S+Pb(AC) 22HAC+PbSHgS+H2SHgBr2+ 2HBr有孔玻璃有孔玻璃旋塞旋塞導(dǎo)氣管導(dǎo)氣管AsH3發(fā)生瓶發(fā)生瓶60mg如葡萄糖酸銻鈉如葡萄糖酸銻鈉概念概念：指藥物在規(guī)定條件下，經(jīng)干燥后減失的重指藥物在規(guī)定條件下，經(jīng)干燥后減失的重量。主要控制藥物中的水分、揮發(fā)性物質(zhì)。量。主要控制藥物中的水分、揮發(fā)性物質(zhì)。測定方法測定方法有：有：l1.1.常壓恒溫干燥法常壓恒溫干燥法 ：l適于對熱穩(wěn)定的藥物，如適于對熱穩(wěn)定的藥物，如NaClNaCl等。等。l恒重：供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后的重量差異在恒重：供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后的重量差

26、異在0.3mg0.3mg以下的重量。以下的重量。2.2.干燥劑干燥法干燥劑干燥法： 適于受熱易分解或揮發(fā)的藥物，如適于受熱易分解或揮發(fā)的藥物，如NHNH4 4ClCl、硝酸、硝酸異山梨酯等。異山梨酯等。l 常用干燥劑有：常用干燥劑有：P2O5、硅膠、濃、硅膠、濃H2SO43.3.減壓干燥法減壓干燥法： 適于熔點低、受熱不穩(wěn)定及難除去水的藥物，適于熔點低、受熱不穩(wěn)定及難除去水的藥物，如腎上腺素、布洛芬等。如腎上腺素、布洛芬等。4 .4 .熱分析法熱分析法（Thernal analysis ): 指研究物質(zhì)在加熱或冷卻過程中發(fā)生的物理或化學(xué)變化與溫度變化的關(guān)系的一種分析方法。l常用的方法有：常用的

27、方法有：（1 1）熱重分析法）熱重分析法（TGA)l優(yōu)點：適于樣品量少、貴重樣品或空氣中易氧化的樣品，且分析速度快。供試品供試品參比物質(zhì)參比物質(zhì)同時升溫同時升溫TT =T供供T參參（2 2）差示熱分析法（）差示熱分析法（DTA) )1不吸熱，不放熱不吸熱，不放熱2放熱放熱3吸熱吸熱TT（3 3）差示掃描量熱法（）差示掃描量熱法（DSC)DSC)供試品供試品參比物質(zhì)參比物質(zhì)同一溫度同一溫度TE吸熱變化，增補能量，峰向上吸熱變化，增補能量，峰向上放熱變化，釋放能量，峰向下放熱變化，釋放能量，峰向下（七）熾灼殘渣（七）熾灼殘渣供試品供試品炭化炭化H2SO4濕潤濕潤700-800 灰化灰化殘渣（多為金

28、屬氧殘渣（多為金屬氧化物或無機雜質(zhì)）化物或無機雜質(zhì)）H2SO4硫酸鹽硫酸鹽（八）有機溶劑殘留量（八）有機溶劑殘留量 用以檢查藥物在生產(chǎn)過程中引入的有害有機溶劑，如苯、用以檢查藥物在生產(chǎn)過程中引入的有害有機溶劑，如苯、氯仿、二氯甲烷、甲苯、環(huán)氧乙烷等。氯仿、二氯甲烷、甲苯、環(huán)氧乙烷等。分類使用舉例毒性乙酸、乙醚、乙酸乙酯、乙醇乙酸、乙醚、乙酸乙酯、乙醇、甲酸、甲酸推薦使用推薦使用危險性較小危險性較小三類溶劑三類溶劑避免使用避免使用苯、四氯化碳苯、四氯化碳二類溶劑二類溶劑有一定毒性有一定毒性限量使用限量使用乙腈、三氯甲烷、二氯甲烷、乙腈、三氯甲烷、二氯甲烷、吡啶、四氫呋喃、甲苯吡啶、四氫呋喃、甲苯

29、毒性較大，致癌，毒性較大，致癌，對環(huán)境有害對環(huán)境有害一類溶劑一類溶劑GC法法檢查方法：檢查方法：第三法溶液直接進樣法毛細管柱頂空進樣等溫法毛細管柱頂空進樣程序升溫法被檢查的有機溶劑數(shù)量少且極性差異較小的情況被檢查的有機溶劑數(shù)量多且極性差異較大的情況分類適用范圍第一法第二法中國藥典方法中國藥典方法（九）水分測定法（九）水分測定法3222SOHI2OHSOI%100FB(%)WA供試品中水分的含量A供試品消耗供試品消耗FisherFisher試液的體積試液的體積B空白消耗空白消耗FisherFisher試液的體積試液的體積F每每1mlFisher1mlFisher試劑相當于水的重量試劑相當于水的重

30、量(mg)(mg)W供試品的重量供試品的重量費休氏法費休氏法I2+SO2+N+H2ONHI2+NHSO4CH3指示終點方法：指示終點方法： FisherFisher試液顏色試液顏色 淡黃色淡黃色紅棕色紅棕色 永停法永停法甲醇甲醇l在特殊雜質(zhì)檢查中應(yīng)用很多，具有簡便、快速、不需特殊在特殊雜質(zhì)檢查中應(yīng)用很多，具有簡便、快速、不需特殊設(shè)備、靈敏度較高的優(yōu)點。設(shè)備、靈敏度較高的優(yōu)點。（一）色譜分析法（一）色譜分析法比移值比移值1. 薄層色譜法：薄層色譜法：原點至溶劑前沿的距離原點至溶劑前沿的距離原點至斑點中心的距離原點至斑點中心的距離 fR薄層涂布：薄層涂布：無粘合劑無粘合劑 含粘合劑：含粘合劑：常加

31、入常加入1015% 煅石膏煅石膏 (CaSO42H2O,180烘烘4h)或或0.50.7%羧甲基纖維素鈉水溶液羧甲基纖維素鈉水溶液 雜質(zhì)對照品法雜質(zhì)對照品法適用于已知雜質(zhì)并能夠得到雜質(zhì)對照品的情況適用于已知雜質(zhì)并能夠得到雜質(zhì)對照品的情況 供試品溶液自身稀釋對照法供試品溶液自身稀釋對照法 適用于雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)不能確定或無雜質(zhì)對照品的情況適用于雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)不能確定或無雜質(zhì)對照品的情況( (僅限于僅限于二者的顏色相近或相同的情況二者的顏色相近或相同的情況) ) 雜質(zhì)對照品法與供試品溶液自身稀釋對照法并用雜質(zhì)對照品法與供試品溶液自身稀釋對照法并用 適用于存在多個雜質(zhì)適用于存在多個雜質(zhì) 對照藥物法對照藥物法

32、無合適的雜質(zhì)對照品，或者是供試品顯示的雜質(zhì)斑點顏色和無合適的雜質(zhì)對照品，或者是供試品顯示的雜質(zhì)斑點顏色和主成分顏色有差異，難以判斷限量。主成分顏色有差異，難以判斷限量。檢查方法檢查方法枸櫞酸乙胺嗪枸櫞酸乙胺嗪NNCH3CONC2H5C2H5I2蒸氣顯色供試液中如顯與對照品相應(yīng)供試液中如顯與對照品相應(yīng)的雜質(zhì)斑點，顏色與對照品的雜質(zhì)斑點，顏色與對照品主斑點比較，不得更深。主斑點比較，不得更深。l規(guī)定：l 如顯雜質(zhì)斑點，如顯雜質(zhì)斑點，其顏色與對照溶其顏色與對照溶液所顯主斑點相液所顯主斑點相比較，不得更深比較，不得更深吡羅昔康供試液吡羅昔康供試液 吡羅昔康供試液吡羅昔康供試液 20mg/ml 0.20

33、mg/ml 吡羅昔康中檢查吡羅昔康中檢查“有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)”例；氫溴酸加蘭他敏中例；氫溴酸加蘭他敏中檢檢“其它生物堿其它生物堿” 12 1-供試品液供試品液 2-氫溴酸加蘭他敏氫溴酸加蘭他敏2 、HPLC法法l內(nèi)標法加校正因子測定法內(nèi)標法加校正因子測定法：用于有雜質(zhì)對照品時能夠測定雜質(zhì)：用于有雜質(zhì)對照品時能夠測定雜質(zhì)的校正因子雜質(zhì)的含量測定。的校正因子雜質(zhì)的含量測定。l外標法外標法：用于有雜質(zhì)對照品或雜質(zhì)對照品易制備的情況。：用于有雜質(zhì)對照品或雜質(zhì)對照品易制備的情況。l加校正因子的主成分自身對照測定法加校正因子的主成分自身對照測定法：用于有雜質(zhì)對照品時，：用于有雜質(zhì)對照品時，雜質(zhì)的含量測定雜質(zhì)

34、的含量測定l不加校正因子的主成分自身對照測定法不加校正因子的主成分自身對照測定法 ：用于沒有雜質(zhì)對照：用于沒有雜質(zhì)對照品的情況品的情況l面積歸一化法面積歸一化法：粗略測量供試品中雜質(zhì)的含量：粗略測量供試品中雜質(zhì)的含量 Ai / Cif =Ar / Cr供試品供試品+內(nèi)標內(nèi)標 ：測定：測定i內(nèi)標內(nèi)標 r 雜質(zhì)對照品雜質(zhì)對照品 x 待檢雜質(zhì)待檢雜質(zhì)Ai / Ci f=Ax / Cx Cx = f AxAi / Ci （1 1）內(nèi)標法加校正因子測定法）內(nèi)標法加校正因子測定法雜質(zhì)對照品雜質(zhì)對照品+內(nèi)標內(nèi)標 ：測定校正因子：測定校正因子 l供試液、雜質(zhì)對照品液分別進樣測定供試液、雜質(zhì)對照品液分別進樣測定

35、Axmx=Ar mr mx = mr AxAr（2 2）外標法）外標法（3 3）加校正因子的主成分自身對照法）加校正因子的主成分自身對照法 =As/CsAr/CrAs-藥物對照品的峰面積藥物對照品的峰面積Ar-雜質(zhì)對照品的峰面積雜質(zhì)對照品的峰面積Cs-藥物對照品的濃度藥物對照品的濃度Cr-雜質(zhì)對照品的濃度雜質(zhì)對照品的濃度 供試溶液和供試液稀釋后的對照液分別進樣供試溶液和供試液稀釋后的對照液分別進樣： 各雜質(zhì)峰面積乘以相應(yīng)的各雜質(zhì)峰面積乘以相應(yīng)的后與對照液主成分峰面積比較。后與對照液主成分峰面積比較。 建立方法時，建立方法時，測定校正因子測定校正因子：雜質(zhì)對照品雜質(zhì)對照品和和藥物對照藥物對照品品

36、進樣計算校正因子進樣計算校正因子, 可直接載入正文?？芍苯虞d入正文。l無雜質(zhì)對照品時采用此法。無雜質(zhì)對照品時采用此法。l將供試溶液稀釋成一定濃度作為對照溶液，調(diào)節(jié)檢測靈敏將供試溶液稀釋成一定濃度作為對照溶液，調(diào)節(jié)檢測靈敏度（對照溶液主成分峰高約為滿量程橫的度（對照溶液主成分峰高約為滿量程橫的20%-25%）后，）后，分別進樣，將供試溶液中各雜質(zhì)峰面積及總和與對照溶液分別進樣，將供試溶液中各雜質(zhì)峰面積及總和與對照溶液主成分峰面積主成分峰面積比較。比較。l例例1：甲硝唑中檢：甲硝唑中檢“2-甲基甲基-5-硝基咪唑硝基咪唑”l供試液：供試液：0.1 mg/ml 對照溶液：對照溶液：0.01 mg/m

37、l l規(guī)定：供試液色譜圖中各雜質(zhì)峰面積之和不得大于對照溶液主成分峰規(guī)定：供試液色譜圖中各雜質(zhì)峰面積之和不得大于對照溶液主成分峰面積的面積的1%。（4 4）不加校正因子的主成分自身對照法）不加校正因子的主成分自身對照法例：氧氟沙星中檢例：氧氟沙星中檢“有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)”供試液：供試液：1.2 mg/ml 對照溶液：對照溶液：2.4g/ml 規(guī)定：供試液色譜圖中單個雜質(zhì)峰面積不得大于規(guī)定：供試液色譜圖中單個雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液主成分峰面積（對照溶液主成分峰面積（0.2%）；各雜質(zhì)峰面積）；各雜質(zhì)峰面積之和不得大于對照溶液主成分峰面積的之和不得大于對照溶液主成分峰面積的2.5倍倍（0.5%）。

38、）。0.02.55.07.510.012.515.0 min010203040mV伊維菌素溶液中伊維菌素溶液中“有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)”的檢的檢查查對照溶液對照溶液供試溶液供試溶液稀釋稀釋10倍倍A主主=72181A1+A2+A3 =672601230.02.55.07.510.012.515.0 min010203040mV（5）峰面積歸一化法）峰面積歸一化法總峰面積（除溶劑峰外）總峰面積（除溶劑峰外）雜質(zhì)峰面積總和雜質(zhì)峰面積總和100% 規(guī)定限量規(guī)定限量3 、GC法法l內(nèi)標法加校正因子法：用于有雜質(zhì)對照品時能夠測定雜質(zhì)的校內(nèi)標法加校正因子法：用于有雜質(zhì)對照品時能夠測定雜質(zhì)的校正因子雜質(zhì)的含量測定

39、。正因子雜質(zhì)的含量測定。l外標法：用于有雜質(zhì)對照品或雜質(zhì)對照品易制備的情況。外標法：用于有雜質(zhì)對照品或雜質(zhì)對照品易制備的情況。l峰面積歸一化法：粗略測量供試品中雜質(zhì)的含量峰面積歸一化法：粗略測量供試品中雜質(zhì)的含量 l標準溶液加入法標準溶液加入法（二）光譜分析法（二）光譜分析法1 紫外分光光度法紫外分光光度法(UV）地蒽酚地蒽酚（二羥基蒽醌）（二羥基蒽醌）432nm地蒽酚基本無吸收地蒽酚基本無吸收二羥基蒽醌最大吸收二羥基蒽醌最大吸收規(guī)定：規(guī)定：0.01%的供試溶液在的供試溶液在432nm處的處的A 0.12一定頻率的紅外光輻照能導(dǎo)致被照射物質(zhì)分子在振動、轉(zhuǎn)動能級上的躍遷。當分子中某些化學(xué)鍵或基團（具有偶極特性）的振動頻率與紅外輻射的頻率一致時，分子便吸收此紅外輻射（一種共振吸收）。若以頻率連續(xù)改變的紅外光輻照試樣，由于試樣對不同頻率的紅外光的吸收不同，便得到以吸光度A或透光率T為縱坐標，紅外輻射波數(shù)或波長為橫坐標的紅外光譜圖。如如 -OH：36503200cm-1有強寬峰，有強寬峰， 14