影響血液凝固的因素

1、實(shí)驗(yàn)三實(shí)驗(yàn)三影響血液凝固的因素影響血液凝固的因素紅細(xì)胞脆性的測(cè)定紅細(xì)胞脆性的測(cè)定血紅蛋白的測(cè)定血紅蛋白的測(cè)定影響血液凝固的因素影響血液凝固的因素 1 1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?以凝血時(shí)間為指標(biāo)，了解影響凝血的因素，加深以凝血時(shí)間為指標(biāo)，了解影響凝血的因素，加深 對(duì)生理止血過程的理解。對(duì)生理止血過程的理解。2 2 實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 血液凝固是一個(gè)酶解激活過程，有多種凝血因子血液凝固是一個(gè)酶解激活過程，有多種凝血因子 參與。根據(jù)凝血過程起動(dòng)時(shí)凝血因子來源不同，可將參與。根據(jù)凝血過程起動(dòng)時(shí)凝血因子來源不同，可將 凝血分為內(nèi)源性激活途徑和外源性激活途徑。凝血分為內(nèi)源性激活途徑和外源性激活途徑。3 3 實(shí)驗(yàn)

2、對(duì)象：實(shí)驗(yàn)對(duì)象：家兔家兔4 4 方法與步驟方法與步驟4.1 4.1 家兔的麻醉、保定與手術(shù)家兔的麻醉、保定與手術(shù) 33%33%乙醇溶液，乙醇溶液，6mL/kg6mL/kg，耳緣靜脈注射。，耳緣靜脈注射。4.2 4.2 頸動(dòng)脈采血頸動(dòng)脈采血4.3 4.3 試管準(zhǔn)備試管準(zhǔn)備4.4 4.4 記錄凝血時(shí)間記錄凝血時(shí)間5 5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果表表1 1 血液凝固及其影響因素血液凝固及其影響因素試管號(hào)試管號(hào)實(shí)驗(yàn)處理實(shí)驗(yàn)處理凝血時(shí)間（秒）凝血時(shí)間（秒）1 1空白空白2 2液體石蠟液體石蠟4 4滴滴3 3棉花少許棉花少許4 4冰水環(huán)境冰水環(huán)境5 5肝素肝素4 4滴滴6 6草酸鉀草酸鉀4 4滴滴7 7腦組織浸液

3、腦組織浸液4 4滴滴5 5號(hào)管加號(hào)管加CaClCaCl2 24 4滴滴6 6號(hào)管加號(hào)管加CaClCaCl2 24 4滴滴6 6 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)6.1 6.1 采血過程要盡量快，以減少計(jì)時(shí)誤差，對(duì)采血過程要盡量快，以減少計(jì)時(shí)誤差，對(duì) 比實(shí)驗(yàn)的采血時(shí)間要緊接著進(jìn)行。比實(shí)驗(yàn)的采血時(shí)間要緊接著進(jìn)行。6.2 6.2 每支試管口徑大小及采血量要相對(duì)一致，每支試管口徑大小及采血量要相對(duì)一致， 不可相差太大。不可相差太大。 6.3 6.3 判斷凝血的標(biāo)準(zhǔn)要一致，一般以傾斜試管判斷凝血的標(biāo)準(zhǔn)要一致，一般以傾斜試管 達(dá)達(dá)4545時(shí)試管內(nèi)血液不見流動(dòng)為準(zhǔn)。時(shí)試管內(nèi)血液不見流動(dòng)為準(zhǔn)。紅細(xì)胞脆性的測(cè)定紅細(xì)胞脆性的測(cè)定

4、1 1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?學(xué)習(xí)測(cè)定紅細(xì)胞滲透脆性的方法，理解細(xì)胞外液學(xué)習(xí)測(cè)定紅細(xì)胞滲透脆性的方法，理解細(xì)胞外液 滲透張力對(duì)維持細(xì)胞正常形態(tài)與功能的重要性。滲透張力對(duì)維持細(xì)胞正常形態(tài)與功能的重要性。2 2 實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 正常紅細(xì)胞懸浮于等滲的血漿中，著置于高滲溶正常紅細(xì)胞懸浮于等滲的血漿中，著置于高滲溶 液內(nèi)，則紅細(xì)胞會(huì)因失水而皺縮；反之，置于低滲溶液內(nèi)，則紅細(xì)胞會(huì)因失水而皺縮；反之，置于低滲溶 液內(nèi)，則水進(jìn)入紅細(xì)胞，使紅細(xì)胞膨脹。如環(huán)境滲透液內(nèi)，則水進(jìn)入紅細(xì)胞，使紅細(xì)胞膨脹。如環(huán)境滲透 壓繼續(xù)下降，紅細(xì)胞會(huì)因繼續(xù)膨脹而破裂，釋放血紅壓繼續(xù)下降，紅細(xì)胞會(huì)因繼續(xù)膨脹而破裂，釋放血紅 蛋白，稱之

5、為溶血。紅細(xì)胞膜對(duì)低滲溶液有一定的抵蛋白，稱之為溶血。紅細(xì)胞膜對(duì)低滲溶液有一定的抵 抗力，這一特征稱為紅細(xì)胞的滲透脆性。抗力，這一特征稱為紅細(xì)胞的滲透脆性。3 3 實(shí)驗(yàn)對(duì)象：實(shí)驗(yàn)對(duì)象：動(dòng)物種類不限動(dòng)物種類不限4 4 方法與步驟方法與步驟4.1 4.1 溶液配置溶液配置表表2 2 不同濃度不同濃度NaClNaCl溶液配制溶液配制管管 號(hào)號(hào)1 12 23 34 45 56 67 78 89 910101%NaCl1%NaCl（mLmL）9.09.06.56.56.06.05.55.55.05.04.54.54.04.03.53.53.03.02.52.5蒸餾水蒸餾水(mL)(mL)1.01.03.

6、53.54.04.04.54.55.05.05.55.56.06.06.56.57.07.07.57.5NaClNaCl濃度濃度（% %）0.900.900.650.650.600.600.550.550.500.500.450.450.400.400.350.350.300.300.250.254.2 4.2 制備抗凝血：檸檬酸鈉作抗凝劑。制備抗凝血：檸檬酸鈉作抗凝劑。4.3 4.3 加抗凝血：每只試管加加抗凝血：每只試管加1 1滴。滴。4.4 4.4 觀察結(jié)果觀察結(jié)果未溶血試管：液體下層有大量紅細(xì)胞下沉，上層為未溶血試管：液體下層有大量紅細(xì)胞下沉，上層為無色透明，表明無紅細(xì)胞破裂。無色透明

7、，表明無紅細(xì)胞破裂。不完全溶血試管：液體下層有紅細(xì)胞下沉，上層出不完全溶血試管：液體下層有紅細(xì)胞下沉，上層出現(xiàn)透明淡紅色，表明部分紅細(xì)胞已經(jīng)破裂，稱為不現(xiàn)透明淡紅色，表明部分紅細(xì)胞已經(jīng)破裂，稱為不完全溶血。完全溶血。完全溶血試管：液體完全變成透明紅色，管底無紅完全溶血試管：液體完全變成透明紅色，管底無紅細(xì)胞下沉。細(xì)胞下沉。5 5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果表表2 2 家兔家兔HbHb含量及含量及RBCRBC脆性測(cè)定脆性測(cè)定分組分組HbHb測(cè)定測(cè)定（g/Lg/L） RBC RBC脆性測(cè)定（脆性測(cè)定（NaCl%NaCl%）最小抵抗力最小抵抗力最大抵抗力最大抵抗力實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組對(duì)照組1231230.600

8、.600.550.550.400.400.350.356 6 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)6.1 6.1 試管要干凈；試管要干凈；6.2 6.2 配液要準(zhǔn)確；配液要準(zhǔn)確；6.3 6.3 加血量要一致；加血量要一致；6.4 6.4 輕輕混勻，減少溶血機(jī)會(huì)；輕輕混勻，減少溶血機(jī)會(huì)；6.5 6.5 靜置時(shí)間不少于靜置時(shí)間不少于30min30min。血紅蛋白的測(cè)定血紅蛋白的測(cè)定1 1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握比色法測(cè)定動(dòng)物血紅蛋白含量的方法。掌握比色法測(cè)定動(dòng)物血紅蛋白含量的方法。2 2 實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 血紅蛋白的顏色與氧結(jié)合量有關(guān)，當(dāng)用一定的氧血紅蛋白的顏色與氧結(jié)合量有關(guān)，當(dāng)用一定的氧 化劑將其氧化時(shí)，可使其轉(zhuǎn)變

9、為穩(wěn)定、棕色的高鐵血化劑將其氧化時(shí)，可使其轉(zhuǎn)變?yōu)榉€(wěn)定、棕色的高鐵血 紅蛋白，而且顏色與血紅蛋白的濃度成正比。因此，紅蛋白，而且顏色與血紅蛋白的濃度成正比。因此， 可與標(biāo)準(zhǔn)色板進(jìn)行對(duì)比，求出血紅蛋白的濃度，即每可與標(biāo)準(zhǔn)色板進(jìn)行對(duì)比，求出血紅蛋白的濃度，即每 升血液中含血紅蛋白的克數(shù)（升血液中含血紅蛋白的克數(shù)（g.Lg.L-1-1）。）。3 3 實(shí)驗(yàn)對(duì)象：實(shí)驗(yàn)對(duì)象：動(dòng)物種類不限動(dòng)物種類不限4 4 方法與步驟：方法與步驟：使用沙里氏血紅蛋白計(jì)測(cè)定。使用沙里氏血紅蛋白計(jì)測(cè)定。 比色法是用比色法是用HClHCl使血紅蛋白酸化形成粽色的高鐵使血紅蛋白酸化形成粽色的高鐵 血紅蛋白，然后和標(biāo)準(zhǔn)比色板進(jìn)行比色。

10、血紅蛋白，然后和標(biāo)準(zhǔn)比色板進(jìn)行比色。（1 1）血紅蛋白計(jì)由標(biāo)準(zhǔn)比色箱和測(cè)定管組成。測(cè)定管）血紅蛋白計(jì)由標(biāo)準(zhǔn)比色箱和測(cè)定管組成。測(cè)定管 兩側(cè)有刻度，一側(cè)為血紅蛋白量的絕對(duì)值，以每?jī)蓚?cè)有刻度，一側(cè)為血紅蛋白量的絕對(duì)值，以每100 100 mL mL血液中所含血紅蛋白的克數(shù)表示；另一側(cè)為相對(duì)血液中所含血紅蛋白的克數(shù)表示；另一側(cè)為相對(duì) 值，以（即相當(dāng)于正常平均值的百分?jǐn)?shù)）來表示。值，以（即相當(dāng)于正常平均值的百分?jǐn)?shù)）來表示。（2 2）測(cè)定方法）測(cè)定方法血紅蛋白吸管清潔：自來水血紅蛋白吸管清潔：自來水蒸餾水蒸餾水無水乙醇。無水乙醇。將將0.1N0.1N鹽酸加入測(cè)定管中至刻度鹽酸加入測(cè)定管中至刻度“2”2”

11、處。處。用血紅蛋白吸管吸取用血紅蛋白吸管吸取20L20L血液，將血液吹入鹽酸血液，將血液吹入鹽酸中，并利用上層鹽酸將吸管反復(fù)洗滌多次（避免起中，并利用上層鹽酸將吸管反復(fù)洗滌多次（避免起泡）。泡）。酸化酸化10min10min后，逐滴加入蒸餾水，邊加邊混勻并與后，逐滴加入蒸餾水，邊加邊混勻并與標(biāo)準(zhǔn)比色板比較，至二者顏色相同為止。標(biāo)準(zhǔn)比色板比較，至二者顏色相同為止。讀數(shù)即為每讀數(shù)即為每100mL100mL血液中血紅蛋白的克數(shù)。血液中血紅蛋白的克數(shù)。 【注意事項(xiàng)】【注意事項(xiàng)】（1 1）血紅蛋白吸管和比色管要清潔；）血紅蛋白吸管和比色管要清潔；（2 2）吸取血液要準(zhǔn)確，避免起泡；）吸取血液要準(zhǔn)確，避免

12、起泡；（3 3）滴加蒸餾水要準(zhǔn)確；）滴加蒸餾水要準(zhǔn)確；（4 4）酸化時(shí)間不能少于）酸化時(shí)間不能少于10min10min；（5 5）在自然光下比色。）在自然光下比色。3 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1 3.1 家兔家兔HbHb含量及含量及RBCRBC脆性測(cè)定：見表脆性測(cè)定：見表1 1。表表1 1 家兔家兔HbHb含量及含量及RBCRBC脆性測(cè)定脆性測(cè)定分組分組HbHb測(cè)定測(cè)定含量（含量（g/Lg/L）RBCRBC脆性測(cè)定（脆性測(cè)定（NaCl%NaCl%）最小抵抗最小抵抗最大抵抗最大抵抗實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組對(duì)照組1231230.600.600.550.550.400.400.350.353.2 3.2

13、不同因素對(duì)血液凝固時(shí)間的影響不同因素對(duì)血液凝固時(shí)間的影響表表2 2 血液凝固及其影響因素血液凝固及其影響因素試管號(hào)試管號(hào)實(shí)驗(yàn)處理實(shí)驗(yàn)處理凝血時(shí)間（秒）凝血時(shí)間（秒）1 1空白空白2 2液體石蠟液體石蠟4 4滴滴3 3棉花少許棉花少許4 4冰水環(huán)境冰水環(huán)境5 5肝素肝素4 4滴滴6 6草酸鉀草酸鉀4 4滴滴7 7腦組織浸液腦組織浸液4 4滴滴5 5號(hào)管加號(hào)管加CaClCaCl2 24 4滴滴6 6號(hào)管加號(hào)管加CaClCaCl2 24 4滴滴4 4 分析與探討分析與探討4.1 4.1 本次實(shí)驗(yàn)家兔本次實(shí)驗(yàn)家兔HbHb測(cè)定結(jié)果比對(duì)照高（或低、或基本一測(cè)定結(jié)果比對(duì)照高（或低、或基本一 致），從操作過程

14、方面說明原因：致），從操作過程方面說明原因：。4.2 4.2 本次實(shí)驗(yàn)家兔本次實(shí)驗(yàn)家兔RBCRBC脆性測(cè)定結(jié)果，最小抵抗比對(duì)照組高（或脆性測(cè)定結(jié)果，最小抵抗比對(duì)照組高（或 低、或基本一致），最大抵抗低、或基本一致），最大抵抗，從操作過程方面說明，從操作過程方面說明 原因：原因：。4.3 4.3 家兔凝血時(shí)間測(cè)定結(jié)果表明，家兔凝血時(shí)間測(cè)定結(jié)果表明，處理能加快（抑制或不處理能加快（抑制或不 凝）血液凝固，為什么？凝）血液凝固，為什么？管加管加CaClCaCl2 2后凝固，為什么？后凝固，為什么？ （從凝血機(jī)制分析）（從凝血機(jī)制分析）5 5 參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)1 1 楊秀平楊秀平. . 動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)

15、動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)M. M. 北京：高等教育出版社，北京：高等教育出版社，2004. 85-99. 2004. 85-99. 2 2 鄒永新，郭予強(qiáng)鄒永新，郭予強(qiáng). . 我國鴨病毒性疾病的發(fā)生和流行概況我國鴨病毒性疾病的發(fā)生和流行概況J.J.中國獸醫(yī)雜中國獸醫(yī)雜 志，志，20022002（6 6）：）：38-40.38-40.實(shí)驗(yàn)報(bào)告的撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告的撰寫1 1 實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理2 2 材料與方法材料與方法2.1 2.1 主要器材主要器材2.2 2.2 主要藥品主要藥品2.3 2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物2.4 2.4 實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)方法HbHb測(cè)定：按動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)測(cè)定：按動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)8585頁方法進(jìn)

16、行頁方法進(jìn)行11。脆性測(cè)定：按動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)脆性測(cè)定：按動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)9090頁方法進(jìn)頁方法進(jìn) 行行11。影響血液凝固因素：按動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)影響血液凝固因素：按動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)9797頁方頁方 法進(jìn)行法進(jìn)行11。家兔家兔HbHb、RBCRBC脆性測(cè)定及影響血凝的因素觀察脆性測(cè)定及影響血凝的因素觀察1 1 實(shí)驗(yàn)相關(guān)信息及目的實(shí)驗(yàn)相關(guān)信息及目的2 2 材料材料2.1 2.1 動(dòng)物動(dòng)物2.2 2.2 主要藥品：主要藥品：2.3 2.3 主要儀器：主要儀器：3 3 實(shí)驗(yàn)方法：簡(jiǎn)述或按實(shí)驗(yàn)方法：簡(jiǎn)述或按動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行方法進(jìn)行11。 4 4 結(jié)果結(jié)果4.1 4.1 家兔家兔HbHb、RBCRBC脆性測(cè)定：見表脆性測(cè)定：見表1 1。4.2 4.2 家兔血凝時(shí)間的測(cè)定：見表家兔血凝時(shí)間的測(cè)定：見表2 2。 表表1 1 家兔家兔HbHb含量及含量及RBCRBC脆性測(cè)定脆性測(cè)定 表表2 2 不同因素對(duì)家兔血凝時(shí)間的影響不同因素對(duì)家兔血凝時(shí)間的影響5 5 討論討論5.1 5.1 家兔家兔HbHb測(cè)定結(jié)果與對(duì)照比較，其值偏高，原因：測(cè)定結(jié)果與對(duì)照比較，其值偏高，原因：5.2 5.2 家兔家兔RBCRBC脆性測(cè)定結(jié)果與對(duì)照比較，其值，原因：脆性測(cè)定結(jié)果與對(duì)照比較，其值，原因：5.3