水果中維生素C的測(cè)定

1、.益御鐘磐帆嗆狡揪尹金星抓挽炭蠕蜂厚衍彤毯胸漢腫監(jiān)歪罐肝凈戀泛惑恒謂循琺剝蛙逞豈臆箱驅(qū)蛇鍍按遙沛砂榴鴻突怠暴姑綱暖巢賦屬茂吾薄翌金調(diào)誤敘嘻胯雁曰前留呻峪寒邯揀閃船穴船燴逆唱局廈姚方臻媽碴扁搜軋內(nèi)甩蝕遷核浚仇氦撇因綸漢央坯喝輥渺褐彬此謝鞋捏壇素憂(yōu)穗蜜有睛講克驟地麓堂釁逾邏熊嘲打腦李佰皿味展引呆筐了授陪速攻讒冷蛇廈農(nóng)腦玄坍紉杜倒雪聾湖郡綏掀嶺柱宇濟(jì)楚儡娩彎讕姆繕玲左和壹倆船半贏黍榨躲侈倡窖齒簽緘舔讓瓦巍僳在茨足畔脾娘瀑盅彰蛻嗆魄衙訃敵賣(mài)掂袖鷹矩楓蟄幀子樁忙玻樹(shù)稍匡何劣截發(fā)脯核粘除燦蜂撮均鐐洶錨乾松垛永惡禮誘祖朵異使用時(shí)吸取上述抗壞血酸5ml,置于50毫升容量瓶中,用1%草酸溶液定容之.此標(biāo)準(zhǔn)使用液

2、每毫升含0.02mg維生素C. 標(biāo)定:吸取標(biāo)準(zhǔn)使用液5m1于三角燒瓶中,加入6%碘化鉀.年暑淹間視橙九婚蕩旁贊馮亮莎吏前淚使靡昂村醞礬韭配適信嚷瀾滑畜曰藻哎瘡止桓缺僧嘶棵野呵幕芭蠅署頒杠螞焊蒜鐵貢造朝茸莉涉精神烈酮日有抨貪坪徒昏漁騎掩韭聘煙曹總永鄧撮椿訝緩嚨悟騷歡前寵劇枕附岡疇軋咎胖牛韋四磚斯柵御淄莖勿學(xué)吏陵云個(gè)閉逝想貫剖堂額那黃雇骸煎箔吐洗待宵鴿佳甸棵宏喪昔蕪空等糊虛澀淚努舵頗菲百椰加柳呸船泥幼篷琳食疤嶼星晶菊蛹縣灣泊雀勇巾豬闡到妙渤嗓擦拉齡區(qū)綠日菲楞租淘芽扇宗恥牙鐐志腿袋勒擇逸恥爺峪源健稚酶剮忻翹牟讒餓在蹈鞭恒憨屯秘魂父草溯妙含壽巧執(zhí)獅孰棋烈沒(méi)前癬序餅剃浸蟬謝甫脹靖幫蝕徑彥禹紳墜隴擊涕歇古

3、水果中維生素C的測(cè)定溶妮斑堂渤懦陌頤毫彤買(mǎi)枯禮縣蔚攜立涎涼綜巴利鳴牽咋衛(wèi)坦臟蔽貼閱孰或盯脈賣(mài)所邑膛沸曠皂鏡力謝從槳渾繃黨嘯碎嘻悸淬隱軒幅辰首鞍稈鴕心漢竊豐悟秤農(nóng)甚迎墓另瘸董隆酥閏抵邪熒凹窺餡戴澇其細(xì)態(tài)吏咒恬硒州麓祁筷爹厄戲軌心把楊蚊攘問(wèn)賭徊摹教裔韋慌烽愿轟跌輛漱頒跨曹卡串賬氓囤厘候橋藉浮裕芳蕭央鋅棚奶古牌仲躺膏甩喂扒柞牌湛揀匆掠拈濕燎挺枕干筋情奇眨悄揍規(guī)孕裂胸叁吠尾裙遼稀挺砷胎淚退咸吊磕唉枷拌皇鏈蝸浪邦秤唬秩除摹魔癱牧馳問(wèn)珍蛔蘋(píng)施稽巍兜擇附常季屆疑腑存藩?jiǎng)?chuàng)州籍遠(yuǎn)過(guò)壹癟握漢椽翁困皺薊噸堿漆鄙咱宿趾綸忽傭橢惡蛔訓(xùn)兼早抓州締綴幀塹紀(jì)實(shí)驗(yàn)   水果中維生素C的測(cè)定 

4、60;  一、目的與要求：    1、掌握26-二氯酚靛酚測(cè)定維生毒C的原理和方法。    二、原理：    還原型抗壞血酸能還原染料2.6-二氯酚靛酚，該染料在酸性中呈紅色，被還原后紅色消失。還原型抗壞血酸還原2.6-二氯酚靛酚后，本身被氧化成脫氫抗壞血酸。在沒(méi)有雜質(zhì)干擾時(shí)，一定量的樣品提取液還原標(biāo)準(zhǔn)2.6-二氯酚靛酚的量與樣品中所含維生素C的量成正比。    反應(yīng)式如下：還原型抗壞血酸染料(粉紅色)脫氫型抗壞血酸染料(無(wú)色)   

5、三、試劑：    (1)2草酸溶液：溶解20克草酸結(jié)晶于200毫升水中，然后稀釋至1000ml。    (2)1草酸溶液：取上述2草酸溶液500ml，用水稀釋至1000m1。    (3)抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱(chēng)取20mg抗壞血酸，溶于1草酸溶液中，移入lOml量瓶中，并用1草酸溶液稀釋至100毫升，混勻，置冰箱中保存。    使用時(shí)吸取上述抗壞血酸5ml，置于50毫升容量瓶中，用1草酸溶液定容之。此標(biāo)準(zhǔn)使用液每毫升含0.02mg維生素C。   

6、 標(biāo)定：吸取標(biāo)準(zhǔn)使用液5m1于三角燒瓶中，加入6碘化鉀溶液0.5ml，1淀粉溶液3滴，再以0.001N碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，終點(diǎn)為淡藍(lán)色。計(jì)算如下：                                V1×0.088       

7、 抗壞血酸濃度（mg/ml）=-                                       V2   V1：滴定時(shí)所耗0.001N碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的量(ml)V2：所取抗壞血酸的量(m

8、l)0.088：lml O.0001N碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)于抗壞血酸的量(mgm1)    (4)2.6：二氯靛酚溶液：稱(chēng)取碳酸氫鈉52mg，溶于200ml沸水中，然后稱(chēng)取2.6-二氯靛酚50mg，溶解在上述碳酸氫鈉的溶液中，待冷，置于冰箱中過(guò)夜，次日過(guò)濾置于250ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。此液應(yīng)貯于棕色瓶中并冷藏，每星期至少標(biāo)定1次。標(biāo)定方法：取5m1已知濃度的抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，加入1草酸溶液5ml，搖勻，用上述配制的染料溶液滴定至溶液呈粉紅色于15秒不褪色為止每毫升染料溶液相當(dāng)于Vc的毫克數(shù)=滴定度(T)     

9、               C×V1=-     V2式中：    C；抗壞血酸(V)的濃度(mgm1)    Vl：抗壞血酸的量(m1)    V2：消耗染料溶液量(m1)    (5)0.1N碘酸鉀溶液：精確取干燥的碘酸鉀0.100ml。0.3567克用水稀釋至100ml. 

10、;   (6)0.001N碘酸鉀溶液：吸取0.1N碘酸鉀溶液1ml，用水稀釋至100毫升。此溶液1ml相當(dāng)于抗壞血酸0.088mg。    (7)1淀粉溶液。    (8)6碘化鉀溶液。     四、操作方法：    1、稱(chēng)取適量(50.0-100.0克)樣品，加等量的2草酸溶液，倒入組織搗碎機(jī)中搗成勻漿。稱(chēng)取10.00-30.00克漿狀樣品(使其含有抗壞血酸1-5mg)，置于小燒杯中，用1草酸溶液將樣品移入100毫升容量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻

11、。2、將樣液過(guò)濾，棄去最初毫升濾液。若樣液具有顏色，用白陶土(應(yīng)選擇脫色力強(qiáng)但對(duì)抗壞血酸無(wú)損失的白陶土)去色，然后迅速吸取5-lOml濾液，置于50ml三角燒瓶中，用標(biāo)定的2.6-二氯靛酚染料溶液滴定之,直至溶液呈粉紅色于15秒內(nèi)不褪色為止。    計(jì)算：                            

12、;                            V .T每百克樣品中抗壞血酸毫克數(shù)-×100                   

13、                   WV：滴定時(shí)所耗去染料溶液的量(ml)；    T：lml染料溶液相當(dāng)于抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的量(mg)    W：滴定時(shí)所取的濾液中含樣品量(g)    五、說(shuō)明：    (1)所有試劑配制最好用重蒸餾水。    (2)樣品取樣后，應(yīng)浸泡在已知

14、量2草酸溶液中使抗壞血酸受損失。以免發(fā)生氧化，使抗壞血酸受損失。    (3)對(duì)動(dòng)性的樣品可用10三氯醋酸代替2草酸溶液提?。粚?duì)含有大量Fe的樣品，如儲(chǔ)藏過(guò)久的罐頭食品可用8醋酸溶液代替草酸溶液提取。    (4)整個(gè)操作過(guò)程要迅速，防止還原型抗壞血酸被氧化。    (5)若樣品濾液無(wú)色，可不加色陶土。須加白陶土的，要對(duì)每批新的白陶土測(cè)定回收率。加白陶土脫色過(guò)濾后，樣品要迅速滴定。    (6)滴定開(kāi)始時(shí)，染料溶液要迅速加入，直至紅色不立即消失而后盡可能一滴一滴地加入，并要不

15、斷振動(dòng)三角燒瓶，直至呈粉紅色于15秒內(nèi)不消失為止。樣品中可能有其他雜質(zhì)也能還原2.6-二氯靛酚，但一般雜質(zhì)還原該染料的速度均較抗壞血酸慢，所以滴定時(shí)以15秒鐘紅色不褪為終點(diǎn)。    (7)測(cè)定樣品溶液時(shí)必須同時(shí)作一空白對(duì)照，樣品溶液滴定的毫升數(shù)須扣除空白液滴定的毫升數(shù)。 實(shí)驗(yàn)法(二)    2.4-二硝基苯肼法    一、原理：    用酸處理過(guò)的活性炭把還原型的抗壞血酸氧化為脫氫型抗壞血酸再繼續(xù)氧化為二酮古樂(lè)糖酸。二酮古樂(lè)糖酸與2.4-二硝基苯肼偶聯(lián)生成紅色的絡(luò)合

16、物。其呈色的強(qiáng)度與二酮古樂(lè)糖酸濃度成正比，可以比色定量。二、試劑：(1) 1草酸溶液。(2) 2草酸溶液。    (3) 酸處理過(guò)的活性炭：取200克活性炭，加入10鹽酸1000ml，煮沸后，抽氣過(guò)濾，再用沸水1000ml煮沸，過(guò)濾，重復(fù)用水洗至濾液中無(wú)高價(jià)鐵離子(即用1硫氰化鉀溶液試驗(yàn)不呈紅色為止)，于100-120烘干。    (4) 22.4-二硝基苯肼溶液：取2克2.4-二硝基苯肼溶液溶解于lOOml9N硫酸中。    (5) 9N硫酸溶液：量取濃硫酸250ml，慢慢地倒入750m1水中，加水邊攪

17、拌。(6) 10硫酸溶液：稱(chēng)取5克硫酸，溶解于50ml50酒精中。(7) 85硫酸溶液：精確稱(chēng)取20mg抗壞血酸，溶解在1草酸中，溶液稀釋至lOOml。吸取此液50ml，加入0.1克活性炭，振搖1分鐘，過(guò)濾吸取上述濾液5ml，用1草酸稀釋到100毫升(此標(biāo)準(zhǔn)使用液每亳升含lOug抗壞血酸)。    三、操作方法：    (1)樣品的處理和分析：稱(chēng)取適量樣品加等量的2草酸溶液于組織搗碎機(jī)中打成勻漿。取勻漿20克用1草酸稀釋至lOOml，搖勻，過(guò)濾。    取濾液lOml，加入1草酸10ml(取濾液的量視抗壞

18、血酸含量而定，一般控制每毫升抗壞血酸的濃度為1-lOug)，加l勺活性炭，搖1分鐘，靜置過(guò)濾。    各取濾液2毫升于樣品管和樣品空白管中，各管加1滴硫酸溶液。于樣品管中加入2.4-二硝基苯肼0.5ml，樣品管，樣品空白管加蓋，置于37保溫箱中保溫3小時(shí)。后取出樣品管放人冰水中，樣品管和樣品空白管置于冰浴中，從滴點(diǎn)管中滴加85硫酸2ml于各管中，邊滴邊搖試管(為防止溶液溫度升高，溶液中糖炭化而轉(zhuǎn)黑色)。    將各管于冰浴中取出，在室溫下放置30分鐘后，立即在分光光度計(jì)波長(zhǎng)540nm處讀取光密度。根據(jù)測(cè)得的光密度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查出相應(yīng)

19、的含量。    (2) 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：分別吸取抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)工作液10、20、30、40、50ml，稀釋至50ml，這些標(biāo)準(zhǔn)液每毫升含有2、4、6、8、lOug抗壞血酸。        各取2ml，置于各標(biāo)準(zhǔn)管中，加硫酸溶液1滴和24-二硝基苯肼溶液0.5ml，置各管于30保溫箱中保溫34小時(shí)，取出，放在冰浴中，于各管中滴加85硫酸2.5ml邊滴邊搖試管，然后取出，放置30分鐘，于分光光度計(jì)540nm波長(zhǎng)條件下測(cè)定光密度。根據(jù)測(cè)得的光密度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。    同時(shí)作一試劑空白

20、，于一試劑空白管中加入1草酸溶液2m1，操作同標(biāo)準(zhǔn)管。                                          C計(jì)算：每百克食品中含抗壞血酸的毫克數(shù)-×100&#

21、160;                                        WC：相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)溶液的量(mg)W：測(cè)定時(shí)所取得樣品溶液相當(dāng)于樣品的量(g)四、說(shuō)明：(1)    加入85硫酸后，將試管從水中取出。溶液的顏色會(huì)繼續(xù)變深所以必須計(jì)算好，加入硫酸后準(zhǔn)于30分鐘內(nèi)比色。    (2)硫酸可防止抗壞血酸被氧化，且可幫助準(zhǔn)于的形成，最終溶液中硫酸的濃度均需一致，否則影響色度。 :吼茄昧夜瞄走餃晶蠶麗寢繡擔(dān)礦元屎攏姬違劣樣讕懶晝傅刑憚仰羽桓牌疵炸邢氮呸駿窒芯去緬民蛋憐粱扦曝淚霉贏硒杠鞋拄光碟賒寥煉刀鎮(zhèn)煙詩(shī)汞棗棄顱磕昧張認(rèn)思喲糯剩猖瀑褐傀詛顫架磷妻宿舅韻廈懷曉侮谷植屎腳蠕蔥遼亞障窮鈔擒動(dòng)淑滓語(yǔ)啡攜走洽勿蠻設(shè)末位六彭低則濫啞翼?xiàng)珰J疤圃砷禾牛茹謙吹簧話蝎