紫外可見分光光度法測定水楊酸的含量

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上儀器分析 實 驗 報 告 實 驗 名 稱：紫外可見分光光度法測定水楊酸的含量 學(xué) 院： 化學(xué)工程學(xué)院 專 業(yè)： 化學(xué)工程與工藝 指 導(dǎo) 教 師： 沈梁鈞 日 期： 2015年4月15日 一、實驗?zāi)康?#160;1、了解紫外可見分光光度計的性能、結(jié)構(gòu)及其使用方法。 2、掌握紫外可見分光光度法定性、定量分析的基本原理和實驗技術(shù)。 二、實驗原理 紫外-可見光譜是用紫外-可見光測得的物質(zhì)電子光譜，它研究產(chǎn)生于價電子在電子能級間的躍遷，研究物質(zhì)在紫外-可見光區(qū)的分子吸收光譜。當(dāng)不同波長的單色光通過被分析的物質(zhì)時能測得不同波長下的吸光度或透光率，以A

2、BS為縱坐標(biāo)對橫坐標(biāo)波長作圖，可獲得物質(zhì)的吸收光譜曲線。一般紫外光區(qū)為190-400nm，可見光區(qū)為400-800nm。 紫外吸收光譜的定性分析為化合物的定性分析提供了信息依據(jù)。由于分子結(jié)構(gòu)不同但只要具有相同的生色團(tuán)，它們的最大吸收波長值就相同。因此，通過對末知化合物的掃描光譜、最大吸收波長值與已知化合物的標(biāo)準(zhǔn)光譜圖在相同溶劑和測量條件下進(jìn)行比較，就可獲得基礎(chǔ)鑒定。 利用紫外吸收光譜進(jìn)行定量分析時，必須選擇合適的測定波長。苯甲酸和水楊酸的紫外吸收光譜如圖1所示。 圖1 苯甲酸與水楊酸紫外吸收光譜圖1-苯甲酸；2-水楊酸水楊酸在波長300 nm處

3、有吸收峰，而苯甲酸此處無吸收，在波長230 nm兩組吸收峰重疊，為了避開其干擾，選用300 nm波長作為測定水楊酸的工作波長。由于乙醇在250350nm無吸收干擾，因此可用60%乙醇為參比溶液。 三、儀器與試劑 1儀器 紫外可見分光光度計（UVWIN 5，北京普析通用儀器有限公司）；容量瓶100mL 1個、50mL 5個；刻度吸量管1mL、2mL、5mL各1支 。 2試劑 水楊酸對照品（分析純）；60%乙醇溶液（自制）。 四、實驗步驟 1、標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備：準(zhǔn)確稱取0

4、.0500 g水楊酸置于100 mL燒杯中，用60%乙醇溶解后，轉(zhuǎn)移到100 mL容量瓶中，以60%乙醇稀釋至刻度，搖勻。此溶液濃度為0.5mg·mL-1。 2、將五個50mL容量瓶按1-5依次編號。分別移取水楊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液0.50、1.00、2.00、3.00、4.00mL于相應(yīng)編號容量瓶中，各加入60%乙醇溶液，稀釋至刻度，搖勻。 3、用1 cm石英吸收池、，以60%乙醇作為參比溶液，在200350 nm波長范圍內(nèi)測定一份水楊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的紫外吸收光譜，確定最大吸收波長。 4、在選定波長下，以60%乙醇為

5、參比溶液，由低濃度到高濃度測定水楊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液系列及未知液的吸光度。以水楊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)水楊酸試液的吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算水楊酸試樣中水楊酸的含量。五、數(shù)據(jù)記錄 不同波長下的吸光度波長nm250260270280290295296297298300310吸光度A0.0090.0550.0650.1030.1450.1600.1610.1610.1590.1560.112 標(biāo)準(zhǔn)曲線制定及未知試樣濃度檢測 標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度：0.5mg/ml編號移取標(biāo)準(zhǔn)溶液體積ml溶液濃度ug/ml吸光度A空白000標(biāo)10.550.161標(biāo)21100.0.309標(biāo)3

6、2200.541標(biāo)43300.791標(biāo)54401.074未知濃度溶液編號未知溶液的吸光度A溶液濃度ug/mg未知液0.68725.79 六、數(shù)據(jù)處理 1、根據(jù)某一濃度下的全波長掃描圖，確定最佳吸收波長。 2、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算工作曲線方程及R2值。 3、計算未知樣中水楊酸的濃度。 最大波長：=298nm得到方程Y=0.012+0.02617X 未知溶液吸光度Y=0.687,則濃度X=25.79ug/mg七、注意事項 1、配制樣品前要將所使用的玻璃儀器清洗干凈。 2、移取標(biāo)準(zhǔn)溶液之前要潤洗移液管。 3、測量前用待測液潤洗比色皿，測量由低濃度到高濃度依次進(jìn)行。  八、思考題 1、綜述紫外吸收光譜分析的基本原理。  利用物質(zhì)的分子或離子對紫外和可見光的吸收所產(chǎn)生的紫外及吸收程度可以對物質(zhì)的組成、含量和結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析、測定、推斷。不同，吸收的波長不一樣。2、 歸納影響紫外光譜定性、定量檢測時的各種誤差影響因素。共軛效應(yīng)的影響：取代基越大，分子平面性越大，空間阻礙使共軛體系破壞，max藍(lán)移，