第八章-皂苷和強(qiáng)心苷 (1)

1、第八章第八章皂苷和強(qiáng)心苷皂苷和強(qiáng)心苷教學(xué)目的與要求v1.熟悉皂苷、強(qiáng)心苷的主要結(jié)構(gòu)類型及理化性質(zhì)熟悉皂苷、強(qiáng)心苷的主要結(jié)構(gòu)類型及理化性質(zhì)v2.掌握皂苷、強(qiáng)心苷的顏色反應(yīng)及其應(yīng)用掌握皂苷、強(qiáng)心苷的顏色反應(yīng)及其應(yīng)用v3.掌握強(qiáng)心苷的酸水解法和酶水解法及其應(yīng)用掌握強(qiáng)心苷的酸水解法和酶水解法及其應(yīng)用v4.熟悉皂苷、強(qiáng)心苷的一般提取分離方法熟悉皂苷、強(qiáng)心苷的一般提取分離方法v5.了解皂苷、強(qiáng)心苷的波譜特征了解皂苷、強(qiáng)心苷的波譜特征v經(jīng)典含義經(jīng)典含義存在于植物體內(nèi)一類比較復(fù)雜的存在于植物體內(nèi)一類比較復(fù)雜的苷類苷類 化合物，其水溶液振搖后可產(chǎn)生持久化合物，其水溶液振搖后可產(chǎn)生持久 的肥皂樣泡沫，的肥皂樣泡沫

2、， 因此而得名。因此而得名。v現(xiàn)代含義現(xiàn)代含義螺甾烷螺甾烷以及與其以及與其生源途徑相似的甾族生源途徑相似的甾族化化 合物的合物的低聚糖苷低聚糖苷或或三萜類化合物三萜類化合物的的低聚低聚 糖苷。糖苷。第一節(jié)第一節(jié) 皂苷皂苷一、皂苷的分類及結(jié)構(gòu)特點(diǎn)一、皂苷的分類及結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 皂苷皂苷 甾體皂苷甾體皂苷 三萜皂苷三萜皂苷 螺甾烷醇型螺甾烷醇型 : 25 S (L)（C25-甲基直立甲基直立a鍵、鍵、 為為型）型） 異螺甾烷醇型異螺甾烷醇型 : 25 R (D) ( C25-甲基平伏甲基平伏e 鍵、為鍵、為 型型)變形螺甾烷醇型變形螺甾烷醇型 ：F環(huán)變形為呋喃甾烷（五環(huán)變形為呋喃甾烷（五 元含氧環(huán)）元含

3、氧環(huán)）呋甾烷型呋甾烷型 ：F環(huán)裂環(huán)環(huán)裂環(huán),C26-OH多與葡萄糖相多與葡萄糖相 連成苷連成苷 四環(huán)三萜皂苷四環(huán)三萜皂苷 五環(huán)三萜皂苷五環(huán)三萜皂苷 達(dá)瑪甾烷型達(dá)瑪甾烷型 羊毛脂甾烷型羊毛脂甾烷型-香樹脂烷型香樹脂烷型(齊墩果烷型齊墩果烷型 ) -香樹脂烷型（烏蘇烷型香樹脂烷型（烏蘇烷型 ） 羽扇豆烷型羽扇豆烷型(一一)甾體皂苷甾體皂苷1、甾體皂苷的結(jié)構(gòu)特征、甾體皂苷的結(jié)構(gòu)特征 ： 甾體皂苷由甾體皂苷由 甾體皂苷元與糖（甾體皂苷元與糖（ -羥基糖）縮合而羥基糖）縮合而成。甾體皂苷元由成。甾體皂苷元由27個(gè)碳原子、六個(gè)環(huán)組成，其基本個(gè)碳原子、六個(gè)環(huán)組成，其基本碳架是碳架是螺甾烷螺甾烷的衍生物。的衍生

4、物。 OOABCDEF123456789101112131415161718192021222324252627（3）C25的絕對構(gòu)型依其上甲基的取向不同有兩種：的絕對構(gòu)型依其上甲基的取向不同有兩種：vC-25甲基是甲基是-構(gòu)型稱為螺甾烷構(gòu)型稱為螺甾烷絕對構(gòu)型為絕對構(gòu)型為L(S)型型，vC-25甲基是甲基是 -構(gòu)型稱為異螺甾烷構(gòu)型稱為異螺甾烷絕對構(gòu)型為絕對構(gòu)型為D (R) 型型。（1）甾體皂苷元中有六個(gè)環(huán)，甾體皂苷元中有六個(gè)環(huán)，A、B、C、D四個(gè)環(huán)四個(gè)環(huán)具有具有甾體母核甾體母核結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu),C-22是螺原子是螺原子,E、F環(huán)以環(huán)以螺縮酮螺縮酮形式連接。形式連接。（2）A、B環(huán)有順、反兩種稠合方式。

5、環(huán)有順、反兩種稠合方式。B、C環(huán)和環(huán)和C、D環(huán)環(huán)均為反式稠合。均為反式稠合。C25-甲基甲基 直立直立a鍵、為鍵、為型型 L型型 (25S 25L 25) 平伏平伏e鍵、為鍵、為 型型 D型（型（ 25R 25D 25 ) 螺甾烷型螺甾烷型 異螺甾烷型異螺甾烷型 (4)取代基團(tuán)：取代基團(tuán)：vOH 多在多在C3-位或其他位置位或其他位置,且多為且多為-型型v羰基羰基 多在多在C12-位位v雙鍵雙鍵 多在多在5 , 9（11）,少數(shù)在少數(shù)在25（27）位位v甾體皂苷不含羧基，呈中性，故稱為中性皂苷甾體皂苷不含羧基，呈中性，故稱為中性皂苷。 (5)常見的糖有常見的糖有: D-葡萄糖、葡萄糖、D-半乳

6、糖、半乳糖、 D-木糖、木糖、L-鼠李糖、鼠李糖、L-阿阿拉伯糖及拉伯糖及D-葡萄糖醛酸、葡萄糖醛酸、D-半乳糖醛酸等較為常見半乳糖醛酸等較為常見,此外此外也可見到夫糖和加拿大麻糖及也可見到夫糖和加拿大麻糖及6-去氧葡萄糖和去氧葡萄糖和6-去氧半去氧半乳糖。乳糖。(6)成苷的位置成苷的位置:與苷元與苷元C-3上的羥基連接成苷上的羥基連接成苷,也有在也有在C-1 或或C-26位置上成苷的。位置上成苷的。OOHO20222325181927OOHO1310132.甾體皂苷苷元的結(jié)構(gòu)類型甾體皂苷苷元的結(jié)構(gòu)類型異螺甾烷醇型異螺甾烷醇型 螺甾烷醇型螺甾烷醇型 25CH2OHO1819OHO2627變形螺

7、甾烷醇型變形螺甾烷醇型27OHOHOHO呋甾烷醇型呋甾烷醇型 （1）三萜皂苷苷元為）三萜皂苷苷元為30個(gè)碳原子組成的三萜類衍生個(gè)碳原子組成的三萜類衍生 物物,大多數(shù)在大多數(shù)在24或或28位有羧基位有羧基,故又稱故又稱酸性酸性皂苷。皂苷。（2）常見的糖有）常見的糖有D-葡萄糖、葡萄糖、D-半乳糖、半乳糖、D-木糖、木糖、L- 阿拉伯糖、阿拉伯糖、L-鼠李糖、鼠李糖、D-葡萄糖醛酸、葡萄糖醛酸、D-半乳糖醛半乳糖醛 酸，另外還有酸，另外還有D-呋糖、呋糖、D-雞納糖、雞納糖、D-芹糖、乙酰基芹糖、乙酰基 和乙酰氨基糖等。和乙酰氨基糖等。（3）成苷的位置多為）成苷的位置多為3位醇位醇皂苷或皂苷或28

8、位酯位酯皂苷；另外皂苷；另外 也有也有16、21、23、29位等醇羥基成苷。位等醇羥基成苷。（4）常見的三萜皂苷有單糖鏈三萜皂苷、雙糖鏈三）常見的三萜皂苷有單糖鏈三萜皂苷、雙糖鏈三 萜皂苷和三糖鏈皂苷萜皂苷和三糖鏈皂苷(二二) 三萜皂苷三萜皂苷1、三萜皂苷的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、三萜皂苷的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)2、三萜皂苷元的結(jié)構(gòu)類型：、三萜皂苷元的結(jié)構(gòu)類型：常見的有四環(huán)三萜皂苷和常見的有四環(huán)三萜皂苷和 五環(huán)三萜皂苷。五環(huán)三萜皂苷。（1）四環(huán)三萜皂苷元）四環(huán)三萜皂苷元:其基本骨架也是甾體結(jié)構(gòu)母核，其基本骨架也是甾體結(jié)構(gòu)母核， A/B、B/C、C/D環(huán)均為反式稠合。環(huán)均為反式稠合。13101314172022242526

9、3029282723191852120252621183029282723195羊毛脂甾烷型羊毛脂甾烷型 達(dá)瑪甾烷型達(dá)瑪甾烷型 -香樹脂烷型香樹脂烷型又稱齊墩果烷型又稱齊墩果烷型A/B、B/C、C/D環(huán)環(huán)為反式稠合為反式稠合D/E環(huán)為順式稠合環(huán)為順式稠合 -香樹脂烷型香樹脂烷型又稱烏蘇烷型又稱烏蘇烷型 A/B、B/C環(huán)環(huán)為反式稠合為反式稠合C/D 、D/E環(huán)為環(huán)為順式稠合順式稠合（2）五環(huán)三萜皂苷元類型）五環(huán)三萜皂苷元類型23456710131417202122293028272625242313282726252423OHHHH12930羽扇豆烷型羽扇豆烷型A/B、B/C、C/D、D/E 環(huán)

10、均為反式稠合環(huán)均為反式稠合木栓烷型木栓烷型A/B、B/C、C/D、D/E 環(huán)均為反式稠合環(huán)均為反式稠合HHH232425262728HH29HH2019212230二、皂苷的理化性質(zhì)二、皂苷的理化性質(zhì) 1、性狀、性狀 皂苷皂苷大多為無色或乳白色無定形粉末（低聚糖大多為無色或乳白色無定形粉末（低聚糖 苷，極性大，分子量大）；苷，極性大，分子量大）；皂苷元皂苷元（極性小）大多有完好結(jié)晶；（極性小）大多有完好結(jié)晶；皂苷皂苷多數(shù)具有苦而辛辣味，對粘膜有強(qiáng)烈刺激多數(shù)具有苦而辛辣味，對粘膜有強(qiáng)烈刺激 性，尤其鼻粘膜，易引起噴嚏性，尤其鼻粘膜，易引起噴嚏 。皂苷皂苷大多具吸濕性。大多具吸濕性。2、溶解性、溶

11、解性 皂苷皂苷（低聚糖苷，極性大）易溶于水、?。ǖ途厶擒?，極性大）易溶于水、稀醇、含水丁醇，醇、含水丁醇， 難溶于丙酮、乙醚等；難溶于丙酮、乙醚等； 次生皂苷次生皂苷（極性降低）（極性降低） 易溶于醇、丙酮、易溶于醇、丙酮、乙酸乙酯等；乙酸乙酯等； 皂苷皂苷的助溶作用（表面活性劑作用），可的助溶作用（表面活性劑作用），可以增大其他成分在水中的溶解度。以增大其他成分在水中的溶解度。 皂苷水溶液經(jīng)強(qiáng)烈振搖能產(chǎn)生大量持久性泡沫，皂苷水溶液經(jīng)強(qiáng)烈振搖能產(chǎn)生大量持久性泡沫，且不因加熱而消失。且不因加熱而消失。原因：皂苷分子中原因：皂苷分子中 降低水溶液表面張力作用所致，但也有些皂苷起泡性降低水溶液表面張

12、力作用所致，但也有些皂苷起泡性不明顯。不明顯。三萜皂苷酸水液的泡沫和堿水液的泡沫持續(xù)時(shí)間相同三萜皂苷酸水液的泡沫和堿水液的泡沫持續(xù)時(shí)間相同甾體皂苷堿水液泡沫比酸水液的泡沫持續(xù)時(shí)間長幾倍甾體皂苷堿水液泡沫比酸水液的泡沫持續(xù)時(shí)間長幾倍6、與膽甾醇的沉淀反應(yīng)、與膽甾醇的沉淀反應(yīng)： 皂苷與膽甾醇可形成皂苷與膽甾醇可形成 分子復(fù)合物的沉淀。生成的分子復(fù)合物沉淀分子復(fù)合物的沉淀。生成的分子復(fù)合物沉淀 用乙醚回流提取時(shí)，膽甾醇可溶于乙醚，用乙醚回流提取時(shí)，膽甾醇可溶于乙醚， 皂苷不溶。沉淀規(guī)律如下皂苷不溶。沉淀規(guī)律如下: 凡有凡有3-OH，A/B環(huán)反式稠合環(huán)反式稠合(5 -H)或或5的的 平展結(jié)構(gòu)的甾醇，與

13、皂苷形成的分子復(fù)合物的平展結(jié)構(gòu)的甾醇，與皂苷形成的分子復(fù)合物的 溶度積最小。溶度積最小。 凡有凡有3 -OH或或3-OH經(jīng)酯化或成苷的甾醇，經(jīng)酯化或成苷的甾醇， 不能與皂苷形成難溶性分子復(fù)合物。不能與皂苷形成難溶性分子復(fù)合物。 三萜皂苷與甾醇形成的分子復(fù)合物的穩(wěn)定性三萜皂苷與甾醇形成的分子復(fù)合物的穩(wěn)定性 低于甾體皂苷與甾醇形成的分子復(fù)合物。低于甾體皂苷與甾醇形成的分子復(fù)合物。 皂苷在無水條件下可與強(qiáng)酸、中等強(qiáng)酸、皂苷在無水條件下可與強(qiáng)酸、中等強(qiáng)酸、Lewis酸酸等作用下發(fā)生顏色反應(yīng)：等作用下發(fā)生顏色反應(yīng)：l醋酐醋酐-濃硫酸反應(yīng)（濃硫酸反應(yīng)（Liebermann-Burchard反應(yīng)）反應(yīng)） 黃

14、黃 紅紅 紫紫 藍(lán)藍(lán) 褪色褪色 黃黃 紅紅 紫紫 藍(lán)藍(lán) 綠色綠色 褪色褪色l五氯化銻反應(yīng)（五氯化銻反應(yīng)（Kahlenberg反應(yīng)）反應(yīng)）l三氯醋酸反應(yīng)（三氯醋酸反應(yīng)（Rosen-Heimer反應(yīng)）反應(yīng)）l氯仿氯仿-濃硫酸反應(yīng)（濃硫酸反應(yīng)（Salkowski反應(yīng)）反應(yīng)）l冰醋酸冰醋酸-乙酰氯反應(yīng)（乙酰氯反應(yīng)（Tschugaeff反應(yīng)）反應(yīng)）甾體皂苷甾體皂苷主要作為合成激素等的原料，故以主要作為合成激素等的原料，故以 提取苷元較為實(shí)用。提取苷元較為實(shí)用。三萜皂苷三萜皂苷為許多中藥的有效活性成分，故以為許多中藥的有效活性成分，故以 提取原生苷為主。提取原生苷為主。方法方法1原才料原才料加水，加水，3

15、6保溫保溫2448小時(shí)浸泡預(yù)發(fā)酵小時(shí)浸泡預(yù)發(fā)酵3%硫酸加熱水解硫酸加熱水解36小時(shí)，小時(shí)，過濾，水洗，干燥過濾，水洗，干燥料渣料渣料渣料渣石油醚、或甲苯連續(xù)回流石油醚、或甲苯連續(xù)回流46小時(shí)提取小時(shí)提取 提取液提取液適當(dāng)回收溶劑，放置析晶，抽濾適當(dāng)回收溶劑，放置析晶，抽濾皂苷元粗品皂苷元粗品乙醇或丙酮處理，活性炭脫色重結(jié)晶乙醇或丙酮處理，活性炭脫色重結(jié)晶皂苷元皂苷元方法方法2.原材料原材料稀醇水溶液提取稀醇水溶液提取皂苷皂苷水解液水解液皂苷元皂苷元苯、氯仿等有機(jī)溶劑萃取苯、氯仿等有機(jī)溶劑萃取萃取液萃取液回收溶劑回收溶劑色譜分離法色譜分離法吸附原理：吸附原理： 硅膠、氧化鋁硅膠、氧化鋁苯苯-氯仿

16、、苯氯仿、苯-甲醇、氯仿甲醇、氯仿-甲醇不同比例洗脫甲醇不同比例洗脫 2、皂苷苷元的分離、皂苷苷元的分離 試劑類型試劑類型 鑒別特點(diǎn)鑒別特點(diǎn) 鑒別意義鑒別意義用于兩類用于兩類皂苷的區(qū)別皂苷的區(qū)別 四、皂苷的檢識(shí)及結(jié)構(gòu)測定四、皂苷的檢識(shí)及結(jié)構(gòu)測定（一）（一） 皂苷的化學(xué)檢識(shí)皂苷的化學(xué)檢識(shí) 顏色反應(yīng)顏色反應(yīng) 醋酐醋酐-濃硫酸濃硫酸反應(yīng)反應(yīng)甾體皂苷最甾體皂苷最后呈藍(lán)綠色后呈藍(lán)綠色三萜皂苷最后三萜皂苷最后顯紅或紫紅色顯紅或紫紅色 三氯醋酸反應(yīng)三氯醋酸反應(yīng) 三萜皂苷加熱至三萜皂苷加熱至100 才顯色才顯色 用于兩類用于兩類皂苷的區(qū)別皂苷的區(qū)別 甾體皂苷加熱至甾體皂苷加熱至60即可顯色即可顯色 鹽酸鹽酸-

17、對二甲氨基苯甲醛對二甲氨基苯甲醛 （Ehrlich試劑，簡稱試劑，簡稱 E試劑）試劑） 螺甾烷醇類螺甾烷醇類 皂苷不顯色皂苷不顯色 呋甾烷醇類呋甾烷醇類皂苷顯紅色皂苷顯紅色 茴香醛茴香醛-硫酸硫酸 (Anisaldehyde, 簡稱簡稱A試劑）試劑） 螺甾螺甾醇類醇類 皂苷皂苷顯黃色顯黃色 呋甾呋甾醇類皂醇類皂苷苷顯黃色顯黃色可用于兩類可用于兩類不同苷元不同苷元皂苷的區(qū)別皂苷的區(qū)別可用于兩類可用于兩類不同苷元不同苷元皂苷的區(qū)別皂苷的區(qū)別 官能團(tuán)官能團(tuán) （max） 孤立雙鍵孤立雙鍵 205225nm（900） 羰基羰基 285nm（500） a、- 不飽和酮基不飽和酮基 240nm（11000）

18、飽和的甾體皂苷元與共軛雙鍵飽和的甾體皂苷元與共軛雙鍵 235nm濃硫酸濃硫酸 40，1hr 220 275nm（二）波譜特征檢識(shí)（二）波譜特征檢識(shí)1、紫外特征（、紫外特征（UV ）飽和的甾體皂苷元飽和的甾體皂苷元 紫外區(qū)無吸收紫外區(qū)無吸收依吸收峰的位置（依吸收峰的位置（max）及吸光系數(shù)（）及吸光系數(shù)（）與標(biāo)準(zhǔn)圖譜相對照，即可用于不同皂苷元的鑒別與標(biāo)準(zhǔn)圖譜相對照，即可用于不同皂苷元的鑒別 甾體皂苷的螺縮酮結(jié)構(gòu)在紅外光譜的指紋區(qū)表現(xiàn)特甾體皂苷的螺縮酮結(jié)構(gòu)在紅外光譜的指紋區(qū)表現(xiàn)特征性四個(gè)吸收峰：征性四個(gè)吸收峰：2紅外光譜（紅外光譜（IR）可用于可用于C- 25構(gòu)型的鑒別（兩種皂苷元的鑒別）構(gòu)型的鑒

19、別（兩種皂苷元的鑒別）25 D (R)系：系： 980 cm-1 ( A ) 、920 cm-1 ( B ) 、 900 cm-1 ( C ) 、 860 cm-1 ( D ); 其中其中A帶最強(qiáng)，帶最強(qiáng)，C帶較帶較B帶強(qiáng)帶強(qiáng) 34倍倍 25L(S)系：系： 980 cm-1 (A) 、920 cm-1 (B) 、 9900 cm-1 (C) 、 860 cm-1 (D); 其中其中A帶最強(qiáng)，帶最強(qiáng)， B帶較帶較C帶強(qiáng)帶強(qiáng)2倍倍 當(dāng)當(dāng)F環(huán)開裂，無螺縮酮結(jié)構(gòu)，無此特征。環(huán)開裂，無螺縮酮結(jié)構(gòu)，無此特征。當(dāng)甾環(huán)當(dāng)甾環(huán)11或或12位有羰基時(shí)位有羰基時(shí),則在則在17511705cm-1處只有一處只有一個(gè)

20、吸收峰；且個(gè)吸收峰；且11位羰基的吸收頻率比位羰基的吸收頻率比12位羰基的高。位羰基的高。若若12位羰基形成位羰基形成 ，-共軛體系，則在共軛體系，則在16051600cm-1（雙鍵）及（雙鍵）及16971673cm-1 （羰基）處各有一個(gè)吸收峰（羰基）處各有一個(gè)吸收峰甾體皂苷的螺縮酮結(jié)構(gòu)甾體皂苷的螺縮酮結(jié)構(gòu) 139（基峰）、（基峰）、115（中）、（中）、126（弱）（弱）若若C25-OH 或或 C27-OH +16 155（基峰）、（基峰）、131（中）、（中）、 142（弱）（弱） OH乙酰化乙?；疧Ac +58 197（基峰）（基峰） OH甲基化甲基化OMe +30 169（基峰）（基

21、峰）若若25（27） -2 137（基峰）、（基峰）、113（中）、（中）、124（弱）（弱）若若C17 OH 139減弱、減弱、126（基峰）、（基峰）、155、153二個(gè)峰二個(gè)峰推斷推斷F - 環(huán)的取代情況環(huán)的取代情況 3.質(zhì)譜（質(zhì)譜（MS）m/z 139（基峰）（基峰） m/z 115（中）（中） m/z 126輔助離子輔助離子 m/z 137 m/z 113 m/z 124 OOOOHFO+OOOH+F 五環(huán)三萜皂苷在五環(huán)三萜皂苷在12位和位和13位間有一雙鍵，具有環(huán)己烯的位間有一雙鍵，具有環(huán)己烯的結(jié)構(gòu)，很容易發(fā)生結(jié)構(gòu)，很容易發(fā)生RDA（逆（逆Diels-Alder）裂解，將分子）裂解

22、，將分子分為兩大碎片。根據(jù)生成的碎片離子峰可以確定分為兩大碎片。根據(jù)生成的碎片離子峰可以確定A、B環(huán)環(huán)及及D、E環(huán)上取代的性質(zhì)、數(shù)目幾位置。環(huán)上取代的性質(zhì)、數(shù)目幾位置。1HNMR特征：特征：在高場區(qū)出現(xiàn)在高場區(qū)出現(xiàn) 18、19、21、27-CH3的信息特征；的信息特征； 4、核磁共振、核磁共振 1.10 (25 S、 L-型型) 0.7 (25R、 D-型型)依依27-H D、 L - 構(gòu)型判斷構(gòu)型判斷21- CH3 3H d 27- CH3 3H d 18- CH3 3H s19- CH3 3H s18- CH3處于較高場處于較高場27- CH3處于較高場處于較高場v（2）在低場區(qū)出現(xiàn)）在低

23、場區(qū)出現(xiàn)C16 H C26-2H的信息特征，的信息特征， 而且，依而且，依C26-2H化學(xué)位移的差值（化學(xué)位移的差值（）可用于）可用于D、 L - 構(gòu)型的判斷構(gòu)型的判斷C26-2H D-型：（型：（25R)3.3、3.95 ；L-型型 （25 S) 3.36v（3）結(jié)構(gòu)中的許多亞甲基、次甲基質(zhì)子堆積成復(fù)雜峰圖）結(jié)構(gòu)中的許多亞甲基、次甲基質(zhì)子堆積成復(fù)雜峰圖相近相近 ： L-型型 （25 S) 相差比較大：相差比較大： D-型：（型：（25R)3.3v13CNMR : 碳譜寬度比氫譜寬碳譜寬度比氫譜寬30倍，分子微小差異倍，分子微小差異 即可引起碳譜化學(xué)位移的區(qū)別，并可利用全氫去即可引起碳譜化學(xué)位

24、移的區(qū)別，并可利用全氫去 偶、偏共振去偶、高分辨碳譜等得到的信息參數(shù)偶、偏共振去偶、高分辨碳譜等得到的信息參數(shù) 幾乎可以將皂苷元分子幾乎可以將皂苷元分子27個(gè)碳原子（包括季碳、個(gè)碳原子（包括季碳、 羰基碳原子）的特征峰全部辨認(rèn)出來。羰基碳原子）的特征峰全部辨認(rèn)出來。v甾體皂苷元碳譜特征及位移規(guī)律：甾體皂苷元碳譜特征及位移規(guī)律：v21、18、19、27-甲基碳原子甲基碳原子在在 20ppm以下以下v16-碳原子碳原子 在在80ppm左右左右v26-碳原子碳原子 在在109ppm左右左右v雙鍵碳原子雙鍵碳原子 115150ppmv羰基碳原子羰基碳原子 200ppm左右左右v碳原子被含氧基團(tuán)取代，碳

25、原子被含氧基團(tuán)取代， +4045ppm含義含義: 是指存在于植物體內(nèi)的一類對心臟具有顯是指存在于植物體內(nèi)的一類對心臟具有顯 著生物活性的著生物活性的甾體苷類甾體苷類化合物?；衔?。132564R78910111213141516171819ABCD第二節(jié)第二節(jié) 強(qiáng)心苷類強(qiáng)心苷類一、一、 強(qiáng)心苷的結(jié)構(gòu)與分類強(qiáng)心苷的結(jié)構(gòu)與分類（一）苷元部分：（一）苷元部分：為甾體衍生物。其結(jié)構(gòu)特征為：為甾體衍生物。其結(jié)構(gòu)特征為：1.甾體母核的四個(gè)環(huán)為甾體母核的四個(gè)環(huán)為順順-反反-順順的稠合方式的稠合方式2.苷元的苷元的3-位、位、14-位常連有羥基，且多為位常連有羥基，且多為-型型3.甾體母核的甾體母核的C17

26、-位上連接不飽和內(nèi)酯環(huán)位上連接不飽和內(nèi)酯環(huán)依據(jù)內(nèi)酯環(huán)大小的不同，依據(jù)內(nèi)酯環(huán)大小的不同，強(qiáng)心苷元可分為強(qiáng)心苷元可分為強(qiáng)心甾烯強(qiáng)心甾烯甲型強(qiáng)心苷元甲型強(qiáng)心苷元 海蔥甾烯（蟾蜍甾二烯）海蔥甾烯（蟾蜍甾二烯）乙型強(qiáng)心苷元乙型強(qiáng)心苷元 強(qiáng)心甾烯強(qiáng)心甾烯 海蔥甾烯（蟾蜍甾二烯）海蔥甾烯（蟾蜍甾二烯） 3-OH 14-OH 3-OH 14-OH 甲型強(qiáng)心苷元甲型強(qiáng)心苷元 乙型強(qiáng)心苷元乙型強(qiáng)心苷元 甲型強(qiáng)心苷甲型強(qiáng)心苷 乙型強(qiáng)心苷乙型強(qiáng)心苷 3 -位連接糖基位連接糖基 3-位連接糖基位連接糖基 20212223O24OABCDOO20212223ABCD1.糖的類型糖的類型 :構(gòu)成強(qiáng)心苷的糖有構(gòu)成強(qiáng)心苷的糖有

27、20多種多種,根據(jù)根據(jù)C2上有無上有無羥基可分為羥基可分為 -羥基糖羥基糖(2-羥基糖羥基糖)和和 -去氧糖去氧糖(2-去氧去氧糖糖)。 -去氧糖去氧糖(2-去氧糖去氧糖)常見于強(qiáng)心苷常見于強(qiáng)心苷,是區(qū)別于其是區(qū)別于其它苷類成分的一個(gè)重要特征。它苷類成分的一個(gè)重要特征。 (1) -OH糖：除糖：除D-葡萄糖、葡萄糖、L-鼠李糖外還有鼠李糖外還有6-去氧去氧 糖如糖如L-夫糖、夫糖、D-雞納糖、雞納糖、D-弩箭子糖、弩箭子糖、D-6去氧去氧 阿洛糖；阿洛糖；6-去氧糖甲醚如去氧糖甲醚如L-黃花夾竹桃糖、黃花夾竹桃糖、D-洋洋 地黃糖等地黃糖等 (2) -去氧糖：去氧糖：2、6-二去氧糖，如二去氧

28、糖，如D-洋地黃毒糖；洋地黃毒糖； 2、6-二去氧糖甲醚，如二去氧糖甲醚，如L-夾竹桃糖、夾竹桃糖、D-加拿大加拿大 麻糖、麻糖、D-迪吉糖和迪吉糖和D-沙門糖等沙門糖等 （二）糖基部分（二）糖基部分OHOH2CH,OHOHOHOHOH,OHCH3OHOHOHOCH3OHOHOHH,OHOH,OHCH3OHOHOH2、常見糖的結(jié)構(gòu)：、常見糖的結(jié)構(gòu)：L-鼠李糖鼠李糖L-夫糖夫糖D-雞納糖雞納糖D-葡萄糖葡萄糖OH,OHCH3OHOCH3OHOCH3OHOHOHH,OHOH,OHCH3OHOHOHL-黃花夾竹桃糖黃花夾竹桃糖D-弩箭子糖弩箭子糖D-6-去氧阿洛糖去氧阿洛糖L -夾竹桃糖夾竹桃糖2,

29、6-二去氧糖二去氧糖OH,OHOHCH3OCH3OH,OHOCH3OHCH3D-加拿大麻糖加拿大麻糖OH,OHOCH3OHCH3D-迪吉糖迪吉糖OH,OHCH3OHOCH3OH,OHCH3OHOHD-洋地黃毒糖洋地黃毒糖D-沙門糖沙門糖OH,OHCH3OHOHOCH3D-洋地黃糖洋地黃糖（三）苷元和糖的連接方式（三）苷元和糖的連接方式I型強(qiáng)心苷型強(qiáng)心苷 苷元苷元-(2、6-二去氧糖二去氧糖)-(D-葡萄糖葡萄糖) II型強(qiáng)心苷型強(qiáng)心苷 苷元苷元-(6-去氧糖去氧糖) (D-葡萄糖葡萄糖)III型強(qiáng)心苷型強(qiáng)心苷 苷元苷元- (D-葡萄糖葡萄糖) 強(qiáng)心苷大多是強(qiáng)心苷大多是低聚糖苷低聚糖苷，少數(shù)是單

30、糖苷或雙糖，少數(shù)是單糖苷或雙糖苷。通常按糖的種類和苷元的連接方式，可分為以下苷。通常按糖的種類和苷元的連接方式，可分為以下三種類型：三種類型：自然界存在的強(qiáng)心苷以自然界存在的強(qiáng)心苷以、型較多型較多, 型較少。型較少。x=13，y=12v 1性狀性狀：大多為無色結(jié)晶或無定形粉末：大多為無色結(jié)晶或無定形粉末 。具有。具有 旋光性。味苦，對粘膜有刺激性。旋光性。味苦，對粘膜有刺激性。 v 2溶解性溶解性 水水 甲醇、甲醇、乙醇、乙醇、丙酮丙酮 乙酸乙酯、乙酸乙酯、含水氯仿、含水氯仿、氯仿氯仿-甲醇（甲醇（3：1） 乙醚、苯、乙醚、苯、石油醚石油醚 原生苷原生苷 次生苷次生苷 + 小小 + + 微溶微

31、溶 可溶可溶 難溶難溶 難溶難溶二、強(qiáng)心苷的理化性質(zhì)二、強(qiáng)心苷的理化性質(zhì) 水解特點(diǎn)水解特點(diǎn) :苷元與苷元與 -去氧糖及去氧糖及 - 去氧糖與去氧糖與 -去氧糖去氧糖 之間之間 的苷鍵開裂的苷鍵開裂 ,不會(huì)引起苷元脫水。不會(huì)引起苷元脫水。3、水解反應(yīng)、水解反應(yīng)(1) 酸水解酸水解溫和酸水解溫和酸水解水解條件水解條件:0.020.05mol/L HCl或或H2SO4在在含水醇溶液中含水醇溶液中 短時(shí)加熱短時(shí)加熱用用 途途:型強(qiáng)心苷水解為苷元和糖。型強(qiáng)心苷水解為苷元和糖。 水解條件水解條件: 35% HCI,延長加熱時(shí)間或加壓延長加熱時(shí)間或加壓 水解特點(diǎn)水解特點(diǎn): 所有苷鍵斷裂所有苷鍵斷裂 用途用途

32、: I 、 II、III型強(qiáng)心苷的水解型強(qiáng)心苷的水解 此法易產(chǎn)生脫水苷元此法易產(chǎn)生脫水苷元 氯化氫氯化氫-丙酮法丙酮法 水解條件水解條件: 1% HCl丙酮溶液丙酮溶液20放置兩周放置兩周 水解特點(diǎn)水解特點(diǎn): 糖分子中的糖分子中的C2和和C3羥基與丙酮反應(yīng)生成丙羥基與丙酮反應(yīng)生成丙 酮化物酮化物,進(jìn)而水解可得到原生苷元和糖衍生物進(jìn)而水解可得到原生苷元和糖衍生物 用途用途:II型強(qiáng)心苷的水解型強(qiáng)心苷的水解強(qiáng)烈酸水解強(qiáng)烈酸水解OOOHOHCOOHOCH3HOHOOHOOOHOHCOOHOCH3HOCOOCH3H3CHClCH3COCH3OOOHOHCOHHOOCH3HOCOOCH3H3CHCl+鈴

33、蘭毒苷鈴蘭毒苷丙酮縮鈴蘭毒苷丙酮縮鈴蘭毒苷毒毛旋花子苷毒毛旋花子苷元元氯代丙酮縮氯代丙酮縮 L-鼠李糖鼠李糖水解條件水解條件：水、：水、36左右、左右、24 hr水解特點(diǎn)水解特點(diǎn)：專屬性強(qiáng)，不同性質(zhì)的酶，作用于不同性質(zhì)：專屬性強(qiáng)，不同性質(zhì)的酶，作用于不同性質(zhì) 的苷鍵的苷鍵 。乙型強(qiáng)心苷比甲型強(qiáng)心苷易水解。乙型強(qiáng)心苷比甲型強(qiáng)心苷易水解 植物體內(nèi)只有水解葡萄糖的酶，無水解植物體內(nèi)只有水解葡萄糖的酶，無水解 -去氧糖的酶。去氧糖的酶。酶能水解除去葡萄糖，保留酶能水解除去葡萄糖，保留 -去氧糖而生產(chǎn)次生苷。去氧糖而生產(chǎn)次生苷。苷元類型不同，被酶水解的難易程度也不同，一般來說苷元類型不同，被酶水解的難易

34、程度也不同，一般來說乙型強(qiáng)心苷比甲型強(qiáng)心苷易水解。乙型強(qiáng)心苷比甲型強(qiáng)心苷易水解。用途用途：研究強(qiáng)心苷的結(jié)構(gòu)。：研究強(qiáng)心苷的結(jié)構(gòu)。（2）酶水解）酶水解（3）堿水解）堿水解 強(qiáng)心苷的苷鍵不被堿水解，但分子中的強(qiáng)心苷的苷鍵不被堿水解，但分子中的?；；?、內(nèi)酯內(nèi)酯環(huán)會(huì)受堿的影響，發(fā)生水解或裂解、雙鍵位移、苷元異環(huán)會(huì)受堿的影響，發(fā)生水解或裂解、雙鍵位移、苷元異構(gòu)化等反應(yīng)。構(gòu)化等反應(yīng)。酰基的堿水解?；膲A水解水解條件水解條件： NaHCO3 、KHCO3、 Ca (OH)2、Ba (OH)2 水解特點(diǎn)水解特點(diǎn)：NaHCO3和和KHCO3主要使主要使2-去氧糖上的酰去氧糖上的酰 基水解，而基水解，而2-羥基

35、糖或苷元上的酰基不水解；羥基糖或苷元上的酰基不水解； 而而Ca(OH)2和和Ba(OH)2可使可使2-去氧糖、去氧糖、 2-羥基羥基 糖及苷元上的?；?，但內(nèi)酯環(huán)不水解。糖及苷元上的?；?，但內(nèi)酯環(huán)不水解。 應(yīng)用：應(yīng)用：鑒別鑒別2-去氧糖和去氧糖和2-羥基糖或苷元羥基糖或苷元內(nèi)酯環(huán)的堿水解內(nèi)酯環(huán)的堿水解 在在水溶液水溶液中中KOH和和NaOH可使內(nèi)酯環(huán)開裂，加酸后可使內(nèi)酯環(huán)開裂，加酸后可再環(huán)合；可再環(huán)合； 在在醇溶液醇溶液中中KOH和和NaOH可使內(nèi)酯環(huán)開裂后生成異可使內(nèi)酯環(huán)開裂后生成異構(gòu)化苷，酸化也不能再環(huán)合為原來的內(nèi)酯環(huán)，是不可逆構(gòu)化苷，酸化也不能再環(huán)合為原來的內(nèi)酯環(huán)，是不可逆反應(yīng)。反

36、應(yīng)。131417D2223202221OOOHOHHH21OO232022HH21OOO23202220OHHHOCOOHKO HC2H5O H131417D2223202221OOOHOHHH21OO232022HH21OOO23202220OHHHOCOOHKOHC2H5OH甲型強(qiáng)心苷在甲型強(qiáng)心苷在KOH醇溶液中通過內(nèi)酯環(huán)的電子轉(zhuǎn)移、雙醇溶液中通過內(nèi)酯環(huán)的電子轉(zhuǎn)移、雙鍵移位，雙鍵由鍵移位，雙鍵由20（22）轉(zhuǎn)移到）轉(zhuǎn)移到20（21），生成），生成C22活活性亞甲基，以及性亞甲基，以及C14位羥基質(zhì)子對位羥基質(zhì)子對C20位的雙鍵親電加成位的雙鍵親電加成反應(yīng)而生成內(nèi)酯型異構(gòu)化苷，再經(jīng)皂化開環(huán)形

37、成開鏈型反應(yīng)而生成內(nèi)酯型異構(gòu)化苷，再經(jīng)皂化開環(huán)形成開鏈型異構(gòu)化苷。異構(gòu)化苷。應(yīng)用：應(yīng)用：與活性亞甲基試劑反應(yīng)，用于鑒別甲型和乙型與活性亞甲基試劑反應(yīng)，用于鑒別甲型和乙型 強(qiáng)心苷。強(qiáng)心苷。OOKOHCH3OHOHOCH3OOHCHOHOCH3OCHO 乙型強(qiáng)心苷在乙型強(qiáng)心苷在KOH醇溶液中不發(fā)生雙鍵位移，但醇溶液中不發(fā)生雙鍵位移，但內(nèi)酯環(huán)開裂生成甲酯異構(gòu)化苷。內(nèi)酯環(huán)開裂生成甲酯異構(gòu)化苷。OOHOHOO4、脫水反應(yīng)、脫水反應(yīng)(D-洋地黃毒糖洋地黃毒糖)3OO 強(qiáng)心苷用混合強(qiáng)酸（如強(qiáng)心苷用混合強(qiáng)酸（如35% HCl或或H2SO4）進(jìn)行）進(jìn)行酸水解時(shí)，苷元往往發(fā)生脫水反應(yīng)。酸水解時(shí)，苷元往往發(fā)生脫水反

38、應(yīng)。C3-、C14-上的上的-OH最容易發(fā)生脫水。最容易發(fā)生脫水。HCl3D-洋地黃洋地黃毒糖毒糖+羥基洋地黃毒糖苷羥基洋地黃毒糖苷脫水羥基洋地黃毒苷元脫水羥基洋地黃毒苷元水解反應(yīng)的副反應(yīng)，應(yīng)注意避免水解反應(yīng)的副反應(yīng)，應(yīng)注意避免5、顯色反應(yīng)：由甾體母核、不飽和內(nèi)酯環(huán)和、顯色反應(yīng)：由甾體母核、不飽和內(nèi)酯環(huán)和 -去氧糖三部分產(chǎn)生。去氧糖三部分產(chǎn)生。（1）作用于甾核的顏色反應(yīng)）作用于甾核的顏色反應(yīng) 醋酐醋酐-濃硫酸（濃硫酸（L-B）反應(yīng)）反應(yīng) Salkowski（氯仿（氯仿-濃硫酸）反應(yīng)濃硫酸）反應(yīng) 三氯醋酸三氯醋酸-氯胺氯胺T(Rosenheim)反應(yīng)反應(yīng) 三氯化銻（五氯化銻）反應(yīng)三氯化銻（五氯化

39、銻）反應(yīng)（2）作用于五元不飽和內(nèi)酯環(huán)的顏色反應(yīng)作用于五元不飽和內(nèi)酯環(huán)的顏色反應(yīng) 甲型甲型強(qiáng)心苷強(qiáng)心苷C17側(cè)鏈上的五元不飽和內(nèi)酯環(huán)在側(cè)鏈上的五元不飽和內(nèi)酯環(huán)在堿性堿性溶溶液中雙鍵轉(zhuǎn)移形成液中雙鍵轉(zhuǎn)移形成活性亞甲基活性亞甲基,該活性亞甲基能與某些試該活性亞甲基能與某些試劑反應(yīng)而劑反應(yīng)而顯色顯色。反應(yīng)在可見光區(qū)有最大吸收，也可用于。反應(yīng)在可見光區(qū)有最大吸收，也可用于定量分析；乙型強(qiáng)心苷在堿性溶液中無此類反應(yīng)定量分析；乙型強(qiáng)心苷在堿性溶液中無此類反應(yīng)。Legal反應(yīng)反應(yīng)Kedde反應(yīng)反應(yīng)Raymand反應(yīng)反應(yīng)Baljet反應(yīng)反應(yīng)反應(yīng)名稱反應(yīng)名稱 試劑試劑 顏色顏色 maxNa2Fe(NO)CN52H

40、2O亞硝酰鐵氰化鈉亞硝酰鐵氰化鈉深紅或藍(lán)深紅或藍(lán)470nm 3,5-二硝基苯甲酸二硝基苯甲酸深紅或紅深紅或紅590nm 間間-二硝基苯二硝基苯紫紅或藍(lán)紫紅或藍(lán)苦味酸苦味酸橙或橙紅橙或橙紅620nm 490nm 此類反應(yīng)可在試管內(nèi)進(jìn)行，也可以此類反應(yīng)可在試管內(nèi)進(jìn)行，也可以作為作為TLC或或PC的的顯色劑。用于甲型與乙型強(qiáng)心苷的鑒別顯色劑。用于甲型與乙型強(qiáng)心苷的鑒別（3）作用于）作用于 -去氧糖的顏色反應(yīng)去氧糖的顏色反應(yīng)Keller-Kiliani（K-K）反應(yīng)：將強(qiáng)心苷溶于含少量）反應(yīng)：將強(qiáng)心苷溶于含少量 Fe3+的冰醋酸，沿試管壁滴加濃硫酸，醋酸層漸呈的冰醋酸，沿試管壁滴加濃硫酸，醋酸層漸呈

41、藍(lán)色或藍(lán)綠色，界面處隨苷元不同顯不同顏色。藍(lán)色或藍(lán)綠色，界面處隨苷元不同顯不同顏色。 對二甲氨基苯甲醛反應(yīng)：將強(qiáng)心苷的醇溶液滴在濾紙對二甲氨基苯甲醛反應(yīng)：將強(qiáng)心苷的醇溶液滴在濾紙 上，干后噴上，干后噴1%對二甲氨基苯甲醛乙醇溶液對二甲氨基苯甲醛乙醇溶液-濃鹽酸濃鹽酸(4:1), 并并于于90加熱加熱30秒，顯灰紅色斑點(diǎn)。秒，顯灰紅色斑點(diǎn)。過碘酸過碘酸-對硝基苯胺反應(yīng)對硝基苯胺反應(yīng):過碘酸能將過碘酸能將2-去氧糖氧化生去氧糖氧化生 成丙二醛成丙二醛,再與對硝基苯胺縮合而顯黃色。再與對硝基苯胺縮合而顯黃色。三、三、 強(qiáng)心苷的提取分離強(qiáng)心苷的提取分離強(qiáng)心苷提取分離比較困難，原因：強(qiáng)心苷提取分離比較困

42、難，原因： v1. 含強(qiáng)心苷成分比較復(fù)雜，且含量較低；含強(qiáng)心苷成分比較復(fù)雜，且含量較低；v2. 強(qiáng)心苷為多糖苷強(qiáng)心苷為多糖苷, 常與多糖、皂苷、色素、鞣質(zhì)常與多糖、皂苷、色素、鞣質(zhì) 等性質(zhì)相近成分共存；等性質(zhì)相近成分共存； v3. 共存酶的存在及酸、堿等，易造成強(qiáng)心苷的水共存酶的存在及酸、堿等，易造成強(qiáng)心苷的水解，使成分復(fù)雜化；解，使成分復(fù)雜化； （一）強(qiáng)心苷的提?。海ㄒ唬?qiáng)心苷的提取： 原生苷和次生苷，在溶解性上有親水性、弱親脂性、原生苷和次生苷，在溶解性上有親水性、弱親脂性、親脂性之分，但均能溶于甲醇、乙醇中。一般常用甲醇親脂性之分，但均能溶于甲醇、乙醇中。一般常用甲醇或或7080%乙醇作

43、溶劑乙醇作溶劑，提取效率高，且能使酶失去活性。，提取效率高，且能使酶失去活性。1、提取、提取溶劑法（相似者相溶原理）：溶劑法（相似者相溶原理）： 原生苷：原生苷： 甲醇、乙醇甲醇、乙醇 次生苷：次生苷： 乙醚、氯仿、氯仿乙醚、氯仿、氯仿-甲醇混合溶劑甲醇混合溶劑 2、除雜、除雜 v溶劑法溶劑法: 油脂類雜質(zhì)，先用壓榨法或石油醚脫脂油脂類雜質(zhì)，先用壓榨法或石油醚脫脂v靜置析膠法：將醇提液濃縮至適當(dāng)醇濃度后靜置，靜置析膠法：將醇提液濃縮至適當(dāng)醇濃度后靜置， 使葉綠素等脂溶性雜質(zhì)成膠狀沉淀析使葉綠素等脂溶性雜質(zhì)成膠狀沉淀析出出 后，過濾除去；后，過濾除去； v吸附法吸附法: 活性炭可除去葉綠素等脂溶

44、性雜質(zhì)；氧化鋁活性炭可除去葉綠素等脂溶性雜質(zhì)；氧化鋁 可除去糖類、水溶性色素、皂苷等雜質(zhì)，注可除去糖類、水溶性色素、皂苷等雜質(zhì)，注 意調(diào)整醇濃度，避免強(qiáng)心苷被吸附而損失。意調(diào)整醇濃度，避免強(qiáng)心苷被吸附而損失。 3、分離純化、分離純化 v兩相溶劑萃取法兩相溶劑萃取法：依分配系數(shù)差異（：依分配系數(shù)差異（K）v逆流分溶法：逆流分溶法： 依分配系數(shù)差異（依分配系數(shù)差異（K）v液滴逆流分溶法（液滴逆流分溶法（DCCC）: 依分配系數(shù)差異（依分配系數(shù)差異（K）v色譜分離法：親脂性苷（單糖苷、次生苷、苷元）采色譜分離法：親脂性苷（單糖苷、次生苷、苷元）采 用吸附色譜，一般用硅膠為吸附劑，正己烷用吸附色譜，一

45、般用硅膠為吸附劑，正己烷-乙酸乙乙酸乙 酯、苯酯、苯-丙酮、氯仿丙酮、氯仿-甲醇、乙酸乙酯甲醇、乙酸乙酯-甲醇為溶劑進(jìn)行甲醇為溶劑進(jìn)行 梯度洗脫；弱親脂性苷（原生苷）：選用分配色譜，梯度洗脫；弱親脂性苷（原生苷）：選用分配色譜， 用硅膠、硅藻土、纖維素為支持劑，甲酰胺、二甲基用硅膠、硅藻土、纖維素為支持劑，甲酰胺、二甲基 甲酰胺為固定相，以乙酸乙酯甲酰胺為固定相，以乙酸乙酯-甲醇甲醇-水或氯仿水或氯仿-甲醇甲醇- 水進(jìn)行梯度洗脫。水進(jìn)行梯度洗脫。 當(dāng)組分復(fù)雜時(shí)，往往需幾種方法配合應(yīng)用反復(fù)分當(dāng)組分復(fù)雜時(shí)，往往需幾種方法配合應(yīng)用反復(fù)分離，才能達(dá)到滿意的分離效果。離，才能達(dá)到滿意的分離效果。四、強(qiáng)心

46、苷的檢識(shí)四、強(qiáng)心苷的檢識(shí) （一）（一） 理化檢識(shí)理化檢識(shí) ：主要是利用其分子結(jié)構(gòu)中甾體母核、主要是利用其分子結(jié)構(gòu)中甾體母核、不飽和內(nèi)酯環(huán)、不飽和內(nèi)酯環(huán)、 -去氧糖的顏色反應(yīng)。常用的有去氧糖的顏色反應(yīng)。常用的有Liebermann-Burchard反應(yīng)、反應(yīng)、Keller-Killiani反應(yīng)、反應(yīng)、Legal反應(yīng)和反應(yīng)和Kedde反應(yīng)等。反應(yīng)等。 若樣品的顯色反應(yīng)表明有甾體母核和若樣品的顯色反應(yīng)表明有甾體母核和 -去氧糖，則去氧糖，則基本可判定樣品含強(qiáng)心苷；若基本可判定樣品含強(qiáng)心苷；若Legal反應(yīng)或反應(yīng)或Kedde反應(yīng)也反應(yīng)也呈陽性，則表明樣品所含成分屬于甲型強(qiáng)心苷類；反之呈陽性，則表明樣品

47、所含成分屬于甲型強(qiáng)心苷類；反之則可能是乙型強(qiáng)心苷類。則可能是乙型強(qiáng)心苷類。（二）色譜檢識(shí)：（二）色譜檢識(shí)：1、紙色譜檢識(shí)：、紙色譜檢識(shí)：親脂性強(qiáng)的強(qiáng)心苷：以甲酰胺或丙二醇為固定相，以親脂性強(qiáng)的強(qiáng)心苷：以甲酰胺或丙二醇為固定相，以苯或甲苯（用固定相飽和）為流動(dòng)相苯或甲苯（用固定相飽和）為流動(dòng)相親水性強(qiáng)的強(qiáng)心苷：以水浸透濾紙為固定相，以水飽和親水性強(qiáng)的強(qiáng)心苷：以水浸透濾紙為固定相，以水飽和的正丁醇或乙醇的正丁醇或乙醇-甲苯甲苯-水（水（4:6:1）、氯仿）、氯仿-甲醇甲醇-水水(10:2:5、10:4:5、10:8:5）為流動(dòng)相）為流動(dòng)相2、薄層色譜檢識(shí)、薄層色譜檢識(shí): 吸附吸附TLC：硅膠為吸附

48、劑，氯仿：硅膠為吸附劑，氯仿-甲醇甲醇-冰醋酸冰醋酸（85:13:2）、二氯甲烷）、二氯甲烷-甲醇甲醇-甲酰胺甲酰胺(80:19:1)、乙酸、乙酸乙酯乙酯-甲醇甲醇-水水(8:5:5)等溶劑系統(tǒng)為展開劑等溶劑系統(tǒng)為展開劑分配分配TLC(反相硅膠反相硅膠):以硅藻土、纖維素為支持劑，以以硅藻土、纖維素為支持劑，以甲酰胺、二甲基甲酰胺或丙二醇為固定相，氯仿甲酰胺、二甲基甲酰胺或丙二醇為固定相，氯仿-丙酮丙酮（4:1）、氯仿）、氯仿-正丁醇正丁醇(19:1)等容積系統(tǒng)展開。等容積系統(tǒng)展開。常用顯色劑：常用顯色劑：2%的的3,5-二硝基苯甲酸乙醇溶液與二硝基苯甲酸乙醇溶液與2mol/LKOH溶液溶液

49、等體積混合。等體積混合。1%的苦味酸水溶液與的苦味酸水溶液與10%NaOH水溶液（水溶液（95:5）混合）混合 噴后于噴后于90100烘烘45分鐘。分鐘。2%三氯化銻的氯仿溶液三氯化銻的氯仿溶液,噴后與噴后與100 烘烘5分鐘分鐘,各種各種 強(qiáng)心苷及苷元顯示不同顏色。強(qiáng)心苷及苷元顯示不同顏色。五、強(qiáng)心苷的波譜特征五、強(qiáng)心苷的波譜特征 （一）（一） 紫外光譜紫外光譜 用于甲型與乙型強(qiáng)心苷及苷元的鑒別用于甲型與乙型強(qiáng)心苷及苷元的鑒別 202221OO23ROOHa202221OO23ROOHa202221OO23ROOHa21OO24222320ROOHmax 295 300nm ( lg 3.93 )max 217220nm ( lg 4.204.24)若甲型強(qiáng)心苷分子中有若甲型強(qiáng)心苷分子中有16(17)16(17)與內(nèi)酯環(huán)共軛則與內(nèi)酯環(huán)共軛則max紅移至紅移至270nm,270nm,若分子中有若分子中有 14(15),16(17)14(15),16(17)雙烯與內(nèi)酯環(huán)共軛則雙烯與內(nèi)酯環(huán)共軛則max紅移至紅移至330nm330nmv強(qiáng)心苷的不飽和內(nèi)酯的羰基在強(qiáng)心苷的不飽和內(nèi)酯的羰基在1800