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文檔簡介

1、根底生物學(xué)技術(shù)實驗 丁曦鈺 141140015C1丁彥霞 謝鴻鑫 周浩天 2021-10-12光學(xué)顯微鏡的使用及動物組織切片觀察丁曦鈺 141140015一、 實驗?zāi)康?、 了解顯微鏡的工作原理,學(xué)習(xí)光學(xué)顯微鏡的使用。2、 根本組織切片的觀察與記錄。3、 實驗報告的書寫要求。4、 生物量級、生物系統(tǒng)及生物類別。二、 實驗原理1. 光學(xué)顯微鏡的工作原理:標(biāo)本經(jīng)物鏡和管鏡放大后,形成倒立的實像:實像經(jīng)目鏡 再次放大后,形成放大的虛像。2. 光學(xué)顯微鏡的使用:先將低倍物鏡的位置固定好,然后放置標(biāo)本片,轉(zhuǎn)動反光鏡,調(diào)好光線,將物鏡提高,向下調(diào)至看到標(biāo)本,再用細(xì)調(diào)對準(zhǔn)焦距進(jìn)行觀察。除少數(shù)顯微鏡外,聚光鏡

2、的位置都要放在最高點。如果視野中出現(xiàn)外界物體的圖像,可以將聚光鏡稍微下降,圖像就可以消失。聚光鏡下的虹彩光圈應(yīng)調(diào)到適當(dāng)?shù)拇笮?,以控制射入光線的量,整理增加明暗差。3. 生物量級:殘基氨基酸,核苷酸,脂肪酸,甘油生物大分子亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)subcellular structure細(xì)胞器細(xì)胞組織器官系統(tǒng)種群群落生態(tài)系統(tǒng)生物圈物理量級:根本粒子夸克,輕子電子自旋反平行質(zhì)子原子分子物體:生物量級天體星系星云宇宙宇宙膜4. 各胚層細(xì)胞發(fā)育走向1) 外胚層:神經(jīng)系統(tǒng)腦、脊髓、脊神經(jīng)、自主神經(jīng)、視網(wǎng)膜、內(nèi)耳、腎上腺髓質(zhì),表皮毛發(fā)、汗腺、油脂腺、乳腺、晶體、口腔黏膜2) 中胚層:肌肉、骨骼、血液、真皮、心臟血管系統(tǒng)

3、、泌尿生殖系統(tǒng)以及結(jié)締組織固有結(jié)締組織、骨與軟骨、血液3) 內(nèi)胚層:消化系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)的上皮和有關(guān)腺體胰,肝、膀胱上皮 5分辨力:能分辨最小間隔的能力,單位距離人眼距目標(biāo)物25cm處R=Knsin(a2) K是透鏡品質(zhì),光鏡在0.611.0之間,光波波長或電子波長,n是光鏡介質(zhì)折射率,a是鏡口角樣本對物鏡的鏡口張角,一般<180度,sina/2<1。 三、 動物與器材1. 實驗材料:13張組織標(biāo)本2. 實驗設(shè)備:光學(xué)顯微鏡生物顯微鏡四、 方法與步驟1. 實驗分組2. 實驗原理講解3. 實驗報告要求介紹4. 使用顯微鏡進(jìn)行操作觀察1安放顯微鏡2檢查顯微鏡是否有故障3插入電源4對光,調(diào)

4、節(jié)亮度5放入組織切片,調(diào)焦6低倍鏡觀察7換高倍鏡,調(diào)焦,觀察,記錄5. 氣管的假復(fù)層纖毛上皮五、 實驗結(jié)果分析杯狀細(xì)胞細(xì)胞核纖毛六、 實驗結(jié)論1. 被覆上皮是指覆蓋于體表以及各種腔、道、管、囊的內(nèi)外外表的上皮。貼附于心臟、血管和淋巴管腔面的上皮又稱為內(nèi)皮(endothelium)。貼附于胸膜、腹膜、心包膜處的上皮又稱為間皮(mesothelium)。由于內(nèi)皮、間皮惡變形成的是肉瘤,故在病理學(xué)的概念里,常將內(nèi)皮、間皮與一般的上皮區(qū)分開,而在其它語境下,內(nèi)皮、間皮與一般的上皮均可視為上皮組織的具體形式。2. 假復(fù)層纖毛柱狀上皮(pseudostratified ciliated columnar

5、epithelium)屬于被覆上皮,由柱狀細(xì)胞、棱形細(xì)胞和錐體形細(xì)胞組成。細(xì)胞高矮不等,細(xì)胞核的位置參差不齊,好似有多層,但每個細(xì)胞的基底部都附于基膜上,所以稱假復(fù)層。柱狀細(xì)胞可達(dá)游離面,細(xì)胞核的位置較高,細(xì)胞向基底部伸入時,胞體逐漸變細(xì);錐體細(xì)胞基細(xì)胞緊靠基膜,細(xì)胞核位置較低于上皮深部,為未分化的細(xì)胞,有增殖分化能力,可分化成前述兩種細(xì)胞。3. 梭形細(xì)胞位于柱狀和錐體細(xì)胞之間,細(xì)胞核位于中部,基底部附著于基膜。在柱狀細(xì)胞的游離面附有能擺動的纖毛,故這種上皮稱假復(fù)層纖毛柱狀上皮,主要分布在鼻粘膜呼吸部、氣管、支氣管、輸卵管。每個纖毛細(xì)胞柱狀細(xì)胞約有三百根纖毛,核卵圓形,位于細(xì)胞中部,纖毛向咽側(cè)

6、快速擺動,將粘液以及附于其上的塵粒細(xì)菌等推向咽部被咳出,故纖毛細(xì)胞對凈化吸入空氣有極大作用。4. 在假復(fù)層纖毛柱狀上皮細(xì)胞之間有分泌粘液的杯狀細(xì)胞,其結(jié)構(gòu)與腸道上皮的杯狀細(xì)胞類似,其頂部細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有大量粘原顆粒,細(xì)胞分泌的黏蛋白為大分子蛋白,與管壁內(nèi)腺體的分泌物在上皮外表構(gòu)成一道粘液性屏障,粘附吸入空氣中的異物,借助于纖毛有節(jié)律性的擺動,將含有灰塵、細(xì)菌的粘液排除至喉部,其溶解吸入的SO2、CO等有害氣體,也隨粘液咳出。此外,粘液還有濕潤枯燥空氣的作用。七、 問題解答1. 什么是雙目顯微鏡?雙目體視顯微鏡是利用雙通道光路,為左右兩眼提供一個具有立體感的圖像。它實質(zhì)上是兩個單鏡筒顯微鏡并列放置,

7、兩個鏡筒的光軸構(gòu)成相當(dāng)于人們用雙目觀察一個物體時所形成的視角,以此形成三維空間的立體視覺圖像。2. 干預(yù)顯微鏡和熒光顯微鏡的工作原理?1熒光顯微鏡可觀察細(xì)胞中的熒光。當(dāng)用激發(fā)光照射時,細(xì)胞發(fā)射熒光。這種熒光被稱為原發(fā)熒光,由細(xì)胞中固有的熒光物質(zhì)比方復(fù)原輔酶I(NADH) 發(fā)出的。另一種是用熒光染料對細(xì)胞中的成分進(jìn)行特異染色,再經(jīng)激發(fā)光照射。照射后經(jīng)化學(xué)反響使組織中的非熒光物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)闊晒馕镔|(zhì)所發(fā)的熒光成為誘發(fā)熒光。其他的還有免疫熒光等。2微分干預(yù)顯微鏡術(shù)是用平面偏振光經(jīng)棱鏡折射后分成兩束,于不同時間經(jīng)過樣品的相鄰部位,此后又經(jīng)另一棱鏡將此兩束光集合,使樣品厚度的微小區(qū)別形成明暗差異,增強(qiáng)樣品反差并具立體感。3. 什么是假復(fù)層?假復(fù)層柱狀纖毛上皮由上下不等、形態(tài)不同的細(xì)胞組成。所有細(xì)胞的基底部都附著在基膜上,但只有高的柱狀上皮細(xì)胞可達(dá)上皮的游離面,其余錐狀和梭形細(xì)

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