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1、基因工程重點(diǎn)馬春玲2011年11月選擇(3030分)分) 名詞解釋(3030分)分) 簡(jiǎn)答(4040分)分) 緒論(緒論(0-5分)分)1、基因工程的概念2、基因工程誕生理論三大發(fā)現(xiàn) 和技術(shù)的三大發(fā)明3、基因工程的基本過程第二章第二章 基因工程工具酶(基因工程工具酶(10-20分)分)1、工具酶定義2、限制性核酸內(nèi)切酶 限制和修飾作用, 基因工程中,受體菌株的表型 定義 類型 命名 基本特性(識(shí)別序列、切割方式)3、連接酶 定義 連接條件 種類4、DNA聚合酶定義分類、來源大腸桿菌DNA聚合酶I:基本性質(zhì)、基本用途Klenow酶:基本性質(zhì)、基本用途T4-DNA聚合酶:基本性質(zhì)、基本用途T7-D
2、NA聚合酶:基本性質(zhì)、基本用途反轉(zhuǎn)錄酶:基本性質(zhì)、基本用途Taq DNA聚合酶:基本性質(zhì)、基本用途 5、末端脫氧核苷酰轉(zhuǎn)移酶:定義、 基本性質(zhì)、基本用途6、核酸酶:定義、分類 核糖核酸酶A、核糖核酸酶H:特點(diǎn) 脫氧核糖核酸酶I :特點(diǎn)、基本用途 S1核酸酶:基本特性7、堿性磷酸酶:基本用途 第三章第三章 基因工程載體基因工程載體(10-20(10-20分分) ) 1、基因工程載體的定義、功能、應(yīng)具備的條件2、質(zhì)粒載體:質(zhì)粒載體定義、組成元件;質(zhì)粒特性,理想質(zhì)粒載體的必備條件常用的質(zhì)粒載體類型(各類型定義)pBR322 pUC18/193、噬菌體載體 - DNA載體載體:構(gòu)建、特點(diǎn)4、柯斯質(zhì)粒
3、(定義)5、人工染色體(定義)第四章第四章 核酸操作的基本技術(shù)核酸操作的基本技術(shù)(10分分)1、核酸提取技術(shù)基本原理基因組DNA提取、質(zhì)粒提取、RNA提取基本原理2、核酸的檢測(cè)與保存DNA/RNA的質(zhì)量鑒定方法電泳指示劑和DNA染色劑:類型、作用4、核酸雜交技術(shù)定義類型:各種類型特點(diǎn)雜交三要素探針:定義、分類、標(biāo)記方法 3、凝膠電泳技術(shù)定義、原理、分類瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳:特點(diǎn)電泳指示劑和DNA染色劑:類型、作用第五章第五章 PCR技術(shù)技術(shù)(10分左右分左右)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR:定義PCR擴(kuò)增原理PCR反應(yīng)過程PCR反應(yīng)體系PCR反應(yīng)條件PCR技術(shù)的特點(diǎn)PCR的種類:了解反向P
4、CR、兼并PCR的原理和應(yīng)用 第六章第六章 DNA文庫(kù)的構(gòu)建和目的基因的文庫(kù)的構(gòu)建和目的基因的篩選篩選(5-10分分) 1、基因文庫(kù)定義、組成、2、基因組DNA文庫(kù):定義、基本程序3、cDNA文庫(kù):定義、基本程序4、基因組DNA文庫(kù)與cDNA文庫(kù)的比較5、目的基因的獲得:未知核酸序列基因的獲得方法已知核酸序列基因的獲得方法 第七章第七章 DNA體外重組與基因轉(zhuǎn)移體外重組與基因轉(zhuǎn)移(5-10分左右分左右)1、DNA分子體外重組技術(shù):定義、需要的工具酶2、連接類型3、受體細(xì)胞:定義、應(yīng)具備的條件4、轉(zhuǎn)化:定義、原理、步驟5、轉(zhuǎn)染:定義、步驟6、高壓電穿孔轉(zhuǎn)化:原理、影響因素 第八章第八章 重組子的篩選與鑒定重組子的篩選與鑒定(10分左右分左右)1、轉(zhuǎn)化子、重組子、目的重組子:定義2、重組體篩選和鑒定方法:篩選方法的選擇與設(shè)計(jì)依據(jù)3各種篩選方法原理和步驟(掌握3種以上 )第九章第九章 外源基因的表達(dá)外源基因的表達(dá)(10分左右分左右)1、基因表達(dá)定義2、外源基因通過表達(dá)產(chǎn)生目的蛋白的目的3、表達(dá)載體、表達(dá)系統(tǒng):定義4、外源基因在原核細(xì)胞中表達(dá)具備條件5、表達(dá)載體的一般組成(基本基因元件及各個(gè)元件的主要功能)6、常用的大腸桿菌表達(dá)載體、常用的大腸桿菌表達(dá)載體7、提高外源基因在大腸桿菌中表、提高外源基因在大腸桿菌中表達(dá)效率的途徑達(dá)效率的途徑8、提高外源基因
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