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1、基因工程專題復(fù)習(xí)1. 1976 年,美國(guó)的 H.Boyer 教授首次將人的生長(zhǎng)激素釋放抑制因子的基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌并獲得了表達(dá), 這是人類第一次獲得轉(zhuǎn)基因產(chǎn)物。其中的“表達(dá)”是指該基因在大腸桿菌體內(nèi)()A.進(jìn)行了復(fù)制B能隨大腸桿菌的繁殖傳遞給后代C.能合成生長(zhǎng)激素釋放抑制因子D能合成人的生長(zhǎng)激素2 控制大腸桿菌的主要性狀的基因、大腸桿菌的抗藥基因、控制酵母菌主要性狀的基因分別位于()1質(zhì)粒上核區(qū) DNA 上染色體 DNA 上A.B CD3.基因工程是在 DNA 分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)施工的。在基因操作的步驟中,不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)的是()A.人工合成目的基因B目的基因與運(yùn)載體結(jié)合C.將目的基因?qū)胧荏w
2、細(xì)胞D目的基因的檢測(cè)和表達(dá)4改良缺乏某種抗病性的水稻品種,不宜采用的方法是()A 誘變育種B 單倍體育種c 基因工程育種d 雜交育種5 利用外源基因在受體細(xì)胞中表達(dá),可生產(chǎn)人類所需要的產(chǎn)品。下列各項(xiàng)中能說(shuō)明目的基因完成了在受體細(xì)胞中表達(dá)的是()A 棉花二倍體細(xì)胞中檢測(cè)到細(xì)菌的抗蟲(chóng)基因B.大腸桿菌中檢測(cè)到人胰島素基因及其mRNAC.山羊乳腺細(xì)胞中檢測(cè)到人生長(zhǎng)激素DNA 序列D.酵母菌細(xì)胞中提取到人干擾素蛋白6 利用基因工程技術(shù)可使大腸桿菌生產(chǎn)人的胰島素。下列相關(guān)敘述,正確的是()A. 人和大腸桿菌在合成胰島素時(shí),轉(zhuǎn)錄和翻譯的場(chǎng)所是相同的B. DNA 連接酶能把兩個(gè)黏性末端經(jīng)堿基互補(bǔ)配對(duì)后留下的縫
3、隙“縫合”C. 通過(guò)檢測(cè),大腸桿菌中沒(méi)有胰島素產(chǎn)生則可判斷重組質(zhì)粒未導(dǎo)入受體菌D. 人和大腸桿菌在合成胰島素時(shí),用于轉(zhuǎn)錄的模板鏈?zhǔn)窍嗤?某考古學(xué)家在西伯利亞泰加林地區(qū)的冰中, 發(fā)現(xiàn)了一種冰凍的已滅絕的巨大動(dòng)物的肌肉。 他想了解該 巨型動(dòng)物的 DNA與現(xiàn)今印度大象的 DNA 的相似性,于是做了如下檢測(cè)工作,其中正確的操作步驟及順序 是()1降低溫度,檢測(cè)處理后形成的雜合DNA 雙鏈區(qū)段通過(guò) PCR 技術(shù)擴(kuò)增巨型動(dòng)物和大象的DNA把巨型動(dòng)物的 DNA 導(dǎo)入大象的細(xì)胞中在一定的溫度條件下,將巨型動(dòng)物和大象的DNA 水浴共熱A.B. C D 8下列有關(guān)限制性內(nèi)切酶識(shí)別的敘述,不正確的是()A. 從反
4、應(yīng)類型來(lái)看,限制性內(nèi)切酶催化的是一種水解反應(yīng)B.限制性內(nèi)切酶的活性受溫度、pH 的影響C.一種限制性內(nèi)切酶只能識(shí)別雙鏈DNA 中某種特定的脫氧核苷酸序列D.限制性內(nèi)切酶識(shí)別序列越短,則該序列在DNA 中岀現(xiàn)的幾率就越小9 下圖表示一項(xiàng)重要的生物技術(shù),對(duì)圖中物質(zhì)a、b、A. a 通常存在于細(xì)菌體內(nèi),目前尚未發(fā)現(xiàn)真核生物體 內(nèi)有類似的結(jié)構(gòu)B.b 識(shí)別特定的核苷酸序列,并將A 與 T 之間的氫鍵 切開(kāi)C. c 連接雙鏈間的 A 和 T,使黏性末端處堿基互補(bǔ)配對(duì)D.若要獲得真核生物的d,則一般采用人工合成方法10.限制性內(nèi)切酶能識(shí)別特定的DNA 序列并進(jìn)行剪切,行剪切?,F(xiàn)以 3 種不同的限制性內(nèi)切酶(
5、A、B、C)對(duì)一 6. 2Kb 大小的線狀不同的限制性內(nèi)切酶可以對(duì)不同的核苷酸序列進(jìn)DNA 進(jìn)行剪切后。用凝膠電泳分離各核酸片段,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示:A5CA BA t rc、d 的描述,正確的是iillBiiQ.0.3I_ X54.0請(qǐng)問(wèn):可正確表示 3 種不同的限制性內(nèi)切酶在DNA 片段上的切點(diǎn)位置的是iAkcAc0. Jn,72桿0.001 E1.2AfcAi.0-72.6CL00. 51.2C.AjcC iU 1曰n. 51 AcA匸o.i7.0. 9OLB1.211.右圖是用 DNA 測(cè)序儀測(cè)岀的某人 DNA 片段的堿基排列順序。下列四幅圖是 DNA 測(cè)序儀測(cè)岀的另外四人 DNA片段的
6、堿基排列順序,請(qǐng)認(rèn)真比較這四幅圖,其中與右圖堿基排列順序最相似的是().是 c,是 b,是 a B .是 a 和 b,是 a,是 b.是 a 和 b,是 b,是 a D .是 c,是 a,是 b(4 分)下列為利用基因工程培育抗蟲(chóng)棉過(guò)程示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答下列有關(guān)問(wèn)題:圖中科學(xué)家在進(jìn)行 操作時(shí),要用 _ 分別切割運(yùn)載體和目的基因,運(yùn)載體的黏性末端與目的基因 DNA 片段的黏性末端通過(guò) _ 原則而結(jié)合。皿是導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)、篩選獲得一株有抗蟲(chóng)特性的轉(zhuǎn)基因植株。經(jīng)分析,該植株三一ABCD12. 現(xiàn)有一長(zhǎng)度為 3000 堿基對(duì)(bp)的線性 DNA 分子,用限制性核酸內(nèi)切酶酶切后,進(jìn)行凝
7、膠電泳,使降 解產(chǎn)物分開(kāi)。用酶 H 單獨(dú)酶切,結(jié)果如圖丨。用酶 B 單獨(dú)酶切,結(jié)果如圖 2。結(jié)果如圖 3。下列相關(guān)敘述正確的是()A. 酶 H 有 2 個(gè)識(shí)別位點(diǎn)和切割位點(diǎn)B. 酶 B 和酶 H 同時(shí)切割時(shí),有 3 個(gè)識(shí)別位點(diǎn)和切割位點(diǎn)C. 酶 B 和酶 H 同時(shí)切割時(shí),能產(chǎn)生完全相同的酶切片段D. 酶 B 和酶 H 有相同的識(shí)別和切割位點(diǎn)13. 質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體,它存在于許多細(xì)菌體內(nèi)。粒上有標(biāo)記基因如右下圖所示,通過(guò)標(biāo)記基因可以推知外源基因(目的基因)是否轉(zhuǎn)移成功。外源基因插入的位置不同,細(xì)菌在培 養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況也不同,下表是外源基因插入位置(插入點(diǎn)有b、c,a 為抗氨芐青霉
8、素基因, 情況,a、細(xì)菌在含氨卞青霉素 培養(yǎng)基上生長(zhǎng)情況細(xì)菌在含四環(huán)素 培養(yǎng)基上生長(zhǎng)情況:能生長(zhǎng)能生長(zhǎng)能生長(zhǎng)不能生長(zhǎng):不能生長(zhǎng)能生長(zhǎng)用酶 H 和酶 B 同時(shí)酶切,質(zhì)粒AC14、b 為抗四環(huán)素基因),請(qǐng)根據(jù)表中提供細(xì)菌的生長(zhǎng) 推測(cè)三種重組后細(xì)菌的外源基因插入點(diǎn)正確的一組是(質(zhì)含有一個(gè)攜帶目的基因的DNA 片段,因此可以把它看作是雜合子。理論上,在該轉(zhuǎn)基因植株自交產(chǎn)生F1中,仍具有抗蟲(chóng)特性的植株占總數(shù)的17.花的纖維有白色的,也有 紫色的;植株有因高酚而抗蟲(chóng) 的,也有低酚不抗蟲(chóng)的, 控制 這兩對(duì)性狀的基因分別位于 不同的同源染色體上, 彩色棉 作為一種具有天然顏色的特 殊棉花,它不需要染色就可制
9、成各種原色棉布,低酚棉是一 種特殊類型的棉花品種,具有 棉纖維酚含量低,對(duì)人體皮膚白色紫色P:低酚不抗蟲(chóng)棉X高酚抗雖棉-離體休細(xì)胞、蘇云金芽抱桿菌璟董白基因轉(zhuǎn)基因_ 辣色細(xì)胞低酚抗蟲(chóng)棉將上述抗蟲(chóng)棉植株的后代種子種植下去后,常會(huì)有很多植株不再具有抗蟲(chóng)特性,原因是15.應(yīng)用生物工程技術(shù)能獲得人們需要的生物新品種或新產(chǎn)品。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題:無(wú)限増殖調(diào)控基困CpiG)d II檢測(cè)in篩選抗蟲(chóng)基因- 棉花受體細(xì)胞型抗蟲(chóng)棉重組Ti質(zhì)粒(1)_ 轉(zhuǎn)基因??赏ㄟ^(guò)分泌的乳汁來(lái)生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素, 須有_ 。過(guò)程培養(yǎng)到一定階段,可以采用轉(zhuǎn)基在基因表達(dá)載體中, 人生長(zhǎng)激素基因的前端必 技術(shù),培育岀多頭完全相同的(2)
10、prG 能激發(fā)細(xì)胞不斷分裂,通過(guò)基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來(lái)制備單克隆抗體,H最可能是細(xì)胞,皿代表的細(xì)胞具有 _ 的特點(diǎn)(3)在抗蟲(chóng)棉培育過(guò)程中,進(jìn)行過(guò)程最常用的方法是_ 。16.番茄果實(shí)成熟過(guò)程中,某種酶(PG)開(kāi)始合成并顯著增加,促使果實(shí)變紅變軟,但不利于長(zhǎng)途運(yùn)輸和長(zhǎng)期保鮮??茖W(xué)家利用反義RNA 技術(shù)(見(jiàn)圖解),可有效解決此問(wèn)題。該技術(shù)的核心是:從番茄體細(xì)胞中獲得指導(dǎo) PG 合成的信使 RNA 繼而以該信使 RNA 為模板,人工合成反義基因并將之導(dǎo)入離體番茄體細(xì)胞,經(jīng)組織培養(yǎng)獲得完整植株;新植株在果實(shí)發(fā)育過(guò)程中,反義基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的反義RNA 與細(xì)胞原有 mRNARNA 阻止靶 mRNA 進(jìn)一
11、步翻譯形成 PQ 從而達(dá)到抑制果實(shí)成熟的目的。請(qǐng)結(jié)合 細(xì)胞驚有族因(靶墓因不能合成基因的蛋伺產(chǎn)樹(shù)形成互補(bǔ)取苗RNAV不能與核糖體結(jié)合擊 彼RNAIW怏理降解(1)反義基因像一般基因一樣是一段雙鏈的DNA 分子, 合成該分子的第一條鏈時(shí),使用的模板是細(xì)胞質(zhì)中的信使 RNA 原料是四種 _ ,所用的酶是 _。(2)開(kāi)始合成的反義基因第一條鏈?zhǔn)桥c模板RNA 連在一起的雜交雙鏈,通過(guò)加熱去除RNA 然后再以反義基因第一條鏈為模板合成第二條鏈,這樣一個(gè)完整的反義基因被合成。若要以完整雙鏈反義基因莧隆成百上千的反義基因,所用復(fù)制方式為_(kāi)。(3)_如果指導(dǎo)番茄合成 PG的信使RNA的減基序列是一 A U C
12、 C A G- G- U C,那么,PG 反義 基因的這段堿基對(duì)序列是(4)_ 將人工合成的反義基因?qū)敕讶~肉細(xì)胞原生質(zhì)體的運(yùn)輸工具是_ ;該目的基因與運(yùn)輸工具相結(jié)合需要使用的酶有_ ;在受體細(xì)胞中該基因指導(dǎo)合成的最終產(chǎn)物是_ .人的生長(zhǎng)激柬墓因轉(zhuǎn)人生涇滋素基因牛目的基因單克隆抗悴(靶 mRNA 互補(bǔ)形成雙鏈圖解回答:ffi mRNA反文RNA一 合成的反文基因無(wú)負(fù)影響的優(yōu)點(diǎn),但低酚棉由于酚含量低,使得低酚棉的抗蟲(chóng)能力普遍下降?,F(xiàn)有白色低酚不抗蟲(chóng)棉及紫色高酚抗蟲(chóng)棉的兩種純合品種,欲培育岀紫色低酚抗蟲(chóng)棉品種。某育種機(jī)構(gòu)設(shè)計(jì)的育種方案如圖所示,請(qǐng)回答該方案中的相關(guān)問(wèn)題:(1)_ 從理論上講,F(xiàn)2
13、群體中的基因型、表現(xiàn)型及其中純種依次為 _ 種。截止 F2的這一階段在育種工作上經(jīng)常采用,它依據(jù)的遺傳原理是_。(2)要制備岀所需要的轉(zhuǎn)基因細(xì)胞,作為其中的受體細(xì)胞應(yīng)從表現(xiàn)型為的棉株上獲得,而作為所用的目的基因,一般應(yīng)先在細(xì)胞外形成_ 再導(dǎo)入受體細(xì)胞,為檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入,一般是通過(guò) _ 是否表達(dá)予以確定。(3)由轉(zhuǎn)基因細(xì)胞培育紫色低酚抗蟲(chóng)棉的過(guò)程,所采用的生物工程技術(shù)為_(kāi)。(4) 用此方案培育的這種品種不一定是純合體,若要快速獲得紫色低酚抗蟲(chóng)棉的純合體,可通過(guò)_ 育種,具體操作方法是: _ 。18質(zhì)粒是基因工程中常用的運(yùn)載體,存在于許多細(xì)菌及酵母菌等生物中。請(qǐng)根據(jù)原理和材料用具,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)選
14、擇運(yùn)載體質(zhì)粒,明確質(zhì)粒的抗菌素基因所控的抗菌素類別。實(shí)驗(yàn)原理:作為運(yùn)載體的質(zhì)粒,須有標(biāo)記基因,這一標(biāo)記基因可以是抗菌素抗性基因,故凡有抗菌素抗性的細(xì)菌,其質(zhì)??蛇x作運(yùn)載體。材料用具:青霉素、10 萬(wàn)單位/ mL 四環(huán)素溶液、菌種試管、滅菌的含細(xì)菌培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿、酒精燈、 接種環(huán)、一次性注射器、蒸餾水、恒溫箱等。方法步驟:第一步:取三個(gè)含細(xì)菌培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿并標(biāo)1、2、3 號(hào),在酒精燈旁,用三支注射器分別注入1ml 蒸餾水、青霉素液、四環(huán)素液,并使之在整個(gè)培養(yǎng)基表面分布均勻。第二步:_,_ 。第三步:一,。預(yù)期結(jié)果:_ ,2_,3_,4_。19.豇豆對(duì)多種害蟲(chóng)具有抗蟲(chóng)能力,根本原因是豇豆體內(nèi)具有胰
15、蛋白酶抑制劑基因(CpTI 基因)??茖W(xué)家將其轉(zhuǎn)移到水稻體內(nèi)后,卻發(fā)現(xiàn)效果不理想,主要原因是CpT I 蛋白質(zhì)的積累量不足。經(jīng)過(guò)在體外對(duì) CpTI基因進(jìn)行了修飾后,CPTI 蛋白質(zhì)在水稻中的積累量就得到了提高。修飾和表達(dá)過(guò)程如下圖所示: rCpTIl白質(zhì)請(qǐng)根據(jù)以上材料,回答下列問(wèn)題:(1) CpTI 基因是該基因工程中的 _基因,“信號(hào)肽,序列及“內(nèi)質(zhì)網(wǎng)滯留信號(hào)”序列的基本組成單位是_。在過(guò)程中,首先要用_酶切開(kāi),暴露出_ ,再用_酶連接。(2) 在該基因工程中,供體細(xì) _ ,受體細(xì)胞是_ 。(3) 過(guò)程稱為_(kāi) 。(4) 檢測(cè)修飾后的 CpTI 基因是否表達(dá)的最好方法是 _。(5) 當(dāng)前,轉(zhuǎn)基
16、因大豆,轉(zhuǎn)基因棉花等轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物已經(jīng)進(jìn)入了我們的生活,請(qǐng)從生物學(xué)角度談轉(zhuǎn)基因農(nóng) 作物可能帶來(lái)的利與弊(各舉一例)信號(hào)肚“內(nèi)質(zhì)網(wǎng)滯留序列T工基因 信號(hào)岸列J修飾后的CpTlg因答案:1 -13 CACBD BCDDD BCA14、 同一種限制性內(nèi)切酶堿基互補(bǔ)配對(duì)原則3/4發(fā)生性狀分離2 分) 既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特定抗體 ( 2 分)( 3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(2 分)16、( 1)脫氧核苷酸;逆轉(zhuǎn)錄酶 (2)半保留復(fù)制TAG GTCCAG( 3)(提示:基因是雙鏈結(jié)構(gòu))一 ATCCAGGT C( 4)質(zhì)粒(或運(yùn)載體、病毒) ;限制性內(nèi)切酶和 DNA 連接酶;(反義) RNA17、( 1) 9、 4、
17、 4(全對(duì) 2 分,否則不給分) 基因重組(2)紫色低酚不抗蟲(chóng)棉(必需要有不抗蟲(chóng)三字,否則不給分)重組 DNA (或重組質(zhì)粒) 標(biāo)記基因( 3)植物組織培養(yǎng)( 4)單倍體 先用紫色低酚抗蟲(chóng)棉的花藥離體培養(yǎng)得單倍 體幼苗,再用秋水仙素處理成純合體。18、第二步:將接種環(huán)在酒精燈上灼燒,并在酒精燈火焰旁接種,并對(duì)三個(gè)培養(yǎng)皿分別接種;第三步:將接種后的三個(gè)培養(yǎng)皿放人 37C恒溫箱 24 小時(shí)。預(yù)期結(jié)果:11 號(hào)培養(yǎng)皿中正常生長(zhǎng),2、3 號(hào)培養(yǎng)皿中細(xì)菌能存活者說(shuō)明有抗性基因,反之則無(wú);22、3 號(hào)中僅 2 號(hào)存活,說(shuō)明該細(xì)菌有青霉素抗性基因;32、3 號(hào)中僅 3 號(hào)存活,說(shuō)明該細(xì)菌有四環(huán)素抗性基因;42、3 號(hào)中都能存活,說(shuō)明該菌質(zhì)粒上有兩種抗菌素基因。19
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