簡述發(fā)酵罐連續(xù)生產(chǎn)液體菌種工藝

1、發(fā)酵罐大小一般為煮料罐的 3 倍。其使用制種技術(shù)過程以杏鮑菇為例介紹如下：空消：洗罐新購的發(fā)酵罐或者使用過的發(fā)酵還煮了茶葉蛋給我們作為第二天的早餐。同學(xué)都感嘆道：我們不是土豪，但我們罐，在生產(chǎn)之前，都必須進(jìn)行徹底的清洗后方可使用。用過的發(fā)酵罐在罐體的內(nèi)壁和管內(nèi)所有接觸液體菌種的管件表面都有可能粘附污物，洗罐的目的就是清除罐內(nèi)的污垢和菌苔及培養(yǎng)料的殘余物，疏通進(jìn)氣口，排料口等。利用高溫高壓蒸汽進(jìn)行發(fā)酵系統(tǒng)滅菌；清洗干凈后將其密閉完成向煮料罐加水至總?cè)莘e的 70%-80%，打開電源開關(guān)，將溫度設(shè)定到 121 度，在發(fā)酵罐內(nèi)加水至總?cè)莘e的 40%將溫度設(shè)定到 118-120 度；達(dá)到設(shè)定溫度后，關(guān)閉

2、進(jìn)入二級過濾器的空氣總閥門，還煮了茶葉蛋給我們作為第二天的早餐。同學(xué)都感嘆道：我們不是土豪，但我們打開蒸汽總閥門，讓蒸汽依次進(jìn)入；級過濾器，最后進(jìn)入發(fā)酵罐，對過濾器及無菌空氣管道等部位進(jìn)行滅菌，這時每隔五分鐘左右排一次過濾器下面的冷凝水； 30 分鐘后將煮料罐出料口閥門打開少許將其滅菌。然后，打開進(jìn)入過料管道的蒸汽總閥門，用蒸汽將過料管道滅菌，40 分鐘后，總時間，關(guān)閉進(jìn)入二級過濾器的蒸汽閥門，打開空氣總閥門，并將發(fā)酵罐的進(jìn)氣閥門關(guān)閉，打開空氣壓縮機(jī)，通入無菌空氣吹干濾芯；然后，打開接種槍開關(guān)，將發(fā)酵罐出種口閥門打開少許，還煮了茶葉蛋給我們作為第二天的早餐。同學(xué)都感嘆道：我們不是土豪，但我們對

3、其預(yù)熱，然后打開進(jìn)入接種槍管道的蒸汽閥門，用蒸汽對出種管道及接種槍進(jìn)行滅菌，30 分鐘后關(guān)閉接種槍開關(guān)，用 75%酒精袋密閉備用，后將灌頂接種口及呼吸器打開少許對其滅菌 30分鐘后關(guān)閉灌頂所有閥門，用 75%酒精棉球密封接種口；最后，將罐內(nèi)高溫高壓水從排污口，取樣口不少于 30 分鐘排出，當(dāng)罐內(nèi)壓力低于0.05MPa 后，打開進(jìn)氣閥門，通入無菌空氣待罐體吹涼后保壓備用。液體培養(yǎng)基制作及滅菌：還煮了茶葉蛋給我們作為第二天的早餐。同學(xué)都感嘆道：我們不是土豪，但我們配方，杏鮑菇發(fā)酵罐常用配方黃豆 1%、淀粉0.5%、葡萄糖 1%、蔗糖 2%、蛋白胨 0.15%、磷酸二氫鉀 0.15%、硫酸鎂 0.0

4、75%、消泡劑 0.15%；配制及滅菌：培養(yǎng)基裝量視煮料罐大小裝入總?cè)萘康?70-80%。首先，將煮料罐內(nèi)加水至淹沒加熱管 3-5 厘米后開始加熱，水質(zhì)太差需處理，黃豆提前浸泡后打漿與淀粉其他原料混合在一起，放在不銹鋼或鋁鍋內(nèi)熬成糊狀母液；當(dāng)水加熱至 90度時加入消泡劑，并打開供氧機(jī)吹少量無菌空氣后，加入母液，并用清水沖洗進(jìn)料口；當(dāng)加熱至還煮了茶葉蛋給我們作為第二天的早餐。同學(xué)都感嘆道：我們不是土豪，但我們95 度時關(guān)閉供氧機(jī)，進(jìn)料口向外排出大量蒸氣時關(guān)閉灌頂所有閥門，將溫控儀表設(shè)定到 121 度，將滅菌繼電器設(shè)定到 2400 秒，打開計(jì)時開關(guān)；在計(jì)時期間將降溫器內(nèi)加滿冷水降溫循環(huán)管道連接好，

5、熱交換器通入循環(huán)水，當(dāng)溫度升到 121度后，將煮料罐頂部排氣閥門及進(jìn)料口閥門打開一點(diǎn)，讓蒸汽排出一些對其滅菌；滅菌計(jì)時結(jié)束，關(guān)閉頂部所有閥門，從罐底排污口以 5-10 分鐘內(nèi)排除 300-500 毫升培養(yǎng)基，然后打開煮料罐出料口閥門，讓無菌液，通過降溫器，熱交換器進(jìn)還煮了茶葉蛋給我們作為第二天的早餐。同學(xué)都感嘆道：我們不是土豪，但我們?nèi)氚l(fā)酵罐無菌液打完后打開發(fā)酵罐進(jìn)氣閥門，通入無菌空氣壓力調(diào)整到 0.03-0.05MPa，過料管道要保持正壓。當(dāng)罐內(nèi)培養(yǎng)料溫度達(dá)到杏鮑菇最適生長溫度 24 度時即可接種。接種及發(fā)酵培養(yǎng)：無菌液打入發(fā)酵罐后要進(jìn)行取樣，檢測培養(yǎng)料，滅菌系統(tǒng)是否達(dá)標(biāo)，能否接種，接種前向

6、發(fā)酵罐內(nèi)通入 12-24 小時的無菌空氣后取樣，檢測過濾系統(tǒng)是否達(dá)到無菌狀態(tài)，能否接種；經(jīng)檢驗(yàn)合格后開始接種，將培養(yǎng)好的杏鮑菇搖瓶種子在還煮了茶葉蛋給我們作為第二天的早餐。同學(xué)都感嘆道：我們不是土豪，但我們接種前(若是低溫保藏菌種要先解凍），用 75%醫(yī)用酒精將其出種銅管口浸泡 10 分鐘以上，在火焰保護(hù)下打開接種口將搖瓶種子接入，接種時門窗要關(guān)閉以減少空氣流通增加成功率；接種操作一般二人配合進(jìn)行，首先，用 95%酒精浸濕的火環(huán)套在接種口上，打開排氣閥門，然后，用鑷子拿掉接種閥門口的酒精棉球打開接種閥門，第二人手扶搖瓶，將銅管口放入火焰內(nèi)，第一人用鑷子拔掉管頭內(nèi)的棉塞，第二人將銅管插入接種口內(nèi)

7、，斜提搖瓶接入菌種，接完后拔出銅管，關(guān)閉還煮了茶葉蛋給我們作為第二天的早餐。同學(xué)都感嘆道：我們不是土豪，但我們閥門去掉火環(huán)，接種口重新用 75%酒精棉球封好；完成后，打開供氧機(jī)，通入無菌空氣，將溫控儀溫度設(shè)定到杏鮑菇最佳生長范圍 24 度，罐壓保持在 0.03-0.04MPa，通氣量前期 1，0.3-0.5 后期按 10.5-0.8 進(jìn)行深層發(fā)酵培養(yǎng)。培養(yǎng)期間要定時觀察及取樣檢測；取樣檢測，制取樣培養(yǎng)基，杏鮑菇取樣培養(yǎng)基制作工藝流程為：A、配方：木屑 79%、麥麩 20%、葡萄糖 1%、拌料、將木屑與麥麩拌勻后、將葡萄糖加水融化均勻拌入、含水量 55%，裝瓶：裝入 250 毫升鹽水，料面整平還

8、煮了茶葉蛋給我們作為第二天的早餐。同學(xué)都感嘆道：我們不是土豪，但我們壓實(shí)后 3-5 厘米，一般 200 克裝 8 瓶擦瓶身、瓶口塞棉塞包防潮紙高壓滅菌 2.5-3 小時風(fēng)干棉塞冷卻檢驗(yàn)合格后收起備用；250毫升空鹽水擦瓶身、瓶口塞棉塞包防潮紙高壓滅菌 40 分鐘風(fēng)干棉塞冷卻檢驗(yàn)合格后收起備用；取樣，杏鮑菇液體菌種連續(xù)發(fā)酵取樣檢測，一般接種前及接種當(dāng)天與補(bǔ)料當(dāng)天，取到空瓶內(nèi)后轉(zhuǎn)接到 PDA 培養(yǎng)基上進(jìn)行細(xì)菌檢測，接種后第 1 天及補(bǔ)料后第 1 天開始取到木屑取樣培養(yǎng)基上檢測菌種活力及純度。其取樣工藝還煮了茶葉蛋給我們作為第二天的早餐。同學(xué)都感嘆道：我們不是土豪，但我們流程為：將取樣瓶用 75%酒

9、精浸濕棉塞，然后用10%以上雙氧水或 0.25%新潔爾滅溶液在處理一次 20 分鐘后二人配合取樣，第一人手持火環(huán)點(diǎn)燃，第二人在火焰內(nèi)從新潔爾滅瓶內(nèi)拔出取樣管，在火焰保護(hù)下放掉管內(nèi)的殘留菌液，第一人將火環(huán)套在待取樣的瓶口上，用鉗子拔掉棉塞，第二人將取樣管插入瓶內(nèi)打開取樣閥放入適量液體菌種，動作要快要準(zhǔn)，第一人迅速用棉塞封住瓶口，火環(huán)移入下一瓶；一般每次每罐取兩瓶，整個取樣過程，取樣管口不能離開火焰中心，取還煮了茶葉蛋給我們作為第二天的早餐。同學(xué)都感嘆道：我們不是土豪，但我們完后把取樣管口插入新潔爾滅瓶內(nèi)，放回原處；培養(yǎng)、檢測細(xì)菌檢測，把空瓶內(nèi)取出的樣液用無菌操作技術(shù)流程接入三支空白 PDA 試管

10、后，放在30-33度條件下培養(yǎng)48小時后沒有任何異常現(xiàn)象及細(xì)菌污染即為合格，菌種活力及純度檢測，將取完樣的杏鮑菇取樣瓶放在 25 度條件下，培養(yǎng)10 小時后表面菌絲發(fā)白，24 小時后菌絲開始吃料， 48 小時后吃料 0.2 厘米以上，表面菌絲潔白，生長有力，72 小時后沒有其它雜菌，即可使用。補(bǔ)料，因培養(yǎng)液中含有大量的顆粒狀物質(zhì)，還煮了茶葉蛋給我們作為第二天的早餐。同學(xué)都感嘆道：我們不是土豪，但我們在培養(yǎng)前期菌液較渾濁，但隨著培養(yǎng)時間的延長，營養(yǎng)物質(zhì)逐漸被利用，菌液變得越來越清澈。菌種培養(yǎng)時，在發(fā)酵罐排氣口可聞到杏鮑菇的香味，而染雜菌的培養(yǎng)液則散發(fā)出霉臭、酒精等異味。經(jīng)檢測內(nèi)菌絲純度、活力、菌

11、絲球多少和出菇能力等合格后即可補(bǔ)料。補(bǔ)料量為加料至發(fā)酵罐容積的 70%-80%。補(bǔ)料后繼續(xù)取樣檢測。發(fā)酵培養(yǎng)：待補(bǔ)料完成后，打開發(fā)酵罐進(jìn)氣閥門，通入還煮了茶葉蛋給我們作為第二天的早餐。同學(xué)都感嘆道：我們不是土豪，但我們無菌空氣，將溫控儀溫度設(shè)定到 24 度，罐壓保持 0.03-0.04MPa，通氣量前期 1，0.3-0.5，后期按 1，0.5-0.8 進(jìn)行深層發(fā)酵培養(yǎng)。亦可根據(jù)生產(chǎn)需要通過調(diào)節(jié)溫度高低，通氣量大小控制培養(yǎng)時間的長短，培養(yǎng)期間要認(rèn)真觀察菌種的生長速度，菌液、PH 值的變化及發(fā)酵罐是否正常工作等生產(chǎn)細(xì)節(jié)；當(dāng)罐內(nèi)菌絲球密度達(dá)到視鏡 70-80%左右時，且培養(yǎng)液清澈，菌絲球較小并均勻，

12、在發(fā)酵罐排氣口可聞到杏鮑菇的香味無霉臭、酒精等酸臭異味即可用于接種生產(chǎn)。還煮了茶葉蛋給我們作為第二天的早餐。同學(xué)都感嘆道：我們不是土豪，但我們不接種連續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)：連續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)是在培養(yǎng)好的液體菌種接種生產(chǎn)時，在罐內(nèi)留下 5-15%左右液體菌種，作為母種，用補(bǔ)料的方法打入新的液體培養(yǎng)基繼續(xù)培育新的液體菌種；經(jīng)生產(chǎn)驗(yàn)證一次接種后如不染菌，不換品種連續(xù)發(fā)酵培育 3-6 個月不用再次接種，培育出的依舊是優(yōu)質(zhì)菌種；為確保連續(xù)發(fā)酵成功率，最好每 3-5 天過濾器、10-15 天接種管道，接種槍滅一次菌，具體方法與【空消】類似、空氣壓縮機(jī) 2-3 天、一級過濾器 1 天排污一次；還煮了茶葉蛋給我們作為第二天的

13、早餐。同學(xué)都感嘆道：我們不是土豪，但我們?nèi)魩讉€發(fā)酵罐生產(chǎn)的是同一個品種，它們的菌種或料液是可以相互補(bǔ)充的，如需更換品種，用同【空消】一樣的方法對發(fā)酵系統(tǒng)進(jìn)行滅菌然后打入新的培養(yǎng)料接入新的菌種即可。標(biāo)簽：發(fā)酵罐1ck0f7c7a 發(fā)酵罐http:/ 度時關(guān)閉供氧機(jī)，進(jìn)料口向外排出大量蒸氣時關(guān)閉灌頂所有閥門，將溫控儀表設(shè)定到 121 度，將滅菌繼電器設(shè)定到 2400 秒，打開計(jì)時開關(guān)；在計(jì)時期間將降溫器內(nèi)加滿冷水降溫循環(huán)管道連接好，熱交換器通入循環(huán)水，當(dāng)溫度升到 121度后，將煮料罐頂部排氣閥門及進(jìn)料口閥門打開一點(diǎn)，讓蒸汽排出一些對其滅菌；滅菌計(jì)時結(jié)束，關(guān)閉頂部所有閥門，從罐底排污口以 5-10 分鐘內(nèi)排除 300-500 毫升培養(yǎng)基，然后打開煮料罐出料口閥門，讓無菌液，通過降溫器，熱交換器進(jìn)還煮了茶葉蛋給我們作為第二天的早餐。同學(xué)都感嘆道：我們不是土豪，但我們閥門去掉火環(huán)，接種口重新用 75%酒精棉球封好；完成后，打開供氧機(jī)，通入無菌空氣，將溫控儀溫度設(shè)定到杏鮑菇最佳生長范圍 24 度，罐壓保持在 0.03-0.04MPa，通氣量前期 1，0.3-0.5 后期按 10.5-0.8 進(jìn)行深層發(fā)酵培養(yǎng)。培養(yǎng)期間要還煮了茶葉蛋給我們作為第二天的早餐。同學(xué)都感嘆道：我們不是土豪，但我們完后把取樣管口插入新潔爾滅瓶內(nèi)，放回原處；培養(yǎng)、檢測細(xì)菌檢測，把空瓶內(nèi)取出的樣液用無菌操作技術(shù)流程