梅毒血清學試驗的臨床價值

1、人體抗體的出現(xiàn) 抗體出現(xiàn)的時間 感染梅毒螺旋體后14周后出現(xiàn)抗體 抗體的分類 非特異性反應素抗體：抗類脂質(zhì)抗體 特異性抗體：抗梅毒螺旋體抗體 抗體的主要成分 IgM和IgG梅毒的臨床病程 潛伏期：24周 平均為3周 一期梅毒：硬下疳出現(xiàn)持續(xù)38周 可自行消失 二期梅毒：損害持續(xù)312周 可自行消失 以后又可反復發(fā)作 持續(xù)2年 三期梅毒：病程大于2年 可有嚴重的神經(jīng)系統(tǒng)或心血管系統(tǒng)的損害梅毒發(fā)病的自然病程 早期梅毒（2年內(nèi) ） 990天 6周6個月一期梅毒 二期梅毒 潛伏梅毒硬下疳 皮疹 無癥狀 扁平濕疣 梅毒性脫發(fā) 系統(tǒng)性表現(xiàn) 發(fā)熱全身不適 淺表淋巴結(jié)腫大 關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)疼痛 虹膜炎腦膜炎 晚期梅

2、毒（2年后 320年潛伏梅毒 三期梅毒 無癥狀 神經(jīng)梅毒 心血管梅毒 臟器梅毒 皮膚粘膜梅毒 各期梅毒取材部位和檢查方法臨床表現(xiàn) 取材部位 檢查方法一期梅毒 潰瘍 淋巴結(jié) 暗視野檢查 血液 血清學檢查二期梅毒 皮損 淋巴結(jié) 暗視野檢查 血液 血清學檢查潛伏梅毒 血液 血清學檢查三期梅毒 血液 腦脊液 血清學檢查神經(jīng)梅毒 血液 腦脊液 血清學檢查未經(jīng)治療梅毒（早期）的病程 15樹膠腫性梅毒 10心血管梅毒 19神經(jīng)梅毒 65潛伏梅毒（無明顯臨床表現(xiàn)）梅毒血清學試驗的分類非梅毒螺旋體抗原血清試驗 性病研究實驗室試驗（VDRL） 不加熱血清反應素試驗（USR） 血漿反應素環(huán)狀卡片試驗（RPR TRU

3、ST）梅毒螺旋體抗原血清試驗 梅毒螺旋體血球凝集試驗（TPHA TPPA） 熒光梅毒螺旋體吸收試驗（FTAABS）檢測梅毒螺旋體IgM抗體的血清學試驗 非梅毒螺旋體血清試驗 抗類脂抗原的抗體 即是反應素 是機體對損害細胞和梅毒螺旋體表面所釋放的脂類物質(zhì)的免疫反應 在感染后34周產(chǎn)生 是IgM和IgG的混合體 未經(jīng)治療 可長期存在 經(jīng)正規(guī)治療后 這種抗體減少 轉(zhuǎn)成陰性 是用心磷脂 卵磷脂和膽固醇作檢測抗原非梅毒螺旋體血清試驗 所有的非梅毒螺旋體血清試驗的抗原基本成分都是一樣的 包括有VDRL試驗 USR試驗 RPR 試驗TRUST(甲苯胺紅)試驗 基本成分是心磷脂 卵磷脂和膽固醇 抗原抗體結(jié)合形

4、成復合物 凝集成網(wǎng)狀沉淀顆粒 被肉眼所見 上述方法的敏感性和特異性都基本相似非梅毒螺旋體血清試驗 VDRL試驗 0.03%心磷脂 0.21%卵磷脂和0.90%膽固醇組成 該抗原需新鮮配制 不能保存 待檢血清需滅活 主要用于腦脊液檢查非梅毒螺旋體血清試驗 USR試驗 是VDRL試驗的改良 抗原是心磷脂卵磷脂和膽固醇 還有乙二胺四醋酸(EDTA) 使抗原不會變質(zhì)可長期保存能維持一年 含有氯化膽堿 對血清能起到化學滅活的作用 不必加熱滅活 制成試劑盒 使用方便非梅毒螺旋體血清試驗 RPR試驗 在USR試劑成分的基礎上 加入黑色碳顆粒 作為沉淀的指示物 用白色的硬紙片替代玻片 血清不需要滅活 不需要顯

5、微鏡觀測結(jié)果 可作定量試驗 有現(xiàn)成的試劑盒 攜帶方便 操作簡單 價格便宜 試驗的結(jié)果可長期保存 非梅毒螺旋體血清試驗 甲苯胺紅試驗(TRUST) 其原理和成分與RPR試驗相同 用紅色的甲苯胺紅替代了碳顆粒 其余的特點均與RPR相同梅毒螺旋體血清試驗 用梅毒螺旋體作抗原 檢測血清中特異的抗梅毒螺旋體抗體 有:梅毒螺旋體血球凝集試驗(TPHA或TPPA試驗) 熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗(FTA-ABS試驗) 該兩個試驗有很好的特異性用于確診試驗梅毒螺旋體血清試驗 TPHA 的原理抗原抗體的復合物抗原抗體的復合物致敏的羊紅血球致敏的羊紅血球梅毒螺旋體血清試驗FTA-ABS試驗 1用完整的梅毒螺旋體作

6、抗原用完整的梅毒螺旋體作抗原 與抗體結(jié)合與抗體結(jié)合 形成免疫復合物形成免疫復合物2再加熒光素標記的抗再加熒光素標記的抗人免疫球蛋白人免疫球蛋白 與免疫與免疫復合物結(jié)合復合物結(jié)合 在熒光顯在熒光顯微鏡下發(fā)出蘋果綠色的微鏡下發(fā)出蘋果綠色的熒光熒光玻片玻片檢測梅毒螺旋體IgM抗體的血清學試驗 人體特異性抗梅毒螺旋體抗體可分為IgG和IgM 目前 所使用的確診試驗FTA-ABS和TPHA均是檢測血清的IgG抗體 IgG抗體終身存在 故盡管正規(guī)治療后 仍可陽性 不能作為判愈和隨訪的手段檢測梅毒螺旋體IgM抗體的血清學試驗 梅毒螺旋體IgM抗體有很強的特異性 IgM抗體與梅毒螺旋體活動性感染成正相關(guān)關(guān)系

7、即有感染而出現(xiàn) 隨感染消失而消失 IgM抗體在感染后2周即可出現(xiàn) 治療后消失也快(與反應素比較) IgM抗體是一種聚合體 不能通過胎盤和腦膜 故可用于檢測先天梅毒和神經(jīng)梅毒 檢測梅毒螺旋體IgM抗體的血清學試驗 臨床應用 先天梅毒的檢測 神經(jīng)梅毒的檢測 最早期的一期梅毒的檢測( RPR陰性或可疑時) 梅毒再感染的判斷 晚期梅毒患者有無活動性感染的判斷檢測梅毒螺旋體IgM抗體的血清學試驗 方法 IgM固相血凝試驗(IgM-SPHA) 梅毒螺旋體特異性IgM血凝試驗(TP-IgM-HA) 梅毒特異性IgM抗體捕獲ELISA試驗(IgM-CAP-ELISA) 19S-IgM熒光抗體吸收試驗(19S-

8、IgM-FTA-ABS) 也可作ELISA試驗梅毒血清學試驗的敏感性和特異性敏感性敏感性(%)試驗試驗梅毒的梅毒的感染期感染期特異性特異性一期一期二期二期潛伏期潛伏期晚期晚期FTA-ABS981001009699TPHA821001009499RPR80100807398VDRL80100717198梅毒血清學試驗的比較 非梅毒螺旋體血清試驗操作簡單價格便宜有試劑盒 便于攜帶適宜于人群的篩查試驗可以用作治療后的療效觀測和判愈的指標 梅毒螺旋體血清試驗敏感性和特異性均高FTA-ABS操作繁復 需熟練的技術(shù)人員和實驗室的設備 TPHA有試劑盒用作確診試驗價格比較貴不能用于大量人群患梅毒后終身陽性

9、不能用作療后隨訪非梅毒螺旋體血清反應的陽性病種 下列三種疾病可產(chǎn)生真陽性反應 梅毒 品他 雅司 這三種均為密螺旋體感染 但后二種國內(nèi)幾乎絕跡非梅毒螺旋體血清的假陽性反應 定義:不存在梅毒感染 但血清學反應呈陽性 假陽性反應可分為 技術(shù)性假陽性 標本的采取 保存 運送和實驗室操作的誤差而產(chǎn)生 可重復試驗 即可證實為陰性 生物學假陽性 事實上不存在梅毒感染 而是其他非技術(shù)性因素所產(chǎn)生的陽性反應 在“正常”的人群中發(fā)生率約為1/4000非梅毒螺旋體血清的假陽性反應 急性生物學假陽性反應 出現(xiàn)于非梅毒感染的感染性疾病 特點:RPR呈陽性 但滴度很低 很少大于1:8 在病情緩解后數(shù)周 即轉(zhuǎn)成陰性 病程很

10、少大于半年 證實試驗TPHA或FTA-ABS為陰性 缺乏明確的梅毒臨床證據(jù)非梅毒螺旋體血清的 假陽性反應 急性生物學假陽性反應的疾病 風疹 水痘 傳染性單核細胞增多癥 傳染性肝炎 上呼吸道感染 肺炎球菌性肺炎 病毒性肺炎 牛痘疹非梅毒螺旋體血清的假陽性反應 慢性生物學假陽性反應的疾病 系統(tǒng)性紅斑狼瘡 自家免疫性溶血性貧血 盤狀紅斑狼瘡 結(jié)節(jié)性多動脈炎 類風濕性關(guān)節(jié)炎 橋本氏甲狀腺炎 風濕性心臟病 干燥綜合征 毒品癮者 慢性腎炎 肝硬化 老年 麻風 (是唯一產(chǎn)生慢性生物學假陽性的感染性 疾病) 非梅毒螺旋體血清的 假陽性反應 毒品癮者的假陽性反應: 假陽性發(fā)生率高 可達33.3%94.8% 毒品

11、癮者常與性亂有關(guān) ?？赏瑫r感染梅毒 醫(yī)務人員在處理這些情況時要特別仔細非梅毒螺旋體血清的假陽性反應 妊娠的假陽性反應 這是一種生理情況下的生物學假陽性 假陽性發(fā)生率較低有報告為0.4% 滴度低梅毒螺旋體血清試驗的生物學假陽性 FTA-ABS試驗的生物學假陽性 系統(tǒng)性紅斑狼瘡 類風濕性關(guān)節(jié)炎 肝硬化 淋巴肉瘤 腦膜瘤 海洛因成癮 自家免疫性溶血性貧血 結(jié)腸癌 麻風梅毒螺旋體學血清試驗的生物學假陽性 FTA-ABS試驗的生物學假陽性 非常罕見 系統(tǒng)性紅斑狼瘡占絕大多數(shù) 真陽性呈均勻的熒光 假陽性呈串珠狀熒光 鑒別需結(jié)合病史和臨床綜合分析非梅毒螺旋體抗原血清學試驗結(jié)果解釋示意圖早期晚期一期二期早期潛

12、伏晚期潛伏三期 治療前 治療后 陽性陰性梅毒螺旋體抗原血清學試驗結(jié)果解釋示意圖早期一期二期早期潛伏晚期晚期潛伏三期治療前 治療后陽性陰性梅毒血清學試驗的臨床診斷意義 血清學試驗USR TPHA 意義RPR TPPA FTA-ABS VDRL _ _ _ 排除梅毒 一期梅毒的早期 愛茲病患者合并梅毒 + + + 現(xiàn)癥梅毒(梅毒孕婦所生 的嬰兒除外) + - - 生物學假陽性 - + + 早期梅毒經(jīng)治療后神經(jīng)梅毒的腦脊液變化無癥狀神無癥狀神經(jīng)梅毒經(jīng)梅毒腦膜血腦膜血管梅毒管梅毒 腦實質(zhì)腦實質(zhì) 梅梅毒毒早期早期晚期晚期麻痹性癡呆麻痹性癡呆脊髓癆脊髓癆細胞計數(shù)細胞計數(shù)/蛋白蛋白FTAABS/VDRL/T

13、PHA/壓力壓力正常正常正常正常正常正常血清學試驗的特殊情況 前帶現(xiàn)象（Prozone phenomenon） 在二期梅毒中 臨床癥狀很明顯 但RPR試驗為弱陽性或陰性 此時 應該將血清稀釋后再作 會出現(xiàn)陽性結(jié)果 這種情況稱為前帶現(xiàn)象 發(fā)生率為12 發(fā)生的原因主要是血清中抗體量過多 與抗原量的比例不合適 抑制了陽性反應的發(fā)生血清學試驗的特殊情況 血清固定（sero-risistance） 表現(xiàn)；梅毒患者經(jīng)過正規(guī)治療和充分的隨訪（2年以上） 一期梅毒隨訪1年 二期梅毒隨訪2年 晚期梅毒隨訪3年 RPR試驗仍不陰轉(zhuǎn) 這種情況是血清固定 早期梅毒血清固定者有35出現(xiàn)梅毒的復發(fā) 血清學試驗的特殊情況血

14、清固定 （sero-risistance）原因；早期梅毒是 與機體的免疫抑制有關(guān) 可能與體內(nèi)仍有潛在的活動性病變有關(guān) 與治療劑量不足 治療較晚 治療不正規(guī) 與復發(fā) 再感染有關(guān) 和可能發(fā)生神經(jīng)系統(tǒng)梅毒有關(guān) 晚期梅毒是與梅毒的類型和治療較晚有關(guān) 血清學試驗的特殊情況血清固定（sero-resistance）處理； 早期梅毒出現(xiàn)血清固定可作一次正規(guī)治療 晚期梅毒出現(xiàn)血清固定應作全面的檢查 以除外心血管 神經(jīng)或內(nèi)臟梅毒 作一次正規(guī)的治療后 定期隨訪 不必過度治療如RPR滴度沒有反復 可終止治療 血清學試驗的特殊情況 血清固定 有報道血清固定者作IgM檢測和外周血淋巴細胞亞群測定 IgM陽性 CD3 C

15、D4 CD8 T淋巴細胞高于正常人群 NK淋巴細胞低于正常人群 IgM陰性 CD3 CD4T淋巴細胞低于正常人群 CD8和NK淋巴細胞高于正常人群說明 血清固定者存在細胞免疫不平衡和免疫抑制 NK細胞的降低可能與RPR陽性并具傳染性有關(guān) 梅毒治療后的血清學觀察 早期梅毒治療后要定期作血清學檢查 治療后的6個月內(nèi) RPR滴度應下降2個梯度 否則應視為治療失敗 第一年 每3個月1次 第二年 每半年1次 第三年末一次梅毒治療后的血清學觀察 梅毒治療后失敗原因分析 實質(zhì)上是再感染 發(fā)生神經(jīng)梅毒 HIV感染 謝謝！非梅毒螺旋體血清試驗 所有的非梅毒螺旋體血清試驗的抗原基本成分都是一樣的 包括有VDRL試

16、驗 USR試驗 RPR 試驗TRUST(甲苯胺紅)試驗 基本成分是心磷脂 卵磷脂和膽固醇 抗原抗體結(jié)合形成復合物 凝集成網(wǎng)狀沉淀顆粒 被肉眼所見 上述方法的敏感性和特異性都基本相似非梅毒螺旋體血清試驗 VDRL試驗 0.03%心磷脂 0.21%卵磷脂和0.90%膽固醇組成 該抗原需新鮮配制 不能保存 待檢血清需滅活 主要用于腦脊液檢查檢測梅毒螺旋體IgM抗體的血清學試驗 人體特異性抗梅毒螺旋體抗體可分為IgG和IgM 目前 所使用的確診試驗FTA-ABS和TPHA均是檢測血清的IgG抗體 IgG抗體終身存在 故盡管正規(guī)治療后 仍可陽性 不能作為判愈和隨訪的手段檢測梅毒螺旋體IgM抗體的血清學試

17、驗 方法 IgM固相血凝試驗(IgM-SPHA) 梅毒螺旋體特異性IgM血凝試驗(TP-IgM-HA) 梅毒特異性IgM抗體捕獲ELISA試驗(IgM-CAP-ELISA) 19S-IgM熒光抗體吸收試驗(19S-IgM-FTA-ABS) 也可作ELISA試驗梅毒血清學試驗的敏感性和特異性敏感性敏感性(%)試驗試驗梅毒的梅毒的感染期感染期特異性特異性一期一期二期二期潛伏期潛伏期晚期晚期FTA-ABS981001009699TPHA821001009499RPR80100807398VDRL80100717198非梅毒螺旋體血清的假陽性反應 定義:不存在梅毒感染 但血清學反應呈陽性 假陽性反應可分為 技術(shù)性假陽性 標本的采取 保存 運送和實驗室操作的誤差