生物制藥期末復(fù)習(xí)答案及題目

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上1.生物技術(shù)藥物（Biotech drugs)指采用DNA重組技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)或其它生物新技術(shù)研制的蛋白質(zhì)、抗體或核酸類(lèi)藥物。2.按生物技術(shù)藥物的功能用途可以分為三類(lèi)：治療藥物；預(yù)防藥物；診斷藥物3.生物技術(shù)制藥的特征：高技術(shù)；高投入；長(zhǎng)周期；高風(fēng)險(xiǎn)；高收益4.制備基因工程藥物的基本過(guò)程（p16頁(yè)）：目的基因的獲得：反轉(zhuǎn)錄法，反轉(zhuǎn)錄-PCR法、化學(xué)合成法、篩選基因新方法、對(duì)已發(fā)現(xiàn)基因改造。組建重組質(zhì)粒；構(gòu)建基因工程菌；培養(yǎng)工程菌；產(chǎn)物分離純化；除菌過(guò)濾；半成品檢定；成品檢定；包裝。5.基因工程技術(shù)：將所要重組的目的基因插入載體、拼接、轉(zhuǎn)入新的宿主細(xì)胞，構(gòu)建成工程菌

2、（或細(xì)胞），實(shí)現(xiàn)遺傳物質(zhì)的重新組合，并使目的基因在工程菌內(nèi)進(jìn)行復(fù)制和表達(dá)的技術(shù)。6.目的基因的獲得方法 反轉(zhuǎn)錄法mRNA的純化 cDNA第一鏈的合成 DNA第二鏈的合成 cDNA 克隆 將重組體導(dǎo)入宿主細(xì)胞 cDNA文庫(kù)的鑒定 目的cDNA克隆的分離和鑒定 反轉(zhuǎn)錄-PCR法cDNA第一鏈合成 PCR擴(kuò)增（高溫變性低溫退火適溫延生循環(huán)擴(kuò)增）克隆重組分離 化學(xué)合成法 篩選基因新方法 對(duì)已發(fā)現(xiàn)基因的改造7.真核基因在大腸桿菌中的表達(dá)方式1） 以融合蛋白的形式表達(dá)藥物基因2） 以非融合蛋白的形式表達(dá)藥物基因3） 分泌型表達(dá)蛋白藥物基因8.質(zhì)粒不穩(wěn)定分為分裂不穩(wěn)定和結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定9.提高質(zhì)粒穩(wěn)定性的方法：1

3、、分階段培養(yǎng)法2、在培養(yǎng)基中加入抗生素，形成選擇性壓力3、通過(guò)溫度、PH值、培養(yǎng)基組分、溶解氧的綜合調(diào)節(jié)措施10.基因工程菌的培養(yǎng)方式:（1）補(bǔ)料分批培養(yǎng)（2）連續(xù)培養(yǎng)（3）透析培養(yǎng)（4）固定化培養(yǎng)11.細(xì)胞融合的方法:（1）病毒誘導(dǎo)融合（2）PEG誘導(dǎo)融合（3）電場(chǎng)誘導(dǎo)融合4）其它誘導(dǎo)融合12.細(xì)胞融合：兩個(gè)或兩個(gè)以上的細(xì)胞合并成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。13.器材的清洗：一般來(lái)說(shuō)，需經(jīng)浸泡、刷洗、泡酸和沖洗四個(gè)步驟14.動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)主要可分為懸浮培養(yǎng)、貼壁培養(yǎng)和貼壁-懸浮培養(yǎng)（假懸浮培養(yǎng)）。15.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的操作方式: 分批式操作；半連續(xù)式操作；灌流式操作。16.細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)

4、器計(jì)數(shù)血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù) 4大格中細(xì)胞總數(shù) 每毫升細(xì)胞數(shù)= 4×10000×稀釋倍數(shù)結(jié)晶紫染色細(xì)胞核計(jì)數(shù)MTT染色計(jì)數(shù)17.動(dòng)物細(xì)胞工程制藥前景與展望改進(jìn)表達(dá)載體，提高表達(dá)水平和產(chǎn)量利用代謝工程，改進(jìn)培養(yǎng)工藝，降低生產(chǎn)成本抑制細(xì)胞凋亡，延長(zhǎng)培養(yǎng)周期采用糖基化工程，提高產(chǎn)品質(zhì)量轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的研究組織工程的研究18.單克隆抗體：由單一雜交瘤細(xì)胞克隆分泌的只能識(shí)別一種表位（抗原決定簇）的高純度抗體。（百科）19.單克隆抗體及其制備步驟：抗原與動(dòng)物免疫細(xì)胞融合與雜交瘤細(xì)胞的選擇性培養(yǎng)篩選陽(yáng)性克隆與克隆化雜交瘤細(xì)胞與抗體性狀的鑒定單克隆抗體的大量制備單克隆抗體的純化20.基因工程抗體類(lèi)型人

5、-鼠嵌合抗體 改形抗體 Fab與Fv抗體 單鏈抗體 單域抗體和分子識(shí)別單位21.噬菌體抗體庫(kù)技術(shù)的基本方法獲得目的基因 抗體庫(kù)技術(shù)的載體 淘篩 表達(dá)與鑒定22.植物細(xì)胞工程制藥的進(jìn)展與展望誘導(dǎo)子的應(yīng)用 植物抗毒素是在植物防御系統(tǒng)內(nèi)能對(duì)抗微生物進(jìn)攻的某些次級(jí)代謝產(chǎn)物，有些時(shí)候連續(xù)合成，有些時(shí)候在被刺激下才會(huì)產(chǎn)生抗毒素，或僅在被誘導(dǎo)下其產(chǎn)量才能增加。 誘導(dǎo)子是觸發(fā)形成植物抗毒素信號(hào)的物質(zhì)，根據(jù)在細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞外形成而將其分為內(nèi)源性誘導(dǎo)子和外源性誘導(dǎo)子，根據(jù)其來(lái)源分為生物誘導(dǎo)子和非生物誘導(dǎo)子2 前體喂養(yǎng)3 兩相培養(yǎng)法4 轉(zhuǎn)基因技術(shù)應(yīng)用5 植物生物轉(zhuǎn)化技術(shù)23.對(duì)生產(chǎn)菌種的要求（1）產(chǎn)酶量高（2）不是致

6、病菌（3）性能穩(wěn)定，不容易變異、退化、不易感染噬菌體。（4）能夠利用廉價(jià)的原料，發(fā)酵周期短、易于培養(yǎng)24.固定化酶：指限制或者固定于特定空間位置的酶，具體來(lái)說(shuō)，就是指經(jīng)過(guò)物理、化學(xué)方法處理，使酶變成不易隨水流失的固定化催化劑。25.制備固定化酶的過(guò)程稱(chēng)為酶的固定化。26.酶固定化的方法1、載體結(jié)合法2、交聯(lián)法3、包埋法27.印跡酶：通過(guò)分子印跡技術(shù)可以產(chǎn)生類(lèi)似于酶的活性中心的空腔，對(duì)底物產(chǎn)生有效的結(jié)合作用，而且還能可以在結(jié)合部位的空腔內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)生催化基團(tuán)，并與底物定向排列。28.酶的化學(xué)修飾：就是在分子水平上，采用化學(xué)方法對(duì)酶進(jìn)行改造，通過(guò)添加一些化學(xué)基團(tuán)，或者采用具有生物相容性的大分子進(jìn)行共價(jià)

7、鍵聯(lián)接，從而改變酶分子性質(zhì)的一種技術(shù)。29.酶工程與藥用酶研究進(jìn)展用分子生物學(xué)方法酶的催化特性及設(shè)計(jì)新酶構(gòu)建新酶抗體酶、核酶、模擬酶、印跡酶開(kāi)辟酶或微生物轉(zhuǎn)化合成的新途徑開(kāi)發(fā)極端環(huán)境條件下的新酶種藥用酶研究30.菌種選育方法: 自然選育；誘變育種；雜交育種31.發(fā)酵的基本過(guò)程為： 菌種 種子制備 發(fā)酵 發(fā)酵液預(yù) 處理 提取精制 32.發(fā)酵方式: 分批(間歇)發(fā)酵； 補(bǔ)料分批發(fā)酵； 連續(xù)發(fā)酵33.發(fā)酵產(chǎn)物的提取方法: 吸附法；沉淀法；溶劑萃取法；離子交換法34.青霉素發(fā)酵工藝（青霉素發(fā)酵過(guò)程）種子制備：以生產(chǎn)豐富的孢子或大量健壯的菌絲體為目的發(fā)酵培養(yǎng)：影響青霉素發(fā)酵產(chǎn)率的因素有環(huán)境因素，有生理變

8、量因素，對(duì)它們都要進(jìn)行嚴(yán)格控制。發(fā)酵后處理：過(guò)濾，采用鼓式真空過(guò)濾器，過(guò)濾前加去乳化劑并降溫；提煉用溶媒萃取法脫色：在二次B A提取液中加活性炭150 一300g10億單位，脫色、過(guò)濾。結(jié)晶：用丁醇共沸結(jié)晶法。35.大腸桿菌、酵母菌、動(dòng)物細(xì)胞在基因工程制藥的區(qū)別大腸桿菌酵母菌動(dòng)物細(xì)胞產(chǎn)物多肽、蛋白、融合蛋白多肽、蛋白、糖基化蛋白完整糖基化蛋白產(chǎn)生部位菌體內(nèi)菌體內(nèi)，分泌出細(xì)胞分泌出細(xì)胞培養(yǎng)方式容易，部分高產(chǎn)容易，可高產(chǎn)較難，成本高，可高產(chǎn)提純一般菌體內(nèi)復(fù)雜簡(jiǎn)單產(chǎn)物活性對(duì)原核好真核接近天然幾乎可為天然產(chǎn)物潛在危險(xiǎn)不大不大可能又致癌因素36.基因表達(dá)：結(jié)構(gòu)基因在生物體中的轉(zhuǎn)錄、翻譯以及所有加工過(guò)程。37.基因高效表達(dá)：外源基因在某種細(xì)胞中的表達(dá)活動(dòng)，即剪切下一個(gè)外源基