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文檔簡介
1、.專業(yè)專注第七章細胞骨架與細胞的運動1.1. 名詞解釋:細胞骨架、微管組織中心(MTOCMTOC)、Y-微管蛋白環(huán)形 復合體(丫-TuRC-TuRC)、中心體、踏車運動、驅(qū)動蛋白、動力蛋白。細胞骨架:真核細胞質(zhì)中的蛋白質(zhì)纖維網(wǎng)架體系,由 3 3 種不同的 蛋白纖維結(jié)構(gòu)組成 微管、微絲、中間絲。微管組織中心:微管的聚合從特異性核心形成位點開始,主要是中心體、纖毛的基體。幫助微管裝配的成核。蘋微管蛋白環(huán)形復合體:可形成 10101313 個Y微管蛋白分子的環(huán) 形結(jié)構(gòu)(螺旋花排列),組成一個開放的環(huán)狀模板,與圍觀具有相 同直徑??纱碳の⒐芎诵男纬桑⒐茇摱?,阻止微管蛋白滲 入。還能影響微管從中心
2、粒上釋放。中心體:是動物細胞中決定微管形成的一種細胞器 ,包括中心 粒和中心粒旁物質(zhì)。兩個桶狀、垂直排列的中心粒,包埋在中心粒 旁物質(zhì)中。在細胞間期,中心體位于細胞核附近,在有絲分裂期,位于紡錘體的兩極。踏車運動:微管的聚合與解聚持續(xù)進行,經(jīng)常是一端聚合,為 正端;另一端解聚,是負端,這種微管裝配方式,稱踏車運動”。細胞內(nèi)各細胞器和所有的物質(zhì)轉(zhuǎn)運都與微管密切相關(guān);微管的物質(zhì)運輸由微管動力蛋白(或馬達蛋白)完成,共有幾十種,可分為三大家族:驅(qū)動蛋白 kinkin esinesin ,動力蛋白 dyndyn einein 和肌球蛋白 myosimyosin n家族(肌球蛋白以肌動蛋白纖維為運行軌道
3、)驅(qū)動蛋白與動力蛋白的兩個球狀頭部是與微管專一結(jié)合,具有ATPATP 酶活性,水解 ATPATP 供能完成與微管結(jié)合、解離、再結(jié)合的動 作。專業(yè)專注驅(qū)動蛋白:由兩條重鏈和兩條輕鏈組成。一對與微管結(jié)合的球 狀頭部一一 ATPATP 水解酶, 水解 ATPATP 產(chǎn)生能量進行運動; 將貨物由負 端運輸向正端。動力蛋白:目前已知的最大的、最快的分子運輸?shù)鞍?。由兩條 重鏈和幾種中等鏈、輕鏈組成,頭部具有 ATPATP 水解酶活性。沿著微 管的正端向負端移動。為物質(zhì)運輸,也為纖毛運動提供動力。在分 裂間期,參與細胞器的定位和轉(zhuǎn)運。2.2.三種骨架蛋白的分布如何?微絲:主要分布在細胞質(zhì)膜的內(nèi)側(cè)。微管:主要
4、分布在核周圍,并呈放射狀向胞質(zhì)四周擴散。中間纖維:分布在整個細胞中。3.3.微管由哪三種微管蛋白組成?各有什么結(jié)構(gòu)功能特點?a管蛋白,B管蛋白,丫管蛋白。a-a-微管蛋白和3 3- -微管蛋白各有一個 GTPGTP 結(jié)合位點。a- -微管蛋白的 GTPGTP 不進行水解也不進行交換;3微管蛋白的 GTPGTP 可水解呈 GDPGDP,而此 GDPGDP 也可換成 GTP,GTP,這一變換對微管的動態(tài)性 有重要作用。潸蛋白定位于微管組織中心,對微管的形成、數(shù)量、位置、極 性、細胞分裂有重要作用。4.4. 哪一種微管蛋白有 GTPGTP 酶活性?伕微管蛋白。5.5.微管結(jié)合蛋白有幾種?分布和功能如
5、何?微管結(jié)合蛋白(MAPMAP ) : MAPIMAPI、MAP2MAP2、MAP4MAP4 禾 口 tautau。分布:MAP1-2MAP1-2 和 tautau 只存在于腦組織;MAP4MAP4 在哺乳動物非神經(jīng) 元、神經(jīng)專業(yè)專注元細胞中,在進化上具有保守性。TauTau 只存在于軸突; MAP2MAP2 分布于神經(jīng)元胞體和樹突中。功能:(1 1)使微管相互交聯(lián)成束,使微管同其他細胞結(jié)構(gòu)交聯(lián), 如質(zhì)膜、微絲和中間絲等;(2 2)與微管成核點的作用,促進微管的 聚合;(3 3)與微管壁的結(jié)合,提高微管的穩(wěn)定性。6.6.為什么說微管具有動態(tài)不穩(wěn)定性?增長的微管末端有微管蛋白-GTP-GTP 帽
6、, 在微管組裝期間或組裝后 GTPGTP 被水解成 GDPGDP,從而使 GDP-GDP-微管蛋白成為微管的主要部分。微 管蛋白-GTP-GTP 帽及短小的微管原纖維從微管末端脫落則使微管解聚。7.7.微管的裝配分為哪三個時期?(1 1 )成核期:a- -閔二聚體,首尾相接和側(cè)面相連,當片狀帶加 寬到1313 根原纖維,合攏成一段微管;是微管聚合的開始,速度較慢限速過程。(2 2)聚合期:高濃度游離的微管蛋白聚合速度大于解聚速度 ,新 的二聚體不斷加到微管正端,微管延長,直至游離微管蛋白濃度降 低。(3 3)穩(wěn)定期:胞質(zhì)中游離微管蛋白達到臨界濃度,微管的聚合與 解聚速度相等8.8.微管的體外裝
7、配需要哪些條件?微管蛋白異二聚體達到一定的臨界濃度(約為 1mg/ml1mg/ml ),加入MgMg2+、GTPGTP 和 EDTAEDTA( CaCa2+的螯合劑,去除 C0C0 的抑制聚合作 用)、適當?shù)?pHpH(pH6.9pH6.9)和溫度(3737C C)的緩沖液。9.9.微管的體內(nèi)裝配是怎樣的?專業(yè)專注在細胞內(nèi)微管形成時,丫-TuRC-TuRC 存在于微管組織中心,成為a- -関 二聚體結(jié)合上去的核心,微管從此生長、延長。由于YTURC 像帽子 一樣戴在微管的負端而使微管負端穩(wěn)定。丫-TuRC-TuRC 組織微管形成的能 力受細胞周期的調(diào)節(jié)。間期此能力被關(guān)閉,G G2期到 M M
8、期,受細胞周 期調(diào)節(jié)激酶作用,磷酸化YTURC 成分,開放微管組織能力。10.10. 溫度、壓力、紫杉醇、秋水仙素、長春花堿對微管的穩(wěn)定性如何 影響的?紫杉醇:只結(jié)合到聚合的微管上,維持了微管的穩(wěn)定。秋水仙素:結(jié)合并穩(wěn)定游離的微管蛋白,抑制微管的聚合。長春新堿:能結(jié)合微管蛋白異二聚體,抑制它們的結(jié)合作用。溫度:低溫中微管解聚。溫度升高時,微管聚合。11.11.微管的功能有哪些?(1) 微管構(gòu)成細胞內(nèi)的網(wǎng)狀支架,支持和維持細胞形態(tài)。微管本 身不能收縮,有一點的強度,抗壓力、抗彎曲,為細胞提供機械支 持力。微管對細胞突起部分,如纖毛、鞭毛、軸突形成和維持起重 要作用。(2) 微管參與中心粒、纖毛和
9、鞭毛的形成。中心粒是 9 9 組三聯(lián)體微管圍成的圓筒狀結(jié)構(gòu)。纖毛、鞭毛是細胞表面的特化結(jié)構(gòu),在來 源和結(jié)構(gòu)上基本相同。兩者主干部分都是 9 9 組二聯(lián)管構(gòu)成,中央是 兩條微管一一中央微管。(3 3)微管參與細胞內(nèi)物質(zhì)運輸。細胞內(nèi)各細胞器和所有的物質(zhì)轉(zhuǎn) 運都與微管密切相關(guān);微管的物質(zhì)運輸由微管動力蛋白完成。(4 4)微管維持細胞內(nèi)細胞器的定位和分布。微管及其相關(guān)馬達蛋 白在膜性細胞器的定位上起著重要作用。專業(yè)專注(5 5)微管參與染色體的運動,調(diào)節(jié)細胞分裂。微管是有絲分裂器 的主要成分,有絲分裂前期微管聚合,核膜崩解時侵入核區(qū),結(jié)合 動粒;姊妹染色單體的動粒分別與來自兩極的微管結(jié)合 ,被拉到細
10、胞兩極。(6 6)微管參與細胞內(nèi)信號傳導。已證明微管參與 hedgehoghedgehog、 JNKJNK、WntWnt、ERKERK PAKPAK 蛋白激酶信號轉(zhuǎn)導通路。信號分子直接或通 過馬達蛋白、支架蛋白等與微管作用,調(diào)節(jié)包括微管的穩(wěn)定/ /不穩(wěn) 定、微管方向性、微管組織中心位置、細胞極化等。12.12.哪些結(jié)構(gòu)是 9 9 組三聯(lián)管、9 9 組二聯(lián)管結(jié)構(gòu)?每個中心粒由 9 9 組三聯(lián)管組成。纖毛、鞭毛的主干部分都是 9 9 組二聯(lián)管構(gòu)成。13.13.微管馬達蛋白主要有哪兩個家族?有何共同特點?驅(qū)動蛋白、動力蛋白。兩者都有兩個球狀頭部,是與微管專一結(jié)合,具有 ATPATP 酶活性, 水解A
11、TPATP 供能完成與微管結(jié)合、解離、再結(jié)合的動作。14.14.驅(qū)動蛋白與動力蛋白在微管上的運動方向如何?驅(qū)動蛋白:由負端運輸向正端。動力蛋白:由正端向負端移動。15.15.微絲又稱什么?占肌肉細胞與非肌肉細胞各多少百分比?肌動蛋白絲。占肌肉細胞總蛋白的 1010%,非肌肉細胞的 1 15 5%。16.16.肌動蛋白絲直徑多少?是由什么組成的什么樣的結(jié)構(gòu)?約 8nm8nm ;由肌動蛋白單體組成雙股螺旋纖維。專業(yè)專注17.17.肌動蛋白的保守性如何?在不同真核生物間相似性如何?很保守;不同種類的生物間有 9090%的相似性。18.18.什么是微絲的正端、負端?它們又名什么?正端:相對生長快的一端
12、;又稱禿端。負端:相對生長慢的一端;又稱指向端。19.19.微絲結(jié)合蛋白共約多少種?書上介紹了哪些種?各有什么作用?100100 多種。單體隔離蛋白:沒有單體隔離蛋白,肌動蛋白都將組裝成纖維, 這些蛋白的活性和濃度,決定了肌動蛋白趨向聚合還是解聚。交聯(lián)蛋白:改變細胞內(nèi)肌動蛋白纖維的三維結(jié)構(gòu)。末端阻斷蛋白:與肌動蛋白纖維的一端或兩端結(jié)合,調(diào)節(jié)或維持 肌動蛋白纖維的長度。結(jié)合肌動蛋白末端,相當于加上了帽子,抑 制微絲生長,導致胞內(nèi)出現(xiàn)較多短的微絲。纖維切割蛋白:與肌動蛋白纖維結(jié)合并切斷它;由于能控制肌動蛋白絲的長度,可大大降低細胞中的黏度。切割產(chǎn)生的新末端可作 為生長點, 促進肌動蛋白裝配。 切割
13、蛋白也可作為帽子封住肌動蛋 白纖維的末端。肌動蛋白纖維解聚蛋白:存在于肌動蛋白絲骨架快速變化的部位,結(jié)合肌動蛋白絲,并引起肌動蛋白絲的快速解聚。膜結(jié)合蛋白:是非肌細胞質(zhì)膜下方產(chǎn)生收縮的機器 。在劇烈活動 時,由收縮蛋白作用于質(zhì)膜產(chǎn)生的力引起質(zhì)膜向內(nèi)或向外移動。這種運動是由肌動蛋白纖維直接或間接與質(zhì)膜相結(jié)合后所形成的 。20.20. 何種交聯(lián)蛋白能使微絲成有彈性網(wǎng)絡(luò)?桿狀交聯(lián)蛋白21.21. 微絲組裝的三個階段是什么?成核期(延遲期):成核作用發(fā)生在質(zhì)膜下,由 ARP2/3ARP2/3 復合物催 化,是微絲組裝的限速過程。聚合期(生長期):微絲兩端的組裝速度有差異,快速增長的一 端是正端,緩慢增
14、長的一端是負端,正端添加單體的速率是負端的 1010 倍以上。平衡期:肌動蛋白聚合微絲的速度與其解離微絲的速度達到平 衡,微絲長度不變,仍進行著聚合、解聚活動。22.22. 為什么說微絲有踏車行為?在微絲裝配時,當肌動蛋白分子添加到肌動蛋白絲上的速率正好 等于肌動蛋白分子從肌動蛋白絲上解離的速率時,微絲凈長度沒改變,這種過程稱踏車行為”。.專業(yè)專注專業(yè)專注23.23. 微絲裝配的成核發(fā)生在哪里?質(zhì)膜24.24. 哪些離子、藥物因素能影響微絲的組裝?MgMg2+存在,微絲聚合;CaCa2+存在,微絲解聚。細胞松弛素 B B:從霉菌中提取,與微絲正端結(jié)合,抑制微絲的聚 合。鬼筆環(huán)肽:從有毒蘑菇中提
15、取,結(jié)合聚合型微絲,穩(wěn)定微絲抑制 解聚。25.25. 微絲的功能有哪些?(1 1) 微絲構(gòu)成細胞的支架并維持細胞的形態(tài):微絲在細胞內(nèi)構(gòu)成 網(wǎng)絡(luò)或成束才能發(fā)揮作用。 而應力纖維是在細胞膜下方由微絲束構(gòu) 成的纖維狀結(jié)構(gòu), 常與細胞的長軸平行, 往往一端與細胞膜連接,另一端插入胞質(zhì),或與中間絲結(jié)合,應力纖維賦予細胞韌性和強 度。(2 2)微絲參與細胞運動:許多動物細胞位置移動時采用變形運 動;這些細胞含有豐富的微絲,通過肌動蛋白和微絲結(jié)合蛋白的相 互作用,進行變形運動。(3 3)微絲參與細胞分裂:有絲分裂的核分裂完成后,兩個即將形 成的子細胞間,在赤道面膜下,肌動蛋白微絲與肌球蛋白 IIII 組裝成
16、 瞬時性收縮束 收縮環(huán),收縮產(chǎn)生動力,將質(zhì)膜向內(nèi)拉,完成一 分為二后解體。(4 4)微絲參與肌肉收縮:許多微絲結(jié)合蛋白都是在肌細胞中發(fā)現(xiàn);肌細胞由數(shù)百個肌原纖維組成;每根肌原纖維由細肌絲和粗肌 絲重疊而形成;肌肉收縮的基本單位是肌小節(jié),由肌原纖維組成。(5 5)微絲參與細胞內(nèi)物質(zhì)運輸: 微絲也介導一些靠近細胞膜的遠 端專業(yè)專注物質(zhì)運輸,肌球蛋白 I I 從微絲負端向正端運輸貨物;肌球蛋白 I I 尾 部同質(zhì)膜結(jié)合,利用其頭部,可將微絲從一個部位運向另一個部 位。(6 6)微絲參與細胞內(nèi)信號傳遞: 細胞膜表面的受體在收到外界信 號作用時, 可觸發(fā)膜下肌動蛋白結(jié)構(gòu)變化, 啟動細胞內(nèi)激酶變化的 信號
17、傳導。26.26. 參與有絲分裂胞質(zhì)收縮環(huán)形成的是哪種肌球蛋白?肌球蛋白 IIII27.27. 組成肌肉粗肌絲的是哪種肌球蛋白?肌球蛋白 IIII28.28. 微絲馬達蛋白是哪種肌球蛋白?運動方向如何?肌球蛋白-1-1 ;沿微絲的負端向正端移動。29.29. 中間纖維的直徑?結(jié)構(gòu)?類型?直徑:1010nmnm ;結(jié)構(gòu):中間纖維是絲狀蛋白多聚體,是一種堅韌持久的蛋白質(zhì)纖 維。中間纖維單體(亞基)是蛋白質(zhì)纖維分子,具有共同的結(jié)構(gòu) 域:一個a- -螺旋的中間去,兩側(cè)是球形的 N N 端和 C C 端。所有的亞基 中間螺旋結(jié)構(gòu)域都保守,中間桿狀區(qū)分為 4 4 個螺旋區(qū),之間被 3 3 個間 隔區(qū)隔開,
18、間隔區(qū)也是保守的。亞基裝配時靠a- -螺旋區(qū)配對形成二聚體。N N 端與 C C 端高度可變,不同亞基在 N N、C C 端大小和氨基酸組成 差別很大。中間纖維亞基的大小主要取決于 C C 端的變化。類型:(I I)酸性角蛋白:主要分布在表皮細胞;(IIII)中性/ /堿性角蛋白:主要分布在表皮;(IIIIII) 非上皮細胞的中間纖維蛋白:A A、波形蛋白(成纖維細 胞、白細專業(yè)專注胞及其他細胞);B B、結(jié)蛋白(肌細胞);C C、外周蛋白(外周神經(jīng)元;D D、膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(神經(jīng)膠質(zhì)細胞)。(IVIV) 神經(jīng)絲蛋白 (NF-LNF-L、NF-MNF-M、NF-HNF-H):主要分布神經(jīng)
19、元;(V V)核纖層蛋白(核纖層蛋白 A A、核纖層蛋白 B B、核纖層蛋白C C)(VIVI)巢蛋白:主要分布中央精神系統(tǒng)的干細胞。3030中間纖維的特點(1 1)沒有極性,少有游離四聚體,四聚體多組裝為中間纖維;(2 2)其裝配與穩(wěn)定、蛋白濃度無關(guān);(3 3)其裝配不需要 ATPATP、GTPGTP 或結(jié)合蛋白的輔助。3131中間纖維是如何裝配的?2 2 個亞基的 a a 螺旋桿狀區(qū)同向以卷曲螺旋形式相互纏繞 ,形成約 48n48nm m長的繩狀二聚體;2 2 個二聚體反向平行交錯相連,形成四聚體 亞單位;四聚體側(cè)向組裝,形成含 8 8 個平行排列原纖維的結(jié)構(gòu),以 簡單結(jié)合反應加到伸長中的
20、中間纖維上 ,結(jié)合反應沿中間纖維長軸排列,按螺旋形式包裹在一起32.32. 中間纖維的功能?(1 1 )中間纖維在細胞內(nèi)形成一個完整的網(wǎng)狀骨架系統(tǒng) :IFIF 與質(zhì)膜 和細胞外基質(zhì)相連,內(nèi)與核纖層相連,整個纖維網(wǎng)架圍繞細胞核,穿過胞質(zhì)終止于質(zhì)膜;中間纖維有一定可塑性,對維持細胞整體結(jié) 構(gòu)、功能完成有重要作用。(2) 中間纖維為細胞提供機械強度支持。專業(yè)專注(3) 中間纖維參與細胞連接:一些器官和皮膚的表皮細胞是通過 橋粒和半橋粒連接在一起,中間纖維參與黏著連接的橋粒、半橋 粒,在細胞中形成一個網(wǎng)絡(luò),既能保持細胞形態(tài),又能提供支持 力。(4) 中間纖維參與細胞內(nèi)信息傳遞及物質(zhì)運輸:中間纖維外連質(zhì) 膜、細胞外基質(zhì),內(nèi)穿核骨架,形成跨膜的信息通道;中間纖維在 體外與單鏈DNADNA 有咼度親和性,在細胞內(nèi)明顯聚集在核周圍,可能 與 DNADNA 復制、轉(zhuǎn)錄有關(guān)。(5) 中間纖維維持細胞核穩(wěn)定:細胞核膜下有一層有核纖層蛋白 組成的網(wǎng)絡(luò),對于維持細胞和形態(tài)有重要作用,核纖層是中間纖維 的
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