生物化學(xué)試題庫

1、生物化學(xué)試題庫1. 糖類化合物有哪些生物學(xué)功能？-答案2.葡萄糖溶液為什么有變旋現(xiàn)象？-答案3.什么是糖蛋白？有何生物學(xué)功能？-答案4.纖維素和糖原都是由D-葡萄糖經(jīng)14連接的大分子，相對(duì)分子質(zhì)量相當(dāng)，是什么結(jié)構(gòu)特點(diǎn)造成它們的物理性質(zhì)和生物學(xué)功能上有很大的差異？-答案5.天然脂肪酸在結(jié)構(gòu)上有哪些共同特點(diǎn) -答案6.為什么多不飽和脂肪酸容易受到脂質(zhì)過氧化？-答案7.人和動(dòng)物體內(nèi)膽固醇可能轉(zhuǎn)變?yōu)槟男┚哂兄匾硪饬x的類固醇物質(zhì)？-答案8.判斷氨基酸所帶的凈電荷，用pI-pH比pH-pI更好，為什么？-答案9.甘氨酸是乙酸甲基上的氫被氨基取代生成的，為什么乙酸羧基的pKa是4.75，而甘氨酸羧基的p

2、Ka是2.34？- -答案10.（1）Ala，Ser，Phe，Leu，Arg，Asp，Lys 和His的混合液中pH3.9進(jìn)行紙電泳，哪些向陽極移動(dòng)？哪些向陰極移動(dòng)？（2）為什么帶相同凈電荷的氨基酸如Gly和Leu在紙電泳時(shí)遷移率會(huì)稍有差 別？- 答案11.（1）由20種氨基酸組成的20肽，若每種氨基酸殘基在肽鏈中只能出現(xiàn)1次，有可能形成多少種不同的肽鏈？（2）由20種氨基酸組成的20肽，若在 肽鏈的任一位置20種氨基酸出現(xiàn)的概率相等，有可能形成多少種不同的肽 鏈？-答案12.在大多數(shù)氨基酸中， -COOH的pKa都接近2.0， -NH 的pKa都接近9.0。但是，在肽鏈中， -COOH的pK

3、a為3.8，而 -NH3 的pKa值為7.8。你能解釋這種差別嗎？-答案13. -螺旋的穩(wěn)定性不僅取決于肽鏈內(nèi)部的氫鍵，而且還與氨基酸側(cè)鏈的性質(zhì)相關(guān)。室溫下，在溶液中下列多聚氨基酸哪些能形成 螺旋？哪些能形成其他有規(guī)則的結(jié)構(gòu)？哪些能形成無規(guī)則的結(jié)構(gòu)？并說明其理由。（1）多聚亮氨酸pH7.0；（2）多聚異亮氨酸pH7.0；(3) 多聚精氨酸pH7.0；(4) 多聚精氨酸pH13.0；（5）多聚谷氨酸pH1.5； (6) 多聚蘇氨酸pH7.0； (7) 多聚羥脯氨酸pH7.0.-答案14.球蛋白的相對(duì)分子質(zhì)量增加時(shí)，親水殘基和疏水殘基的相對(duì)比例會(huì)發(fā)生什么變化？-答案15.血紅蛋白 亞基和 亞基的空

4、間結(jié)構(gòu)均與肌紅蛋白相似，但肌紅蛋白中的不少親水殘基在血紅蛋白中被疏水殘基取代了，這種現(xiàn)象能說明什么問題。-答案16.簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)溶液的穩(wěn)定因素，和實(shí)驗(yàn)室沉淀蛋白質(zhì)的常用方法。-答案17.（1）除共價(jià)鍵外，維持蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的主要非共價(jià)鍵有哪幾種？（2）有人說蛋白質(zhì)組學(xué)比基因組學(xué)研究更具挑戰(zhàn)性，請(qǐng)從蛋白質(zhì)分子和DNA分子的復(fù)雜性 和研究難度來說明這一觀點(diǎn)。 - 答案18.簡(jiǎn)要敘述蛋白質(zhì)形成寡聚體的生物學(xué)意義。-答案19.胎兒血紅蛋白（Hb F）在相當(dāng)于成年人血紅蛋白（Hb A） 鏈143殘基位置含有Ser,而成年人 鏈的這個(gè)位置是具陽離子的His殘基。殘基143面向 亞基之間的中央空隙。（1）為什么2

5、，3-二磷酸甘油酸（2，3-BPG）同脫氧Hb A的結(jié)合比同脫氧Hb F更牢固？（2）Hb F對(duì)2，3-BPG低親和力如何影響到Hb F對(duì)氧的親和力？這種差別對(duì)于氧從母體血液向胎兒血液的運(yùn)輸有何意義。-答案20.蛋白質(zhì)變性后，其性質(zhì)有哪些變化？-答案21.為什么大多數(shù)球狀蛋白質(zhì)在溶液中具有下列性質(zhì)。（1）在低pH值時(shí)沉淀。（2）當(dāng)離子強(qiáng)度從零逐漸增加時(shí)，其溶解度開始增加，然后下降，最后出現(xiàn)沉 淀。（3）在一定的離子強(qiáng)度下，達(dá)到等電點(diǎn)pH值時(shí)，表現(xiàn)出最小的溶解度。（4）加熱時(shí)沉淀。（5）加入一種可和水混溶的非極性溶劑減小其介質(zhì)的介電常 數(shù)，導(dǎo)致溶解度的減小。（6）如果加入一種非極性強(qiáng)的溶劑。使介

6、電常數(shù)大大地下降會(huì)導(dǎo)致變性。 - 答案22.凝膠過濾和SDS-PAGE 均是利用凝膠，按照分子大小分離蛋白質(zhì)的，為什么凝膠過濾時(shí)，蛋白質(zhì)分子越小，洗脫速度越慢，而在SDS-PAGE中，蛋白質(zhì)分子越小，遷移速度越 快？- 答案23.一種蛋白質(zhì)的混合物在pH6的DEAE-纖維素柱中被分離，用pH6稀鹽緩沖液可以洗脫C，用pH6的高鹽緩沖液，B和A依次被洗脫，用凝膠過濾測(cè) 定得A的Mr 是240000，B的Mr是120000，C的Mr是60000。但SDS-PAGE只發(fā)現(xiàn)一條帶。請(qǐng)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 -答案24.簡(jiǎn)述酶與一般化學(xué)催化劑的共性及其特性？-答案25.Vmax與米氏常數(shù)可以通過作圖法求得，試比

7、較v-S圖，雙倒數(shù)圖，v-v/S作圖，S/v-S作圖及直接線性作圖法求Vmax和Km的優(yōu)缺點(diǎn)？-答案27.在很多酶的活性中心均有His殘基參與，為什么？-答案28.試比較酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用與非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用的異同。-答案29.闡述酶活性部位的概念。可使用哪些主要方法研究酶的活性中心？-答案30.影響酶反應(yīng)效率的因素有哪些?它們是如何起作用的?-答案31.輔基和輔酶在催化反應(yīng)中起什么作用？它們有何不同？-答案32.哪些因素影響酶的活性？酶宜如何保存？-答案33.某酶的化學(xué)修飾實(shí)驗(yàn)表明，Glu和Lys殘基是這個(gè)酶活性所必需的兩個(gè)殘基。根據(jù)pH對(duì)酶活性影響研究揭示，該酶的最大催化活性的pH近中性。請(qǐng)

8、你 說明這個(gè)酶的活性部位的Glu和Lys殘基在酶促反應(yīng)中的作用，并予以解釋。 -答案34.某物質(zhì)能可逆抑制琥珀酸脫氫酶的活性，但不知道該抑制劑屬何種抑制劑。你將如何證實(shí)該物質(zhì)是什么類型抑制劑。-答案35.胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶同屬絲氨酸蛋白酶類，具有相同的電荷轉(zhuǎn)接系統(tǒng)，當(dāng)胰蛋白酶102位的Asp突變?yōu)锳la時(shí)將對(duì)該酶（1）與底物的結(jié)合和（2）對(duì)底物的催化有什么影響？-答案36.當(dāng)抑制劑能選擇性地和不可逆地與酶的活性部位的殘基結(jié)合，從而能幫助鑒別酶時(shí)，這類抑制劑就可以稱為親和標(biāo)記試劑。已知TPCK是胰凝乳蛋白酶的親 和標(biāo)記試劑，它通過使蛋白質(zhì)His烷基化而使其失活。（1）為胰蛋白酶設(shè)計(jì)一個(gè)類似T

9、PCK的親和標(biāo)記試劑還可以用于什么蛋白 質(zhì)？-答案37. 酶的疏水環(huán)境對(duì)酶促反應(yīng)有何意義？-答案38.同工酶形成的機(jī)制是什么？同工酶研究有哪些應(yīng)用？-答案39.一個(gè)雙螺旋DNA分子中有一條鏈的成分A=0.30，G=0.24，（1）請(qǐng)推測(cè)這一條鏈上的T，C的情況。（2）互補(bǔ)鏈的 A，G，T和C的情況。-答案40.如何看待RNA功能的多樣性?-答案41.如果人體有1014個(gè)細(xì)胞，每個(gè)體細(xì)胞的DNA含量為6.4×109個(gè)堿基對(duì)。試計(jì)算人體DNA的總長(zhǎng)度是多少？是太陽-地球之間距離 （2.2×109公里）的多少倍？已知雙鏈DNA每1000個(gè)核苷酸重1×10-18g，求人體

10、的DNA的總質(zhì)量。 -答案42.為什么說堿基堆積作用是一種重要的穩(wěn)定雙螺結(jié)構(gòu)的力？-答案43.（a）計(jì)算相對(duì)分子質(zhì)量為3 × 107的雙股DNA分子的長(zhǎng)度；（b）這種DNA一分子占有的體積是多少？（c）這種DNA一分子含多少圈螺旋?-答案44.如何區(qū)分相對(duì)分子質(zhì)量相同的單鏈DNA與單鏈RNA？-答案45.什么是DNA變性？DNA變性后理化性有何變化？-答案46.組成RNA的核苷酸也是以,-磷酸二酯鍵彼此連接起來。盡管RNA分子中的核糖還有2羥基，但為什么不形成,磷酸二酯鍵？-答案47.何謂Tm？影響Tm大小的因素有哪些？在實(shí)驗(yàn)中如何計(jì)算Tm值？-答案48.什么是核酸雜交？有何應(yīng)用價(jià)值

11、？-答案49.超螺旋的生物學(xué)意義有哪些?-答案50.DNA雙螺旋模型的主要特征是，一條鏈上的堿基與另一條鏈上的堿基在同一個(gè)平面上配對(duì)。Watson和Crick提出，腺嘌呤只與胸嘧啶配對(duì)，鳥嘌 呤只與胞嘧啶配對(duì)。出于什么樣的結(jié)構(gòu)考慮，使他們確定這樣的配對(duì)方案?-答案51.如果降低介質(zhì)的離于強(qiáng)度會(huì)對(duì)雙螺旋DNA的解鏈曲線有何影響?如果向介質(zhì)加入少量的乙醇呢?-答案52.為什么相同相對(duì)分子質(zhì)量的線狀DNA比共價(jià)閉合的環(huán)狀DNA能結(jié)合更多的溴乙錠？如何利用這一點(diǎn)在氯化銫梯度中分離這兩種DNA？為什么共價(jià)閉環(huán) DNA在含溴乙錠的介質(zhì)中的沉降速度隨溴乙錠的濃度增加出現(xiàn)近似U形的變化？-答案53.以B族維生

12、素與輔酶的關(guān)系，說明B族維生素在代謝中的重要作用。-答案54.維生素A缺乏時(shí)，為什么會(huì)患夜盲癥？-答案55.為什么缺乏葉酸和維生素B12可引起巨幼紅細(xì)胞性貧血？-答案56.簡(jiǎn)述維生素C的生化作用。-答案57.試述G蛋白參與信號(hào)傳遞在細(xì)胞代謝調(diào)節(jié)中的意義。-答案58.簡(jiǎn)述cAMP的生成過程及作用機(jī)制。-答案59.介紹兩條Ca+介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑。-答案60.腺苷酸環(huán)化酶所催化的反應(yīng)如下： ATPcAMP +PPi，其平衡常數(shù)Keq=0.065，如果ATP水解成AMP + PPi，Go=-33.44 kJ/mol，試計(jì)算cAMP水解成AMP的Go是多少？-答案 61.在25，pH為7.0的條件下，

13、向濃度為0.1mol/L的葡萄糖-6-磷酸溶液加入磷酸葡萄糖變位酶以催化葡萄糖-6-磷酸葡萄糖-1-磷酸 的反應(yīng)，反應(yīng)的Go為 +7.5kJ/mol，求反應(yīng)后葡萄糖-6-磷酸和葡萄糖-1-磷酸的最終濃度是多 少？-答案62.計(jì)算1摩爾葡萄糖在肝臟細(xì)胞中徹底氧化成CO2和H2O，可產(chǎn)生多少摩爾ATP？如果有魚藤酮存在，理論上又可產(chǎn)生多少摩爾ATP？-答案63.試比較電子傳遞抑制劑、氧化磷酸化抑制劑、和氧化磷酸化作用解偶聯(lián)劑對(duì)生物氧化作用的影響。-答案64.在一個(gè)具有完全細(xì)胞功能的哺乳動(dòng)物肝臟細(xì)胞勻漿體系中，當(dāng)1摩爾下列底物完全氧化成CO2和H2O時(shí)，能產(chǎn)生多少 ATP？乳酸； 檸檬酸； 磷酸稀醇

14、式丙酮酸。-答案65.從ATP的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)說明其在機(jī)體細(xì)胞能量傳遞中的作用。-答案66.分離的完整線粒體懸浮液中有過量的ADP、O2和谷氨酸，谷氨酸在線粒體基質(zhì)中可產(chǎn)生NADH和FADH2，如果在該體系中加入下列物質(zhì)，會(huì)對(duì)氧的 消耗和ATP的合成產(chǎn)生什么影響？(1) 二硝基苯酚，(2)二硝基苯酚，同時(shí)加入HCN，(3)加入寡霉素，然后加入二硝基苯酚。 -答案67.葡萄糖分子的第二位用14C標(biāo)記，在有氧情況下進(jìn)行徹底氧化。問經(jīng)過幾輪三羧酸循環(huán)，該同位素碳可作為CO2釋放？-答案68.糖酵解和糖異生作用中各有三個(gè)可能產(chǎn)生無效循環(huán)的位點(diǎn)，這三個(gè)位點(diǎn)在兩條途徑中分別由什么酶來催化？以兩條途徑中果糖-6-

15、磷酸與果糖-1,6-二 磷酸之間的轉(zhuǎn)變?yōu)槔f明細(xì)胞是如何避免無效循環(huán)的。 -答案69.已知磷酸稀醇式丙酮酸轉(zhuǎn)變成丙酮酸時(shí)，G0'為31.38 kJ/mol，計(jì)算在標(biāo)準(zhǔn)狀況下，當(dāng)ATP/ADP=10時(shí)， 磷酸稀醇式丙酮酸和丙酮酸的濃度比。-答案70.計(jì)算由2摩爾丙酮酸轉(zhuǎn)化成1摩爾葡萄糖需要提供多少摩爾的高能磷酸化合物？-答案71.簡(jiǎn)要說明甘油徹底氧化成CO2和H2O的過程，并計(jì)算1摩爾甘油徹底氧化成CO2和H2O凈生成多少摩爾的ATP？-答案72.簡(jiǎn)述血糖的來源和去路，人體如何維持血糖水平的恒定？-答案73.在EMP途徑中，磷酸果糖激酶受ATP的反饋抑制，而ATP卻又是磷酸果糖激酶的一種

16、底物，試問為什么在這種情況下并不使酶失去效用？-答案74.在充分光照下，25，pH值7的離體葉綠體中，ATP、ADP和Pi的穩(wěn)態(tài)濃度分別為3mmol/L、0.1 mmol/L、10 mmol/L。問（a）在這些條件下，合成ATP反應(yīng)的G是多少？（b）在此葉綠體中光誘導(dǎo)的電子傳遞提供ATP合成所需的能量（通過質(zhì)子電動(dòng)勢(shì)），在 這些條件下合成1摩爾ATP所需的最小電勢(shì)差（E0）是多少？假設(shè)每產(chǎn)生1摩爾ATP要求2摩爾電子（2e-）通過電子傳遞鏈。 -答案75.說明knoop的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)對(duì)脂肪酸氧化得到的結(jié)論。比較他的假說與現(xiàn)代-氧化學(xué)說的異同。-答案76.計(jì)算一分子硬脂酸徹底氧化成CO2和H2O，產(chǎn)

17、生的ATP分子數(shù)，并計(jì)算每克硬脂酸徹底氧化產(chǎn)生的自由能。-答案77.試從脂類代謝紊亂角度分析酮癥、“脂肪肝”和動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病原因。（復(fù)旦大學(xué)2000年考研題）-答案78.說明真核生物體內(nèi)脂肪酸合酶的結(jié)構(gòu)與功能。-答案79.脂肪酸氧化和脂肪酸的合成是如何協(xié)同調(diào)控的?-答案80.試比較脂肪酸合成和脂肪酸-氧化的異同。-答案81.血漿脂蛋白有哪幾類?并說明各自的來源、化學(xué)組成特點(diǎn)和主要生理功能。-答案82.乙酰CoA羧化酶在脂肪酸合成中起調(diào)控作用，試述其調(diào)控機(jī)制。-答案83.簡(jiǎn)述載脂蛋白（即apo1ipoprotein）的分類、組成特點(diǎn)及其主要功能。-答案84.簡(jiǎn)述影響和調(diào)節(jié)膽固醇合成的主要因素

18、。-答案85.丙氨酸、乳酸和丙酮酸具有相似的結(jié)構(gòu)，通過計(jì)算說明在肝臟組織中，等摩爾的丙氨酸、乳酸和丙酮酸完全氧化，哪種物質(zhì)產(chǎn)能更高？（南開大學(xué)2002考研題）-答案86.在氨基酸的生物合成中，哪些氨基酸與三羧酸循環(huán)中間物有關(guān)？哪些氨基酸與糖酵解和戊糖磷酸途徑有直接聯(lián) 系？- 答案87.尿素循環(huán)和三羧酸循環(huán)之間有哪些聯(lián)系？-答案88.谷氨酸經(jīng)轉(zhuǎn)氨基作用生成-酮戊二酸，試問1摩爾谷氨酸徹底氧化成CO2和H2O共生成多少摩爾的ATP？并簡(jiǎn)要解釋其氧化產(chǎn)能途經(jīng)。-答案89.單克隆抗體是通過雜交瘤技術(shù)制備的。雜交瘤細(xì)胞是經(jīng)抗原免疫的B細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞。為便于篩選融合細(xì)胞，選用次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移

19、酶缺陷 （HGPRT-）的腫瘤細(xì)胞和正常B細(xì)胞融合后在HAT（次黃嘌呤、氨甲蝶呤、胞苷）選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，此時(shí)只有融合細(xì)胞才能生長(zhǎng)和繁殖。請(qǐng)解釋選擇原 理。-答案90.怎樣確定雙向復(fù)制是DNA復(fù)制的主要方式，以及某些生物的DNA采取單向復(fù)制？-答案91.DNA復(fù)制需要RNA引物的證據(jù)有哪些？-答案92.已知大腸桿菌長(zhǎng)度為1100m，它的復(fù)制是在一世代大約40分鐘內(nèi)通過一個(gè)復(fù)制叉完成的，試求其復(fù)制體的鏈增長(zhǎng)速度。-答案93.若使15N標(biāo)記的大腸桿菌在14N培養(yǎng)基中生長(zhǎng)三代，提取DNA，并用平衡沉降法測(cè)定DNA密度，其14N-DNA分子與14N15N雜合DNA分子之比應(yīng)為多少？-答案94.DNA和

20、RNA各有幾種合成方式，各由什么酶催化新鏈的合成？-答案95.真核生物DNA聚合酶有哪幾種？它們的主要功能是什么？-答案96.要說明原核生物的轉(zhuǎn)錄過程。-答案97.原核生物RNA聚合酶是如何找到啟動(dòng)子的？真核生物RNA聚合酶與之相比有何異同？-答案98.真核生物三類啟動(dòng)子各有何結(jié)構(gòu)特點(diǎn)？-答案99.細(xì)胞內(nèi)至少要有幾種tRNA才能識(shí)別64個(gè)密碼子？-答案100.什么是無細(xì)胞翻譯系統(tǒng)，一個(gè)無細(xì)胞翻譯系統(tǒng)需要哪些基本成分？常用的無細(xì)胞翻譯系統(tǒng)有哪些？-答案101.簡(jiǎn)述原核細(xì)胞和真核生物蛋白質(zhì)合成的主要區(qū)別（青島海洋大學(xué)2001年考研題）。-答案102.在原核細(xì)胞中高效表達(dá)真核細(xì)胞的基因要注意哪些問題

21、？-答案103.論述遺傳密碼的特點(diǎn)。-答案104.一基因的編碼序列中發(fā)生了一個(gè)堿基的突變，那么這個(gè)基因的表達(dá)產(chǎn)物在結(jié)構(gòu)上、功能上可能發(fā)生哪些改變？-答案105.如果mRNA上的閱讀框已被確定，它將只編碼一種多肽的氨基酸順序。從一蛋白質(zhì)的已知氨基酸順序，是否能確定唯一的一種mRNA的核苷酸序列？為什么？-答案106.如果E.Coli 染色體DNA的75%可用來編碼蛋白質(zhì)，假定蛋白質(zhì)的平均相對(duì)分子質(zhì)量為60000，以三個(gè)堿基編碼一個(gè)氨基酸計(jì)算，（1）若該染色體DNA大約能編碼 2000種蛋白質(zhì)，求該染色體DNA的長(zhǎng)度？（2）該染色體DNA的相對(duì)分子質(zhì)量大約是多少？（氨基酸殘基的平均相對(duì)分子質(zhì)量是1

22、20，核苷酸對(duì)的平均相 對(duì)分子質(zhì)量是640）。- 答案107.原核生物與真核生物翻譯起始階段有何異同？-答案108.原核生物的肽鏈延長(zhǎng)需要哪三種蛋白質(zhì)因子參與？它們各自有何功能？-答案109.盡管IF-2、EF-Tu、EF-G和RF-3在蛋白質(zhì)合成中的作用顯著不同，然而這四種蛋白質(zhì)都有一個(gè)氨基酸序列十分相似的結(jié)構(gòu)域。你估計(jì)此結(jié)構(gòu)域的功能會(huì)是什么？-答案110.（1）合成由600個(gè)氨基酸殘基組成的大腸桿菌某蛋白時(shí)需水解多少個(gè)磷酸酐鍵？（2）蛋白質(zhì)的合成為什么需要消耗這樣多的自由能？（計(jì)算時(shí)不考慮合成氨基酸、mRNA、tRNA或核糖體所需的能量）。-答案111.肽鏈合成后的加工修飾有哪些途徑？-答

23、案112.簡(jiǎn)述干擾素抑制病毒繁殖的機(jī)制。-答案113.為什么翻譯能被一段與mRNA互補(bǔ)的序列（即反義RNA）抑制？-答案114.在基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控中，為什么真核生物多為正調(diào)控，而原核生物多為負(fù)調(diào)控？-答案115.一個(gè)基因如何產(chǎn)生多種不同類型的mRNA分子？-答案116.自然質(zhì)粒通常需要改造，才能成為理想的質(zhì)粒載體，請(qǐng)問質(zhì)粒改造包括哪些基本內(nèi)容？-答案117.什么是基因組文庫（genomic library）？構(gòu)建基因組文庫涉及哪些基本過程？它同遺傳學(xué)上的基因庫有什么不同？-答案118.舉例說明基因表達(dá)的誘導(dǎo)與阻遏，正調(diào)控與負(fù)調(diào)控。-答案119.在lac操縱子中，（1）lac操縱基因的突變

24、，（2）lacI基因的突變，（3）啟動(dòng)子的突變將會(huì)對(duì)結(jié)構(gòu)基因表達(dá)產(chǎn)生什么影響。-答案120.概述原核生物基因表達(dá)調(diào)控的特點(diǎn)。-答案121.概述真核生物基因組的特點(diǎn)。-答案122.簡(jiǎn)答真核生物基因表達(dá)的調(diào)控方式。-答案123.真核生物基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控因子有哪些重要的結(jié)構(gòu)模體？-答案124.在基因克隆中，目的基因有哪些主要來源？-答案125.用于DNA重組的載體應(yīng)具備什么條件？常用的載體有哪一些？各有何特點(diǎn)？-答案126.什么是DNA重組（基因克?。?？簡(jiǎn)述DNA重組的步驟及其用途。-答案127.原核表達(dá)載體應(yīng)具備哪些基本的結(jié)構(gòu)元件？-答案128.概述篩選和鑒定DNA重組體的常用方法。-答案129.為

25、什么藍(lán)白斑選擇法有時(shí)會(huì)出現(xiàn)假陽性？-答案130.將重組DNA導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)有哪些方法？-答案131.分析蛋白質(zhì)融合表達(dá)和非融合表達(dá)的利弊。-答案132.概述基因定點(diǎn)誘變的常用方法。-答案133.什么是蛋白質(zhì)工程？舉例說明蛋白質(zhì)工程的意義。-答案生物化學(xué)答疑庫1.答（1）作為生物體的結(jié)構(gòu)成分：植物的根、莖、葉含有大量的纖維素、半纖維素和果膠等，這些物質(zhì)是構(gòu)成植物細(xì)胞壁的主要成分。肽聚糖屬于雜多糖， 是構(gòu)成細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)多糖。（2）作為生物體內(nèi)的主要能源物質(zhì)：糖在生物體內(nèi)分解時(shí)通過氧化磷酸化放出能量，供生命活動(dòng)需要。生物體內(nèi)作為能源貯存的糖 類有淀粉、糖原等。（3）在生物體內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌镔|(zhì)：有些糖是

26、重要的代謝中間物，糖類物質(zhì)通過這些中間代謝物合成其他生物分子例如氨基酸、核苷酸 等。（4）作為細(xì)胞識(shí)別的信息分子:：糖蛋白是一類生物體內(nèi)分布極廣的復(fù)合糖，其中的糖鏈在分子或細(xì)胞的特異性識(shí)別過程中可能起著信息分子的作用。與免疫 保護(hù)、發(fā)育、形態(tài)發(fā)生、衰老、器官移植等均與糖蛋白有關(guān)。-返回試 題2.答 D-吡喃葡萄糖在乙醇溶液或吡啶溶液中可以形成結(jié)晶，得到兩種比旋光度不同的D-葡萄糖，前者的比旋光度為+113o，后者的比旋光度為+19o。如果把 這兩種葡萄糖結(jié)晶分別溶解在水中，并放在旋光儀中觀察，前者的比旋光度由+113 o 降至+52 o，后者由+19 o 升到+52 o ，隨后穩(wěn)定不變。葡萄糖

27、溶液發(fā)生比旋光度改變的主要原因是葡萄糖具有不同的環(huán)狀結(jié)構(gòu)，當(dāng)葡萄糖由開鏈結(jié)構(gòu)變?yōu)榄h(huán)狀結(jié)構(gòu)時(shí)，C1原子同時(shí)變成不對(duì)稱碳原子， 同時(shí)產(chǎn)生了兩個(gè)新的旋光異構(gòu)體。一個(gè)叫-D-吡喃葡萄糖，另外一個(gè)叫-D-吡喃葡萄糖，這兩種物質(zhì)互為異頭物，在溶液中可以通過開鏈?zhǔn)浇Y(jié)構(gòu)發(fā)生相互轉(zhuǎn) 化，達(dá)到最后的平衡，其比旋光度為+52 o 。-返回試題3.答 糖蛋白是廣泛存在與動(dòng)物、植物和微生物中的一類含糖基（或糖衍生物）的蛋白質(zhì)，糖基與蛋白質(zhì)的氨基酸以共價(jià)鍵結(jié)合。糖蛋白中的寡糖鏈大小不一，小的僅為1 個(gè)單糖，復(fù)雜的有1020個(gè)單糖分子或其衍生物組成的。有的寡糖鏈?zhǔn)侵辨?，有的為支鏈，組成寡糖鏈的單糖主要有葡萄糖、甘露糖、木糖

28、、巖藻糖、N-乙酰 -氨基葡萄糖、N-乙酰-氨基半乳糖、葡萄醛酸和艾杜糖醛酸等。糖蛋白的主要生物學(xué)功能：（1）激素功能：一些糖蛋白屬于激素，例如促濾泡激素、促黃體激 素、絨毛膜促性腺激素等均屬于糖蛋白。（2）保護(hù)機(jī)體：細(xì)胞膜中的免疫球蛋白、補(bǔ)體也是糖蛋白。（3）凝血和纖溶作用：參與血液凝固和纖溶的蛋白質(zhì)例如凝 血酶原、纖溶酶原均為糖蛋白。（4）具有運(yùn)輸功能：例如轉(zhuǎn)運(yùn)甲狀腺素的結(jié)合蛋白、運(yùn)輸銅元素的銅藍(lán)蛋白、運(yùn)輸鐵元素的轉(zhuǎn)鐵蛋白等均屬于糖蛋白。（5）決定 血液的類型：決定血型的凝集原A,B,O以糖蛋白和糖脂的形式存在。（6）與酶的活性有關(guān)：糖蛋白在酶的新生肽鏈折疊、轉(zhuǎn)運(yùn)和保護(hù)等方面普遍起作 用。

29、（7）一些凝集素屬于糖蛋白。-返回試題4.答糖原結(jié)構(gòu)與支鏈淀粉的結(jié)構(gòu)很相似，糖原的分支較多，平均每812個(gè)殘基發(fā)生一次分支。糖元高度的分支結(jié)構(gòu)一則可以增加分子的溶解度，二則將有更多的非還原端同時(shí)接受到降解酶的作用，加速聚合物轉(zhuǎn)化為單體，有利于及時(shí)動(dòng)用葡萄糖庫以供生物體代謝的急需。纖維素是線性葡聚糖，殘基間通過（14）糖苷鍵連接的纖為二糖單位。纖維素鏈中的每一個(gè)殘基相對(duì)前一個(gè)翻轉(zhuǎn)1800，使鏈采取完全伸展的構(gòu)象。相鄰、 平行的伸展鏈在殘基環(huán)面的水平向通過鏈內(nèi)和鏈間的氫鍵網(wǎng)形成片層結(jié)構(gòu)。若干條鏈聚集成周期性晶格的分子束，稱微晶或膠束。多個(gè)膠束形成微纖維，在植物細(xì)胞 中，纖維素包埋在果膠、半纖維素、

30、木質(zhì)素、伸展蛋白等組成的基質(zhì)中。纖維素與基質(zhì)粘合在一起增強(qiáng)了細(xì)胞壁的抗張強(qiáng)度和機(jī)械性能，以適應(yīng)植物抵抗高滲透壓和 支撐高大植株的需要。返回試題5.-返回試題答 來自動(dòng)物的天然脂肪酸碳骨架為線性，雙鍵數(shù)目一般為14個(gè)，少數(shù)為6個(gè)。細(xì)菌所含的脂肪酸大多數(shù)是飽和的，少數(shù)為單烯酸，多于一個(gè)得極少，有些含有分支 的甲基。天然脂肪酸的碳骨架原子數(shù)目幾乎都是偶數(shù)，奇數(shù)碳原子的脂肪酸在陸地生物中極少，但在海洋生物有相當(dāng)?shù)臄?shù)量。天然脂肪酸碳骨架長(zhǎng)度為436個(gè)， 多數(shù)為1224個(gè)，最常見的為16、18碳，例如軟脂酸、硬脂酸和油酸，低于14碳的主要存在于乳脂中。大多數(shù)單不飽和脂肪酸中的雙鍵位置在C9和 C10之間。

31、在多不飽和脂肪酸中通常一個(gè)雙鍵也為于9，其余雙鍵位于9和烴鏈的末端甲基之間，雙鍵一般為順式。6.-返回試題答 多不飽和脂肪酸分子中與兩個(gè)雙鍵相連接的亞甲基（-CH2-）上的氫比較活潑，這是因?yàn)殡p鍵減弱了與之連接的碳原子與氫原子之間的C-H鍵，使氫很容易被 抽去。例如羥基自由基從-CH2-抽去一個(gè)氫原子后，在該碳原子上留下一個(gè)未成對(duì)電子，形成脂質(zhì)自由基L?。后者經(jīng)分子重排、雙鍵共軛化，形成較穩(wěn)定的共 軛二烯衍生物。在有氧的條件下，共軛二烯自由基與氧分子結(jié)合生成脂質(zhì)過氧自由基LOO?。LOO?能從附近的另外一個(gè)脂質(zhì)分子LH抽氫生成新的脂質(zhì)自由基 L?。這樣就形成了鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，導(dǎo)致多不飽和脂肪酸發(fā)生脂

32、質(zhì)過氧化。7.-返回試題答 激素類：雄激素、雌激素、孕酮、糖皮質(zhì)激素和鹽皮質(zhì)激素。非激素類：維生素D、膽汁酸（包括膽酸、鵝膽酸和脫氧膽酸）。牛磺膽酸和甘氨膽酸。8.-返回試題答 當(dāng)一種氨基酸的凈電荷用q=pI-pH表達(dá)時(shí)，若q為正值，則該氨基酸帶正電荷；若q為負(fù)值，則該氨基酸帶負(fù)電荷。q值的正與負(fù)和該氨基酸所帶電荷的種類 是一致的。如果采用q=pH-pI來表達(dá)，則會(huì)出現(xiàn)相反的結(jié)果，即q為負(fù)值時(shí)，氨基酸帶正電荷；q為正值時(shí)，氨基酸帶負(fù)電荷。因此，用pI-pH更好。9.-返回試題答 當(dāng)甘氨酸溶液的pH低于6.0時(shí)，氨基以帶正電荷的形式存在，帶正電荷的氨基通過靜電相互作用（誘導(dǎo)效應(yīng)）使羧基更容易失去

33、質(zhì)子，成為更強(qiáng)的酸。10.-返回試題答（1）Ala ,Ser,Phe和Leu的pI在6左右。在PH3.9時(shí)，都帶凈正電荷，所以向陰極移動(dòng)，但彼此不能分開；His和Arg的pI分別是7.6和 10.8，在pH3.9時(shí)，它們亦帶凈正電荷向陰極移動(dòng)。由于它們帶的正電荷多，所以能和其他向陰極移動(dòng)的氨基酸分開；Asp的pI是3.0,在 PH3.9時(shí)，它帶負(fù)電荷，向陽極移動(dòng)。（2）電泳時(shí)若氨基酸帶有相同電荷，則相對(duì)分子質(zhì)量大的移動(dòng)速度較慢。因?yàn)橄鄬?duì)分子質(zhì)量大的氨基酸，電荷與質(zhì)量的 比小，導(dǎo)致單位質(zhì)量受到的作用力小，所以移動(dòng)慢。11.-返回試題答（1）可能的種類數(shù)為20！ ；（2）可能的種類數(shù)為2020 。

34、12.-返回試題. 答 在游離的氨基酸中，帶正電荷的 使帶負(fù)電荷的-COO-穩(wěn)定，使羧基成為一種更強(qiáng)的酸。相反地，帶負(fù)電荷的羧酸使 穩(wěn)定，使它成為一種更弱的酸，因而使它的pKa升高。當(dāng)肽形成時(shí)，游離的 -氨基和 -羧基分開的距離增大，相互影響降低，從而使它們的pKa值發(fā)生變化。13.-返回試題答（1）多聚亮氨酸的R基團(tuán)不帶電荷，適合于形成 -螺旋。（2）異亮氨酸的 -碳位上有分支，所以形成無規(guī)則結(jié)構(gòu)。（3）在pH7.0時(shí)，所有精氨酸的R基團(tuán)帶正電荷，由于靜電斥力，使氫鍵不能形成，所以形成無規(guī)則結(jié)構(gòu)。（4）在 pH13.0時(shí)，精氨酸的R基團(tuán)不帶電荷，并且 -碳位上沒有分支，所以形成 -螺旋。（5

35、）在pH1.5時(shí)，谷氨酸的R基團(tuán)不帶電荷，并且 -碳位上沒有分支，所以形成 -螺旋。（6）因?yàn)樘K氨酸 -碳位上有分支，所以不能形成 -螺旋。（7）脯氨酸和羥脯氨酸折疊成脯氨酸螺旋，這是一種不同于 -螺旋的有規(guī)則結(jié)構(gòu)。14.-返回試題答 隨著蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量（Mr）的增加，表面積與體積的比率也就是親水殘基與疏水殘基的比率必定減少。為了解釋這一點(diǎn)，假設(shè)這些蛋白質(zhì)是半徑為r的球狀蛋 白質(zhì)，由于蛋白質(zhì)Mr的增加，表面積隨r2增加而增加，體積隨r3的增加而增加，體積的增加比表面積的增加更快，所以表面積與體積的比率減少，因此親水殘 基與疏水殘基的比率也就減少。15.-返回試題答 肌紅蛋白以單體的形式存在

36、，血紅蛋白以四聚體的形式存在，血紅蛋白分子中有更多的親水殘基，說明疏水作用對(duì)于亞基之間的結(jié)合有重要意義。16.-返回試題答 維持蛋白質(zhì)溶液穩(wěn)定的因素有兩個(gè)：（1）水化膜：蛋白質(zhì)顆粒表面大多為親水基團(tuán)，可吸引水分子，使顆粒表面形成一層水化膜，從而阻斷蛋白質(zhì)顆粒的相互聚 集，防止溶液中蛋白質(zhì)的沉淀析出。（2）同種電荷：在pHpI的溶液中，蛋白質(zhì)帶有同種電荷。若pHpI，蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷；若pH<pI，蛋白 質(zhì)帶正電荷。同種電荷相互排斥，阻止蛋白質(zhì)顆粒相互聚集而發(fā)生沉淀。沉淀蛋白質(zhì)的方法，常用的有：（1）鹽析法，在蛋白質(zhì)溶液加入大量的硫酸銨、硫酸鈉或 氯化鈉等中性鹽，去除蛋白質(zhì)的水化膜，中和蛋白

37、質(zhì)表面的電荷，使蛋白質(zhì)顆粒相互聚集，發(fā)生沉淀。用不同濃度的鹽可以沉淀不同的蛋白質(zhì)，稱分段鹽析。鹽析是 對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行粗分離的常用方法。（2）有機(jī)溶劑沉淀法：使用丙酮沉淀時(shí)，必須在04低溫下進(jìn)行，丙酮用量一般10倍于蛋白質(zhì)溶液的體積，蛋白質(zhì)被丙酮 沉淀時(shí)，應(yīng)立即分離，否則蛋白質(zhì)會(huì)變性。除了丙酮以外，也可用乙醇沉淀。此外，還可用加重金屬鹽，加某些有機(jī)酸，加熱等方法將樣品中的蛋白質(zhì)變性沉淀。17.-返回試題答（1）除共價(jià)鍵外，維持蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的主要非共價(jià)鍵有：范德華力（范德華相互作用）、疏水作用、鹽鍵、氫鍵。（2）DNA是由4種元件構(gòu)成的大分子， 蛋白質(zhì)是由20多種元件構(gòu)成的大分子，顯然，蛋白質(zhì)的分子結(jié)

38、構(gòu)更具復(fù)雜性，DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)有一定的剛性，其空間結(jié)構(gòu)相對(duì)簡(jiǎn)單，蛋白質(zhì)作為單鏈分子，可 以形成各種復(fù)雜的空間結(jié)構(gòu)，由于結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性，蛋白質(zhì)的功能廣泛而復(fù)雜，且結(jié)構(gòu)和功能受到復(fù)雜的調(diào)控，DNA的功能則相對(duì)簡(jiǎn)單。綜合而論，蛋白的研究更具 復(fù)雜性和挑戰(zhàn)性。18.-返回試題答（1）能提高蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。亞基結(jié)合可以減少蛋白質(zhì)的表面積/體積比，使蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性增高。（2）提高遺傳物質(zhì)的經(jīng)濟(jì)性和有效性。編碼一個(gè)能裝 配成同聚體的單位所需的基因長(zhǎng)度比編碼一個(gè)與同聚體相同相對(duì)分子質(zhì)量的超長(zhǎng)肽鏈所需的基因長(zhǎng)度要小得多（如煙草花葉病毒的外殼有2130多個(gè)亞 基）。（3）形成功能部位。不少寡聚蛋白的單體相互聚集可

39、以形成新的功能部位。（4）形成協(xié)同效應(yīng)。寡聚蛋白與配體相互作用時(shí)，有可能形成類似血紅蛋白或 別構(gòu)酶那樣的協(xié)同效應(yīng)，使其功能更加完善。有些寡聚蛋白的不同亞基可以執(zhí)行不同的功能，如一些酶的亞基可分為催化亞基和調(diào)節(jié)亞基。19.-返回試題答（1）由于2，3-BPG是同脫氧Hb A中心空隙帶正電荷的側(cè)鏈結(jié)合，而脫氧Hb F缺少帶正電荷的側(cè)鏈（ 鏈143位的His殘基），因此2，3-BPG是同脫氧Hb A的結(jié)合比同脫氧Hb F的結(jié)合更緊。（2）2，3-BPG穩(wěn)定血紅蛋白的脫氧形式，降低血紅蛋白的氧飽和度。由于Hb F同 2，3-BPG親和力比Hb A低，HbF受血液中2，3-BPG影響小，因此Hb F在任

40、何氧分壓下對(duì)氧的親和力都比Hb A大，（3）親和力的這種差別允許氧從母親血向胎兒有效轉(zhuǎn)移。20.-返回試題答 蛋白質(zhì)變性后，氫鍵等次級(jí)鍵被破壞，蛋白質(zhì)分子就從原來有秩序卷曲的緊密結(jié)構(gòu)變?yōu)闊o秩序的松散伸展?fàn)罱Y(jié)構(gòu)。即二、三級(jí)以上的高級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)發(fā)生改變或破壞，但 一級(jí)結(jié)構(gòu)沒有破壞。變性后，蛋白質(zhì)的溶解度降低，是由于高級(jí)結(jié)構(gòu)受到破壞，使分子表面結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，親水基團(tuán)相對(duì)減少，容易引起分子間相互碰撞發(fā)生聚集沉 淀，蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能喪失，由于一些化學(xué)鍵的外露，使蛋白質(zhì)的分解更加容易。21.-返回試題答（1）在低pH值時(shí)，羧基質(zhì)子化，蛋白質(zhì)分子帶有大量的凈正電荷，分子內(nèi)正電荷相斥使許多蛋白質(zhì)變性，蛋白質(zhì)分子

41、內(nèi)部疏水基團(tuán)因此而向外暴露，使蛋 白質(zhì)溶解度降低，因而產(chǎn)生沉淀。（2）加入少量鹽時(shí)，對(duì)穩(wěn)定帶電基團(tuán)有利，增加了蛋白質(zhì)的溶解度。但是隨著鹽離子濃度的增加，鹽離子奪取了與蛋白質(zhì)結(jié)合的 水分子，降低了蛋白質(zhì)的水合程度。使蛋白質(zhì)水化層破壞，從而使蛋白質(zhì)沉淀。（3）在等電點(diǎn)時(shí)，蛋白質(zhì)分子之間的靜電斥力最小，所以其溶解度最小。（4）加 熱會(huì)使蛋白質(zhì)變性，蛋白質(zhì)內(nèi)部的疏水基團(tuán)被暴露，溶解度降低，從而引起蛋白質(zhì)沉淀。（5）非極性溶劑減小了表面極性基團(tuán)的溶劑化作用，使蛋白質(zhì)分子與水之 間的氫鍵減少，促使蛋白質(zhì)分子之間形成氫鍵，蛋白質(zhì)的溶解度因此而降低。（6）介電常數(shù)的下降對(duì)暴露在溶劑中的非極性基團(tuán)有穩(wěn)定作用，促

42、使蛋白質(zhì)肽鏈的展 開而導(dǎo)致變性。22.-返回試題答 凝膠過濾時(shí)，凝膠顆粒排阻Mr較大的蛋白質(zhì)，僅允許Mr較小的蛋白質(zhì)進(jìn)入顆粒內(nèi)部，所以Mr較大的蛋白質(zhì)只能在凝膠顆粒之間的空隙中通過，可以用較小體積 的洗脫液從層析柱中洗脫出來。而Mr小的蛋白質(zhì)必須用較大體積的洗脫液才能從層析柱中洗脫出來。SDS- PAGE分離蛋白質(zhì)時(shí)，所有的蛋白質(zhì)均要從凝膠的網(wǎng)孔中穿過，蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量越小，受到的阻力也越小，移動(dòng)速度就越快。23.-返回試題答 DEAE-纖維素柱層析的結(jié)果說明，在pH6的條件下，A帶有較多的負(fù)電荷，B次之，C帶負(fù)電荷最少。凝膠過濾法測(cè)出A的Mr是C的4倍，B的Mr是C的 2倍，但SDS-PAGE只發(fā)現(xiàn)一條帶。由于SDS-PAGE測(cè)定的亞基的Mr，凝膠過濾法可以測(cè)定寡聚體的Mr，可以推斷C是單體，B是以C為亞基的二 聚體，A是以C 為亞基的4聚體，由于C在pH6時(shí)帶負(fù)電荷，隨著亞基數(shù)的增加，帶負(fù)電荷的量也會(huì)增加，這與DEAE-纖維素層析的結(jié)果也是一致的。24.-返回試題答（1）共性：用量少而催化效率高；僅改變化學(xué)反應(yīng)的速度，不改變化學(xué)反應(yīng)的平衡點(diǎn)，酶本身在化學(xué)反應(yīng)