下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制課件

1、下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LHLH異常釋放的神經(jīng)異常釋放的神經(jīng)(shnjng)(shnjng)內(nèi)分泌機制內(nèi)分泌機制江蘇省中醫(yī)院內(nèi)分泌科江蘇省中醫(yī)院內(nèi)分泌科 安安 曉曉 飛飛 論文論文(lnwn)匯報匯報第一頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制OFQ對下丘腦對下丘腦GnRH和垂體和垂體(chut)LH釋放的藥理作用釋放的藥理作用（3-1）第二頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制 孤啡肽（孤啡肽（OFQ） 19951

2、995年年 下丘腦下丘腦 孤兒孤兒(g r)(g r)受體受體( (ORL1) )內(nèi)源性配體內(nèi)源性配體 EOP家族新成員，結(jié)構(gòu)的同源性家族新成員，結(jié)構(gòu)的同源性 痛覺的調(diào)制痛覺的調(diào)制 多種生理功能活動多種生理功能活動 神經(jīng)內(nèi)分泌？神經(jīng)內(nèi)分泌？1998 1998 PRL GH 研究研究(ynji)(ynji)背景背景第三頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制下丘腦下丘腦卵巢卵巢(luncho)垂體垂體(chut)GnRHGnRHFSHLHE2PHPOAOFQ及其受體分布及其受體分布(fnb)(fnb)GnRHGnRH調(diào)控部位調(diào)控部位 （ MBH )MPO（內(nèi)側(cè)

3、視前區(qū)）（內(nèi)側(cè)視前區(qū)）VMH（腹內(nèi)側(cè)核）（腹內(nèi)側(cè)核）ARC （弓狀核）（弓狀核）下丘腦下丘腦OFQ與與GnRH釋放的調(diào)節(jié)有關(guān)系嗎？釋放的調(diào)節(jié)有關(guān)系嗎？第四頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制EOP系統(tǒng)系統(tǒng)(xtng)的比較的比較1998年電生理膜片鉗年電生理膜片鉗臨床療效和動物實驗臨床療效和動物實驗針灸和血針灸和血b-內(nèi)啡肽內(nèi)啡肽圍絕經(jīng)期婦女雌激素替代治療圍絕經(jīng)期婦女雌激素替代治療電針調(diào)整去卵巢大鼠電針調(diào)整去卵巢大鼠HPOA異常功能異常功能問題問題 OFQ ? GnRH-LH-E2第五頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分

4、泌機制研究方法研究方法(fngf)實驗動物實驗動物 去卵巢大鼠去卵巢大鼠實驗方法實驗方法 icv injection in vitro incubation RIA ICC RT-PCR Western blot第六頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制 The dose response curves for the effect of OFQ on plasma LH levels of OVX rats ( bP0.05 vs control)第七頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制實驗實驗(shyn)分組分組

5、 Control組組 （ACSF，10 l, icv） OFQ組組 (20nmolOFQ，10 l, icv) NC13+OFQ組組 (20nmol NC13+ 20nmolOFQ, icv) NC13組組 (20nmol NC13，10 l, icv)OFQORL1LHORL1受體的選擇性受體拮抗劑受體的選擇性受體拮抗劑Nphe1NC(1-13)NH2 （NC13）?第八頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制 Effect of pretreatment with NC13 on the decrease of plasma LH level induc

6、ed by OFQ ( bP0.05 vs control)第九頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制 M: Marker A: hippocampus B: pituitary C: hypothalamus RT-PCR analysis for the expression of ORL1 receptor 問題問題 OFQ對垂體對垂體LH釋放釋放(shfng)是否直接作用？是否直接作用？第十頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制 Effect of OFQ on the LH release from pitu

7、itary fragments in vitro Western blot analysis for the expression of ORL1 receptorAhypothalamus BpituitaryC hippocampus第十一頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制The dose response curves for the effect of OFQ on GnRH release in POA of hypothalamus in PPP第十二頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制OFQ對垂體對

8、垂體LH釋放釋放（間接（間接(jin ji)作用）作用）是否通過是否通過GnRH？ OFQ GnRH OFQ LH 40min2hOFQLH?GnRH直接觀察直接觀察OFQ抑制抑制LH 分泌過分泌過程程(guchng)中中GnRH的變化的變化第十三頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制GnRH 神經(jīng)元在腦內(nèi)的分布神經(jīng)元在腦內(nèi)的分布(fnb)(fnb)第十四頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制 The different subtypes of GnRH-IR neurons (800) ) A13: spins su

9、btype B13: smooth subtype第十五頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制 Effect of OFQ on the number of GnRH-IR neurons of OVX rats （bP0.05 vs control）第十六頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制 大鼠下丘腦區(qū)冠狀切面大鼠下丘腦區(qū)冠狀切面(qimin)概觀（概觀（10）第十七頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制下丘腦神經(jīng)下丘腦神經(jīng)(shnjng)解剖和正中隆起解剖和正中隆起GnRH

10、陽性纖維陽性纖維第十八頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制 Effect of NC13 and OFQ on GnRH-IR fibers in ME (800) ) 第十九頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制 The relative density analysis for GnRH -IR fibers in ME hypothalamus ( bP0.05 vs control)第二十頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制 Co-localization of ORL

11、1 mRNA in GnRH-IR neurons in rat hypothalamus. (ORL1 green ; GnRH red and double labeled cells yellow) 第二十一頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制OFQ has no significant effect on the release of NE and DA from medial basal hypothalamus of rats (HPLC)國外研究國外研究(ynji)(ynji)OFQOFQ可抑制神經(jīng)細(xì)胞可抑制神經(jīng)細(xì)胞GluGlu的釋放的釋放

12、（in vitro and in vivo)GluGlu是調(diào)節(jié)是調(diào)節(jié)GnRHGnRH釋放興奮性神經(jīng)遞質(zhì)（釋放興奮性神經(jīng)遞質(zhì)（NMDA and KA)NMDA and KA)調(diào)控調(diào)控(dio kn)GnRH釋放的因素釋放的因素(+NE,DA,Glu)(-NPY?)第二十二頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制 NMDA受體的選擇性受體拮抗劑受體的選擇性受體拮抗劑 MK-801 （ 0.2mg/kg, sc ）實驗實驗(shyn)分組分組 Control組組 （ACSF，icv） OFQ組組 ( 200nmolOFQ， icv) MK801+OFQ組組 ( 0

13、.2mg/kg, sc +200nmolOFQ, icv) MK801組組 ( 0.2mg/kg, sc)NMDA第二十三頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制 Effect of pretreatment with MK801 on the decrease of plasma LH levels induced by OFQ (bP0.05 vs control. eP0.05 vs OFQ group)第二十四頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制 The dose response study for the

14、effect of NC13 on plasma LH levels of OVX rats ( bP0.05 vs control) 第二十五頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制小小 結(jié)結(jié)下丘腦下丘腦OFQ可能通過可能通過ORL1 受體介導(dǎo)抑制受體介導(dǎo)抑制GnRH的釋放，從而減少垂體的釋放，從而減少垂體LH的分泌的分泌(fnm)，使血使血LH水平降低。水平降低。 NMDA受體也可能部分受體也可能部分介導(dǎo)了該作用。介導(dǎo)了該作用。提示提示OFQ可能參與了對可能參與了對GnRH和和LH釋放的生理調(diào)節(jié)作用，下丘腦釋放的生理調(diào)節(jié)作用，下丘腦可能存在可能存在OFQ

15、-Glu-GnRH神經(jīng)調(diào)節(jié)通路神經(jīng)調(diào)節(jié)通路 。第二十六頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制思考思考(sko)？OFQ可抑制可抑制GnRH和和LH的釋放的的釋放的藥理和生理藥理和生理作用（作用（OFQ和和NC13有潛在的治療有潛在的治療(zhlio)(zhlio)作用）。作用）。 OFQ及其受體及其受體ORL1可能為調(diào)整更年期綜合癥可能為調(diào)整更年期綜合癥和性早熟神經(jīng)內(nèi)分泌異常提供等新的藥物治療靶和性早熟神經(jīng)內(nèi)分泌異常提供等新的藥物治療靶點點。（丹參酮）（丹參酮） 下丘腦下丘腦OFQmRNA及其蛋白水平可以作為篩選及其蛋白水平可以作為篩選調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)GnRH分泌中西藥物的探針分泌中西藥物的探針。第二十七頁，共三十頁。下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機制發(fā)表發(fā)表(fbio)論文論文 Involvement of Nociceptin/Orphanin FQ in release of hypothalamic GnRH mediated by ORL1 receptor in ovariectomized rats Acta Pharmacologica Sinica ( SCI, IF=1.125 ) 2005 Sep, 26(9): 10391044 第二十八頁，共三十頁。