生物大分子的分離純化和鑒定_第1頁
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1、生物大分子的分離純化和鑒定第1頁，共14頁。第2頁，共14頁。2 2、植物組織：、植物組織：1010小時(shí)內(nèi)置小時(shí)內(nèi)置-4 -30-4 -30冰箱儲(chǔ)藏備用冰箱儲(chǔ)藏備用3 3、微生物：胞外產(chǎn)物（如發(fā)酵液），低溫短時(shí)儲(chǔ)藏。、微生物：胞外產(chǎn)物（如發(fā)酵液），低溫短時(shí)儲(chǔ)藏。 胞內(nèi)產(chǎn)物，則應(yīng)收集菌體或細(xì)胞，制成凍干粉于胞內(nèi)產(chǎn)物，則應(yīng)收集菌體或細(xì)胞，制成凍干粉于44保存（數(shù)月不保存（數(shù)月不變質(zhì)）變質(zhì)） 除了體液和微生物胞外的某些蛋白質(zhì)和多肽以外除了體液和微生物胞外的某些蛋白質(zhì)和多肽以外, ,大多數(shù)生物大分子都大多數(shù)生物大分子都存在于細(xì)胞之內(nèi)存在于細(xì)胞之內(nèi). .第3頁，共14頁。蛋白質(zhì)的分離純化蛋白質(zhì)的分離純化

2、第4頁，共14頁。第5頁，共14頁。3 3、有機(jī)溶劑分級(jí)法、有機(jī)溶劑分級(jí)法 有機(jī)溶劑引起蛋白質(zhì)沉淀的主要原因之一是改變介質(zhì)的介電常數(shù)，水是高介電常數(shù)（20時(shí)，80），有機(jī)溶劑是低介電常數(shù)物質(zhì)（20時(shí)，甲醇33，乙醇24，丙酮21.4），因此有機(jī)溶劑的加入使水溶液的介電常數(shù)降低。這樣，蛋白質(zhì)分子表面的可解離基團(tuán)的離子化程度減弱，水化程度降低，因此促進(jìn)了蛋白質(zhì)分子的聚集和沉淀。有機(jī)溶劑引起蛋白質(zhì)沉淀的另一重要方式可能與鹽析相似，與蛋白質(zhì)爭(zhēng)奪水化（膜）水，致使蛋白質(zhì)聚集體的形成并沉淀。 有機(jī)溶劑沉淀法一般與等電點(diǎn)沉淀法聯(lián)合使用。即操作時(shí)溶液的pH值應(yīng)控制在欲分離蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)附近。第6頁，共14頁。第7頁，共14頁。第8頁，共14頁。第9頁，共14頁。第10頁，共14頁。層析技術(shù)第11頁，共

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