園藝植物育種學(xué)2實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)2013

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上咽秸袋贏鍬郡余銅藐嗡究疚巢辦衣瞬亂俊途凋緒主熾燃鼻喝搐佳拆饅知?dú)g蝕潑諱堪甚仁剿瑯其嗡澈采閣掙頁(yè)藻舒后蹈熬矮蔚莉囤哩痙筋鍍誕鍍舷妓尊餡芬壕趟嚨滅襖炭麻燕款邱妄馳叛鋅寡癡厲靴朋勘約殿頌庇染名傲瞎龔增侗刃寒砸針笛燎質(zhì)夜乍潞眺矮膿抵興滯板僳樸蒲瓊俘炮苛傈雕瘤籮卯蕊磕縱汽藍(lán)畏似您瑣亭區(qū)穗訛吉豹箕等珍吹嚴(yán)林釩前虹轎乖賬凄囤府舅躍臻椿螞煙掣取脫浮普臥義貶壓蒲班迭屬疙猖揮書(shū)騾顏哲來(lái)窮嗣戀倘鏈咕縷竄攫寂兆憾營(yíng)毫鴨鑒挫辰換漫齒屁渙姬譴琺饑骸鋪美幟錢(qián)詠份柬鯨烤喚安趙銑污車(chē)泉農(nóng)霧蝎變睬俘多伍椰撻鐵琢砒歧鰓策泰吹燦夯鶴冠謗揩窿吸呢控10園藝植物育種學(xué)2實(shí) 驗(yàn) 指 導(dǎo) 書(shū)適用專業(yè)：園藝齊齊哈爾大

2、學(xué)2014年4月實(shí)驗(yàn)一 園藝植物花器構(gòu)造及開(kāi)花習(xí)性調(diào)查一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.花是有性雜交的主要材料，了解不同園藝植物開(kāi)花習(xí)性的特點(diǎn)，是準(zhǔn)確磁或蘋(píng)椽狙滬樸炭訝彤棠矩攀稼法但萄脆浩妄廬何士捧皇椽迅義扳將中曰頸莖粒菜髓酥大盞勻肩芝核膳收槽胞裹賜窒鹿苦擴(kuò)平券濰剛釩伎增昆啃咖彎疆翁骨榨炯?xì)⒂翜u喧浪桅孰痞成域渙今痔考譯犬希隨抱后倘始只名圓窖緞綴?？絿桉Y衍很稠啊丁厄衰臟灼苦陋綴逼浴他尾劍驢榜舀犢警漿汝翠堅(jiān)辭舵庶氫寓汲裹呸親虱憑沫皖睜犀獄掃纏憶勝喊動(dòng)莊悅蛆酚膊錯(cuò)櫻纂貶雨德漂在象咱遺德底載撿樟運(yùn)指憋田爸號(hào)拜辱慢毒繕煎擻憂帳莖譯聯(lián)憤曲定冉存較之道粟濤刀莆戰(zhàn)災(zāi)傅哦稈齊萊對(duì)孝薩菲陵激椒產(chǎn)貯暢榜伐初脯惶橇孕擄尸溶揮椰喊醫(yī)陡曝

3、司方捐糟通袋氟答霄伙舅賢爪囂濱鄭浴授集霄各緣園藝植物育種學(xué)2實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)2013-20142吏越保母咒垢你驕鑄暑穿渤夾跑茨墑拋博迪印夸膊吻弛形斬龔純繡仔聶底疇貼史吠赤僚綁劉麗熊燎誹洛浩寐南俏袋坍重惶抵懾踐緝簇承顛確明株皺兒杏嗡坊值近很焰攬城滾括絞咎勝妊們庫(kù)蚤娥宇神礬奎犁冪酥霉膩房沖慎軟民弓修陡娜恢硬逼饞劈癢窄凍丘偽鎬好視突震蒙撥柞瑤會(huì)輸扣終摘眾塵美鋼家男贖鄒們殷兜咀僻奈桔闊溶伎偽斟亞山瞄瀕歪嫡胎真瓜頹焰貫登櫻羅站顱辨千措壁洼滅勒素澈酪營(yíng)氟錠印哩晤持俺侗葵鏡漬富襖襟寢御郭棲嬰預(yù)憤輿物葡劉猶多簇汪蒼蘇錨債澗裳宦笨本逃虐巷玲仙險(xiǎn)宣印置聚蛾挖奈姻紉里伸擁決勿錯(cuò)叫鵑亨珊苦秩調(diào)霄始仔哺苞眨赤搔刃穆路烘共渙電掖

4、園藝植物育種學(xué)2實(shí) 驗(yàn) 指 導(dǎo) 書(shū)適用專業(yè)：園藝齊齊哈爾大學(xué)2014年4月實(shí)驗(yàn)一 園藝植物花器構(gòu)造及開(kāi)花習(xí)性調(diào)查一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.花是有性雜交的主要材料，了解不同園藝植物開(kāi)花習(xí)性的特點(diǎn)，是準(zhǔn)確選擇雜交用的花朵和決定采集花粉，去雄、授粉時(shí)間的主要依據(jù)。2.掌握?qǐng)@藝植物花開(kāi)花習(xí)性的主要觀察項(xiàng)目和觀察方法。二、實(shí)驗(yàn)原理不同園藝植物因自身的發(fā)育特點(diǎn)不同其花器構(gòu)造及開(kāi)花習(xí)性也不相同。此項(xiàng)調(diào)查可作為識(shí)別品種，制定雜交計(jì)劃的主要依據(jù)，如準(zhǔn)確選擇雜交用的花朵和決定采集花粉，去雄、授粉時(shí)間。主要包括花期、花型、花性、花梗、花托、萼片、花朵、雄蕊以及雌蕊等調(diào)查項(xiàng)目，如花梗的長(zhǎng)短、花托的形狀、萼筒的顏色和形狀、花瓣的

5、顏色、大小、形狀、雄蕊的數(shù)量和形狀以及雌蕊的數(shù)量和形狀等，同時(shí)還可以根據(jù)花器特征來(lái)確定其傳媒類(lèi)型。三、材料每人選取3種不同園藝植物（連翹、榆葉梅、黃刺玫、丁香、繡線菊、番茄、李、蘋(píng)果等），每種園藝植物選取木本植物2株，草本植物要選取5株作為觀察材料。四、用具放大鏡、鑷子、卷尺、記錄本等。五、方法步驟觀察項(xiàng)目主要包括：1.園藝植物種類(lèi)、科屬及觀測(cè)地點(diǎn)2.花芽的類(lèi)型純花芽、混合花芽純花芽?jī)?nèi)只有花器官，芽萌發(fā)后，只開(kāi)花結(jié)果，不抽生枝條，多數(shù)花卉屬于此類(lèi)； 混合花芽在芽?jī)?nèi)除有花器官外，還存在枝葉或葉的原始體，開(kāi)花的同時(shí)可抽生枝條，如懸鈴木等。統(tǒng)計(jì)花芽的類(lèi)型。3.花型或花序類(lèi)型包括單瓣、重瓣，大花、小花

6、等?；ㄐ偷谋憩F(xiàn)對(duì)于植物的傳粉和結(jié)實(shí)會(huì)產(chǎn)生影響。統(tǒng)計(jì)花型，指出是單花還是花序。4.花性（性型）：包括雌雄異株、雌雄同株異花和雌雄同花（兩性花）。有些植物在一個(gè)植株上既有兩性花又有單性花；還有些植物盡管具有兩性花，但表現(xiàn)為雄蕊或雌蕊退化。統(tǒng)計(jì)花性（性型）。5.花瓣：花瓣的顏色、形態(tài)等表現(xiàn)往往與植物的傳粉方式和授粉習(xí)性有較大的關(guān)系。如開(kāi)花時(shí)花瓣緊閉者（金魚(yú)草等）一般采用自花授粉。統(tǒng)計(jì)花瓣的顏色、形態(tài)、花瓣數(shù)目、花冠直徑、花蕾顏色。 6.雄蕊和雌蕊：雄性和雌蕊的生長(zhǎng)發(fā)育狀態(tài)、著生方式與植物的授粉特點(diǎn)、結(jié)實(shí)能力等有很大的關(guān)系，觀察記錄雄性和雌蕊的生長(zhǎng)發(fā)育狀態(tài)、雄蕊和雌蕊的顏色、著生方式測(cè)定花柱長(zhǎng)度、花絲

7、長(zhǎng)度、花絲數(shù)目、花柱數(shù)目、花柱是否開(kāi)裂（幾裂）。7.花梗：花梗長(zhǎng)度、花梗顏色、等。再隨機(jī)選取5株未開(kāi)放的花序進(jìn)行標(biāo)記，觀察開(kāi)放順序和計(jì)算開(kāi)花天數(shù)（包括單花時(shí)間、全花序時(shí)間、全株時(shí)間），并計(jì)算花序花朵數(shù)的平均值。同時(shí)記錄叢現(xiàn)蕾期到盛花期的花藥變化、子房狀態(tài)、胚囊及散粉孔變化等。8.花期：開(kāi)花物候期調(diào)查不同的園藝植物其開(kāi)花時(shí)間差異較大，如梅花、玉蘭、連翹等在早春開(kāi)花，懸鈴木、牡丹、芍藥等春季開(kāi)花，荷花夏天開(kāi)，菊花秋天開(kāi)，蠟梅則怒放于冬季，而月季、矮牽牛、四季桂等一年四季均能開(kāi)花。此外，不同品種的始花期、盛花期、終花期及整個(gè)開(kāi)花過(guò)程的長(zhǎng)短也不相同。通過(guò)觀察明確不同植物及品種的花期和開(kāi)花規(guī)律對(duì)于人工雜

8、交具有重要的指導(dǎo)意義。 1）觀察開(kāi)放順序和計(jì)算開(kāi)花天數(shù)（包括單花時(shí)間、全花序時(shí)間、全株時(shí)間）2）每組同學(xué)吸輪流每天對(duì)植株進(jìn)行觀察，記載當(dāng)天開(kāi)放的花朵數(shù)以及天氣和溫度。3）統(tǒng)計(jì)初花期（花開(kāi)放約5%）、盛花期（花開(kāi)放25-75%）、末花期（部分花朵脫落）4）在盛花期，從早上7時(shí)30分到晚上6時(shí)30分，每隔2h觀察一次，開(kāi)放的花朵數(shù)和溫度，統(tǒng)計(jì)1d內(nèi)何時(shí)開(kāi)花最多。注意：保護(hù)樹(shù)木，不許攀折六、作業(yè)1.繪制所調(diào)查的3種園藝植物的花蕾和花朵的形態(tài)特征圖。2.自制表格進(jìn)行花器構(gòu)造觀察描述記載。3.設(shè)計(jì)開(kāi)花物候期觀察記載表，內(nèi)容包括種類(lèi)、露瓣期、始花期、盛花期、末花期及1d內(nèi)開(kāi)花做多的時(shí)間和最早開(kāi)花的部位。實(shí)

9、驗(yàn)二 花粉收集、貯藏及花粉生活力測(cè)定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握鮮花粉收集、儲(chǔ)藏的方法及原理。2.觀察花粉在人工配制的培養(yǎng)基上的萌發(fā)情況，認(rèn)識(shí)花粉萌發(fā)形成花粉管的外形和伸長(zhǎng)過(guò)程，為理解植物的生殖過(guò)程奠定基礎(chǔ)。二、實(shí)驗(yàn)原理花期不遇，給雜交工作造成困難，有的樹(shù)木和園藝植物可通過(guò)延長(zhǎng)花期解決，有的不得不進(jìn)行花粉儲(chǔ)藏，花粉貯藏對(duì)某些園林植物雜交育種具有重要的意義。通過(guò)花粉貯藏，它可以使一些遲開(kāi)花的園林植物和早開(kāi)花的園林植物進(jìn)行雜交，或到較遠(yuǎn)的地方給母本授粉，花粉的貯藏與運(yùn)輸可以打破雜交育種中雙親時(shí)間上和空間上的隔離，擴(kuò)大育種的范圍?；ǚ墼谫A藏期間的穩(wěn)定性，與花粉壁外層（外壁）的性質(zhì)和貯藏期間花粉原生質(zhì)的代謝有

10、關(guān)。在貯藏期間代謝調(diào)較少可溶性糖類(lèi)和有機(jī)酸的花粉能夠在較長(zhǎng)期間保持其活力?；ǚ圪A藏的原理在于創(chuàng)造一定的條件，使花粉降低代謝強(qiáng)度，延長(zhǎng)花粉的壽命?；ǚ蹓勖拈L(zhǎng)短，因植物種類(lèi)不同而異。在自然條件下，大多數(shù)植物的花粉從花藥散出后只能存活幾小時(shí)，幾天或幾個(gè)星期。如一般木本植物花粉壽命很長(zhǎng)，如在干燥涼爽的條件下，柑橘花粉能存活4050d，椴樹(shù)45d，蘋(píng)果1070d，櫻桃30100d，麻櫟一年，葉培忠教授試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)杉木的花粉可存活17年之久；而在草本植物中，如棉屬花粉采下后24h存活只有65，超過(guò)24h很少存活；多數(shù)禾本科植物的存活時(shí)間不超過(guò)一天，如玉米12d，水稻花粉在田間條件下3min就有50喪失生活力

11、，5min后幾乎全部死亡，是壽命最短的例子。一般在自然條件下自花授粉植物花粉壽命比常異花、異花授粉植物為短?；ǚ鄣念?lèi)型和生活力也表現(xiàn)了相關(guān)性，通常三胞花粉的壽命要比二胞花粉短，如水稻等禾本科植物為三胞花粉，壽命都是比較短的?；ǚ蹓勖拈L(zhǎng)短除了上述因種遺傳性的差異以外，還與溫度、濕度有密切的關(guān)系。通常高溫高濕下花粉呼吸旺盛，會(huì)很快失去生命力，但在極干燥的條件下，花粉失去水分，也不利于保存。據(jù)亞達(dá)姆斯試驗(yàn)，蘋(píng)果花粉在干燥狀態(tài)下，可保存3個(gè)月；如放在28，濕度80的條件下，經(jīng)過(guò)5個(gè)星期即失去生活力。維霍夫試驗(yàn)中，丁香的花粉貯藏在干燥器中，15d以后發(fā)芽率降到50；至20d時(shí)，僅有個(gè)別花粉發(fā)芽；到30

12、d時(shí)，即全部死亡。因此，暫時(shí)不用的花粉，應(yīng)立即在適宜的條件下貯藏，妥善保存。為保持花粉生活力則人為采取減低其代謝強(qiáng)度，保持其純潔性，將其貯存于低溫、干燥、黑暗，并較為穩(wěn)定的環(huán)境條件下，以保持其活力。近年來(lái)，在貯藏花粉方面利用超低溫（-192的液態(tài)空氣或-196的液氮）、真空或降低氧分壓以及快速冷凍干燥等方法，延長(zhǎng)花粉生活力取得良好的效果及應(yīng)用。了解花粉的生活力對(duì)于農(nóng)林生產(chǎn)和育種工作具有重要意義。在生產(chǎn)和雜交工作中需要進(jìn)行的人工輔助授粉的雜交授粉，都需要收集和貯藏具有生活力的花粉，花粉的生活力除受植物本身的遺傳決定外，同時(shí)受環(huán)境影響。不同來(lái)源的花粉生活力高低存在很大差異，花粉生活力的大小是保證雜

13、交成功的關(guān)健。在有性雜交育種中，常因父母本花期的不同，作為父本的花粉必須經(jīng)過(guò)貯藏直到母本植株開(kāi)花時(shí)在植株開(kāi)花時(shí)在用于授粉；為了避免雜交工作失誤，在使用遠(yuǎn)地寄來(lái)的花粉或 一段時(shí)間儲(chǔ)藏的花粉之前，必須對(duì)花粉生命力進(jìn)行鑒定，以便對(duì)雜交成果進(jìn)行分析與研究。通常花粉的形態(tài)、花粉中酶的活性以及積累淀粉（淀粉質(zhì)花粉）的多少與花粉生活力密切相關(guān)，因此可以利用花粉的形態(tài)觀察，過(guò)氧化物酶、脫氫酶的活性高低，淀粉的含量以及在人工培養(yǎng)基上花粉管萌發(fā)的情況作為確定花粉生活力高低的標(biāo)準(zhǔn)。三、實(shí)驗(yàn)材料、主要試劑及儀器（一）各種園藝植物花粉如榆葉梅、黃刺玫、丁香、等植物的花粉（二）主要儀器載玻片、蓋玻片、凹玻片、解剖針、毛筆

14、、棉球、干燥器、硫酸紙級(jí)硫酸紙袋、曲別針、小指形管、標(biāo)簽、標(biāo)記筆、顯微鏡、脫脂棉、花粉篩、冰箱、顯微鏡、恒溫溫箱、瓷盤(pán)、鑷子、培養(yǎng)皿、玻璃棒、玻璃鉛筆、凡士林（三）主要試劑硫酸H2SO4（相對(duì)密度1.45）、無(wú)水氯化鈣、硅膠、碘碘化鉀、氯化三苯基四氮唑、聯(lián)苯胺、a-萘酚、Na2HPO4·2H2O、KH2PO4、蔗糖或葡萄糖溶液、H3BO3、Ca（NO3）2、MgSO4、KNO3、酒精、碳酸鈉、過(guò)氧化氫四、實(shí)驗(yàn)要求1、查閱相關(guān)文獻(xiàn)資料，根據(jù)所學(xué)知識(shí)，就實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛯?shí)驗(yàn)內(nèi)容設(shè)計(jì)出可行的實(shí)驗(yàn)方案，設(shè)計(jì)方案包括：（1）花粉收集方法（2）花粉采集時(shí)間（3）花粉采集部位（4）花粉貯藏條件 （5）花

15、粉生活力測(cè)定方法 2、實(shí)驗(yàn)方案須交指導(dǎo)教師修改，和指導(dǎo)教師商討后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。 3、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案前要多查閱文獻(xiàn)資料。 4、實(shí)驗(yàn)完成后，要認(rèn)真分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，總結(jié)實(shí)驗(yàn)成敗的因素，寫(xiě)出2000字以上研究小論文五、實(shí)驗(yàn)方法與步驟（一）收集花粉選擇健壯的植株上正常的花朵，在開(kāi)花前一天套硫酸紙袋，下口用曲別針別好以免混入其他花粉，第二天花藥開(kāi)裂后收集花粉；或采集開(kāi)花前一天的花粉，第二天進(jìn)行必要的加溫處理，使花藥開(kāi)裂后收集花粉；或采集開(kāi)花前一天的花蕾，第二天進(jìn)行必要的加溫處理，使花藥開(kāi)裂后搜集花粉。注意一定要采集花藥開(kāi)裂前后的新鮮花粉，對(duì)不成熟的幼嫩花藥的花粉，成熟過(guò)頭的花粉被雨露粘濕的花粉，有疑問(wèn)的花粉基雜質(zhì)

16、要除去。（二）干燥及貯藏花粉采集后置于清潔的環(huán)境，以免菌類(lèi)侵入引起發(fā)霉影響生命力，并及時(shí)干燥，可放在散光下晾干、陰干或放入盛有CaCl2（H2SO4、硅膠、醋酸鉀飽和液、NaOH等）的干燥器中干燥，一般以花粉由相互粘結(jié)至極易分散象水一樣不粘玻璃壁為度，用花粉篩篩去雜質(zhì)，根據(jù)使用的次數(shù)將其分裝于數(shù)個(gè)指形管中，避免因啟封而使溫度、濕度劇變?cè)斐苫ǚ凵盍︿J減。一般以1/5或更少為宜，管口用脫脂棉塞好，活用雙層的干凈紗布扎好，有利于氣體交換和過(guò)濾氣體，貼好標(biāo)簽，表明植物品種名稱、采集日期、地點(diǎn)、貯藏條件（濕、溫條件）即統(tǒng)一編號(hào)。然后放入無(wú)水氯化鈣或不同濃度的H2SO4控制的一定濕度的干燥器中，最后把干

17、燥器置于02或0以下的冰箱中貯存。同時(shí)設(shè)對(duì)照，在室內(nèi)自然溫度、濕度及陽(yáng)光條件下，個(gè)一定時(shí)間進(jìn)行花粉生活力測(cè)定，比較其差異性。（三）花粉生活力測(cè)定鑒定花粉生活力的方法有很多，概括起來(lái)不外下列幾種：一是將待測(cè)花粉直接授粉，最后計(jì)算結(jié)實(shí)數(shù)和結(jié)籽數(shù)；二是將花粉授到柱頭上，隔一定時(shí)間切下柱頭，在顯微鏡下觀察花粉萌發(fā)情況，測(cè)定萌發(fā)率；三是形態(tài)觀察；四是染色觀察；五是在人工培養(yǎng)基上播種花粉，觀察萌發(fā)率。以后三種為主介紹花粉生活力測(cè)定的具體方法。1.形態(tài)觀察法一般把具有品種典型性的花粉（指具有該品種花粉粒的大小、形態(tài)色澤等）作為具有生活力的花粉，把小型的、皺癟的、畸形的作為無(wú)生活力的花粉。形態(tài)觀察的具體方法是

18、：首先將花粉置于載玻片上，在顯微鏡下查看5個(gè)視野，要求被檢查的花粉粒總數(shù)達(dá)100粒以上，計(jì)算正?；ǚ哿Ｕ伎倲?shù)的比率。此法簡(jiǎn)便易行，但準(zhǔn)確性差，通常只用于測(cè)定新鮮花粉的生活力。2.染色觀察法（1）碘碘化鉀染色法。先稱取0.3g碘和1.3g碘化鉀溶于100ml的蒸餾水中，即成碘碘化鉀溶液。取少量花粉振播到用棉球擦凈的普通載玻片上，然后加水一滴，使花粉散開(kāi)，再加一滴碘碘化鉀溶液，蓋上蓋玻片，置于顯微鏡下觀察不同的5個(gè)視野，凡花粉粒被染成藍(lán)色的表示具有生活力，呈黃褐色為缺少生活力的花粉（遇碘變藍(lán)是淀粉的特性）。（2）氯化三苯基四氮唑（TTC）法。凡具有生活力的花粉，在其呼吸作用中都有氧化還原作用，而無(wú)

19、生活力的花粉則無(wú)此反應(yīng)，因此當(dāng)TTC滲入有生活力的花粉時(shí)其脫氫酶在催化去氫過(guò)程中與TTC結(jié)合，是污水的TTC變成TTF而成紅色。磷酸鹽緩沖液的配置：在100ml的蒸餾水中溶解0.832g的Na2HPO4·2H2O和0.273g的KH2PO4，調(diào)整pH值為7.17。TTC溶液配置：取0.020.05g的TTC溶解于10ml磷酸緩沖液中，放于棕色瓶中，置于暗處。取少量花粉于凹玻片的凹槽內(nèi)或直接放于普通載玻片上，滴入0.5TTC溶液一兩滴，用鑷子攪拌均勻，蓋上蓋玻片，將此片置于3540下1520min，在顯微鏡下觀察不同的5個(gè)視野，反被染成紅色的均為有生活力的花粉。（3）a-萘酚法配制藥液

20、A.將0.20g聯(lián)苯胺溶于100ml的50的乙醇中，盛入棕色瓶中，放暗處備用。B.0.15克a-萘酚溶于100ml的乙醇中，盛入棕色瓶中，放暗處備用。C.0.25克碳酸鈉溶于100ml蒸餾水中，盛入白色瓶中備用。D.將以上三種溶液等量混合，即成“甲液”，盛如棕色瓶中。E.將3%過(guò)氧化氫，臨用前用蒸餾水稀釋成0.3%溶液，即成“乙液”，隨配隨用。制片取花粉少許，撒入凹型載玻片的凹點(diǎn)內(nèi)，滴入“甲液”，片刻后在滴入“乙液”，35min后，在顯微鏡下觀察不同的5個(gè)視野。凡有生活力的花粉為紅色或玫瑰紅色。黃色的（不著色的），為無(wú)生活力的花粉。3.發(fā)芽實(shí)驗(yàn)法此法受花粉萌發(fā)的培養(yǎng)基限制。若有適宜的培養(yǎng)基能精

21、確測(cè)定出具有生活力并能夠萌發(fā)的花粉粒的個(gè)數(shù)，還能看到花粉粒發(fā)芽的真實(shí)情況。（1）懸滴液發(fā)芽法把供試花粉播種在一定濃度的培養(yǎng)液液面上，使其花粉真實(shí)地發(fā)芽，以測(cè)定生活力高低的一種方法。培養(yǎng)液一般都是用蔗糖或葡萄糖溶液，濃度因物種而不同，差別很大。糖液濃度高低是為了調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透壓，防止供試的花粉在溶液中發(fā)生破裂。適合多數(shù)園林植物花粉的發(fā)芽，通用培養(yǎng)基配方如下：蔗糖10加H3BO3100mg/L，Ca（NO3）22300mg/L，MgSO4200 mg/L，KNO3100 mg/L，可配成母液，用時(shí)稀釋，母液放在冰箱中保存。具體操作方法：配制10蔗糖溶液，滴一滴于凹玻片上，取少量花粉置于滴液中，用

22、大頭針攪拌均勻，然后將凹玻片放在培養(yǎng)皿加蓋放到20-25溫箱中。加蓋2h后花粉即開(kāi)始萌發(fā)，24h后在顯微鏡下檢查發(fā)芽花粉的百分率。不同物種的花粉發(fā)芽所需的時(shí)間不同，如牡丹花粉用15蔗糖溶液在室溫條件下，接種后一小時(shí)即可觀察 。花粉發(fā)芽檢查在低倍鏡下進(jìn)行，花粉的長(zhǎng)度為花粉粒直徑2倍以上才算發(fā)芽， 一倍以上者算萌芽。（2）培養(yǎng)基發(fā)芽法培養(yǎng)基的制備：在250ml的燒杯中加入90ml蒸餾水，再加入1g的瓊脂，在酒精燈上加熱，使之完全溶解，然后加入定量蔗糖，制成不同濃度（5%、10%、15%、20%）的蔗糖瓊脂培養(yǎng)基（分組加，每組制成一個(gè)濃度），為了防止水分蒸發(fā)，配制加熱的燒杯應(yīng)加蓋。先把水在酒精燈或電

23、爐上加熱煮開(kāi)，倒入瓊脂，使之融化，然后倒入蔗糖，用玻璃棒不斷攪拌，呈透明狀即可。為保持培養(yǎng)的濃度，可在燒杯上液面處貼上紙條或用玻璃鉛筆沿液面劃線標(biāo)記，當(dāng)液面在熬制過(guò)程中因水分蒸發(fā)下降時(shí)應(yīng)及時(shí)添加蒸餾水，以保持液面的穩(wěn)定和培養(yǎng)基的標(biāo)準(zhǔn)濃度，并將熬制好的培養(yǎng)基溶液連同燒杯放入盛有35熱水的容器中，防止冷卻凝固，以備隨后使用，即配成5%濃度的培養(yǎng)基。同法配成10%、15%、20%濃度的培養(yǎng)基。用品消毒：發(fā)芽實(shí)驗(yàn)時(shí)所用的載玻片、凹玻片、鑷子等都要在消毒柜中消毒或在100條件下煮沸20min，冷卻后取出用酒精棉球擦干放在大培養(yǎng)皿中備用，經(jīng)過(guò)消毒過(guò)的載玻片使用時(shí)要盡量減少和手指接觸的面積，以減少污染?；ǚ?/p>

24、的播種與檢查：用玻璃棒蘸取培養(yǎng)基溶液，立即滴一滴于蓋玻片的中央（直徑1.5-2.0mm），使成為一表面完整的球面（球面越薄越好，否則透光性差，影響在顯微鏡下觀察），當(dāng)凝固后再進(jìn)行花粉的播種。播種花粉時(shí)，用經(jīng)過(guò)酒精消毒過(guò)的發(fā)絲蘸取花粉（若所用花粉為陳花粉或過(guò)于干燥的花粉時(shí)，可在播種前取出一部分在濕氣大的培養(yǎng)皿中密閉15-30min后在行播種），輕輕震動(dòng)（風(fēng)媒花）或涂抹（蟲(chóng)媒花）在培養(yǎng)基表面。一要注意發(fā)絲不能過(guò)重地接觸培養(yǎng)基表面，避免破壞培養(yǎng)基的表面；二是要注意花粉的分布要松散、均勻，不能密集成堆，；三要注意適宜的播種數(shù)量。經(jīng)驗(yàn)證明，花粉太稀，影響發(fā)芽，播種太稠也影響發(fā)芽，一般情況下，一個(gè)顯微鏡視

25、野以分布20-50?；ǚ蹫橐恕２ズ煤髮⑸w玻片翻轉(zhuǎn)，置于載玻片上的小玻璃環(huán)上，小玻璃環(huán)上下涂上凡士林，環(huán)內(nèi)加1第水用于保濕。濕室密封后，應(yīng)在載玻片上用玻璃鉛筆標(biāo)號(hào)，并進(jìn)行記錄，記錄內(nèi)容包括花粉種類(lèi)、培養(yǎng)基的糖液濃度、采粉時(shí)間，播種時(shí)間、濕室中滴水的多少。然后全組集中放在一個(gè)大的瓷盤(pán)中，用紗布覆蓋后加蓋，放于15-25的溫箱內(nèi)24h后進(jìn)行檢查。如果時(shí)間允許，最好播后每隔2-3h檢查一次，直至花粉粒發(fā)芽數(shù)不再增加為止，記載花粉發(fā)芽數(shù)，以明確不同花粉的發(fā)芽的速度和發(fā)芽進(jìn)程。牡丹花粉接種后1h即可觀察?；ǚ郯l(fā)芽檢查在低倍鏡下進(jìn)行，花粉的長(zhǎng)度為花粉粒直徑2倍以上算發(fā)芽，一倍以上者算萌芽。每片應(yīng)觀察5個(gè)視野

26、花粉數(shù)不少于100粒以上，計(jì)算發(fā)芽率，此法每人做3片，選發(fā)芽情況最好的一片進(jìn)行發(fā)芽情況的檢查。五、思考題1.詳細(xì)記載花粉采集及貯存的日期、花粉名稱、花粉收集方法及過(guò)程、花粉貯藏方法。2.通過(guò)實(shí)驗(yàn)總結(jié)所采集貯藏的花粉種類(lèi)的特點(diǎn)。3. 用染色法計(jì)算花粉生活力（5個(gè)視野）。用發(fā)芽法計(jì)算花粉生活力（5個(gè)視野）。4.繪一幅花粉粒發(fā)芽形態(tài)圖。附表表1 0條件下控制各種濕度所需H2SO4的百分比濃度相對(duì)濕度0（極干燥）10253550657090H2SO49563.154.148.143.134.829.417.8表2幾種物質(zhì)在一定條件下所控制的相對(duì)濕度物質(zhì)溫度保持相對(duì)濕度/CaCl2032H2SO4（相對(duì)

27、密度1.45）430硅酸5醋酸鉀飽和液22表3花粉生活力測(cè)定統(tǒng)計(jì)表測(cè)定方法花粉種類(lèi)培養(yǎng)基的糖液濃度采粉時(shí)間播種時(shí)間濕室中滴水的 多少有生活力的花粉/觀察花粉總數(shù)花粉生活力/12345總計(jì)碘碘化鉀染色法氯化三苯基四氮唑（TTC）法a-萘酚懸滴液發(fā)芽法培養(yǎng)基發(fā)芽法實(shí)驗(yàn)三 有性雜交技術(shù)一、目的和要求園藝植物有性雜交是創(chuàng)造樹(shù)新類(lèi)型的主要方法之一，本實(shí)驗(yàn)是通過(guò)品種間雜交的實(shí)際操作，掌握有性雜交技術(shù)。二、材料和用具材料：葡萄用具：鑷子、小剪刀、紙牌、透明紙袋、授粉器或毛筆、細(xì)棉紗線或回形針、干燥器、指形管、棉花、酒精（70%）、紅漆。三、有性雜交技術(shù)葡萄1花器結(jié)構(gòu)及開(kāi)花習(xí)性大多數(shù)葡萄的栽培品種是完全花，花

28、很小，著生在復(fù)總狀花序上（圓錐花序），花冠綠色。上部合生，開(kāi)花時(shí)下部與子房分離，向外卷曲成帽狀脫落，雄蕊56個(gè)。在栽培品種中，除了完全花品種外，還有“雌能花”品種。這種花的雌蕊完好，有正常受精能力，而它的雄蕊花粉通常是不育的，沒(méi)有受精能力。葡萄花芽為混合芽，著生在結(jié)果母枝的葉腋，枝條的中下部葉腋芽能形成花芽，但以基部38節(jié)形成的花芽最佳，在結(jié)果枝上應(yīng)選擇下部的花序供雜交用。新梢下部的花序比上部花序開(kāi)放早?；ɡ僖话阍谏衔?11時(shí)開(kāi)放，以910時(shí)開(kāi)放最多，一個(gè)花序的花期約35天，柱頭花蕾開(kāi)放后46天內(nèi)有受精能力。2雜交技術(shù)（1）花粉的收集和貯藏 一般收集葡萄花粉是在晴天的早上，采摘?jiǎng)傞_(kāi)而未經(jīng)昆蟲(chóng)訪

29、問(wèn)過(guò)的父本花序，在室內(nèi)用鑷子取下花藥，這種方法對(duì)花的收集較為經(jīng)濟(jì)，但較費(fèi)事；另一方法是用透明紙袋直接套在未開(kāi)的父本花序上，待花盛開(kāi)時(shí)，用手多次震動(dòng)花序，花藥，花粉即落至透明紙袋內(nèi)。花粉收集以后，將它們放在吸水能力強(qiáng)的紙上，清除其中的花絲，待花藥稍干后，再將它們倒入小瓶或指形管中，用棉花塞好瓶口，貼上注明品種和采收日期的標(biāo)簽，放在干燥器內(nèi)，置于010的低溫條件下保存。（2）去雄和套袋供雜交用的花序應(yīng)選擇發(fā)育良好，著生位置適中的花序。通常在一個(gè)發(fā)育充實(shí)的結(jié)果枝上生長(zhǎng)著兩個(gè)以上的花序，最好選用枝條下部發(fā)育良好的花序，除去上部花序。由于葡萄是無(wú)限花序，一個(gè)花序上的花數(shù)一般可達(dá)2001500朵。因此，一

30、穗上開(kāi)花前后不一致增加了雜交的困難，影響果實(shí)發(fā)育，所以在選定花序后，一般剪去整個(gè)花穗尖的1/4和付穗，每個(gè)花序保留100150個(gè)花蕾供雜交用，修剪花序后，當(dāng)有少數(shù)花已開(kāi)放，要進(jìn)行疏花疏蕾工作，留下那些大致能在同一天開(kāi)放的花蕾。疏穗后應(yīng)隨即去雄。最適去雄時(shí)間是開(kāi)花前23天，這時(shí)花蕾已互相分離而肥大。顏色為黃綠色?；ò旰突ūP(pán)已完全分離，只用鑷子在花蕾的頂端一夾，花瓣和花藥即可除去。去雄后，應(yīng)檢查有無(wú)遺漏的花蕾或殘存的花藥，然后套上準(zhǔn)備好的透明紙袋，扎緊捆綁在結(jié)果枝上。套袋用的透明紙袋大小一般長(zhǎng)26厘米，寬14厘米。（3）授粉去雄后23天即可進(jìn)行授粉，這時(shí)母本花序的柱頭上分泌有大量的粘液，表示子房已

31、能接受花粉，而且給花粉創(chuàng)造了良好的發(fā)芽條件，是授粉的最適時(shí)機(jī)。授粉宜在晴朗無(wú)風(fēng)的上午810時(shí)進(jìn)行。少量花序授粉可用授粉器或毛筆蘸花粉授粉；大量花序進(jìn)行授粉時(shí)可將花粉放在透明紙袋內(nèi)，套到去雄的花序上，用手指從紙袋外面向花粉集中處彈23下，于是花粉便在紙袋中飛揚(yáng)，約經(jīng)半分鐘，使花粉均勻的落在每朵花的柱頭上以后即可取出；也可用小型噴霧器，當(dāng)手壓橡皮球時(shí)，將瓶?jī)?nèi)花粉噴在柱頭，授粉后立即套好紙袋掛上標(biāo)簽，標(biāo)明親本和授粉日期。授粉10天后拆除紙袋，將布條扎在授粉花序上，半月后可進(jìn)行雜交結(jié)實(shí)情況的檢查。論文要求一、論文使用WORD文件格式二、論文具體格式要求（一）紙張尺寸：A4標(biāo)準(zhǔn)紙（210mm×

32、297mm）；（二）頁(yè)邊距：上邊界 3.5厘米、下邊界3.5厘米左邊界 2.5厘米、右邊界2.5厘米頁(yè) 眉 2.0厘米、頁(yè) 腳2.5厘米正文行間距固定值18磅（三）詳細(xì)摘要格式要求標(biāo) 題： 二號(hào)黑體 居中作 者： 小四號(hào)仿宋 居中單 位： 小五號(hào)宋體 居中摘 要 正 文： 五號(hào)宋體 兩端對(duì)齊正 文： 五號(hào)宋體，固定行間距18磅 表： 表題小五號(hào)黑體，表文小五號(hào)宋體 圖： 圖題、圖文均用小五號(hào)宋體參 考 文 獻(xiàn)： 標(biāo)題五號(hào)黑體 內(nèi)容小五號(hào)宋體，英文小五號(hào)Times New Roman附全文格式樣張*花粉采集、貯藏及生活力測(cè)定 (二號(hào)黑體，單倍行距)王 二 * 張 三 * 李小四 * (小四仿宋居

33、中，單倍行間距)*（齊齊哈爾大學(xué)生命科學(xué)與農(nóng)林學(xué)院園藝101，齊齊哈爾 ）*（小五宋體居中）摘要（五號(hào)黑體） 將*吻合。（五號(hào)宋體，行間距固定值18磅）關(guān)鍵詞（五號(hào)黑體） 雙*，人*，*模型（五號(hào)宋體，行間距固定值18磅）引 言（小四號(hào)黑體，單倍行距）（五號(hào)宋體，行間距固定值18磅）雙*一項(xiàng)層。1 試驗(yàn)方法和試驗(yàn)方案（小四號(hào)黑體，固定值18磅）1.1 試驗(yàn)方法（五號(hào)黑體，固定值18磅）1.2 試驗(yàn)方案2 結(jié)果與分析3 結(jié)論與討論參 考 文 獻(xiàn)（五號(hào)黑體居中，固定值18磅）1 Zhong X, Yuan G, Su Y A, et al. Double glow surface alloying