實(shí)驗(yàn)六煮法及川烏炮制前后成分的比較

1、第二部分第二部分1.川烏煮制、蒸制的工藝研究川烏煮制、蒸制的工藝研究2.煮制、蒸制川烏的時(shí)間正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)煮制、蒸制川烏的時(shí)間正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 一、目的要求一、目的要求 通過(guò)實(shí)驗(yàn)了解煮制的目的意義。通過(guò)實(shí)驗(yàn)了解煮制的目的意義。 掌握川烏煮制、蒸制的方法、注意事項(xiàng)。掌握川烏煮制、蒸制的方法、注意事項(xiàng)。 掌握川烏炮制的原理、意義。掌握川烏炮制的原理、意義。 二、實(shí)驗(yàn)器材及藥品二、實(shí)驗(yàn)器材及藥品 1、儀器：電爐、煮鍋、蒸鍋、沖缽、超聲波提、儀器：電爐、煮鍋、蒸鍋、沖缽、超聲波提取器、水浴、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)取器、水浴、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) 、試劑：無(wú)水乙醇、試劑：無(wú)水乙醇 、乙醚、氨試液、三氯甲烷、乙醚、氨

2、試液、三氯甲烷、 堿性鹽酸羥胺、高氯酸鐵、高氯酸堿性鹽酸羥胺、高氯酸鐵、高氯酸三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容（一）實(shí)驗(yàn)原理、使用概念：（一）實(shí)驗(yàn)原理、使用概念： 1、 傳統(tǒng)煮法的目的傳統(tǒng)煮法的目的-”水煮三沸，百毒水煮三沸，百毒具消具消“； 2、川烏加熱水煮、蒸中，雙酯型生物堿、川烏加熱水煮、蒸中，雙酯型生物堿被水解、酯化成毒性較低的生物堿，藥效保被水解、酯化成毒性較低的生物堿，藥效保存。存。另外另外C8-乙?；部杀蝗〈芍瑝A而毒性降低乙?；部杀蝗〈芍瑝A而毒性降低毒性生物堿毒性生物堿烏頭堿烏頭堿中烏頭堿中烏頭堿次烏頭堿次烏頭堿雙酯型二萜類雙酯型二萜類毒性強(qiáng)毒性強(qiáng)苯甲酰烏頭胺苯甲酰烏頭胺（烏頭次堿）（烏

3、頭次堿）苯甲酰苯甲酰中烏頭胺中烏頭胺苯甲酰苯甲酰次烏頭胺次烏頭胺苯甲酰單酯型生物堿苯甲酰單酯型生物堿C8-乙?；庖阴；釩14-苯甲?；獗郊柞；舛拘越禐槎拘越禐?/200-500烏頭堿烏頭堿苯甲酰烏頭胺苯甲酰烏頭胺（烏頭次堿）（烏頭次堿）+HAC 次烏頭堿在烏頭堿的基礎(chǔ)上次烏頭堿在烏頭堿的基礎(chǔ)上C-3上沒(méi)有上沒(méi)有-OH取代，取代，N上連接上連接-CH3 中烏頭堿在烏頭堿的基礎(chǔ)上中烏頭堿在烏頭堿的基礎(chǔ)上N上連接上連接-CH3 極性大小順序：次烏頭堿極性大小順序：次烏頭堿 烏頭堿烏頭堿 烏頭堿烏頭堿 中烏頭堿中烏頭堿 （二）、實(shí)驗(yàn)方法（二）、實(shí)驗(yàn)方法 、煮制：取凈川烏，用水浸泡至內(nèi)無(wú)

4、干心煮制：取凈川烏，用水浸泡至內(nèi)無(wú)干心（約兩天），取出，加水煮沸至大個(gè)及實(shí)心（約兩天），取出，加水煮沸至大個(gè)及實(shí)心者切開(kāi)內(nèi)無(wú)白心，口常微有麻舌感時(shí)（約者切開(kāi)內(nèi)無(wú)白心，口常微有麻舌感時(shí)（約4-6h，可蒸，可蒸6-8h），取出切片（草烏切薄片，），取出切片（草烏切薄片，川烏切厚片），干燥，篩去碎屑。川烏切厚片），干燥，篩去碎屑。 成品形狀：表面黑褐色或黃褐色，中心部色成品形狀：表面黑褐色或黃褐色，中心部色較淺，呈灰色，周邊黑褐色。味淡不麻舌或較淺，呈灰色，周邊黑褐色。味淡不麻舌或微有麻舌感。微有麻舌感。 2、川烏炮制前后成分的比較：藥典法、川烏炮制前后成分的比較：藥典法 四、實(shí)驗(yàn)方法四、實(shí)驗(yàn)方法

5、1.川烏樣品液的制備：川烏樣品液的制備： 取川烏取川烏2克粉末，加無(wú)水乙醇克粉末，加無(wú)水乙醇10ml,超聲提取超聲提取 15分鐘，過(guò)濾，濾液為草烏樣品液。分鐘，過(guò)濾，濾液為草烏樣品液。 2.制川烏樣品液制備：制川烏樣品液制備： 取制川烏取制川烏2克粉末，加無(wú)水乙醇克粉末，加無(wú)水乙醇10ml,超聲波超聲波 提取提取15分鐘，過(guò)濾，濾液為制川烏樣品液。分鐘，過(guò)濾，濾液為制川烏樣品液。 3.烏頭堿對(duì)照品液制備：烏頭堿對(duì)照品液制備： 精密稱取烏頭堿對(duì)照品，加無(wú)水乙醇制成每精密稱取烏頭堿對(duì)照品，加無(wú)水乙醇制成每 1ml含含1克的溶液，作為對(duì)照品溶液?？说娜芤?，作為對(duì)照品溶液。 4.川烏煮制藥汁的制備：同

6、上川烏煮制藥汁的制備：同上 色譜方法：色譜方法： 精密吸取上述精密吸取上述3種溶液各種溶液各5ul,分別點(diǎn)于同一硅膠分別點(diǎn)于同一硅膠 G薄層板上，以乙酸乙酯：丙酮：氨水（薄層板上，以乙酸乙酯：丙酮：氨水（17：2：1）為展開(kāi)劑展開(kāi)為展開(kāi)劑展開(kāi)10cm,取出晾干。取出晾干。 顯色顯色 劑：劑： 稀碘化鉍鉀。稀碘化鉍鉀。 分配色譜（分配色譜（Partition Chromatography）用載體在固相基體）用載體在固相基體上的固定液作固定相，以不同極性溶劑作流動(dòng)相，依據(jù)樣品上的固定液作固定相，以不同極性溶劑作流動(dòng)相，依據(jù)樣品中各組分在固定液上分配性能的差別來(lái)實(shí)現(xiàn)分離。中各組分在固定液上分配性能的

7、差別來(lái)實(shí)現(xiàn)分離。 根據(jù)固定相和液體流動(dòng)相對(duì)極性的差別，又可分為正相分配根據(jù)固定相和液體流動(dòng)相對(duì)極性的差別，又可分為正相分配色譜和反相分配色譜。色譜和反相分配色譜。 -當(dāng)固定相的極性大于流動(dòng)相的極性時(shí)，可稱為正相分配色當(dāng)固定相的極性大于流動(dòng)相的極性時(shí)，可稱為正相分配色譜或簡(jiǎn)稱正相色譜（譜或簡(jiǎn)稱正相色譜（Normal Phase Chromatography）；）； -若固定相的極性小于流動(dòng)相的極性時(shí)，可稱為反相分配色若固定相的極性小于流動(dòng)相的極性時(shí)，可稱為反相分配色譜或簡(jiǎn)稱反相色譜譜或簡(jiǎn)稱反相色譜(Reversed Phase Chromatography)。 川烏樣品液制備：超聲提?。ū匾獣r(shí)與冷川烏樣品液制備：超聲提?。ū匾獣r(shí)與冷浸法做驗(yàn)證試驗(yàn)）浸法做驗(yàn)證試驗(yàn)） 注意：藥汁中的檢識(shí)注意：藥汁中的檢識(shí) 注意事項(xiàng)：川烏大小一般為：長(zhǎng)注意事項(xiàng)：川烏大小一般為：長(zhǎng)2-7.5cm，直徑直徑1.2-2.5cm，