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1、名詞解釋?zhuān)ü?0分)1、 共同抗原:具有共同或相似的抗原表位的不同抗原。2、 抗原決定簇:抗原分子中決定抗原特異性的特殊化學(xué)基因。是指抗原性物質(zhì)表面決定該抗原特異性的特殊化學(xué)基團(tuán),又稱(chēng)表位。3、 CK是指由免疫細(xì)胞和某些非免疫細(xì)胞經(jīng)剌激而合成、分泌的一類(lèi)具有生物學(xué)效應(yīng)的小分子蛋白物質(zhì)的總稱(chēng)。CK能調(diào)節(jié)白細(xì)胞生理功能、介導(dǎo)炎癥反應(yīng)、參與免疫應(yīng)答和組織修復(fù)等,是除免疫球蛋白和補(bǔ)體之外的又一類(lèi)免疫分子。4、 TAA:指無(wú)嚴(yán)格的月中瘤特異性,但可在月中瘤細(xì)胞異位表達(dá)或出現(xiàn)量的改變,包括某些糖蛋白、胚胎性抗原等。5、 超敏反應(yīng):是指機(jī)體對(duì)某些抗原初次應(yīng)答致敏后,再次接觸相同抗原刺激時(shí),所出現(xiàn)的一種以生理

2、功能紊亂和組織細(xì)胞損傷為主的異常免疫應(yīng)答。四、簡(jiǎn)答題(共30分)1、 免疫球蛋白的生物學(xué)功能答:V區(qū):結(jié)合抗原C區(qū):激活補(bǔ)體;結(jié)合Fc受提:調(diào)理作用;ADCC作用;介導(dǎo)I型超敏反應(yīng);穿過(guò)胎盤(pán)和黏膜2、 補(bǔ)體的生物學(xué)功能有哪些答:1)溶解細(xì)菌、細(xì)胞2)調(diào)理作用3)引起炎癥反應(yīng)4)清除免疫復(fù)合物1、補(bǔ)體的生物學(xué)作用答:一、補(bǔ)體介導(dǎo)的溶菌、溶細(xì)胞作用:1。機(jī)體抵抗病原微生物、寄生蟲(chóng)感染的重要防御機(jī)制;2。某些病理情況下,可介導(dǎo)自身細(xì)胞溶解,導(dǎo)致組織損傷與疾病。二、補(bǔ)體活性片段介導(dǎo)的生物學(xué)效應(yīng):(一)免疫粘附與調(diào)理作用、(二)促炎癥作用、(三)對(duì)循環(huán)免疫復(fù)合物的清除作用、(四)免疫調(diào)節(jié)作用3、 初次應(yīng)

3、答和再次應(yīng)答的區(qū)別初次應(yīng)答再次應(yīng)答長(zhǎng)短需要的抗原劑量大小抗原類(lèi)型TD-AgTI-AgTD-Ag抗體產(chǎn)量低高抗體類(lèi)型IgM為主igG為主維持時(shí)間短長(zhǎng)親和力低高4、 自身免疫病的特點(diǎn)1、患者血液中可以檢出高滴度的自身抗體和(或)與自身免疫組織成分起反應(yīng)的致敏淋巴細(xì)胞。2、患者組織器官的病理特征為免疫炎癥,并且損傷的范圍與自身抗體或致敏淋巴細(xì)胞所針對(duì)的抗原分布相對(duì)應(yīng)。3、用相同抗原在某些實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中可復(fù)制出相似的疾病模型、并能通過(guò)自身抗體或相應(yīng)致敏淋巴細(xì)胞使疾病在同系動(dòng)物間轉(zhuǎn)移。上述三個(gè)特點(diǎn)是自身免疫的三個(gè)基本特征,也是確定自身免疫病的三個(gè)基本條件。除此之外,目前所認(rèn)識(shí)的自身免疫病往往還具有以下特點(diǎn):

4、4、多數(shù)病因不明,常呈自發(fā)性或特發(fā)性,有些與病毒感染或服用某類(lèi)藥物有關(guān)。5、病程一般較長(zhǎng),多呈反復(fù)發(fā)作和慢性行遷延的過(guò)程,病情的嚴(yán)重程度與自身免疫應(yīng)答呈平行有關(guān)系。6、有遺傳傾向,但多非單一基因作用的結(jié)果;HLA基因在某些自身免疫病中有肯定的作用。7、發(fā)病的性別和年齡傾向?yàn)榕远嘤谀行裕夏甓嘤谇嗌倌辍?、多數(shù)患者血清中可查到抗核抗體。9、易伴發(fā)于免疫缺陷病或惡性月中瘤。1 .自身免疫病患者血液中常常出現(xiàn)高滴度的自身抗體和(或)能與自身組織成分起反應(yīng)的致敏淋巴細(xì)胞。2.組織器官的病理性損傷和相應(yīng)的功能障礙。3.自身免疫病??稍趧?dòng)物中復(fù)制出類(lèi)似的疾病模型,或者通過(guò)將患者血清或淋巴細(xì)胞注入正常動(dòng)物

5、而引起相應(yīng)的疾病或表現(xiàn)。4.除少數(shù)繼發(fā)性自身免疫病(如藥物所致的免疫性溶血性貧血和血小板減少癥、某些慢性活動(dòng)性肝炎等)外,大多數(shù)自身免疫病的病因尚未能確定。5.自身免疫反應(yīng)的強(qiáng)度與自身免疫病的病情密切相關(guān)。6.自身免疫病的臨床經(jīng)過(guò)常呈現(xiàn)反復(fù)發(fā)作和慢性遷延的過(guò)程。7.自身免疫病的發(fā)生有一定的遺傳傾向性。5、 免疫缺陷病的特點(diǎn)免疫缺陷病的臨床表現(xiàn)因其性質(zhì)不同而異,體液免疫缺陷的患者產(chǎn)生抗體的能力低下,因而發(fā)生連綿不斷的細(xì)菌感染。淋巴組織中無(wú)生發(fā)中心,也無(wú)漿細(xì)胞存在血清免疫球蛋白定量測(cè)定有助于這類(lèi)疾病的診斷。細(xì)胞免疫缺陷在臨床上可表現(xiàn)為嚴(yán)重的病毒、真菌、胞內(nèi)寄生菌(如結(jié)核桿菌等)及某些原蟲(chóng)的感染。患

6、者的淋巴結(jié)、脾及扁桃體等淋巴樣組織發(fā)育不良或萎縮,胸腺依賴區(qū)和周?chē)辛馨图?xì)胞減少,功能下降,遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)微弱或缺如。免疫缺陷患者除表現(xiàn)難以控制的感染外,自身免疫病及惡性月中瘤的發(fā)病率也明顯增高。6自身免疫病共同特點(diǎn)1 .患者血液中可以檢出高滴度的自身抗體和(或)與自身組織成分起反應(yīng)的致敏淋巴細(xì)胞,自身抗體在不同的自身免疫病中有交叉重疊現(xiàn)象。2 .患者組織器官的病理特征為免疫炎癥,并且損傷范圍與自身抗體或致敏淋巴細(xì)胞所針對(duì)的抗原分布相對(duì)應(yīng)。3 .動(dòng)物中可復(fù)制出相似的疾病模型,并能通過(guò)血清或淋巴細(xì)胞使疾病在同系動(dòng)物中轉(zhuǎn)移。除上述基本特征外,還常伴有以下特點(diǎn):(1)病因不明,多為自發(fā)性或特發(fā)性醫(yī)

7、|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。(2)病程一般較長(zhǎng),多為發(fā)作與緩解反復(fù)交替出現(xiàn)。(3)有遺傳傾向,但多非單一基因作用的結(jié)果。(4)女性多于男性,老年多于青少年。(5)多數(shù)患者血清中可查到抗核抗體或其他自身抗體。(6)易伴發(fā)免疫缺陷病或惡性腫瘤。五、問(wèn)答題(共30分)1、 試述雙抗體夾心法檢測(cè)血清中的乙肝表面抗原的原理及步驟一.原理1 .以特異性Ab(抗-HBSAgIgG單克隆抗體)包被載體表面2 .然后加入可能含有相應(yīng)Ag的待測(cè)血清,孵育后洗滌3 .再加酶標(biāo)的特異性Ab一起孵育4 .包被的Ab待測(cè)Ag和酶標(biāo)Ab形成夾心復(fù)合物5 .洗滌加底物,根據(jù)顏色的有無(wú)和顏色的深淺定性或定量檢測(cè)Ag用ELISA雙抗體夾

8、心法檢測(cè)HBsAg先將HBsA狼克隆抗體吸附到固相載體表面,然后加入待檢血清樣品,若樣品中有HBsAg則與HBsAg多克隆抗體在載體表面形成抗原-抗體復(fù)合物,再加入酶標(biāo)記抗HBsA押克隆抗體,形成固相HBsA好克隆抗體HBsAg-酶標(biāo)記抗HBsA押克隆復(fù)合物,加入酶的底物顯色,用肉眼觀察或比色測(cè)定抗原量。雙抗原夾心法-操作步驟:將特異性抗原包被固相載體。孵育一定時(shí)間,使形成固相抗原,洗滌除去未結(jié)合的抗原和雜質(zhì)。加待檢標(biāo)本,孵育,使標(biāo)本中的抗體與固相載體上的抗原充分反應(yīng),形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。加酶標(biāo)抗原,孵育,使形成固相抗原-待測(cè)抗體-酶標(biāo)抗原夾心復(fù)合物。洗滌除去未結(jié)合

9、酶標(biāo)抗原。加底物顯色。固相上的酶催化底物產(chǎn)生有色產(chǎn)物,通過(guò)比色,測(cè)標(biāo)本中抗體的量。間接法間接法間接法問(wèn)接法此法是測(cè)定抗體最常用的方法,屬非競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合試驗(yàn)。基本原理是將抗原連接到固相載體上,樣品中待測(cè)抗體與之結(jié)合成固相抗原-受檢抗體復(fù)合物,再用酶標(biāo)二抗(針對(duì)受檢抗體的抗體,如羊抗人IgG抗體)與固相免疫復(fù)合物中的抗體結(jié)合,形成固相抗原固相抗原固相抗原固相抗原-受檢抗體受檢抗體受檢抗體受檢抗體-酶標(biāo)二抗復(fù)合物酶標(biāo)二抗復(fù)合物酶標(biāo)二抗復(fù)合物酶標(biāo)二抗復(fù)合物,測(cè)定加底物后的顯色程度,確定待測(cè)抗體含量?!静僮鞑襟E】競(jìng)爭(zhēng)法ELISA可用于抗原和半抗原的定量測(cè)定,也可對(duì)抗體進(jìn)行檢測(cè)2、I型變態(tài)反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制及過(guò)程

10、、反應(yīng)特點(diǎn)答:I型超敏反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制:I型超敏反應(yīng)是由于變應(yīng)原再次進(jìn)入體內(nèi)后引發(fā)的超敏反應(yīng),其發(fā)生通常分三個(gè)階段:(1)致敏階段在此階段,變應(yīng)原進(jìn)入機(jī)體,刺激機(jī)體特異的B淋巴細(xì)胞,使其增殖分化為漿細(xì)胞,漿細(xì)胞分泌產(chǎn)生針對(duì)特異變應(yīng)原的IgE抗體,此抗體吸附于肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞上,使機(jī)體處于致敏狀態(tài)。(2)發(fā)敏階段當(dāng)有相同變應(yīng)原再次進(jìn)入機(jī)體時(shí),與致敏靶細(xì)胞表面的IgEFab段超變區(qū)特異性結(jié)合,觸發(fā)靶細(xì)胞的細(xì)胞膜活化,使其脫顆粒及合成新的生物活性介質(zhì)。(3)效應(yīng)階段顆粒中的生物活性介質(zhì)及新合成的生物活性介質(zhì)作用于相應(yīng)的效應(yīng)器官,引起效應(yīng)器官病理改變。一、名詞解釋(共20分)1、 免疫:機(jī)體識(shí)別和

11、排除抗原性異物即機(jī)體區(qū)分自己與非己進(jìn)而排除異己的功能。通常對(duì)機(jī)體有利,但在某些條件下也可對(duì)機(jī)體有害2、 TI-Ag:非胸腺依賴性抗原,不需T細(xì)胞輔助即可刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體。少數(shù)Ag屬此類(lèi)。如細(xì)菌多糖、聚合鞭毛蛋白等。共同特點(diǎn):TI-Ag刺激機(jī)體產(chǎn)生的Ab僅是免疫球蛋白M不引起回憶應(yīng)答,不引起細(xì)胞免疫。3、 異嗜性抗原:一類(lèi)與種屬無(wú)關(guān),存在于人、動(dòng)物及微生物之間的共同抗原,最初由Forssman發(fā)現(xiàn),故命名為Forssman抗原。在人不同種屬動(dòng)物植物和微生物細(xì)胞表面上存在的共同抗原。它們之間有廣泛交叉反應(yīng),與種屬特異性無(wú)關(guān)。又稱(chēng)Forssman抗原又稱(chēng)Forssman抗原:指在不同種屬生物之間存在

12、的共同抗原。這種抗原無(wú)種屬特異性,與一些疾病的發(fā)病機(jī)理和診斷有關(guān)。4、 CK是指由免疫細(xì)胞和某些非免疫細(xì)胞經(jīng)剌激而合成、分泌的一類(lèi)具有生物學(xué)效應(yīng)的小分子蛋白物質(zhì)的總稱(chēng)。CK能調(diào)節(jié)白細(xì)胞生理功能、介導(dǎo)炎癥反應(yīng)、參與免疫應(yīng)答和組織修復(fù)等,是除免疫球蛋白和補(bǔ)體之外的又一類(lèi)免疫分子。CK細(xì)胞因子:是由多種細(xì)胞分泌的、通過(guò)結(jié)合細(xì)胞表面的相應(yīng)受體發(fā)揮多種生物學(xué)功能的小分子蛋白質(zhì)或多肽。5、 MCAb:單克隆抗體:借助雜交瘤技術(shù),由一個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的,只作用于單一抗原決定基的高度特異性的Abo純度高,特異性強(qiáng),效價(jià)高,可大量生產(chǎn)。四、簡(jiǎn)答題(共30分)1、抗原怎樣分類(lèi)1、根據(jù)抗原是否顯示免疫原性而區(qū)分抗原

13、(1)完全抗原:即免疫原。根據(jù)化學(xué)特性,免疫原性最強(qiáng)的是蛋白質(zhì)抗原,多糖次之;脂類(lèi)和核酸如果與蛋白質(zhì)及多糖形成復(fù)合物,可顯示免疫原性。(2)半抗原:因分子質(zhì)量小僅具有抗體結(jié)合特異性,需和載體蛋白連接后方具有免疫原性。此時(shí),半抗原激活B細(xì)胞,載體蛋白激活T細(xì)胞。換言之,對(duì)于半抗原一載體系統(tǒng),B細(xì)胞表位和T細(xì)胞表位分別位于半抗原和載體分子。根據(jù)B細(xì)胞產(chǎn)生抗體是否需要T細(xì)胞協(xié)助而區(qū)分抗原(1)T細(xì)胞依賴性抗原(TD-Ag):主要是蛋白質(zhì)。此類(lèi)抗原誘導(dǎo)B細(xì)胞產(chǎn)生抗體時(shí),需有CD4Th卸胞參與。(2)T細(xì)胞非依賴性抗原(TI-Ag):主要是多糖和決定簇重復(fù)的線性抗原,可直接誘發(fā)B細(xì)胞分化,產(chǎn)生以IgM為

14、主的抗體。2、根據(jù)抗原和機(jī)體的親緣關(guān)系而區(qū)分抗原(1)異種抗原:主要指來(lái)自不同物種的蛋白質(zhì)抗原。如針對(duì)人體抗原的鼠源性單克隆抗體,一旦引入人體后,既可作為抗體和相應(yīng)的抗原分子起作用,也可以誘發(fā)產(chǎn)生抗抗體,形成人抗鼠抗體(HAMA反應(yīng)。廣義而言,前面提到的病原體如細(xì)菌和病毒顯示的PAMP&是一種異種抗原,只是此類(lèi)抗原一般不與抗體等免疫產(chǎn)物相結(jié)合,而是啟動(dòng)炎癥反應(yīng)消除病原體。(2)同種異體抗原:典型者如AS()血型抗原和組織相容性抗原,后者是引起移植物排斥的主要因素。(3)自身抗原:正常情況下,免疫系統(tǒng)不對(duì)自身抗原產(chǎn)生免疫應(yīng)答。病理情況下,自身反應(yīng)性淋巴細(xì)胞大量激活并產(chǎn)生自身抗體,引起自身耐受崩潰

15、。其中涉及一系列復(fù)雜的免疫生物學(xué)現(xiàn)象。嗜異性抗原(heterophilicantigen):通常指人體某些組織與病原微生物特定成分之間所具有的共同抗原。如肺炎球菌與血型抗原之間、溶血性鏈球菌胞膜與腎小球基底膜和心肌組織之間,大腸桿菌成分與結(jié)腸膜之間可呈現(xiàn)交叉反應(yīng),表明存在共同的嗜異性抗原。闡明這些抗原的作用,對(duì)疾病的診斷和治療十分重要。抗原的分類(lèi)方法不一,一般按以下幾種方法分類(lèi)。一、根據(jù)抗原與機(jī)體的親緣關(guān)系分為異種抗原(xenoantigen)、同種異型抗原(alloantigen)、自身抗原(autoantigen)二、根據(jù)抗原刺激機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答過(guò)程中是否需要T細(xì)胞的協(xié)助分類(lèi)(一)胸腺依賴

16、性抗原(thymusdependentantigen,TDAg)TDAg刺激B細(xì)胞產(chǎn)生抗體過(guò)程中需T細(xì)胞的協(xié)助。絕大多數(shù)蛋白質(zhì)抗原(如細(xì)胞、細(xì)菌、血清蛋白)屬于此類(lèi)。TDAgJ激機(jī)體產(chǎn)生的抗體有IgM和IgG,同時(shí)還可引起細(xì)胞免疫應(yīng)答,并有免疫記憶。(二)胸腺非依賴性抗原(thymusindependentantigen,TIAg)TIAg,其特點(diǎn)是抗原分子上有許多相同的決定簇,重復(fù)排列呈長(zhǎng)鏈的多聚物。如細(xì)菌脂多糖、莢膜多糖、聚合鞭毛素等。TIAg刺激B細(xì)胞產(chǎn)生抗體時(shí)一般不需要T細(xì)胞的協(xié)助,且產(chǎn)生的抗體主要為IgM,不引起細(xì)胞免疫應(yīng)答,也無(wú)免疫記憶。三、其他分類(lèi)方法根據(jù)抗原的化學(xué)組成不同可分為

17、蛋白質(zhì)抗原、脂蛋白抗原、糖蛋白抗原、多糖和核蛋白抗原等。根據(jù)抗原的性質(zhì)可分為完全抗原、半抗原。根據(jù)抗原獲得方式可分為天然抗原(naturalantigen)、人工抗原(artificialantigen)、合成抗原(syntheticantigen)和應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)制備的重組抗原(疫苗)2、CK的共性1.多為小分子多肽。高效性:微量(pM就可對(duì)靶細(xì)胞產(chǎn)生顯著的生物學(xué)作用。須與相應(yīng)受體結(jié)合才能發(fā)揮作用。可以旁分泌、自分泌或內(nèi)分泌的方式發(fā)揮作用。多效性、重疊性、拮抗效應(yīng)和協(xié)同效應(yīng)。網(wǎng)絡(luò)性:相互促進(jìn)或制約。以非特異方式發(fā)揮作用,即細(xì)胞因子對(duì)靶細(xì)胞作用無(wú)抗原特異性,也不受MHC艮制。3、HLAII

18、類(lèi)分子的功能HLAII類(lèi)分子主要表達(dá)在專(zhuān)職APC(如DC單核/巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞)、激活T細(xì)胞表面和胸腺上皮細(xì)胞。功能:1、參與抗原加工和提呈2、參與對(duì)免疫應(yīng)答的遺傳控制3、參與T細(xì)胞限制性識(shí)別4、參與T細(xì)胞在胸腺的發(fā)育4、補(bǔ)體系統(tǒng)的基本特征5、免疫應(yīng)答的類(lèi)型體內(nèi)有兩種免疫應(yīng)答類(lèi)型:一是固有性免疫應(yīng)答,又稱(chēng)為非特異性免疫;二是適應(yīng)性免疫應(yīng)答,又稱(chēng)為特異性免疫。根據(jù)抗原刺激、參與細(xì)胞或應(yīng)答效果等各方面的差異,免疫應(yīng)答可以分成不同的類(lèi)型:1 .按參與細(xì)胞分類(lèi)根據(jù)主導(dǎo)免疫應(yīng)答的活性細(xì)胞類(lèi)型,可分為細(xì)胞介導(dǎo)免疫(CMI)和體液免疫兩大類(lèi)。CMI是T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答,簡(jiǎn)稱(chēng)為細(xì)胞免疫,但與描述的細(xì)胞免疫(

19、吞噬細(xì)胞免疫)已有本質(zhì)的區(qū)別。體液免疫是B細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答,也可稱(chēng)抗體應(yīng)答,以血清中出現(xiàn)循環(huán)抗體為特征。2 .按抗原刺激順序分類(lèi)某抗原初次刺激機(jī)體與一定時(shí)期內(nèi)再次或多次刺激機(jī)體可產(chǎn)生不同的應(yīng)答效果,據(jù)此可分為初次應(yīng)答和再次應(yīng)答(secondaryresponse)兩類(lèi)。一般地說(shuō),不論是細(xì)胞免疫還是體液免疫,初次應(yīng)答比較緩慢柔和,再次應(yīng)答則較快速激烈。3 .按應(yīng)答效果分類(lèi)一般情況下,免疫應(yīng)答的結(jié)果是產(chǎn)生免疫分子或效應(yīng)細(xì)胞,具有抗感染、抗腫瘤等對(duì)機(jī)體有利的效果,稱(chēng)為免疫保護(hù);但在另一些條件下,過(guò)度或不適宜的免疫應(yīng)答也可導(dǎo)致病理?yè)p傷,稱(chēng)為超敏反應(yīng),包括對(duì)自身抗原應(yīng)答產(chǎn)生的自身免疫病。與此相反,特定

20、條件下的免疫應(yīng)答可不表現(xiàn)出任何明顯效應(yīng),稱(chēng)為免疫耐受。另外,在免疫系統(tǒng)發(fā)育不全時(shí),可表現(xiàn)出某一方面或全面的免疫缺陷;而免疫系統(tǒng)的病理性增生而稱(chēng)為免疫增殖病。6、T細(xì)胞免疫的生物學(xué)效應(yīng)細(xì)胞免疫是指T細(xì)胞受到抗原刺激后,增殖、分化、轉(zhuǎn)化為致敏T細(xì)胞(也叫效應(yīng)T細(xì)胞),當(dāng)相同抗原再次進(jìn)入機(jī)體的細(xì)胞中時(shí),致敏T細(xì)胞(效應(yīng)T細(xì)胞)對(duì)抗原的直接殺傷作用及致敏T細(xì)胞所釋放的細(xì)胞因子的協(xié)同殺傷作用。具引起的生物學(xué)效應(yīng)有:1.當(dāng)致敏T細(xì)胞與帶有相應(yīng)抗原的靶細(xì)胞再次接觸時(shí),兩者發(fā)生特異性結(jié)合,產(chǎn)生刺激作用,使靶細(xì)胞膜通透性發(fā)生改變,引起靶細(xì)胞內(nèi)滲透壓改變,靶細(xì)胞月中脹、溶解以致死亡。2.通過(guò)淋巴因子相互配合、協(xié)同

21、殺傷靶細(xì)胞。如皮膚反應(yīng)因子可使血管通透性增高,使吞噬細(xì)胞易于從血管內(nèi)游出;巨噬細(xì)胞趨化因子可招引相應(yīng)的免疫細(xì)胞向抗原所在部位集中,以利于對(duì)抗原進(jìn)行吞噬、殺傷、清除等。五、論述題(共30分)1、 試述雙抗體夾心法檢測(cè)血清中的乙肝表面抗原的原理及步驟一.原理1 .以特異性Ab(抗-HBSAgIgG單克隆抗體)包被載體表面2 .然后加入可能含有相應(yīng)Ag的待測(cè)血清,孵育后洗滌3 .再加酶標(biāo)的特異性Ab一起孵育4 .包被的Ab待測(cè)Ag和酶標(biāo)Ab形成夾心復(fù)合物5 .洗滌加底物,根據(jù)顏色的有無(wú)和顏色的深淺定性或定量檢測(cè)Ag用ELISA雙抗體夾心法檢測(cè)HBsAg先將HBsAg克隆抗體吸附到固相載體表面,然后加入待檢血清樣品,若樣品中有HBsAg則與HBsAg多克隆抗體在載體表面形成抗原-抗體復(fù)合物,再加入酶標(biāo)記抗HBsA押克隆抗體,形成固相HBsA好克隆抗體HBsAg-酶標(biāo)記抗HBsA押克隆復(fù)合物,加入酶的底物顯色,用肉眼觀察或比色測(cè)定抗原量。雙抗原夾心法-操作步驟

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