萬孚rdt瘧疾檢測(cè)ppt課件

1、江蘇省寄生蟲病防治研討所江蘇省寄生蟲病防治研討所 顧亞萍顧亞萍 一、瘧疾檢測(cè)方法學(xué)一、瘧疾檢測(cè)方法學(xué) 二、萬孚瘧疾快速試劑引見二、萬孚瘧疾快速試劑引見 三、本卷須知及異常情況三、本卷須知及異常情況顯微鏡鏡檢PCR檢測(cè)儀膠體金檢測(cè)試劑檢測(cè)方法檢測(cè)方法優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)缺陷缺陷顯微鏡鏡檢技術(shù)特異高；分期，計(jì)數(shù)，區(qū)分蟲種；1小時(shí)內(nèi)能完成診斷程序密度低時(shí)易漏檢惡性瘧；費(fèi)時(shí)、費(fèi)力PCR技術(shù)敏感性和特異性最高能鑒定4種瘧原蟲產(chǎn)物的污染易致假陽性；或操作不當(dāng)易致假陰性;需特殊設(shè)備，不能用于現(xiàn)場(chǎng)；費(fèi)時(shí)，本錢高 RDT簡(jiǎn)便快速，適用性廣對(duì)于原蟲密度小于100個(gè)瘧原蟲/l血樣本，出現(xiàn)漏檢情況。原原 理理l 利用膠體金免疫層

2、析技術(shù)，采用雙抗體夾心法檢利用膠體金免疫層析技術(shù)，采用雙抗體夾心法檢測(cè)抗原。測(cè)抗原。l 檢測(cè)抗原為瘧原蟲乳酸脫氫酶檢測(cè)抗原為瘧原蟲乳酸脫氫酶PLDH。l 產(chǎn)品為三線聯(lián)檢卡，可檢測(cè)出瘧原蟲感染和區(qū)分產(chǎn)品為三線聯(lián)檢卡，可檢測(cè)出瘧原蟲感染和區(qū)分惡性瘧感染。惡性瘧感染。PANPAN，為泛瘧原蟲，為泛瘧原蟲，包括了瘧疾包括了瘧疾4 4個(gè)型個(gè)型PFPF，為惡性瘧，為惡性瘧性能目的性能目的l最低檢出量：最低檢出量：100 個(gè)瘧原蟲個(gè)瘧原蟲/l 血血對(duì)不同原蟲密度的檢測(cè)結(jié)果研討如下：對(duì)不同原蟲密度的檢測(cè)結(jié)果研討如下：原蟲密度原蟲密度parasites/l數(shù)量數(shù)量陽性陽性陰性陰性靈敏度靈敏度%010026323

3、11.51002002018290.02005003735294.650030300100l 樣本搜集樣本搜集l 用全血來進(jìn)展檢測(cè)。用全血來進(jìn)展檢測(cè)。l 全血搜集：采用抗凝管采血，或在采血管里先參全血搜集：采用抗凝管采血，或在采血管里先參與抗凝劑抗凝劑種類可為肝素、與抗凝劑抗凝劑種類可為肝素、EDTA、檸檬、檸檬酸鈉或草酸鉀，將采集血樣參與并搖勻備用。酸鈉或草酸鉀，將采集血樣參與并搖勻備用。l 指尖、耳垂末梢或靜脈樣本采集后立刻便用；指尖、耳垂末梢或靜脈樣本采集后立刻便用；檢驗(yàn)步驟檢驗(yàn)步驟 1 測(cè)試前仔細(xì)閱讀運(yùn)用闡明書，測(cè)試應(yīng)在測(cè)試前仔細(xì)閱讀運(yùn)用闡明書，測(cè)試應(yīng)在室溫下進(jìn)展室溫下進(jìn)展. 2 沿鋁

4、箔袋切口部位扯開，取出試紙卡平沿鋁箔袋切口部位扯開，取出試紙卡平放于臺(tái)面上，并做好標(biāo)志。放于臺(tái)面上，并做好標(biāo)志。 3 3 將將5l5l全血參與樣本加樣孔全血參與樣本加樣孔(A(A孔孔) )中中 , ,再往稀釋液加再往稀釋液加樣孔樣孔(B(B孔孔) )中滴加稀釋液中滴加稀釋液4 4滴滴(100 (100 120l) 120l)。 4. 15分鐘內(nèi)察看顯示結(jié)果；分鐘內(nèi)察看顯示結(jié)果；30分鐘后顯示的結(jié)果分鐘后顯示的結(jié)果無臨床意義。無臨床意義。結(jié)果判讀結(jié)果判讀l 一一 本卷須知本卷須知l 試劑試劑l 1.本品為一次性體外診斷試劑，過期產(chǎn)品請(qǐng)勿運(yùn)用；本品為一次性體外診斷試劑，過期產(chǎn)品請(qǐng)勿運(yùn)用；l 2.如

5、試劑包裝鋁袋破損，枯燥劑變紅，建議不要運(yùn)用；如試劑包裝鋁袋破損，枯燥劑變紅，建議不要運(yùn)用；l 實(shí)驗(yàn)和保管環(huán)境：實(shí)驗(yàn)和保管環(huán)境：l 1. 應(yīng)防止實(shí)驗(yàn)環(huán)境溫度過低或過高；應(yīng)防止實(shí)驗(yàn)環(huán)境溫度過低或過高；l 2.低溫保管的測(cè)試卡需求恢復(fù)至室溫后再翻開，以免吸潮；低溫保管的測(cè)試卡需求恢復(fù)至室溫后再翻開，以免吸潮；l 3.試劑應(yīng)保管在陰涼枯燥的環(huán)境中；試劑應(yīng)保管在陰涼枯燥的環(huán)境中；l 4.不要混合運(yùn)用來自不同批次的試條不要混合運(yùn)用來自不同批次的試條/試卡和裂解液。試卡和裂解液。l 5.當(dāng)瘧原蟲密度很高時(shí)檢測(cè)線很明顯，質(zhì)控線能夠變得很當(dāng)瘧原蟲密度很高時(shí)檢測(cè)線很明顯，質(zhì)控線能夠變得很弱，為正常結(jié)果。弱，為正常

6、結(jié)果。二、異常情況二、異常情況-假陽性假陽性l 對(duì)于個(gè)別情況導(dǎo)致的假陽性，能夠?yàn)橐韵戮売梢龑?duì)于個(gè)別情況導(dǎo)致的假陽性，能夠?yàn)橐韵戮売梢稹Ｆ?。l 1 血液樣本為高血脂、高血紅蛋白、高度乳糜血血液樣本為高血脂、高血紅蛋白、高度乳糜血等異常血樣，能夠會(huì)引起非特異性吸附，以致出等異常血樣，能夠會(huì)引起非特異性吸附，以致出現(xiàn)細(xì)線或假陽?，F(xiàn)細(xì)線或假陽。l 2 操作時(shí)，加樣后應(yīng)能自然流過膜部分，如樣本操作時(shí)，加樣后應(yīng)能自然流過膜部分，如樣本在膜部位凝固，易導(dǎo)致誤判假陽。在膜部位凝固，易導(dǎo)致誤判假陽。l 3 察看時(shí)間的延伸，導(dǎo)致金標(biāo)物質(zhì)的繼續(xù)釋放，察看時(shí)間的延伸，導(dǎo)致金標(biāo)物質(zhì)的繼續(xù)釋放，過量的抗原抗體呵斥假陽情

7、況。過量的抗原抗體呵斥假陽情況。三、異常情況三、異常情況-假陰性假陰性1. 檢查試劑包裝內(nèi)枯燥劑有無吸潮，試劑條質(zhì)控檢查試劑包裝內(nèi)枯燥劑有無吸潮，試劑條質(zhì)控線顯色能否正常。線顯色能否正常。2.試劑應(yīng)該保管于試劑應(yīng)該保管于4-30,如放于冰箱保管，檢測(cè)如放于冰箱保管，檢測(cè)標(biāo)本和試劑盒應(yīng)復(fù)溫再檢測(cè)。標(biāo)本和試劑盒應(yīng)復(fù)溫再檢測(cè)。3. 假設(shè)樣本中抗原含量少，因其反響時(shí)間較長(zhǎng)，假設(shè)樣本中抗原含量少，因其反響時(shí)間較長(zhǎng)，判讀時(shí)間最好不要提早，應(yīng)在判讀時(shí)間最好不要提早，應(yīng)在15min后。后。4. 留意，全血加樣量和滴加稀釋液的量，假設(shè)全留意，全血加樣量和滴加稀釋液的量，假設(shè)全血量少，稀釋液多，易導(dǎo)致低濃度陽性漏檢。血量少，稀釋液多，易導(dǎo)致低濃度陽性漏檢。四、異常情況四、異常情況-無效情況無效情況1. 1. 運(yùn)輸過程導(dǎo)致包裝破損，試劑失效；運(yùn)輸過程導(dǎo)致包裝破損，試劑失效；2. 2. 操作