F-7000熒光分光光度計操作規(guī)程

1、日本日立F-7000熒光分光光度計基本操作規(guī)程1、開機(jī)順序(1)開啟計算機(jī)。(按圖中圓圈按鈕)(2)開啟儀器主機(jī)電源。按下儀器主機(jī)左側(cè)面板下方的黑色按鈕(POWER)。(按下圖中圓圈按鈕)(3)觀察主機(jī)正面面板右側(cè)的Xe LAMP和RUN指示燈依次亮起來,都顯示黃綠色。Xe LAMP燈先亮，RUN燈后亮2、打開運(yùn)行軟件。0D(1)雙擊桌面圖標(biāo)fl solution 2.i for ftmo. ink (FL Solution 2.1 forF-7000)。主機(jī)自行初始化，掃描界面自動進(jìn)入。(2)初始化結(jié)束后，須預(yù)熱15-20分鐘(若要進(jìn)行定量分析，須預(yù)熱30分鐘以上，按界面提示選擇操作方式3.

2、點(diǎn)擊右上角Method,進(jìn)行方法設(shè)置。若要預(yù)掃描，可選擇3-D scan （如下圖）.設(shè)置好方法后（見下圖）再點(diǎn)擊右上角Pre Scan （如上圖），Vavflengtk 工燈皿¥ 電"11glXCtllTim4 上4artI在 Instrument Monitor 菜單（見下圖）的 Data mode中選擇 Fluorescence,在EX Start WL中輸入激發(fā)波長200, EX End WL中輸入激發(fā)波長500,在EM Start WL中輸入發(fā)射波長210（有利于保護(hù)檢測器），在EM EndWL中輸入700（nm）,為節(jié)約掃描時間，掃描速度 Scan speed可

3、設(shè)置為30000。點(diǎn)擊update可知掃描需要多少時間。EX slit和EM slit般選擇5.0 （若熒光強(qiáng)度太弱，可提高該數(shù)值，若強(qiáng)度太高，可降低 該數(shù)值），PMT Voltage （電壓）中可選擇700 （若熒光強(qiáng)度太弱，可提高該數(shù)值，若強(qiáng)度太高，可降低該數(shù)值），PMT Voltage 0-1000v前 面的方框打勾后，可在上面的 PMT Voltage中隨意填寫電壓值。在 Response 中選擇 Auto。Analy%ig JVIethodM力me"Gul. onft hmod。Rctp口口£白Fr-edi cti on fli«ua-EH*nt iff

4、t 電 Mi (I Bn inan“一 J|5 &三而h o-itfciay!VaJ t %£UpWdt© >在Processing菜單中（見下圖）的Y Axis中的Max中填5000或10000,Min 中填 0。Contour 中填寫 10, 在 open data processing window afterdata acquisitior 前打勾。再點(diǎn)擊右上角Pre Scan （如下圖），進(jìn)行預(yù)掃描然后選擇圖譜中顏色最濃、最深、縱坐標(biāo)最高的漩渦中心點(diǎn)，點(diǎn)擊這 個中心點(diǎn)，即可出現(xiàn)最佳激發(fā)波長、最佳發(fā)射波長及強(qiáng)度。若中心點(diǎn)太密，看不出（如上圖），可點(diǎn)擊右

5、鍵，選才Sc scale,將contour由10.00改為100。再點(diǎn)擊確定即可出現(xiàn)下圖情況:點(diǎn)擊縱坐標(biāo)最高的漩渦中心，如上圖和下圖，在左上角即可出現(xiàn)最佳激發(fā)波長（EX）、最佳發(fā)射波長（EM）及強(qiáng)度。待預(yù)掃描結(jié)束后，可再次點(diǎn)擊 Method,進(jìn)行重新設(shè)置，在General菜單的 Measurement中選擇 Wavelength scan （如下圖）；在 Instrument Monitor 菜單（見下圖）的 scan mod即選擇 Emission, Data 中選擇Fluorescence,在EX WL中輸入預(yù)掃描中得到的最佳激發(fā)波長，在EM Start WL中輸入比最佳激發(fā)波長大10nm

6、的數(shù)據(jù)（有利于保護(hù)檢測器），在EM End WL中輸入700（nm）, Scan speed中選擇240或1200, EX slit和EM slit 一般選擇5.0 （若熒光強(qiáng)度太弱，可提高該數(shù)值，若強(qiáng)度太高，可降低該數(shù)值），PMT Voltage （電壓）中可選擇700 （若熒光強(qiáng)度太弱，可提高該數(shù)值，若強(qiáng)度太高，可降低該 數(shù)值），PMT Voltage 0-1000v前面的方框打勾后，可在上面的 PMTVoltage中隨意填寫電壓值。在 Response中選擇Auto,在Replicates中選擇1,在Cycle time中填0在Processing菜單中（見下圖）的Y Axis中的Max

7、中填1000或2000或10000（可根據(jù)預(yù)掃描結(jié)果的熒光強(qiáng)度值填寫Y軸熒光強(qiáng)度的最大值），Min 中填 0。Contour 中填寫 10,在 open data processing windowafter data acquisitior 前打勾。4點(diǎn)擊右上角Sample ABC進(jìn)行數(shù)據(jù)存儲模式及途徑設(shè)置（見下圖）phuHei： DpenLjitcs ONS«Fe 丁R»pfcM fi .0jAijcm«nce |<l DIBEXI 湖口 mEM1|50OG rtfnEX 5k ISO-EM Sk 廂-55 .點(diǎn)擊上圖右上角Measure即可對樣品進(jìn)行測

8、試，測試完后在圖譜右 上角點(diǎn)擊report,再點(diǎn)擊文件菜單“另存為”，可將圖譜數(shù)據(jù)另存為 excel格式。6 . 96微孔板的操作，先安裝相關(guān)裝置，安裝后（見下圖）圖中畫圓 圈的支架突出部分要壓住它邊上按鈕。開機(jī)后在空白圖譜上面可見 MPR菜單（見下圖），點(diǎn)擊該按鈕。出現(xiàn)下圖情景i u rlKlI IIrtfinPiktn |A1|M<rvM點(diǎn)擊Data save可設(shè)置數(shù)據(jù)格式及存儲路線（如下圖）點(diǎn)擊上圖中的Exchange position,放微孔板的支架會跳出來，然后可放入裝有樣品的微孔板，左下角為 A1位置（見下圖）。選擇圖中有樣品的比色皿，如下圖，點(diǎn)擊Sample set可出現(xiàn)黃

9、色背景, 若點(diǎn)擊Reset可取消設(shè)置，黃色背景消失?？蛇x擇某一個樣品進(jìn)行預(yù) 掃描（設(shè)置方法同上面敘述過的方法一樣），根據(jù)預(yù)掃描結(jié)果，再對方法進(jìn)行設(shè)置（設(shè)置方法同上面敘述過的方法一樣），對批量樣品進(jìn)行測試。7、關(guān)機(jī)順序(逆開機(jī)順序?qū)嵤┎僮?：(1)關(guān)閉運(yùn)行軟件 FL Solution 2.1 for F-7000(2)關(guān)閉儀器主機(jī)電源。(3)關(guān)閉計算機(jī)。注意事項(xiàng)(1)注意開機(jī)順序。步驟1- (2)若是未先開主機(jī)，則程序會抓取不到主機(jī)訊號。(2)注意關(guān)機(jī)順序。(3)為延長儀器使用壽命，掃描速度、負(fù)高壓、狹縫的設(shè)置一般不 宜選在高檔。(4)關(guān)機(jī)后必須半小時(等氤燈溫度降下)方可重新開機(jī)。F-7000

10、熒光分光光度計使用操作步驟1、開機(jī)：(1)開啟計算機(jī)。(2)開啟儀器主機(jī)電源。按下儀器主機(jī)左側(cè)面板下方的黑色按鈕(POWER)。同時，觀察主機(jī)正面面板右側(cè)的 Xe LAMP和RUN指 示燈依次亮起來，都顯示綠色。2、計算機(jī)進(jìn)入 Windows XP視窗后，打開運(yùn)行軟件(如圖1)。0H(1 )雙擊桌面圖標(biāo)FL Solutions 2.1 for FTMU. Ink ( FL Solution 2.1 forF-7000)。主機(jī)自行初始化，掃描界面自動進(jìn)入。(2)初始化結(jié)束后，須預(yù)熱15-20分鐘，按界面提示選擇操作方式圖1 FL Solution 2.1掃描界面3、測試模式的選擇：波長掃描（wa

11、velength scan(1)點(diǎn)擊掃描界面右側(cè)“ Method”(2)在 “General 選項(xiàng)中的 “ Measurement"選擇 a wavelengthscan”測量模式，如圖2。圖2 Method- "General”選項(xiàng)的界面(3)在“Instrument”選項(xiàng)中設(shè)置儀器參數(shù)和掃描參數(shù)，如圖3Analysis lethodX圖 3 Method- "Instrument” 選項(xiàng)設(shè)置界面主要參數(shù)選項(xiàng)包括：選擇掃描模式 " Scan Mode”: Emission/Excitation/Synchronous(發(fā)射光譜、激發(fā)光譜和同步熒光)。選

12、擇數(shù)據(jù)模式 “ Data Mode ”：磷光測Fluorescence/Phosphprescence/LuminescenCe()t 測量、量、化學(xué)發(fā)光)。設(shè)定波長掃描范圍A、 掃描熒光激發(fā)光譜(Excitation):需設(shè)定激發(fā)光的起始/終止波長(EX Start/End WL)和熒光發(fā)射波長(EM WL );B、 掃描熒光發(fā)射光譜(Emission)：需設(shè)定發(fā)射光的起始/終止波 長（EM Start/End WL）和熒光激發(fā)波長（EX WL ）;C、 掃描同步熒光（Synchronous ：需設(shè)定激發(fā)光的起始/終止波 長（EX Start/End WL）和熒光發(fā)射波長（EM WL ）。!

13、 Attention :激發(fā)光終止與起始波長差不小于 10nm。選擇掃描速度" Scan Speed （通常選240nm/min）。選擇?發(fā)/發(fā)射狹縫（EX/EM Slit ）。選擇光電倍增管負(fù)高壓“ PMT Voltage”（一般選700V）。選擇儀器響應(yīng)時間“ Response （一般選Auto）。選擇光閘才5制“口 Shutter Control”打，以使儀器在光譜掃描 時自動開啟，而其他時間關(guān)閉。選擇“ Report”設(shè)定輸出數(shù)據(jù)信息、儀器采集數(shù)據(jù)的步長（通 常選0.2nm）及輸出數(shù)據(jù)的起始和終止波長（Data Start/End）。! Attention : Data St

14、art/End需與 “Instrument” 選項(xiàng)中設(shè)置一致，否則所得到的數(shù)據(jù)點(diǎn)會逐漸減少，而無法作圖。（4）參數(shù)設(shè)置好后，點(diǎn)擊“確定”。4、設(shè)置文件存儲路徑（1）點(diǎn)擊掃描界面右側(cè)“ Sample如圖4。圖4 Sample選項(xiàng)的界面(2)樣品命名 " Sample name o(3)選中“UAuto File"，打可以自動保存原始文件和TXT格 式文本文檔數(shù)據(jù)。(4)參數(shù)設(shè)置好后，點(diǎn)擊“ OK5、掃描測試(1)打開蓋子，放入待測樣品后，蓋上蓋子。(請勿用力)(2)點(diǎn)擊掃描界面右側(cè)“ Measure(或快捷鍵F4),窗口在線出現(xiàn)掃描譜圖6、數(shù)據(jù)處理(1)選中自動彈出的數(shù)據(jù)窗口

15、，如圖 5(2)選擇“Trace” 回，進(jìn)行讀數(shù)并尋峰等操作。戰(zhàn) Lili Liii Ii.n !. .wli IlfAj* 工Up業(yè)gp闿|圜出IxMBIRt Htl?,. ?ln 開攤 fF t A " r9r-Tmffit.黃土盍0汁5i r-iim M自 i皿國It 陽年” | 3 rm-i.-*«*W - BE i- W < f-. - :lT 1T 3圖5掃描譜圖窗口(3)上傳數(shù)據(jù)。3、關(guān)機(jī)順序(逆開機(jī)順序?qū)嵤┎僮?：(1)關(guān)閉運(yùn)行軟件FL Solution 2.1 for F-7000,彈出窗口，如圖6(2) 選中 “O Close the lamp, the