水產(chǎn)品生物活性肽的研究進(jìn)展

1、水產(chǎn)品生物活性肽的研究進(jìn)展海洋食品精深加工關(guān)鍵技術(shù)省部共建協(xié)同創(chuàng)新中心摘要水產(chǎn)品種類繁多，所含氨基酸比例與人體氨基酸組成接近。與陸生動植物蛋白來源的生物活性肽相比，水產(chǎn)品生物活性肽具有自身優(yōu)勢，這引起了研究人員的廣泛關(guān)注，成為近年來食品領(lǐng)域的研究熱點。該文概括了水產(chǎn)品生物活性肽的基本概念、研究現(xiàn)狀，制備方法及構(gòu)效關(guān)系，并以魚類、貝類、甲殼類動物為例，綜合闡述了水產(chǎn)品抗氧化肽、降血壓肽、抗菌肽等生物活性肽的研究進(jìn)展。最后，對水產(chǎn)品生物活性肽當(dāng)前發(fā)展中的共性問題進(jìn)行了總結(jié)與展望，為水產(chǎn)品生物活性肽進(jìn)一步開發(fā)利用提供參考。關(guān)鍵詞水產(chǎn)品；生物活性肽；功能活性；制備；研究進(jìn)展生物活性肽是以蛋白質(zhì)為原料，

2、經(jīng)過水解及分離純化后得到的具有特殊生物活性的蛋白水解物。生物活性肽相比于蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物氨基酸而言，更容易被人體吸收利用。生物活性肽能夠調(diào)節(jié)機(jī)體生命活動，具有一定的藥用特性和營養(yǎng)特性，在日益關(guān)注健康與飲食的今天，越來越受到人們的重視。但是在親本蛋白序列中，肽是無活性的，必須釋放才能發(fā)揮其作用，目前主要通過直接提取法或酶水解法獲得。國內(nèi)外研究的活性肽主要來源于陸生動植物，如研究最早也是最深入的陸生動物乳、肉、蛋活性肽，以及植物來源的大豆肽、大米活性肽、玉米活性肽入水產(chǎn)品生長環(huán)境獨特，是結(jié)構(gòu)多樣的生物活性肽的豐富來源，近年來引起學(xué)者的極大興趣。1水產(chǎn)品生物活性肽概述水產(chǎn)品生物由于其極端的生長環(huán)境，相

3、較于陸生動植物蛋白來源于的蛋白質(zhì)，顯示了出獨特的優(yōu)勢與特性。譬如，藻類生物為了防止嚴(yán)重的氧化損傷，可以產(chǎn)生抗氧化肽而提供自我保護(hù)3水產(chǎn)品生物毒性較強的多肽類，通常作用于離子通道，具有特定的生理活性，如神經(jīng)保護(hù)肽、鎮(zhèn)痛肽、抗病毒肽等、研究顯示，大多數(shù)水產(chǎn)品加工副產(chǎn)物的蛋白水解產(chǎn)物中Gly、Pro、Val、Tyr和Glu的含量更高。水產(chǎn)品生物活性肽的優(yōu)勢與特性見表1。表1水產(chǎn)品生物活性肽的優(yōu)勢與特性Table1Advantagesandcharacteristicsofaquaticproductbioactivepeptides優(yōu)勢._,_抄上_11：，具有建片構(gòu)泡編性.在在大的中F*衽'

4、;kHI使也國內(nèi)民史國好性定住，亭易更擇出如理W生化也f3隹嚙品若把戰(zhàn)第上直晶的保爾此力門，日有包軒杓起咆卻軋化胖擊.國計可用柞客忖土星的刃化和7L沌這丫成行.并fj,助于泡襪狀產(chǎn)品同花成制巨工化、口卜府收連車而準(zhǔn)近"-t門大,依已報道的口鬣白水餐期中AittGluI太亭*產(chǎn)品加工事產(chǎn)物的董白木斛產(chǎn)看中（口口小。,V*L.Fyr府Irlu的唐慟孜高，：未產(chǎn)生檢活性叫4卷14一些特琳期眈如物產(chǎn)生燦邪?奘將洋心1件桿也批強大如溫性.帕*Ft、目前，盡管已經(jīng)報道了大量魚類來源的生物活性肽，但是其他水產(chǎn)品生物,例如甲殼類、軟體動物來源的生物活性肽尚未被大量研究。而以水產(chǎn)品魚、蝦、貝、甲殼類為

5、主的抗菌、降血壓、抗癌活性肽也未進(jìn)行過系統(tǒng)的概述。2水產(chǎn)品生物活性肽的制備、分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定方法2.1 水產(chǎn)品生物活性肽的制備方法通常從生物體中獲得生物活性肽主要有以下3種途徑：（1）通過提取直接從生物體內(nèi)分離得到天然活性肽類；（2）通過體外水解蛋白質(zhì)降解獲得具有生理功能的活性肽；（3）人工合成法制備生物活性肽，酶合成、化學(xué)合成或重組DNA技術(shù)。目前在水產(chǎn)多肽的制備中酶法水解是一個熱門技術(shù)，尤其在食品與藥物中，因為該過程安全、可控，反應(yīng)條件溫和。同時，蛋白質(zhì)類物質(zhì)在酶的催化下，降解產(chǎn)生的小肽，不會與體內(nèi)氨基酸吸收產(chǎn)生競爭，因此可以用制備得到的多肽模擬人體蛋白的體外降解。2.2 水產(chǎn)品生物活性

6、肽的分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定方法水解產(chǎn)物本身也可以用作生物活性化合物的商業(yè)來源。但是，從水產(chǎn)生物中提取的多肽，通常含量較低，而經(jīng)分離純化后的肽其生物活性較高。因此，分離純化程度是水產(chǎn)活性肽研究的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。目前，水產(chǎn)品生物活性肽已通過多種技術(shù)進(jìn)行了研究，包括超濾、凝膠過濾、離子交換色譜和反相高效液相色譜技術(shù)12。純化后的水產(chǎn)品生物活性肽一般需要深入進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定的研究。通常采用質(zhì)譜技術(shù)、凝膠過濾色譜、電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜、高效液相色譜分離或蛋白質(zhì)測序闡明其一級結(jié)構(gòu)用于檢測分子質(zhì)量、氨基酸序列或氨基酸組成。3水產(chǎn)品生物活性肽的研究進(jìn)展3.1 抗氧化活性肽區(qū)別于植物體中通過抑制線粒體損傷或抑制亞麻酸氧化體系的脂質(zhì)

7、過氧化和畜禽體中抑制必需脂肪酸的過氧化而具備的抗氧化功能，水產(chǎn)品中的抗氧化活性是由于疏水性氨基酸或小分子肽的抗氧化作用。目前，具有抗氧化能力的小分子活性肽已成為當(dāng)前的研究熱點之一”I。3.1.1 源于魚類魚類資源豐富易捕撈，是制備抗氧化肽最常見的水產(chǎn)資源。目前魚類抗氧化肽的制備多來源于低值魚及其下腳料。SAMPATH等14采用連續(xù)色譜分離技術(shù)從竹莢魚和黃花魚的皮膚蛋白水解物中純化出2種具有抗氧化特性的肽。并利用電子噴霧電離雙質(zhì)譜法鑒定其肽序列分別為Asn-His-Arg-Tyr-Asp-Arg和Gly-Asn-Arg-Gly-Phe-Ala-Cys-Arg-His-Ala。結(jié)果表明與天然抗氧化

8、劑a-生育酚相比，這2種肽均顯示出更高的抗多不飽和脂肪酸過氧化活性，可有效地用作食品添加劑和藥物。3.1.2 源于貝類貝類蛋白在水產(chǎn)品功能活性肽的研究中占比相對較多，但起步較晚。目前，酶法水解貝類多肽研究較多，主要集中在對扇貝、牡蠣和文蛤等重要貝類資源的利用。WANG等15采用凝膠過濾色譜法和反相高效液相色譜技術(shù)分離純化牡蠣水解物的抗氧化活性肽，采用新技術(shù)納米ESI-MS/MS分析氨基酸序列，得到2種新型抗氧化肽，Pro-Val-Met-Gly-Asp和Gln-His-Gly-Val，這2種肽在其序列中分別包含組氨酸和蛋氨酸，與當(dāng)前其他抗氧化肽沒有任何顯著同源性，有助于中國工業(yè)更好地利用廉價的

9、生物活性材料。3.1.3 源于甲殼類甲殼類動物不同于其他動物，外殼堅硬、體積較大，從蝦蟹殼中制備抗氧化肽，原料數(shù)量大。黃湛媛等阿為實現(xiàn)竹節(jié)蝦的高值化利用，采用超聲輔助酶解工藝對其蝦頭副產(chǎn)物進(jìn)行酶解，利用超高壓液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)對肽結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征，結(jié)果顯示相對分子質(zhì)量3kDa的組分具有顯著的抗氧化活性，采用超高壓液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對抗氧化肽的結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定為Gly-Asn-Gly-Leu-Pro。3.1.4 源于藻類藻類被視為天然的生物反應(yīng)器，是目前已知食品中蛋白質(zhì)含量和質(zhì)量最高的，是天然抗氧化肽的重要來源-0ZHANG等1煙采用不同蛋白酶從藻類中制備抗氧化肽，結(jié)果顯示a-胰凝乳蛋白酶的水解

10、產(chǎn)物具有最高的抗氧化活性，通過超濾、凝膠排阻色譜和反相高效液相色譜進(jìn)行分離、純化后，再通過超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(ultraperformanceliquidchromatography/tandemmassspectrometry,UPLC-MS/MS)鑒定抗氧化肽的序列為Glu-Leu-Trp-Lys-Thr-Phe,結(jié)果證實，Glu-Leu-Trp-Lys-Thr-Phe可以顯著清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肥(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基，自由基消除率為50%時所需樣品的濃度(EC50:concentrationfor50%ofmax

11、imaleffect,EC50)為1.514mg/mL。SHEIH等19采用胃蛋白酶酶解從藻類蛋白廢料中獲得抗氧化肽，通過反相高效液相色譜對目標(biāo)肽段進(jìn)行進(jìn)一步的分離純化，用質(zhì)譜儀鑒定其氨基酸序列為Val-Glu-Cys-Tyr-Gly-Pro-Asn-Arg-Pro-Gln-Phe,半抑制濃度(50%inhibitingconcentration,IC50)為(256.4±1.2)(imol/L,研究顯示，廉價的藻類蛋白廢料可能是生產(chǎn)抗氧化肽的新選擇。3.1.5 源于水產(chǎn)品加工副產(chǎn)物中國水產(chǎn)資源豐厚，總魚蝦貝類的捕撈量居全球前列，然而近海岸的水產(chǎn)品加工廢棄物及低值蛋白質(zhì)資源浪費嚴(yán)重，

12、高值化利用低值水產(chǎn)資源越來越成為水產(chǎn)領(lǐng)域研究的熱點。HSU20,使用定向酶(orientase,OR)和蛋白酶(proteaseXXIII,PR)這2種商業(yè)酶對金槍魚黑肌肉副產(chǎn)物進(jìn)行酶解制備抗氧化肽。然后，對蛋白質(zhì)水解物進(jìn)行SephadexG-25凝膠過濾層析并利用兩步高效液相色譜法進(jìn)一步分離肽級分。結(jié)果表明，使用2種蛋白酶酶解后分子質(zhì)量為3901400Da的肽級分顯示出最高的抗氧化活性，來自O(shè)R和PR水解產(chǎn)物的2種抗氧化肽的氨基酸序列為Leu-Pro-Thr-Ser-Glu-Ala-Ala-Lys-Tyr和Pro-Met-Asp-Tyr-Met-Val-Thr?？寡趸某藖碜杂谒a(chǎn)品的下腳

13、料外，還來自于部分副產(chǎn)物的膠原蛋白中。WU等磔采用酶法水解處魚皮膚膠原蛋白，超濾后，通過尺寸排阻色譜法進(jìn)一步純化，并使用質(zhì)譜鑒定抗氧化肽級分。結(jié)果表明，從超濾級分中鑒定出一種新序列肽Pro-Met-Arg-Gly-Gly-Gly-Gly-Tyr-His-Tyr,是一種小分子質(zhì)量的抗氧化肽，通過抗氧化能力指數(shù)(oxygenradicalabsorbancecapacity,ORAC)分析顯示該肽具有抗氧化活性(2.51±0.14)mmolTE/g。同時，研究結(jié)果表明，超濾級分中的較大肽段(>3kDa)可被鑒定為潛在的冷凍保護(hù)劑。3.2 降血壓活性肽世界各國高血壓平均發(fā)病率為10%

14、20%,在我國目前，大約有25%的成年人患有此病，預(yù)計到2025年這一比例將高達(dá)29%22。從水產(chǎn)品中分離純化得到的食源性降血壓肽，來源于生物體本身，相對于人工合成的降壓藥而言，具有對人體組織溫和、安全、親和力強，藥效持久，無副作用等優(yōu)點。因此從水產(chǎn)品中分離純化降血壓肽更加符合當(dāng)代人的消費理念，具有較好的發(fā)展前景。酶解水產(chǎn)品制備降血壓肽，最早是從帶魚和沙丁魚開始的，在接下來的數(shù)十年間，越來越傾向于向水產(chǎn)品中開發(fā)探索血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制成分，發(fā)現(xiàn)蝦、螃蟹、藻類、貝類、羅非魚等水產(chǎn)品的酶解物中，都存在此物質(zhì)。3.2.1 源于魚類水產(chǎn)生物中的降血壓肽，最早是從魚貝類中提取的，目前更多的是集中于對其降

15、血壓機(jī)理的研究。部分研究表明血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(angiotensinconvertingenzyme,ACE)抑制肽的活性與其結(jié)構(gòu)具有一定的關(guān)系，已經(jīng)報道活性肽在N-末端具有脂肪族氨基酸如Val、Met和Ile,以及諸如Pro、Phe的芳香族氨基酸，將具有較強的抑制作用23。止匕外，大多數(shù)抑制ACE的肽至少有1個脯氨酸殘基。吳靖娜等例利用復(fù)合蛋白酶酶解制備羅非魚魚皮膠降血壓肽，為測定高ACE抑制率的氨基酸組分，通過超濾膜對不同分子質(zhì)量組分截留純化，從而比較不同組分ACE抑制率。結(jié)果表明，ACE抑制活性最強的組分集中在相對分子質(zhì)量小于2000Da以下，對該組分發(fā)揮作用的氨基酸主要是Gly和Pro

16、。3.2.2 源于貝類某些海洋貝類肽能夠抑制ACE活性，這些活性多肽通常是加密在親本蛋白的一級結(jié)構(gòu)中，只有當(dāng)其被釋放出來后才表現(xiàn)出來。牡蠣因其高價值高產(chǎn)量等特點，一直是貝類生物活性肽研究的熱點。WANG等的選用胃蛋白酶酶解牡蠣蛋白，從牡蠣蛋白中釋放出ACE抑制肽,并采用SephadexLH-20凝膠過濾色譜和反相高效液相色譜進(jìn)行分離，制備出具有序列Val-Val-Tyr-Pro-Trp-Thr-Gln-Arg-Phe的九肽，通過給予動物口服實驗，證明其ACE抑制活性的有效性。LIU等26采用酶法從珍珠牡蠣肉蛋白中制備降血壓抑制肽，采用超濾，聚乙二醇甲基醴改性的固定化金屬離子親和介質(zhì),以及反相高

17、效液相色譜對其水解產(chǎn)物進(jìn)行分離純化得到2種新型的ACE抑制肽(His-Leu-His-Thr和Gly-Trp-Ala)。結(jié)果表明，2種肽均具有較高ACE抑制活性值，分別為(458.1±3.2)和(109.3±1.5)gol/L，可通過降低大鼠血壓來證明其降壓活性。3.2.3 源于甲殼類甲殼類降血壓肽具有分子質(zhì)量小、易吸收等特點。李銳等如采用體外模擬腸胃消化的方法對克氏原螯蝦蝦頭進(jìn)行酶解，并通過超濾、凝膠色譜、離子色譜、反向高效液相色譜相結(jié)合的方法對其降血壓肽進(jìn)行分離純化，得到一種新型ACE降血壓肽，分子質(zhì)量為225u,肽序列為Pro-Val。朱國萍陽采用自溶法從其蝦頭副產(chǎn)物

18、中獲得降血壓肽。結(jié)果顯示，3000Da超濾膜產(chǎn)物的ACE抑制活性和肽含量的活性較高，通過SephadexG-25、反相高效液相色譜(Reversephase-highperformanceliquidchromatography,RP-HPLC)對該組分進(jìn)行進(jìn)一步的分離純化，經(jīng)電噴霧離子源質(zhì)譜鑒定，推測為2種二肽為Tyr-Pro和Leu-Pro與Ile-Pro。3.2.4 源于藻類藻類植物中具有降血壓活性的物質(zhì)有多肽、胡蘿卜、多糖等，目前從藻類中提取降血壓肽研究較多。KO等29對海洋小球藻中的降壓肽進(jìn)行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)堿性蛋白酶水解液具有最高的ACE抑制活性，并對堿性蛋白酶解液分子質(zhì)量進(jìn)行分級

19、，范圍為低于5kDa,510kDa和高于10kDa。結(jié)果顯示低于5kDa的級分顯示出最高的ACE抑制活性，并用于隨后的分離純化；在對其進(jìn)行進(jìn)一步分離純化與結(jié)構(gòu)鑒定時，發(fā)現(xiàn)一個降血壓四肽Val-Glu-Gly-Tyr(IC5。128.4mol/L)。姚興存等30采用木瓜蛋白酶酶解條斑紫菜制備活性寡肽，并對其酶解液進(jìn)行層析分析，測得相對分子質(zhì)量小于2000Da活性肽具有降血壓活性，在最優(yōu)條件下測定ACE抑制肽的半抑制濃度IC，。值為4.5mg/mL。除此之外，國外不少研究人員也對藻類生物中的血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制肽進(jìn)行分離純化，鑒定其蛋白水解產(chǎn)物的降壓作用并通過了解它們的細(xì)胞作用機(jī)制，建立結(jié)構(gòu)-抑制

20、關(guān)系來評估它們在臨床前和臨床試驗中有效性31。3.2.5 源于其他水產(chǎn)原料除了對幾種常見種類生物的降血壓肽有研究外，軟體動物、腸腔動物中的降血肽也有研究。BALTI等©a將烏賊肌肉蛋白質(zhì)進(jìn)行水解制備降血壓肽，通過各種類型的色譜分離純化活性肽，利用電噴霧質(zhì)譜和電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜測定其分子質(zhì)量和氨基酸序列，發(fā)現(xiàn)9種新的ACE抑制肽，其中最有效的肽的結(jié)構(gòu)被鑒定為Val-Glu-Leu-Tyr-Pro,Ala-Phe-Val-Gly-Tyr-Val-Leu-Pro和Glu-Lys-Ser-Tyr-Glu-Leu-Pro。結(jié)果表明，最高活性的ACE抑制肽Val-Glu-Leu-Tyr-Pro作為A

21、CE的非競爭性抑制劑，將成為營養(yǎng)保健品和藥物對抗高血壓及其相關(guān)疾病的有益成分。3.3 抗菌性活性肽與市面上流通的抗生素相比，抗菌肽不僅能夠高效殺死細(xì)菌，對部分真菌、原蟲、病毒、月中瘤細(xì)胞也具有很強的抑殺能力。并且大多數(shù)抗菌肽具有較好的水溶性以及穩(wěn)定性，對真核細(xì)胞具有低毒甚至無毒性，不容易產(chǎn)生耐藥性，僅含有十肽或者更短肽的氨基酸的寡肽序列，生產(chǎn)成本低33。3.3.1 源于魚類魚類抗菌肽分布范圍較廣，在魚體體表黏膜、皮膚、小腸、鯉等組織均有過分離得到抗菌肽的報道，因此魚類在受到病原入侵或損傷時能夠迅速進(jìn)行防御并殺害有害物質(zhì)。按其生化組織與結(jié)構(gòu)，可將其分為四類。第一類為富含某種氨基酸的線性抗菌肽，不

22、含半胱氨酸。此種類型的抗菌肽由于富含一些堿性氨基酸和a螺旋結(jié)構(gòu)，有利于在細(xì)菌細(xì)胞膜形成穿孔，細(xì)胞膜內(nèi)磷脂分子的極性端與抗菌肽的極性端相對螺旋翻轉(zhuǎn)，破壞細(xì)胞膜的完整性，使細(xì)胞的功能喪失，達(dá)到抗菌的目的，因此又可稱為穿孔螺旋模型，如Piscidins、Pleurocidins>Moronecidin物種來源有蹶魚34等。第二類為具有B折疊結(jié)構(gòu)，是由于含多個半胱氨酸折疊而形成，如Hepcidin、Cathelicidins,物種來源有大彈涂魚35等。第三類為多存在于魚類的皮膚黏膜中的組蛋白樣抗菌肽，如Parasin,物種來源有鯉魚網(wǎng)等。第四類為經(jīng)酰胺化、糖基化修飾的抗菌肽，這類抗菌肽在相關(guān)酶的

23、作用下，通過高爾基體加工時，會脫掉C端一個或多個氨基酸，或再與一些糖基結(jié)合，從而變成具有活性的成熟肽，物種來源有鯉魚西等。3.3.2 源于貝類在海洋貝類中，貽貝的抗菌肽研究較為透徹，它們多數(shù)是富含半胱氨酸的陽離子抗菌肽閘。宋宏霞網(wǎng)以紫貽貝為原料，采用復(fù)配酶法制備抗菌肽，利用Cellulose-52離子交換柱對其進(jìn)行分離純化，得到具有廣譜殺菌作用的抗菌肽，且其抗菌效果中革蘭氏陽性菌明顯優(yōu)于革蘭氏陰性菌。3.3.3 源于甲殼類1996年首次從甲殼類生物岸蟹(Carcinusmaenas)體內(nèi)分離出一種小分子的具有殺菌作用的蛋白質(zhì)-0不少研究報道顯示有3種類型的抗菌肽，一種是僅對革蘭氏陰性菌具有專一

24、的殺菌作用，一種是僅對革蘭氏陽性菌具有專一的識別抑制作用，還有一種是對2種菌都起到抑制及殺死作用。EVANS等將殺死的革蘭氏陰性桿菌注射到加利福尼亞刺龍蝦中時，在血液淋巴中出現(xiàn)誘導(dǎo)的殺菌素?？怪嗵且蜃?anti-lipopolysaccharidefactor,抗菌肽ALF),是一種小的堿性蛋白質(zhì)，已被證明對革蘭氏陰性菌及陽性菌均具有抑制或殺死功能420ENRIQUE等附從海洋蝦南美白對蝦中克隆了ALF,并檢測了它在細(xì)菌、真菌和病毒感染的先天免疫反應(yīng)中的作用，這是通過使用體內(nèi)RNA干擾方法(RNAinterference,RNAi)分析ALF產(chǎn)生的表型來完成的。3.4 其他水產(chǎn)品活性肽傳統(tǒng)的

25、治療手段對月中瘤細(xì)胞的專一性作用差，副作用大，并且長期服用抗癌藥物，人體會產(chǎn)生耐藥性。相對于傳統(tǒng)的藥物治療，抗月中瘤肽分子質(zhì)量小，易被人體組織吸收利用。與傳統(tǒng)的抗癌藥物相比，其對月中瘤細(xì)胞具有較好的靶向作用，親和力強等優(yōu)點而備受研究人員的關(guān)注。CHI等44通過超濾分級及凝膠色譜技術(shù)從血蛤肌肉蛋白水解物中分離出的2種肽被鑒定為Trp-Pro-Pro和Gln-Pro,分子質(zhì)量分別為398.4Da和243.2Da。結(jié)果表明，Trp-Pro-Pro具有顯著抑制脂質(zhì)過氧化，并且在水解產(chǎn)物分級和純化的肽中表現(xiàn)出最高的自由基消除活性。該發(fā)現(xiàn)表明,Trp-Pro-Pro可用于消除在氧化應(yīng)激條件下產(chǎn)生的過量活性

26、氧(reactiveoxygenspecies,ROS),并預(yù)防由大量自由基引起的癌癥。止匕外，Trp-Pro-Pro還可以通過消除自由基和誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡來用于癌癥治療。王竹君佝也從螺旋藻粉末中提取到了抗月中瘤肽。動脈和靜脈血栓形成是心血管發(fā)病和死亡的主要原因，抑制動脈血栓形成的策略主要集中在阻斷血小板功能上，抗凝血肽通過防止纖維細(xì)胞沉積形成血小板聚集來預(yù)防和治療血栓的形成。JUNG等“從藍(lán)貽貝的可食用部分分離出有效的抗凝血寡肽，M.edulis抗凝血肽（MEAP）,約2.5kDa分子質(zhì)量類似于來自扇貝內(nèi)收肌的鈣調(diào)蛋白的EF-手域的氨基酸序列，能有效地與血液中的凝血活性因子相結(jié)合，延長凝血酶和

27、活化部分促凝血酶原激酶時間，增強機(jī)體抗凝血功能。4水產(chǎn)品生物活性肽的結(jié)構(gòu)特征與生物活性關(guān)系4.1 氨基酸序列與水產(chǎn)品生物活性肽活性關(guān)系不同蛋白質(zhì)水解物和生物活性肽的氨基酸組成的變化大多數(shù)受原材料、酶源和水解過程中所改變的參數(shù)等因素影響。ACE抑制肽的抑制作用通過氨基酸的N-或C-末端類型而改變，這完全取決于酶的一級結(jié)構(gòu)和選擇囪。已經(jīng)報道活性肽在N-末端具有脂肪族氨基酸如Val、Met和Ile,以及Pro、Phe的芳香族氨基酸，將具有較強的抑制作用，肽C-末端存在Tyr、Phe、Trp、Ala、Gly和Pro有助于提高ACE抑制活性陰。并且，大多數(shù)抑制ACE的肽至少有一個Pro殘基或一個Gly殘

28、基。抗氧化活性與氨基酸種類，序列和疏水性有關(guān)，疏水性氨基酸中Lys和Met對抗氧化肽的影響最大49。迄今為止，大多數(shù)已鑒定的魚蛋白抗氧化肽較短（516個氨基酸），并且在其N端和序列中的Pro、His或Tyr處含有疏水性氨基酸（Val和Leu）。Tyr主要消除自由基，因為它們的酚類側(cè)鏈充當(dāng)有效的電子給體。因此，可以終止自由基鏈反應(yīng)50%Pro和Hyp似乎在抑制脂質(zhì)過氧化中起作用51。大多數(shù)水產(chǎn)品加工副產(chǎn)物膠原蛋白研究涉及抗氧化劑和ACE抑制活性的多肽結(jié)構(gòu)中，重復(fù)了獨特的Gly-Pro-Hyp序列，因此抗氧化和ACE抑制活性可能與這種獨特的氨基酸組成有關(guān)52。水產(chǎn)品中的膠原蛋白對黑色素的合成起顯著作用，酪氨酸酶是控制黑色素代謝和兒茶酚胺的關(guān)鍵酶，SCHURINK等研究發(fā)現(xiàn)多肽的氨基酸組成，Leu、Val、Phe、Arg和Ala對抑制酪氨酸酶可能起主要作用，因此這些氨基酸的組成及序列對皮膚修復(fù)能力具有影響。4.2 分子質(zhì)量與水產(chǎn)品生物活性肽活性關(guān)系低分子質(zhì)量的肽比高分子質(zhì)量的肽具有更高的生物活性，因為它們更容易被胃腸道吸收540UMAYAPARVATHI等55對從牡蠣蛋白水解物中分離出的生物活性肽進(jìn)行了體外評估。牡蠣水解產(chǎn)物表現(xiàn)出很強的抗氧化潛力，利用SephadexG-25凝膠色譜和UPLC-MS對其水解產(chǎn)物