臨床微生物檢驗(yàn)標(biāo)本的正確采集及注意事項(xiàng)

1、標(biāo)本質(zhì)量的好壞直接影響診斷結(jié)果的正誤, 不當(dāng)標(biāo)本可導(dǎo)致假陰性。 假陽性結(jié)果的出現(xiàn)。 因此正確采集臨床微生物標(biāo)本, 直接影響到微生物培養(yǎng)鑒定結(jié)果。 可靠的檢驗(yàn)結(jié)果可以指導(dǎo) 臨床診斷治療,為臨床科學(xué)用藥和成功的感染控制提供依據(jù),是正確、合理使用抗菌藥物, 延緩細(xì)菌耐藥, 減少抗菌藥物濫用和監(jiān)測醫(yī)院感染的第一步, 也是最重要的一步。 為此應(yīng)正 確采集各種細(xì)菌學(xué)標(biāo)本。一、 血液標(biāo)本的采集1、 皮膚消毒程序:a.75%酒精清潔局部皮膚 30s 以上。 b. 待皮膚干后, 再用 1%-2.%碘酊作用 30s 或 10%碘伏作用 90s 以上,從穿刺點(diǎn)中心部位向外畫圈消毒,范圍不應(yīng)小于 3cm (直徑 ,

2、且不能用手指觸摸消毒后的皮膚。 c. 皮膚碘酒干后 (約 1min , 穿刺采集血液, 采血量成人 10-20ml ,嬰幼兒 1-2ml 。兒童 3-5ml 。 d. 培養(yǎng)瓶消毒程序:70%酒精擦拭血培養(yǎng) 橡皮塞,作用 60s ;用無菌棉簽清除橡皮塞表面殘余酒精。用注射器無菌采血后立即在床旁 接種培養(yǎng)瓶,并迅速輕搖,充分混勻防止凝固,但又不可劇震以防溶血。立即送檢,切勿冷 藏。一般情況下可把血培養(yǎng)瓶放 20-22。不放冰箱。2、注意事項(xiàng):a. 懷疑菌血癥應(yīng)盡早采血,體溫上升(38.5采血可提高陽性率, 但也要防止因等待而延誤時機(jī)。 b. 對已經(jīng)使用抗菌藥物,而又不能停藥者,也應(yīng)在下次用藥 前采

3、血。 切忌不要在靜滴抗菌藥物的靜脈處采取血標(biāo)本, 也不能從靜脈導(dǎo)管及動脈插管中取 血。 c. 培養(yǎng)基與血液之比以 10:1為宜,以稀釋血液中的抗生素,抗體等殺菌物質(zhì);有人主張 對接受抗菌藥物治療的病人, 培養(yǎng)基與采血量之比可為 20:1或大于這個比例。 d. 近年研究表 明, 將血液注入血培養(yǎng)基前, 更換針頭反而易導(dǎo)致污染。 e. 每例至少采血兩次,間隔 0.5-1h , 以利于提高陽性率和區(qū)分感染菌與污染菌。 f. 疑為細(xì)菌性心內(nèi)膜炎及布魯氏病的病人,以肘 動脈或股動脈采血為宜,除在發(fā)熱期采血外,并要多次采血(24h3-4次和增加采血量(可 增加 10ml 。 g 采血后立即送檢,如不能立即

4、送檢可置室溫,而不能放置冰箱。 h 如臨床表 現(xiàn)很似敗血癥,而血培養(yǎng)多次陰性者,提示考慮厭氧菌和真菌感染的可能。二、呼吸道痰標(biāo)本1、采集方法:a. 清晨起床后用涼開水漱口多次,以除去口腔內(nèi)大量雜菌,用力咳 出肺深部的膿痰, 置于清潔干燥容器中送檢。 b. 痰量極少者可用 45 3%-5%的氯化鈉溶液約 5ml 霧化吸入 min, 進(jìn)行導(dǎo)痰。對于咯痰量少的幼兒,可輕輕壓迫胸骨上部的氣管,當(dāng)其咯痰 后用無菌棉棒采集標(biāo)本。 c. 咳嗽無力或昏迷病人,可用吸痰管經(jīng)鼻腔或口腔經(jīng)氣管腔內(nèi)吸引 痰液送檢。 d. 氣管切開者可以深入透氣孔中取痰。 e. 可用支氣管鏡直接在病灶部位采集高濃 度的病原菌。 f.

5、用無菌導(dǎo)管經(jīng)鼻腔插入氣管鏡內(nèi),緩慢注入無菌蒸餾水 5ml ,取出導(dǎo)管。留 取患者在 3h 內(nèi)咳出的痰液,放入無菌容器中送檢。2、注意事項(xiàng):a. 痰標(biāo)本的采集以晨痰為準(zhǔn),此時患者痰量較多且含菌量也多。 b. 標(biāo)本采集后立即送檢,若不能及時送檢者,可暫存 4冰箱。若晚 1-2h 接種,會失去苛氧 菌,并使得革蘭陰性菌過分生長。 c. 可接受的標(biāo)本:痰;支氣管灌洗液,支氣管刷,支氣管 活檢;肺吸出物和肺活檢。不能接受的標(biāo)本:唾液; 24h 留的痰(結(jié)核桿菌培養(yǎng)除外 ;拭 子。 d. 痰標(biāo)本的質(zhì)量評價(jià):(用顯微鏡篩選在低倍鏡下,檢查鱗狀上皮細(xì)胞,至少 10個視 野,集中在有白細(xì)胞處,合格標(biāo)本為白細(xì)胞與

6、鱗狀上皮細(xì)胞比例大于 2:1。三、鼻咽喉拭子標(biāo)本A. 用濕的拭子(生理鹽水 ;需插兩個鼻孔;深入 3.3cm 左右,轉(zhuǎn)動 4-5次;以上 用于診斷金黃色葡萄球菌暴發(fā)時的鼻帶菌者。B. 咽拭子、口腔拭子(1采集方法(到細(xì)菌室取專用拭子 a. 患者清水漱口后, 由檢查者將其舌外拉, 用棉拭子將咽后壁或懸雍垂的后側(cè)反復(fù)擦拭數(shù)次; b. 化膿性扁桃體炎、 口腔念珠菌病時, 直接用棉拭子在病灶部位擦拭; c 插入運(yùn)送培養(yǎng)基中立即送檢, 防止干燥。 (2注意事項(xiàng) a. 棉拭子應(yīng)避免觸及舌、口腔黏膜和唾液 ;b. 采集標(biāo)本前數(shù)小時不可用消毒藥物漱口或接觸病灶局部。六、胃腸道1、糞便 a. 采集方法選取膿血、

7、黏液糞便 2-3g ,液體糞便取絮狀物 1-2ml 。盛于滅 菌瓶中或蠟紙盒中及時送檢。 b. 注意事項(xiàng)標(biāo)本要采集新鮮的,陳舊標(biāo)本影響陽性檢出率; 切忌糞尿混合; 若要分離阿米巴, 標(biāo)本要立即送檢并注意保溫; 運(yùn)送培養(yǎng)基可提高陽 性率;分離難辨梭菌時需選不成形或水樣便;霍亂弧菌、大腸桿菌 157感染的腹瀉便 則為水樣便或血性便; 標(biāo)本在病理早期或治療前采集; 一般認(rèn)為用抗菌藥三天后, 標(biāo)本 培養(yǎng)病原菌陰性。2、肛拭子在無法獲得糞便的情況下,可用經(jīng)無菌甘油水或無菌生理鹽水濕潤的肛 拭子插入肛門 4-5cm (幼兒 2-3cm 處,輕輕旋轉(zhuǎn)擦取直腸表面黏液后取出,置運(yùn)送培養(yǎng)基 中送檢。七、泌尿道根

8、據(jù)衛(wèi)生部醫(yī)學(xué)感染診斷標(biāo)準(zhǔn) (試行通知,泌尿系統(tǒng)臨床診斷為:患者出現(xiàn) 尿頻、尿急、尿痛等尿路刺激癥狀,或有下腹觸痛、腎區(qū)叩痛、伴或不伴發(fā)熱,并具有下列 情況之一:(1尿檢白細(xì)胞男性 5個 /高倍視野,女性 10個 /高倍視野,插導(dǎo)尿管患者應(yīng) 結(jié)合尿培養(yǎng); (2臨床已診斷為泌尿道感染,或抗菌治療有效而認(rèn)定的泌尿道感染。1、 中段尿 (1 采集方法女性 采樣前用肥皂水或 0.1%的高錳酸鉀溶液沖洗外陰, 留取中段尿 10ml 于滅菌容器內(nèi)。 男性用肥皂水清洗尿道口, 或 0.1%的碘伏溶液消毒尿道 口,滅菌紗布擦干,留取中段尿 10ml 于滅菌容器內(nèi)。 (2注意事項(xiàng)導(dǎo)尿雖然可以減少污 染, 但是多次

9、重復(fù)導(dǎo)尿可以造成逆行性感染, 因此近年來大多采用中段尿。 女性病人最好 采取膀胱截石位由護(hù)士采取標(biāo)本, 減少污染。 采集標(biāo)本以晨起第一次尿液為佳。 采集標(biāo) 本后,若不能在 1h 內(nèi)送檢,暫放 4冰箱,但不能超過 8h 。若尿液標(biāo)本在室溫下放置超過 2h ,即使接種培養(yǎng)結(jié)果細(xì)菌數(shù) 104 cfu/ml獲 103cfu/ml,也不能作為診斷依據(jù),應(yīng)重新留取 標(biāo)本送檢。 疑為尿道炎時可將最初 3-4ml 尿液收集在滅菌容器內(nèi)。 該尿中即使有少數(shù)細(xì)菌, 如反復(fù)檢查為同一細(xì)菌,也應(yīng)考慮為病原菌。兒童在多數(shù)情況下,僅沖洗外陰是不夠的, 故采集標(biāo)本較為困難。如果尿內(nèi)細(xì)菌明顯增多,可以高度懷疑為尿路感染,無菌

10、則可否定。 若細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果為兩種或兩種以上細(xì)菌, 需考慮污染可能, 建議重新留取標(biāo)本送檢。 尿 液中不得加入防腐劑,消毒劑否則影響陽性檢出率。2、膀胱穿刺采集法避免污染是很困難的,培養(yǎng)結(jié)果與病情不符時,或尿厭氧菌培 養(yǎng),或嬰幼兒中段尿采集困難時,可以用恥骨上穿刺膀胱內(nèi)采尿。3、留置導(dǎo)尿者采集法拔去閉式引流的集尿袋,棄去導(dǎo)尿管前段尿液,留無污染的 膀胱內(nèi)尿液 10ml 送檢。不可從集尿袋下端留取標(biāo)本。八、腦脊液1、 采集方法由臨床醫(yī)師以無菌方法收集腦脊液 3-5ml (細(xì)菌 1ml , 真菌 2ml 抗酸桿 菌 2ml ,病毒 1ml 盛于無菌試管或小瓶中立即送檢。2、注意事項(xiàng)(1采集標(biāo)本后立即

11、送檢,因腦膜炎奈瑟菌離體后迅速自溶,肺炎鏈 球菌及流感嗜血桿菌也易死亡; (2 疑為上述細(xì)菌感染時,應(yīng)注意保溫,不可置冰箱或低溫 保存。十、穿刺液標(biāo)本穿刺液包括胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜液。1、采集方法由臨床醫(yī)師行穿刺術(shù)抽取。胸腹水可收集 5-10ml, 心包液、關(guān)節(jié)液收集2-5ml ,置于無菌含抗凝劑的試管或小瓶中,充分混勻后,立即送檢?？鼓齽?10%EDTA二 鈉鹽,標(biāo)本與抗凝劑之比 10:1。2、注意事項(xiàng):標(biāo)本采集應(yīng)在患者用藥之前或停止用藥 1-2天后進(jìn)行;不能立即送檢可置 4冰箱保存;疑為淋病性關(guān)節(jié)炎患者的關(guān)節(jié)液,采集后立即送檢,或床旁培 養(yǎng)為佳;不能用棉拭子浸蘸標(biāo)本送檢。十一、

12、膿汁及病灶分泌物1、 傷口:表面?zhèn)谑米硬杉椒白⒁馐马?xiàng) 僅限于皮膚與皮下組織, 包括手 術(shù)切口、褥瘡潰瘍、新生兒臍炎、嬰兒膿瘡病。用無菌生理鹽水或 75%的酒精擦去病灶 表面滲液; 用無菌棉拭子抹去及較深部的膿汁分泌物或組織送檢; 采集褥瘡潰瘍標(biāo)本時 應(yīng)采集褥瘡邊緣的膿性分泌物, 拭子放在運(yùn)送培養(yǎng)基中立即送檢, 不要采集創(chuàng)口表面的滲液。 傷口、 膿腫、 竇道、 壞疽組織采集方法及注意事項(xiàng)閉鎖性膿腫用碘酒和酒精消 毒皮膚后, 用滅菌注射器穿刺抽取全部膿液送檢, 疑為厭氧菌感染時, 排去針管內(nèi)空氣將針 頭插入滅菌橡膠塞內(nèi)送檢; 傷口處若有膿及滲出物要用無菌棉簽深入各種竇道中擦拭, 用 小刀刮取

13、,穿刺抽吸或手術(shù)切除獲得深處傷口標(biāo)本;當(dāng)創(chuàng)傷出血時,敷有藥物在 2h 以內(nèi) 及燒傷在 12h 內(nèi)均不應(yīng)采集標(biāo)本, 此時獲得陽性結(jié)果機(jī)會甚少。 采集標(biāo)本注意觀察膿汁及 分泌物性狀、色澤、氣味等?？蔀榕囵B(yǎng)鑒定提供依據(jù)。燒傷創(chuàng)面燒傷創(chuàng)面需要膿性分泌物, 焦痂迅速分離變棕黑、 黑或紫羅蘭色, 燒 傷邊緣水腫?；颊甙l(fā)燒 >38或低體溫 <36,合并低血壓。用無菌生理鹽水沖洗傷口創(chuàng) 面。 由于創(chuàng)面部位不同, 細(xì)菌種類也不盡相同, 要用滅菌棉拭子采集多個部位的炎癥區(qū)送 檢。采集痂下變黑或變性的不健康區(qū)邊緣或引流液等做定量培養(yǎng)及組織活檢。2、厭氧傷口拭子厭氧專用棉棒或玻璃棒觸及深部膿汁;可用注射器

14、抽吸,排 去針管內(nèi)空氣將針頭插入滅菌橡膠塞內(nèi)送檢; 立即送檢, 送檢過程中必須保持在無氧條件; 不宜做厭氧菌培養(yǎng)的有痰、喉拭子、鼻咽拭子、齒齦拭子、直腸、陰道和宮頸拭子以及回 腸、結(jié)腸造瘺術(shù)的流出物,胃、小腸及大腸內(nèi)容物等。3、尿道口分泌物拭子男性用無菌紗布擦拭和清洗尿道口,然后采取從尿道口溢 出的膿性分泌物; 采集前列腺液時, 先將尿道、 膀胱沖洗, 然后從肛門用手指按摩前列腺, 促使前列腺液溢出; 女性病人先用滅菌紗布或棉拭子仔細(xì)擦拭或清洗尿道口, 然后從陰道 內(nèi)診壓迫尿道, 使分泌物溢出; 取子宮頸分泌物,先用內(nèi)窺鏡擴(kuò)張陰道, 然后從宮頸口用 滅菌棉拭子采取分泌物,盡量避免被陰道宮頸附近正常菌群