微生物純種的分離方法

1、微生物純種的分離方法自然界中的微生物總是雜居在一起，即使一粒土或一滴水中也生存著多種微生物。要研究其中的某一種微生物，首先必須將它分離出來。下面介紹幾種純種微生物的分離方法。平板劃線分離 將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中制成平板，用接種環(huán)沾取少量待分離的材料，在培養(yǎng)基表面平行或分區(qū)劃線(圖5-5)，然后，將培養(yǎng)皿放入恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成純種的單個(gè)菌落。液體稀釋法 將待分離的樣品經(jīng)過大量稀釋后，取稀釋液均勻地涂布在培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基表面，培養(yǎng)后就可能得到單個(gè)菌落。利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行分離 不同的微生物對(duì)不同的試劑、染料、抗生素等

2、具有不同的抵抗能力，利用這些特點(diǎn)可配制出適合某種微生物生長而限制其他微生物生長的選擇培養(yǎng)基。用這種培養(yǎng)基來培養(yǎng)微生物就可以達(dá)到純種分離的目的。菌絲尖端切割 這種方法適于絲狀真菌。用無菌的解剖刀切取位于菌落邊緣的菌絲的尖端，將它們移到合適的培養(yǎng)基上培養(yǎng)后，就能得到新菌落三、細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)（一）背景知識(shí)介紹1.細(xì)菌的分離與純化自然界的細(xì)菌總是以雜居的方式存在，如土壤、水、空氣等都分布著種類繁多的細(xì)菌。我們?nèi)绾沃肋@些雜居的細(xì)菌是哪種細(xì)菌呢？這就需要將這些帶菌的材料中混雜的細(xì)菌，經(jīng)過稀釋，使其分散成單個(gè)存在的菌體，在固體培養(yǎng)基平板上，長成肉眼可見并具有一定特征的菌落。這些菌落分離出來，進(jìn)行純培養(yǎng)。

3、所謂純培養(yǎng)即在一個(gè)培養(yǎng)物中，所有的細(xì)菌都是由一個(gè)細(xì)菌分裂繁殖而產(chǎn)生的后代。這種獲得單一菌株純培養(yǎng)的的方法稱為細(xì)菌的分離。常用的分離方法有稀釋法和劃線法。（二）課題提出：我們的身體和周圍的環(huán)境有大量的細(xì)菌，細(xì)菌與我們的生活和健康密切相關(guān)。但是，自然存在的細(xì)菌都混雜在一起，我們要想研究和了解各種細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能，就要對(duì)其進(jìn)行分離純化，才能進(jìn)行深入的研究。如對(duì)一些致病菌的研究，食品衛(wèi)生的研究，微生物工業(yè)的研究等。在研究過程中，有時(shí)需要調(diào)查和檢測(cè)細(xì)菌密度，則需要統(tǒng)計(jì)細(xì)菌的數(shù)量。如對(duì)環(huán)境污染（水污染、空氣污染、食品污染）的監(jiān)測(cè)和檢查，現(xiàn)在公布的空氣污染度中，有一項(xiàng)即是細(xì)菌數(shù)量。所以，分離與計(jì)數(shù)是對(duì)細(xì)

4、菌研究的基本方法。如果調(diào)查不同深度土壤中細(xì)菌的種類和數(shù)量，通過對(duì)樣品進(jìn)行分離和計(jì)數(shù)，然后再進(jìn)行比較。對(duì)使人生病的細(xì)菌，其檢查也要采取此方法。如當(dāng)皮膚受傷時(shí)則容易發(fā)炎，皮膚中的那些細(xì)菌在引起炎癥？再如，食物的變質(zhì)、蔬菜水果的腐爛、水的污染、生活用水標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)、飲料和食品合格的檢查等，都可以作為課題進(jìn)行研究。分離與計(jì)數(shù)是微生物研究中非?；竞统Ｓ玫姆椒?，涉及面很廣。（三）活動(dòng)范例【活動(dòng)課題】 對(duì)校園不同環(huán)境塵土細(xì)菌數(shù)量的調(diào)查?！菊n題概述】 土壤中細(xì)菌的數(shù)量大，種類多。但是不同的土質(zhì)及土壤的不同深度，細(xì)菌的數(shù)量和種類是不同的。那么，我們生活的環(huán)境中，土壤里的細(xì)菌數(shù)量和類型有沒有區(qū)別呢？教室是人集中的

5、場(chǎng)所，由于人多雜菌也多；操場(chǎng)是學(xué)生運(yùn)動(dòng)的場(chǎng)所，人雖然很多，但直接暴露在陽光下，其中的細(xì)菌會(huì)比教室少嗎？【活動(dòng)過程】（1）樣品的采集：在教室不同方位的角落的地面用刷子，掃取塵土，放入潔凈的容器中；在操場(chǎng)中央及四個(gè)角掃取少量的塵土，放入潔凈的容器中。（2）菌液的制備：將教室土樣和操場(chǎng)土樣各稱取10g，分別在火焰旁加入裝有90ml無菌水的三角瓶中，震蕩5分鐘使菌分散。制備成10-1（1/10）的菌懸液。（3）稀釋：準(zhǔn)備已滅菌的裝有9ml無菌水的試管14只（每個(gè)樣品7支），按10-210-8順序編號(hào)。然后用無菌移液管從教室樣品10-1菌懸液中，搖均后吸取1ml放入1號(hào)試管，用手輕壓移液管的橡皮頭，吸三

6、次將移液管中的菌懸液洗下并混勻。再用無菌移液管按上面方法稀釋操場(chǎng)塵土樣品。（4）接種培養(yǎng)：準(zhǔn)備好經(jīng)過滅菌的、溫度在50牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基約300ml；經(jīng)過滅菌直徑9cm的培養(yǎng)皿18套（每個(gè)樣品9套），并編號(hào)10-6、10-7、10-8，每個(gè)稀釋度各3套，即做三個(gè)重復(fù)以便觀察。待放涼凝固后，將平板倒置放入37恒溫箱中培養(yǎng)12天。（5）結(jié)果觀察：經(jīng)過培養(yǎng)后，平板的表面長出菌落。不同的細(xì)菌其菌落的形態(tài)也不同；根據(jù)平板菌落的數(shù)量計(jì)算出樣品所含菌數(shù)。（6）記錄如下：菌落數(shù)：計(jì)算3個(gè)重復(fù)菌落的平均數(shù)。平板上菌落數(shù)，以第二個(gè)稀釋度長有50個(gè)左右菌落為最佳（太密了不好數(shù)）。如果太密，可進(jìn)一步稀釋。每毫升活菌數(shù)

7、：按上面公式分別計(jì)算3個(gè)稀釋度的菌數(shù)，其計(jì)算結(jié)果3個(gè)稀釋度應(yīng)很接近，如差距較大，實(shí)驗(yàn)則不夠精確。菌落類型：簡單根據(jù)菌落特征，計(jì)算3個(gè)重復(fù)共有幾種（一樣的算一種）。（7）結(jié)果分析：根據(jù)兩種樣品的細(xì)菌數(shù)量和菌落種類，分析兩種環(huán)境中細(xì)菌的分布有什么不同，這種不同與人群密度、周圍環(huán)境特點(diǎn)有沒有關(guān)系。（8）結(jié)論。（四）問題與思考1.有時(shí)吃剩飯為什么會(huì)鬧肚子：提示，將新鮮的米飯、放置一天的米飯、放置二天的米飯取一定量，接種在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)后進(jìn)行計(jì)數(shù)，比較細(xì)菌的數(shù)量。還可以將剩飯熱后培養(yǎng)進(jìn)行計(jì)數(shù)檢查，與沒熱過的進(jìn)行對(duì)比。根據(jù)此方法你能設(shè)計(jì)一些小實(shí)驗(yàn)，對(duì)食物的保鮮或防止變質(zhì)提出新的看法嗎？2.雨后的空氣細(xì)菌

8、數(shù)量是否減少：雨后，把無菌平板在距離地面一定高度，打開皿蓋，暴露一定時(shí)間（一般為510分鐘，如空氣潔凈，可以適當(dāng)延長時(shí)間），經(jīng)培養(yǎng)后計(jì)算菌落數(shù)。與沒下雨時(shí)的空氣進(jìn)行對(duì)比，比較細(xì)菌數(shù)量有沒有差距。一般認(rèn)為，在5分鐘內(nèi)，100cm2表面上沉降的細(xì)菌數(shù)量約等于10m2空氣中細(xì)菌數(shù)量。用此方法還可以檢查教室、實(shí)驗(yàn)室、廁所、花園等處的空氣細(xì)菌數(shù)量，并對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析。想一想，多進(jìn)行戶外活動(dòng)是否有益健康。3.市售的飲料符合衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)嗎：日常生活中，經(jīng)常喝一些飲料如汽水、牛奶、果汁等，這些飲料是否符合衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)呢？市售飲料的種類多，而且魚目混珠。可將你經(jīng)常喝的幾種飲料接種在：（1）普通固體培養(yǎng)基的平板上進(jìn)行培

9、養(yǎng)，統(tǒng)計(jì)細(xì)菌數(shù)量；（2）接種在伊紅-美蘭培養(yǎng)基上（參考水中大腸桿菌的檢查），檢查飲料中的大腸桿菌含量。將檢查的結(jié)果與生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)比較，判斷其是否符合衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。例題 空氣中的含菌量是衡量空氣質(zhì)量的指標(biāo)之一。為了檢測(cè)學(xué)校生物實(shí)驗(yàn)室、教室、校長室、小樹林四個(gè)地方空氣中的含菌情況，請(qǐng)利用所提供條件設(shè)計(jì)一個(gè)簡單實(shí)驗(yàn)。 (1)請(qǐng)用100 mL量筒、4副培養(yǎng)皿、煮沸過的洗碗水設(shè)計(jì)取樣的實(shí)驗(yàn)步驟。(2)請(qǐng)用4支試管、滴管、0.01%亞甲基藍(lán)溶液設(shè)計(jì)檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)步驟。(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的預(yù)測(cè)及分析：_(4)你所設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)到的是_細(xì)菌的相對(duì)數(shù)量。答案(1) 用量筒量取等量的煮沸過的洗碗水分別倒人4副培養(yǎng)皿中。 分

10、別將以上4副培養(yǎng)皿暴露放置于題目所說的4個(gè)場(chǎng)所。 靜置1-3 d后，同時(shí)加蓋取回。(2) 分別取等量放置過的洗碗水放人4支試管中。 在每支試管內(nèi)滴加5.10滴0.01%亞甲基藍(lán)溶液，將試管置于溫暖處。(3)根據(jù)4支試管內(nèi)洗碗水在相同時(shí)間內(nèi)褪色的程度來判定空氣中的含菌量。褪色程度最大的，空氣中的含菌量相對(duì)最高;褪色程度最低的，空氣中含菌量最低。(4)好氧性。16題：基因突變、基因重組和染色體變異的比較基因突變基因重組染色體變異概念基因分子結(jié)構(gòu)發(fā)生發(fā)生改變控制不同性狀的基因重新組合染色體數(shù)目或者結(jié)構(gòu)發(fā)生改變結(jié)果產(chǎn)生新的基因產(chǎn)生新的基因型基因數(shù)目或排列順序發(fā)生變化應(yīng)用誘變育種雜交育種多倍體育種和單倍

11、體育種基因重組,基因突變,染色體變異三者的聯(lián)系和區(qū)別 基因重組是指非等位基因間的重新組合。能產(chǎn)生大量的變異類型，但只產(chǎn)生新的基因型，不產(chǎn)生新的基因?；蛑亟M的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)是性原細(xì)胞的減數(shù)分裂第一次分裂，同源染色體彼此分裂的時(shí)候，非同源染色體之間的自由組合和同源染色體的染色單體之間的交叉互換?；蛑亟M是雜交育種的理論基礎(chǔ)。 基因突變是指基因的分子結(jié)構(gòu)的改變，即基因中的脫氧核苷酸的排列順序發(fā)生了改變，從而導(dǎo)致遺傳信息的改變?；蛲蛔兊念l率很低，但能產(chǎn)生新的基因，對(duì)生物的進(jìn)化有重要意義。發(fā)生基因突變的原因是 DNA在復(fù)制時(shí)因受內(nèi)部因素和外界因素的干擾而發(fā)生差錯(cuò)。典型實(shí)例是鐮刀形細(xì)胞貧血癥?；蛲蛔兪钦T

12、變育種的理論基礎(chǔ)。 染色體變異是指染色體的數(shù)目或結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。重點(diǎn)是數(shù)目的變化。染色體組的概念重在理解。一個(gè)染色體組中沒有同源染色體，沒有等位基因，但一個(gè)染色體組中所包含的遺傳信息是一套個(gè)體發(fā)育所需要的完整的遺傳信息，即常說的一個(gè)基因組。對(duì)二倍體生物來說，配子中的所有染色體就是一個(gè)染色體組。染色體組數(shù)是偶數(shù)的個(gè)體一般都具有生育能力，但染色體組數(shù)是奇數(shù)的個(gè)體是高度不孕的，如一倍體和三倍體等。23題：41、關(guān)于神經(jīng)內(nèi)分泌免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)學(xué)說現(xiàn)代醫(yī)學(xué)最新的進(jìn)展表明：人體的生命活動(dòng)并不是僅僅受神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)，還要接受內(nèi)分泌系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)的復(fù)雜調(diào)節(jié)和影響。機(jī)體神經(jīng)、內(nèi)分泌和免疫系統(tǒng)共同形成一個(gè)復(fù)雜廣泛的

13、調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)，機(jī)體內(nèi)所有細(xì)胞、組織無一不受這個(gè)網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)和控制，它們既是這個(gè)系統(tǒng)的成員，亦接受這個(gè)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)，以適應(yīng)周圍環(huán)境的變化，維持機(jī)體的正常生理功能，發(fā)揮防病和抗病的作用。這就是著名的神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)學(xué)說。神經(jīng)、內(nèi)分泌和免疫系統(tǒng)在生命活動(dòng)中并不是雜亂無章、各自為政的，三者兩兩之間通過復(fù)雜的機(jī)制互相作用、互相影響，神經(jīng)系統(tǒng)是通過神經(jīng)纖維傳達(dá)信息的，內(nèi)分泌因子則是以血液循環(huán)為主要的傳輸渠道，而免疫因子主要以血管、組織液和淋巴管為循行通路，神經(jīng)內(nèi)分泌和免疫系統(tǒng)都和心血管系統(tǒng)存在著解剖生理病理上的千絲萬縷的聯(lián)系，當(dāng)機(jī)體內(nèi)外環(huán)境發(fā)生變化時(shí)，中樞神經(jīng)系統(tǒng)通過整合神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)的相互作用

14、調(diào)節(jié)心輸出量及各部分血管的舒縮變化，從而使各器官、組織之間的血流分配能適應(yīng)機(jī)體當(dāng)時(shí)功能活動(dòng)的需要，心血管系統(tǒng)的反應(yīng)調(diào)節(jié)是系統(tǒng)整合方式作用的主要途徑。從免疫細(xì)胞受體研究進(jìn)展來看，已經(jīng)表明，神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生變化，會(huì)引起內(nèi)分泌系統(tǒng)的變化，而內(nèi)分泌系統(tǒng)產(chǎn)生的各類激素作用于免疫系統(tǒng)，必然引起免疫系統(tǒng)功能的變化，與此同時(shí)免疫反應(yīng)也相對(duì)地影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)。比如情緒影響人體中的天然殺傷細(xì)胞和T細(xì)胞的數(shù)量及淋巴細(xì)胞的反應(yīng)性。15題：海洋微生物可進(jìn)行光合作用海洋微生物一種喜鹽細(xì)菌，它體中有細(xì)菌視紫質(zhì)。它能將光線轉(zhuǎn)化成移動(dòng)電子，成為推動(dòng)菌體新陳代謝的能量，這也就形成了海洋微生物體內(nèi)特有的光合作用機(jī)制。提示人們將來利用海

15、洋微生物視紫質(zhì)光合作用產(chǎn)生能量的原理，人類可以制造出生物太陽能電池。（例如熱泉生態(tài)系統(tǒng)中的生物是以硫化物作用能源物質(zhì)）真核生物只進(jìn)行無性生殖的話，也不符合規(guī)律，可見適用孟德爾的遺傳規(guī)律的是有性生殖中的主要類型配子生殖，配子生殖的真核為基礎(chǔ)的例61977年，科學(xué)家在深海中的火山口周圍發(fā)現(xiàn)熱泉。熱泉噴出的海水溫度超過300，并且富含硫化氫和硫酸鹽。令人驚奇的是，在這樣的海水中，竟發(fā)現(xiàn)大量的硫細(xì)菌。這些細(xì)菌通過氧化硫化物和還原二氧化碳來制造有機(jī)物，在熱泉口周圍還發(fā)現(xiàn)多種無脊椎動(dòng)物，如大海蛤、蟹、管水母、沒有口也沒有消化道的管居環(huán)節(jié)動(dòng)物等。近年來，人們不斷在深海發(fā)現(xiàn)這樣的熱泉生態(tài)系統(tǒng)。有些科學(xué)家認(rèn)為熱

16、泉口的環(huán)境與地球上早期生命所處的環(huán)境類擬。請(qǐng)根據(jù)以上材料回答：(1)上述硫細(xì)菌的同化作用類型是 (2)與一般生態(tài)系統(tǒng)相比，深海熱泉生態(tài)系統(tǒng)有哪些特殊之處? (3)研究深海熱泉生態(tài)系統(tǒng)有什么意義? 解析根據(jù)題目材料信息：這些細(xì)菌通過氧化硫化物和還原二氧化碳來制造有機(jī)物。以H2S為例，則：H2S+O2 SO2+能量(化學(xué)能)CO2+H2O (CH2O)可見硫細(xì)菌為化能自養(yǎng)型生物。(2)深海熱泉生態(tài)系的特殊之處可從無機(jī)環(huán)境、生產(chǎn)者類群和生態(tài)系的能源等三個(gè)方面進(jìn)行描述。(3)閱讀完題干，給人的第一印象是生物的適應(yīng)性和多樣性超出我們的預(yù)料，進(jìn)而對(duì)熱泉生態(tài)系生物的抗高溫、高壓能力感到迷惑，還有“有些科學(xué)家

17、認(rèn)為熱泉生態(tài)系的環(huán)境與地球上早期生命所處的環(huán)境類似”，這難道不是生命起源和生物進(jìn)化的鮮活材料嗎? 答案(1)化能自養(yǎng)型 (2)能源是化學(xué)能，不是太陽能 生產(chǎn)者是化能自養(yǎng)細(xì)菌，不是綠色植物 無機(jī)環(huán)境是高溫、高壓、無光環(huán)境，不是常溫、常壓、有光環(huán)境 (3)豐富人們對(duì)生物適應(yīng)性或多樣性的認(rèn)識(shí)；對(duì)研究生物抗高溫、抗高壓的機(jī)理有重要價(jià)值；對(duì)研究生命的起源和生物的進(jìn)化有一定意義。35題：什么叫基因污染? 基因污染是指經(jīng)過基因改造后的生物由于具有“雜交”優(yōu)勢(shì)，當(dāng)它們回到自然環(huán)境中往往會(huì)獲得更多的生殖機(jī)會(huì)，同時(shí)還有可能對(duì)與其相關(guān)和相互依存的生物產(chǎn)生影響，破壞原有的生態(tài)平衡，進(jìn)而使被改造過的基因較快地?cái)U(kuò)散到它的

18、后代中去，使原有種群面臨滅種的危險(xiǎn)。據(jù)報(bào)道，轉(zhuǎn)基因鮭魚生長速度快、體型較大并有抗寒的特點(diǎn)，逃逸大洋中之后，已對(duì)北美地區(qū)大西洋和太平洋中野生鮭魚的生態(tài)構(gòu)成威脅；轉(zhuǎn)基因鮭魚與野生鮭魚的后代不再具有野生鮭魚游動(dòng)敏捷和定期回游的特點(diǎn)。關(guān)于亞甲基藍(lán)。亞甲基藍(lán)是一種活體染色劑，好氧性細(xì)菌將藍(lán)色的亞甲基藍(lán)陽離子吸收到細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)，氧化分解亞甲基藍(lán)染料，而使其溶液褪色。所以常用于好氧性細(xì)菌存在的鑒定和好氧性細(xì)菌數(shù)量多少的鑒別。1、用放置太久的洗碗水做水質(zhì)污染實(shí)驗(yàn)時(shí)，不能使0.01%亞甲基藍(lán)溶液褪色，其合理解釋是( )A.溶解氧太低，好氧細(xì)菌已死亡 B.亞甲基藍(lán)溶液濃度太低C.好氧細(xì)菌大量繁殖D.溶解氧太多解析：

19、0.01%的亞甲基藍(lán)天溶液是活體染色劑，不影響生物的正常生理活動(dòng).好氧性細(xì)菌可以在洗碗水中大量繁殖，將藍(lán)色的亞甲基藍(lán)陽離子吸收到細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)，氧化分解亞甲基藍(lán)染料，從而使其藍(lán)色褪去.故人們常用亞甲基藍(lán)作為指示劑，根據(jù)藍(lán)色的褪色程度來鑒定水質(zhì)的污染(檢測(cè)好氧性細(xì)菌的相對(duì)數(shù)量)程度.當(dāng)洗碗水放置時(shí)間過長時(shí)，水中溶解氧太低，好氧性細(xì)菌死亡，就不能進(jìn)行有效地鑒定.答案：A2、取放置一天的洗碗水、河水、自來水各5ml，分別注入標(biāo)有1、2、3編號(hào)的試管。在每支試管中各加510滴0.01%的亞甲基藍(lán)溶液，把試管放置在溫暖處，3040min后，管內(nèi)亞甲基藍(lán)褪色的速度依次為（）。A.自來水河水洗碗水B.洗碗水自來

20、水河水C.河水自來水洗碗水D.洗碗水河水自來水分析：污水中的好氧細(xì)菌數(shù)量與有機(jī)物含量成正比，而好氧細(xì)菌能氧化分解亞甲基藍(lán)染料，使它從藍(lán)色變成無色。若水樣中好氧細(xì)菌存在越多，則亞甲基藍(lán)染液被分解褪色得越快。由于洗碗水內(nèi)有機(jī)物含量最多，所以好氧細(xì)菌也最多，因此氧化分解亞甲基藍(lán)染料速度最快。而河水中有機(jī)物的含量也要高于自來水，好氧細(xì)菌在河水中的含量比在自來水中高，所以河水褪色比自來水快。答案應(yīng)為（D）。3、亞甲基藍(lán)是一種活體染色劑，它在溶液中易被好氧性細(xì)菌分解，而使其溶液褪色。請(qǐng)以此為實(shí)驗(yàn)原理根據(jù)下面所提供實(shí)驗(yàn)材料和用具，設(shè)計(jì)一個(gè)簡單的實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證飲用生水不利于身體健康。一實(shí)驗(yàn)材料和用具：0.01%亞

21、甲基藍(lán)溶液，肉湯，試管，大小燒杯，恒溫箱，滴管，酒精燈，池塘清水，三角架二實(shí)驗(yàn)步驟及其結(jié)果：(1) 用燒杯取少量清水，用酒精燈加熱至沸騰，然后冷卻。再煮沸肉湯并冷卻。取兩個(gè)試管，分別編號(hào)為1號(hào)和2號(hào)。(2) 在1號(hào)試管中加入3毫升清水。在2號(hào)試管中加入等量的上述涼開水。在兩支試管中各加入0.5毫升冷卻后的肉湯。(3) 將這兩個(gè)試管同時(shí)放在恒溫箱(30)中恒溫24小時(shí)。(4 )同時(shí)取出這兩支試管，在每只試管中滴入10滴亞甲基藍(lán)溶液繼續(xù)恒溫45小時(shí)，同時(shí)觀察兩試管中溶液的褪色情況。結(jié)果：A試管褪色較快，褪色程度明顯。B試管褪色緩慢，褪色不明顯。三對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析A試管褪色明顯，說明其中含菌量較高，

22、這說明清水比涼開水含較多的細(xì)菌，可見生活中不宜喝生水，應(yīng)喝開水以防病菌進(jìn)入體內(nèi)引起疾病。15題：已知某植物光合作用和呼吸作用的最適溫度分別為25和30.圖表示該植物在25時(shí)光合強(qiáng)度合光照強(qiáng)度的關(guān)系.若將溫度提高到30的條件下(原光照強(qiáng)度和co2濃度等不變).則理論上,圖中a.b.m點(diǎn)的移動(dòng)方式應(yīng)該為溫度升高，呼吸作用增強(qiáng)，所以a點(diǎn)下移；光補(bǔ)償點(diǎn)右移；可是30度已經(jīng)超過了光合作用最適宜的溫度了，所以m點(diǎn)下移。33題：三倍體無籽西瓜的果實(shí)里無籽，含糖量比普通西瓜提高了10%左右，吃著特別甜。而且產(chǎn)量高，抗逆性強(qiáng)。1。獲得三倍體西瓜種子時(shí)，用二倍體為四倍體提供花粉，如果反交，能否獲得三倍體西瓜種子？

23、用四倍體植株作母本，用二倍體植株作父本，進(jìn)行雜交，就能在四倍體上結(jié)出三倍體的種子。如果反交，能否獲得三倍體的西瓜種子呢？四倍體與二倍體西瓜，無論正交或反交，都能產(chǎn)生三倍體的種子。但是反交獲得的三倍體西瓜的胚珠硬化，種子發(fā)育比較困難，形成的三倍體種子難于萌發(fā)；且果實(shí)品質(zhì)差，而正交，不但能獲得三倍體的種子，且四倍體的西瓜吃著味道甜美。故獲得三倍體西瓜種子時(shí)通常以二倍體為四倍體提供花粉。2。三倍體無籽西瓜的發(fā)育過程中需要不需要生長素？若需要，生長素從何而來？三倍體無籽西瓜的發(fā)育過程中必需要有生長素促進(jìn)作用方可進(jìn)行。那么，三倍體無籽西瓜的發(fā)育過程中，生長素又從何而來呢？三倍體的西瓜植株，由于在減數(shù)分裂

24、的過程中，染色體的聯(lián)會(huì)發(fā)生紊亂，因而不能形成正常的生殖細(xì)胞，胚株并不發(fā)育成種子；在三倍體無籽西瓜的培育過程中，也沒有用人工在雌蕊柱頭上涂上一定濃度的生長素溶液；雖然在培育過程中使用了秋水仙素，但這與果實(shí)的發(fā)育無關(guān)。原來，三倍體西瓜植株上的雌蕊要用二倍體西瓜的花粉刺激，子房才能發(fā)育成果實(shí)，從而結(jié)合無籽西瓜。一般來說，生長素在植物體內(nèi)的合成部位是葉原基、嫩葉和發(fā)育中的種子，在這些部位，存在著與生長素合成有關(guān)的酶系。在多種酶的催化作用下，植物體內(nèi)的色氨酸經(jīng)過氨基轉(zhuǎn)換、脫羧作用和兩個(gè)氧化步驟，最終變成生長素（吲哚乙酸）。在二倍體西瓜的花粉中，除含有少量的生長素外，同樣也含有使色氨酸轉(zhuǎn)變成生長素的酶系。

25、當(dāng)二倍體花粉萌發(fā)時(shí)，形成的花粉管伸入到三倍體植株的子房內(nèi)并將自身合成生長素的酶體系轉(zhuǎn)移到其中，從而在子房內(nèi)仍能合成大量的生長素，促使子房發(fā)育成無籽果實(shí)。3。三倍體無籽西瓜為什么含糖量比普通西瓜能提高10%，且產(chǎn)量高，抗逆性強(qiáng)？三倍體無籽西瓜的這一系列變異特征，顯然是由于核內(nèi)染色體加倍，以致等位基因增加而引起的“劑量效應(yīng)”。當(dāng)然，由于三倍體西瓜無籽，本當(dāng)儲(chǔ)藏于種子的子葉中的那部分營養(yǎng)物質(zhì)，就以糖的形式存在于果實(shí)的果肉細(xì)胞中了，這也是三倍體無籽西瓜比普通西瓜含糖量高的原因之一。4無籽西瓜中產(chǎn)生種子的機(jī)率有多大?無籽西瓜為三倍體，其3=33，三倍體在減數(shù)分裂時(shí)，每同源的三個(gè)染色體在前期聯(lián)會(huì)時(shí)或形成三

26、價(jià)體，或形成一個(gè)二價(jià)體與一個(gè)單價(jià)體，而二價(jià)體在后期正常分離，單價(jià)體則隨機(jī)分向一極。也就是說，其中的兩條分向一極，一條分向另一極。所以就同源的三個(gè)染色體而言，形成2配子與配子的機(jī)率各為12（2和配子才是可育配子）,于是三個(gè)染色體組減數(shù)分裂的結(jié)果能形成2和配子的機(jī)率共為 2（1/2）的11方=1/2的10方=1/1024。乳糖是還原性糖嗎還原性糖種類：還原性糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麥芽糖等。非還原性糖有蔗糖、淀粉、纖維素等，但它們都可以通過水解生成相應(yīng)的還原性單糖。 還原性糖概念：還原糖是指具有還原性的糖類。在糖類中，分子中含有游離醛基或酮基的單糖和含有游離醛基的二糖都具有還原性。葡萄糖

27、分子中含有游離醛基，果糖分子中含有游離酮基，乳糖和麥芽糖分子中含有游離的醛基，故它們都是還原糖。 還原性糖鑒定： 鑒定原理：生物組織中普遍存在的還原糖種類較多，常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內(nèi)都含有還原性基團(tuán)（游離醛基或游離酮基）。用斐林試劑、班氏試劑、銀氨溶液等可以檢驗(yàn)生物組織中還原糖存在與否。 （1）利用斐林試劑：斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1gmL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.05gmL的硫酸銅溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡藍(lán)色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下，能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀，而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應(yīng)式如下：CH2OH(CHOH)4CHO2Cu(OH)2CH2OH(CHOH)4COOHCu2O2H2O用斐林試劑鑒定還原糖時(shí)，溶液的顏色變化過程為：淺藍(lán)色棕色磚紅色(沉淀)。 (2)利用班氏試劑：班氏試劑由A液(硫酸銅溶液)，B液(檸檬酸鈉和碳酸溶液)配制而成。將A溶液傾注人B液中，邊加邊攪，如有沉淀可過濾。實(shí)驗(yàn)原理與斐林試劑相似，所不同的是班氏試劑可長期使用。班氏試劑A液中的硫酸銅溶液與B液中的無