土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)上課用PPT學(xué)習(xí)教案

1、會計(jì)學(xué)1土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)上土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)上課用課用 尿素尿素是一種重要的是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥。農(nóng)業(yè)氮肥。尿素尿素不能直不能直接接被農(nóng)作物被農(nóng)作物吸收。吸收。土壤中的細(xì)菌將尿素土壤中的細(xì)菌將尿素分解成分解成氨氨之后才能被植物利用。之后才能被植物利用。土壤中的細(xì)菌分解尿素是因?yàn)樗鼈兡芎铣赏寥乐械募?xì)菌分解尿素是因?yàn)樗鼈兡芎铣呻迕鸽迕?第1頁/共37頁 芽孢桿菌、小球菌、假單胞桿菌、克氏桿菌芽孢桿菌、小球菌、假單胞桿菌、克氏桿菌、棒狀桿菌、梭狀芽孢桿菌，某些真菌和放線、棒狀桿菌、梭狀芽孢桿菌，某些真菌和放線菌也能分解尿素。菌也能分解尿素。從土壤中分離出能夠分解尿素的細(xì)

2、菌從土壤中分離出能夠分解尿素的細(xì)菌統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中究竟含有多少這樣的細(xì)菌統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中究竟含有多少這樣的細(xì)菌第2頁/共37頁啟示：尋找目的菌種時(shí)要根據(jù)它對生存環(huán)境的啟示：尋找目的菌種時(shí)要根據(jù)它對生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。 問：問：如果請你尋找這種耐高溫的酶，你會去如果請你尋找這種耐高溫的酶，你會去哪里尋找？哪里尋找？ DNADNA多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCRPCR）是一種在體是一種在體外將外將少量少量DNADNA大量復(fù)制大量復(fù)制的技術(shù)，此項(xiàng)技術(shù)要求的技術(shù)，此項(xiàng)技術(shù)要求使用使用耐高溫的耐高溫的DNADNA聚合酶聚合酶（93930 0C C）。

3、第3頁/共37頁問：問：為什么為什么TaqTaq細(xì)菌能從熱泉中被篩選出來？細(xì)菌能從熱泉中被篩選出來？ 水生耐熱細(xì)菌水生耐熱細(xì)菌TaqTaq：美國科學(xué)家布魯克于美國科學(xué)家布魯克于19661966年在美國黃石國家公園的一個(gè)熱泉中發(fā)現(xiàn)，并分年在美國黃石國家公園的一個(gè)熱泉中發(fā)現(xiàn)，并分離出耐高溫的離出耐高溫的TaqDNATaqDNA聚合酶。聚合酶。第4頁/共37頁 原因：原因：因?yàn)闊崛獪囟纫驗(yàn)闊崛獪囟?07080800 0C C，高溫高溫淘汰淘汰了絕大多數(shù)微生物（了絕大多數(shù)微生物（不耐熱不耐熱），只有），只有TaqTaq細(xì)菌細(xì)菌被篩選出來。被篩選出來。（一）篩選菌株（一）篩選菌株原理原理：人為提供有人為

4、提供有利于目的菌株利于目的菌株生長的生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度、條件（包括營養(yǎng)、溫度、PHPH等）等），同時(shí)，同時(shí)抑制或阻止抑制或阻止其他微生物生其他微生物生長。長。有選擇作用第5頁/共37頁要分離一種微生物，必須根據(jù)該微生物的特點(diǎn)要分離一種微生物，必須根據(jù)該微生物的特點(diǎn)，包括營養(yǎng)、生理、生長條件等；配置合適的培養(yǎng)包括營養(yǎng)、生理、生長條件等；配置合適的培養(yǎng)基基方法：方法： 抑制大多數(shù)微生物生長抑制大多數(shù)微生物生長 造成有利于該菌生長的環(huán)境，造成有利于該菌生長的環(huán)境，結(jié)果：結(jié)果：培養(yǎng)一定時(shí)間后，該菌數(shù)量上升，再通過稀培養(yǎng)一定時(shí)間后，該菌數(shù)量上升，再通過稀釋涂布平板法等方法對它進(jìn)行純化培養(yǎng)分離。釋

5、涂布平板法等方法對它進(jìn)行純化培養(yǎng)分離。第6頁/共37頁從物理性質(zhì)看此培養(yǎng)基屬于哪類？從功能上從物理性質(zhì)看此培養(yǎng)基屬于哪類？從功能上屬屬于哪類培養(yǎng)基？于哪類培養(yǎng)基？固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基葡萄糖、尿素葡萄糖、尿素 尿素尿素選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基第7頁/共37頁 培養(yǎng)基的培養(yǎng)基的氮源為尿素氮源為尿素，只有能只有能合成脲酶合成脲酶的微的微生物才能利用尿素作為氮源而生存生物才能利用尿素作為氮源而生存。 缺乏缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長發(fā)育繁殖，而受到抑制，所以用氮源而不能生長發(fā)育繁殖，而受到抑制，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出分解尿素的微生物。此培養(yǎng)基就

6、能夠選擇出分解尿素的微生物。第8頁/共37頁組別組別培養(yǎng)基類型培養(yǎng)基類型是否涂是否涂布接種布接種目目 的的實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)組以尿素為唯一氮源以尿素為唯一氮源的選擇性培養(yǎng)基的選擇性培養(yǎng)基是是對照組對照組牛肉膏蛋白胨牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)基是是分離尿素細(xì)分離尿素細(xì)菌菌用以判斷選擇性培養(yǎng)用以判斷選擇性培養(yǎng)基是否具有選擇性基是否具有選擇性對設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的訓(xùn)練對設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的訓(xùn)練第9頁/共37頁 對照組對照組牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 實(shí)驗(yàn)組實(shí)驗(yàn)組以尿素為氮源的培養(yǎng)基以尿素為氮源的培養(yǎng)基第10頁/共37頁常用方法：常用方法：稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法、顯微鏡、顯微鏡直接計(jì)數(shù)法，直接計(jì)數(shù)法， 還可以用過濾膜

7、法還可以用過濾膜法：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過統(tǒng)計(jì)平板品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。有多少活菌。 1 1個(gè)菌落個(gè)菌落 = 1 = 1個(gè)活菌個(gè)活菌 第11頁/共37頁 （2 2）操作方法：稀釋涂布平板）操作方法：稀釋涂布平板 統(tǒng)計(jì)菌落統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)。數(shù)。（3 3）統(tǒng)計(jì)原則）統(tǒng)計(jì)原則 、選、選 30300 30300 個(gè)菌落的平板統(tǒng)計(jì)。個(gè)菌落的平板統(tǒng)計(jì)。 、每個(gè)稀釋度取、每個(gè)稀釋度取3 3個(gè)平板取其平均

8、值。個(gè)平板取其平均值。（4 4）統(tǒng)計(jì)結(jié)果：統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際）統(tǒng)計(jì)結(jié)果：統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，因此統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用數(shù)目低，因此統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用菌落數(shù)菌落數(shù)來表示。來表示。第12頁/共37頁同學(xué)同學(xué)平板平板1 1平板平板2 2平板平板3 3平均數(shù)平均數(shù)評價(jià)評價(jià)甲甲230230230230乙乙2121212212256256163163結(jié)論結(jié)論啟示啟示沒有設(shè)置重復(fù)組，因此結(jié)果沒有設(shè)置重復(fù)組，因此結(jié)果不具說服力。不具說服力。1 1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2 2個(gè)個(gè)相差太遠(yuǎn)，說明在操作過相差太遠(yuǎn)，說明在操作過程程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤。中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤。不能簡單地將不能簡

9、單地將3 3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來求平均值。個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來求平均值。在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)，一定要涂布至少在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)，一定要涂布至少3 3個(gè)平板，作為重復(fù)組，才能個(gè)平板，作為重復(fù)組，才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性。在分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)，一定要考慮。在分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)，一定要考慮所設(shè)置的重復(fù)組的結(jié)果是否一致，結(jié)果不一致，意味著操作有誤所設(shè)置的重復(fù)組的結(jié)果是否一致，結(jié)果不一致，意味著操作有誤，需要重新實(shí)驗(yàn)。，需要重新實(shí)驗(yàn)。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目 P22第13頁/共37頁第14頁/共37頁 在做本課題的實(shí)驗(yàn)時(shí)，在做本課題的實(shí)驗(yàn)時(shí)，A A 同學(xué)從對應(yīng)同學(xué)從對應(yīng)10106 6倍稀釋的培養(yǎng)基中篩

10、倍稀釋的培養(yǎng)基中篩選出大約選出大約150150個(gè)菌落。但是，其他同學(xué)在同樣的稀釋度下只選擇出個(gè)菌落。但是，其他同學(xué)在同樣的稀釋度下只選擇出大約大約5050個(gè)菌落。個(gè)菌落。 其他同學(xué)認(rèn)為其他同學(xué)認(rèn)為A A同學(xué)的結(jié)果有問題。他們分析可能是同學(xué)的結(jié)果有問題。他們分析可能是A A同學(xué)的培同學(xué)的培養(yǎng)基被雜菌污染了，或者培養(yǎng)基中混入了其他含氮物質(zhì)，因而導(dǎo)致養(yǎng)基被雜菌污染了，或者培養(yǎng)基中混入了其他含氮物質(zhì)，因而導(dǎo)致不能分解尿素的細(xì)菌也能在該培養(yǎng)基上生長。不能分解尿素的細(xì)菌也能在該培養(yǎng)基上生長。 但是，但是，A A同學(xué)確信自己的實(shí)驗(yàn)操作準(zhǔn)確無誤，與其他同學(xué)的結(jié)同學(xué)確信自己的實(shí)驗(yàn)操作準(zhǔn)確無誤，與其他同學(xué)的結(jié)果之

11、所以不相同，是因?yàn)樽约核x用的土壤樣品不同。但是，果之所以不相同，是因?yàn)樽约核x用的土壤樣品不同。但是，A A同同學(xué)在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候并沒有設(shè)置對照，因而此時(shí)也拿了不出令人信學(xué)在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候并沒有設(shè)置對照，因而此時(shí)也拿了不出令人信服的證據(jù)。服的證據(jù)。 你能通過設(shè)置對照，幫助你能通過設(shè)置對照，幫助A A同學(xué)學(xué)排除上述兩個(gè)可能影響實(shí)驗(yàn)同學(xué)學(xué)排除上述兩個(gè)可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素嗎？結(jié)果的因素嗎？ 第15頁/共37頁是排除實(shí)驗(yàn)組中非測試是排除實(shí)驗(yàn)組中非測試因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。設(shè)置對照的方法：設(shè)置對照的方法： 空白對照：不給對照組任何處理因

12、素?？瞻讓φ眨翰唤o對照組任何處理因素。 條件對照：給對照組施以部分實(shí)驗(yàn)因素，但不是所要研究的條件對照：給對照組施以部分實(shí)驗(yàn)因素，但不是所要研究的 處理因素。處理因素。 自身對照：對照組和實(shí)驗(yàn)組都在同一研究對象上進(jìn)行。自身對照：對照組和實(shí)驗(yàn)組都在同一研究對象上進(jìn)行。 相互對照：不單設(shè)對照組，而是幾個(gè)實(shí)驗(yàn)組相互對照。相互對照：不單設(shè)對照組，而是幾個(gè)實(shí)驗(yàn)組相互對照。A A同學(xué)的結(jié)果與其他同學(xué)不同，可能的解釋有兩同學(xué)的結(jié)果與其他同學(xué)不同，可能的解釋有兩種。種。一是由于土樣不同一是由于土樣不同；二是由于培養(yǎng)基污染或操作失誤二是由于培養(yǎng)基污染或操作失誤。第16頁/共37頁小結(jié)：通過這個(gè)事例可以看出，實(shí)驗(yàn)結(jié)

13、果要有小結(jié)：通過這個(gè)事例可以看出，實(shí)驗(yàn)結(jié)果要有說服力，對照的設(shè)置是必不可少的。說服力，對照的設(shè)置是必不可少的。方案一：方案一：由其他同學(xué)用與由其他同學(xué)用與A同學(xué)相同土樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn)同學(xué)相同土樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn)方案二：方案二：將將A同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)行培養(yǎng)，作為空白對照，以證明培養(yǎng)基況下進(jìn)行培養(yǎng)，作為空白對照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染。是否受到污染。結(jié)果預(yù)測：結(jié)果預(yù)測：如果結(jié)果與如果結(jié)果與A同學(xué)一致，則證明同學(xué)一致，則證明A無誤無誤；如果結(jié)果不同，則證明；如果結(jié)果不同，則證明A同學(xué)存在操作失誤或培同學(xué)存在操作失誤或培養(yǎng)基的配制有問題。養(yǎng)基的配制有問題。第17頁

14、/共37頁 從肥沃、濕潤的土壤中取樣。先鏟去表層從肥沃、濕潤的土壤中取樣。先鏟去表層土土3cm3cm左右，再取樣，將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的左右，再取樣，將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的信封中。信封中。取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的的信封在使用取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的的信封在使用前都要滅菌。前都要滅菌。制備以尿素為唯一氮源的制備以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基。第18頁/共37頁應(yīng)在火焰旁稱取土壤應(yīng)在火焰旁稱取土壤10g10g。在稀釋土壤溶液的過程中，每一步都要在火焰旁進(jìn)行在稀釋土壤溶液的過程中，每一步都要在火焰旁進(jìn)行分離不同的微生物采用不同的稀釋度分離不同的微生物采用不同的稀釋度 原因：不同微生物在土

15、壤中含量不同原因：不同微生物在土壤中含量不同 目的：保證獲得菌落數(shù)在目的：保證獲得菌落數(shù)在3030300300之間、適于計(jì)之間、適于計(jì)數(shù)的平板數(shù)的平板第19頁/共37頁微生物的種類微生物的種類土壤稀釋倍數(shù)土壤稀釋倍數(shù)目標(biāo)目標(biāo)分離土壤中所有細(xì)菌分離土壤中所有細(xì)菌10104 4、10105 5、10106 6平板上的菌落數(shù)應(yīng)平板上的菌落數(shù)應(yīng)為為3030300300個(gè)，便于個(gè)，便于準(zhǔn)確計(jì)數(shù)。準(zhǔn)確計(jì)數(shù)。分離土壤中的放線菌分離土壤中的放線菌10103 3、10104 4、10105 5分離土壤中的真菌分離土壤中的真菌10102 2、10103 3、10104 4分離土壤中的尿素細(xì)菌分離土壤中的尿素細(xì)菌1

16、0104 4、10105 5、10106 6、10107 7（二）土壤稀釋（二）土壤稀釋二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)第20頁/共37頁10101 110102 210103 310104 410105 510106 610107 710g土壤土壤9ml無菌水無菌水 9ml 無菌水無菌水1ml0.1ml0.1ml0.1ml0.1ml10104 410104 410104 410105 510105 510105 510106 610106 610106 610107 710107 710107 7稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法第21頁/共37頁如果得到了如果得到了2 2個(gè)或個(gè)或2 2個(gè)以上菌落數(shù)目在個(gè)

17、以上菌落數(shù)目在3030030300的平的平板，則說明稀釋操作比較成功，并能夠進(jìn)行菌落的計(jì)板，則說明稀釋操作比較成功，并能夠進(jìn)行菌落的計(jì)數(shù)，如果數(shù)，如果同一稀釋倍數(shù)的三個(gè)重復(fù)的菌落數(shù)相差較大同一稀釋倍數(shù)的三個(gè)重復(fù)的菌落數(shù)相差較大，表明試驗(yàn)不精確，表明試驗(yàn)不精確，需要重新實(shí)驗(yàn)。，需要重新實(shí)驗(yàn)。第22頁/共37頁第23頁/共37頁第24頁/共37頁1.1.通過對照實(shí)驗(yàn)，若培養(yǎng)物有雜菌污染，通過對照實(shí)驗(yàn)，若培養(yǎng)物有雜菌污染，菌落數(shù)偏高；若培養(yǎng)物混入其他氮源，則菌落數(shù)偏高；若培養(yǎng)物混入其他氮源，則菌落形態(tài)多樣，菌落數(shù)偏高，難以選擇出菌落形態(tài)多樣，菌落數(shù)偏高，難以選擇出分解尿素的微生物。分解尿素的微生物。

18、2.2.提示：選擇每個(gè)平板上長有提示：選擇每個(gè)平板上長有3030030300個(gè)個(gè)菌落的稀釋倍計(jì)算每克樣品的菌數(shù)最合適菌落的稀釋倍計(jì)算每克樣品的菌數(shù)最合適。同一稀釋倍數(shù)的三個(gè)重復(fù)的菌落數(shù)不能。同一稀釋倍數(shù)的三個(gè)重復(fù)的菌落數(shù)不能相差懸殊，如相差較大，表示實(shí)驗(yàn)不精確相差懸殊，如相差較大，表示實(shí)驗(yàn)不精確。第25頁/共37頁第26頁/共37頁第27頁/共37頁 在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入入酚紅酚紅指示劑。培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果指示劑。培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果PHPH升高，指示劑將變紅，說明該細(xì)菌能升高，指示劑將變紅，說明該細(xì)菌能夠分解尿素。夠分解尿素。第28頁/共37頁第2

19、9頁/共37頁第30頁/共37頁六、例題解析六、例題解析 例例1 1對細(xì)菌群體生長規(guī)律測定的正確的表述是對細(xì)菌群體生長規(guī)律測定的正確的表述是 A A在液體培養(yǎng)基上進(jìn)行在液體培養(yǎng)基上進(jìn)行 B B至少接種一種細(xì)菌至少接種一種細(xì)菌 C C接種一個(gè)細(xì)菌接種一個(gè)細(xì)菌 DD及時(shí)補(bǔ)充消耗的營養(yǎng)物質(zhì)及時(shí)補(bǔ)充消耗的營養(yǎng)物質(zhì) 解析：細(xì)菌群體解析：細(xì)菌群體生長規(guī)律的測定生長規(guī)律的測定是人們在一定條件下進(jìn)行是人們在一定條件下進(jìn)行的。這些條件是：一的。這些條件是：一種細(xì)菌、恒定容積的培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基種細(xì)菌、恒定容積的培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基、定時(shí)測定細(xì)菌總數(shù)、定時(shí)測定細(xì)菌總數(shù)。在這些條件下，才能測定出細(xì)菌的生長。在這些條件

20、下，才能測定出細(xì)菌的生長規(guī)律。測定時(shí)只能用一種細(xì)菌的子細(xì)胞群體的變化規(guī)律表達(dá)微規(guī)律。測定時(shí)只能用一種細(xì)菌的子細(xì)胞群體的變化規(guī)律表達(dá)微生物的生長；恒定容積是給微生物提供一定的生存環(huán)境；液體生物的生長；恒定容積是給微生物提供一定的生存環(huán)境；液體培養(yǎng)基才能通過樣品推測細(xì)菌總數(shù)。若接種多種細(xì)菌，則會發(fā)培養(yǎng)基才能通過樣品推測細(xì)菌總數(shù)。若接種多種細(xì)菌，則會發(fā)生種間斗爭而不能測定一種微生物的生長規(guī)律。在接種時(shí)，要生種間斗爭而不能測定一種微生物的生長規(guī)律。在接種時(shí)，要保證一定的接種量。保證一定的接種量。答案：答案：A A第31頁/共37頁例例2 2在微生物群體生長規(guī)律的測定中，種內(nèi)在微生物群體生長規(guī)律的測定中

21、，種內(nèi)斗爭最顯著最激烈的時(shí)期是斗爭最顯著最激烈的時(shí)期是A A調(diào)整期調(diào)整期 B B對數(shù)期對數(shù)期 C C穩(wěn)定期穩(wěn)定期 D D衰亡期衰亡期解析：種內(nèi)斗爭是一種生態(tài)因素。種內(nèi)斗爭反應(yīng)了種內(nèi)生物解析：種內(nèi)斗爭是一種生態(tài)因素。種內(nèi)斗爭反應(yīng)了種內(nèi)生物對生存空間和生活資源的爭奪。在生活空間充裕，營養(yǎng)充足的時(shí)對生存空間和生活資源的爭奪。在生活空間充裕，營養(yǎng)充足的時(shí)候，種內(nèi)斗爭的程度是比較低的。隨著微生物個(gè)體數(shù)目的增加，候，種內(nèi)斗爭的程度是比較低的。隨著微生物個(gè)體數(shù)目的增加，每個(gè)個(gè)體的生存空間越來越少，營養(yǎng)物質(zhì)也越來越少，每個(gè)個(gè)體每個(gè)個(gè)體的生存空間越來越少，營養(yǎng)物質(zhì)也越來越少，每個(gè)個(gè)體對生存空間和資源的爭奪也越來

22、越激烈，種內(nèi)斗爭就越來越激烈對生存空間和資源的爭奪也越來越激烈，種內(nèi)斗爭就越來越激烈。由此可知，在。由此可知，在穩(wěn)定期穩(wěn)定期的種內(nèi)斗爭最激烈。在衰亡期，微生物的的種內(nèi)斗爭最激烈。在衰亡期，微生物的數(shù)目已經(jīng)開始減少，數(shù)目已經(jīng)開始減少，pHpH已經(jīng)極度不適于微生物的生存，次級代謝已經(jīng)極度不適于微生物的生存，次級代謝產(chǎn)物積累到很高的程度，這時(shí)的微生物的生存斗爭主要是與無機(jī)產(chǎn)物積累到很高的程度，這時(shí)的微生物的生存斗爭主要是與無機(jī)環(huán)境的斗爭。環(huán)境的斗爭。答案：答案：C C第32頁/共37頁1.1.對細(xì)菌群體生長規(guī)律測定的正確的表述是（對細(xì)菌群體生長規(guī)律測定的正確的表述是（ ） A.A.在液體培養(yǎng)基上進(jìn)行

23、在液體培養(yǎng)基上進(jìn)行 B.B.至少接種一種細(xì)菌至少接種一種細(xì)菌 C.C.接種一個(gè)細(xì)菌接種一個(gè)細(xì)菌 D.D.及時(shí)補(bǔ)充消耗的營養(yǎng)物質(zhì)及時(shí)補(bǔ)充消耗的營養(yǎng)物質(zhì) 2.2.使用選擇培養(yǎng)基的目的是（使用選擇培養(yǎng)基的目的是（ ） A.A.培養(yǎng)細(xì)菌培養(yǎng)細(xì)菌 B.B.培養(yǎng)真菌培養(yǎng)真菌 C.C.使需要的微生物大量繁殖使需要的微生物大量繁殖 D.D.表現(xiàn)某微生物的特定性狀與其他微生物加以區(qū)別表現(xiàn)某微生物的特定性狀與其他微生物加以區(qū)別3.3.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分別是能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分別是( ( ) ) A.CO A.CO2 2和和N N2 2 B. B.葡萄糖和葡萄糖和NHNH3 3 C.COC.CO2 2和尿素和尿素 D.D.葡萄糖和尿素葡萄糖和尿素A AC CD D第33頁/共37頁4.4.下列說法不正確的是（下列說法不正確的是（ ） A.A.科學(xué)家從科學(xué)家從70708080度熱泉中分離到耐高溫的度熱泉中分離到耐高溫的TaqDNATaqDNA聚聚合酶合酶 B.B.統(tǒng)計(jì)某一稀釋度的統(tǒng)計(jì)某一稀釋度的5 5個(gè)平板的菌落數(shù)依次為個(gè)平板的菌落數(shù)依次為M1M1、M2M2、M3M3、M4M4、M5M5，以，以M3M3作為該樣品菌落數(shù)的估計(jì)值作為該樣品