第一節(jié)酶的制備及活力測定

1、第一節(jié)酶的制備及活力測定第一節(jié)酶的制備及活力測定【課標要求】研究酶的存在和簡單制作方法，嘗試利用酶活力測定的一般原理和方法?！局R梳理】背景知識1、酶在活細胞內合成，在細胞內起催化作用，稱為。1 、生物細胞產(chǎn)生的酶2 、由細胞內產(chǎn)生然后分泌到細胞外發(fā)揮作用，稱為。1、提取胞內酶，需要破碎，可用破碎儀、研磨器或勻漿機2、提取酶的方法使酶從中釋放出來，進入細胞外的溶液中，經(jīng)過濾、離心制備成。2、提取胞外酶，可直接從中提取。在酶的提取過程中，、等多種環(huán)境條件都可能影響酶的空間結構導致酶變性直至喪失活力。因而，提取出的酶首先需要檢測酶的。（1）定義：通常以單位時間內或者單位時間內3、酶的活力（2）測定

2、方法：和實踐案例：植物淀粉酶的制備及活力測定材料器具：略活動程序：1 、提取酶液2、滴加酶液：取4支試管編號后均加入PH=5.6的緩沖溶液。向1、2試管中各加入未煮過的1ml向3、4試管中各加入已煮過的1ml3 、恒溫處理：為什么要進行恒溫處理？答：保證酶在溫度下充分發(fā)生反應。4 、鈍化處理：鈍化處理的原因？答：使酶的活性，從而使反應減慢或停止。5 、測定吸光值：用分光光度計在波長處進行比色。6 、繪制標準曲線7 、結果分析：（1）從標準曲線中查出。（2）計算淀粉酶的活力。探究活動：1、制備過氧化氫酶粗酶液以新鮮、為材料經(jīng)過粉碎、研磨、離心，取即可得到過氧化氫酶粗酶液。2 、用分光光度法測定過

3、氧化氫酶的活力在過氧化氫酶存在時，過氧化氫將愈創(chuàng)木酚氧化生成色產(chǎn)物，這種產(chǎn)物在波長470nm處有最大吸收峰，通過測定可以計算出過氧化氫酶的活力。3 、用高錳酸鉀滴定法測定過氧化氫酶的活力如果在反應系統(tǒng)中加入的過氧化氫溶液，經(jīng)酶促反應后，在酸性條件下，用高錳酸鉀溶液滴定的H2O2然后根據(jù)消耗的H2O2量計算出過氧化氫酶的活力。高錳酸鉀滴定時：當出現(xiàn)色并不再消退時標志著滴定達到終點?！緩土曋敢?、學法指導：本節(jié)課應初步學會酶的制備及活力測定。學會使用滴定法的具體操作，并運用所學知識和方法去進行酶的活力的測定。本節(jié)課的酶的相關知識和酶的活力測定技術的知識應引起重視，在高考選擇題和實驗題中都有可能體

4、現(xiàn)。2、疑難解析：在溫度、pH影響酶活性的實驗中，始終都貫穿著對照原則，而在設置對照實驗時最重要的是運用單一變量原則，其中的變量就是我們所研究的對象，所以在分析實驗問題時，要緊緊抓住研究變量，把其他可能影響實驗結果的變量變?yōu)槌Ａ?，才能保證對照實驗結果的嚴密性和準確性。對于溫度對酶活性影響的關系曲線，在低于最適溫度時，活性受溫度影響比高于最適溫度時的小?！镜漕}解析】在生物體內，各種化學反應之所以能有條不紊地進行，是因為（）A.酶的催化效率具有高效性B.酶的種類具有多樣性酶的催化作用具有專一性D.酶的空間結構具有穩(wěn)定性解析生物體內同時進行很多化學反應，這些化學反應是互不干涉的，因為催化各種化學反應

5、的酶不同，對一種酶來講，只能催化一種或一類化學反應，即酶的專一性特點保證了各種化學反應互不干涉。答案C2.下列關于酶的敘述錯誤的是（）A.有些酶是核酸B.酶的數(shù)量因與化學反應而減少酶的活性與pH有關D.酶的催化效率很高解析本題考查了酶的性質，酶是活細胞產(chǎn)生的一類具有催化作用的有機物，絕大多數(shù)的酶是蛋白質少數(shù)酶是RNA酶既具有無機催化劑的特點，又有本身的特點，高效性和專一性，并且需要適宜的條件。答案B【聚焦高考】（2005年全國高考題）將小麥種子分別置于和培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4天，依次取等量的萌發(fā)種子分別制成提取液I和提取液。取3支試管甲、乙、丙，分別加入等量的淀粉液，然后按下圖加入等量的提取液和蒸餾水，450C水浴保溫5分鐘，立即在3支試管中加人等量斐林試劑并煮沸2分鐘，搖勻觀察試管中的顏色。結果是（D）A、甲呈藍色，乙呈磚紅色，丙呈無色B、甲呈無色，乙呈磚紅色，丙呈藍色C、甲、乙皆呈藍色，丙呈磚紅色D、甲呈淺磚紅色，乙呈磚紅色，丙呈藍色2.（上海高考題）右圖為某酶在不同溫度下反應曲線和時間的關系，從圖中不能獲得的信息是（D）A、酶反應的最適溫度B、酶因熱而失活生成物時間</v:grou、酶反應生成物量與時間的關系D、酶反應速度和酶量的關系第一節(jié)酶的制備及活力測定【知識梳理】胞內酶、胞外酶、生物組織細胞、粗酶液、動物分泌物或細胞外的組織間隙、溫度、PH活力、底物的消耗量