無菌方法驗證試驗模板

1、藥品無菌檢查方法驗證試驗記錄 共 頁 第 頁檢品名稱 褥瘡膏規(guī)格 8g/瓶批號20130402收檢日期 2013年5月12日檢品數(shù)量 50瓶包裝 塑料瓶生產(chǎn)單位 供樣單位 檢驗依據(jù) 中國藥典2010年版一部報告日期 年 月 日實驗儀器： 儀器 編號儀器 編號高壓蒸汽滅菌器YXQ-LS-50SII S14LAH-250A型生化培養(yǎng)箱 S24HZY-III型智能集菌儀 S20HH-B11-600電熱恒溫培養(yǎng)箱 S23全封閉集菌培養(yǎng)器（杭州高得醫(yī)療器械有限公司，批號：20090309）菌液制備：10倍稀釋法菌種代數(shù)接種至菌懸液制備大腸埃希菌CMCC(B)441023營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基用0.9%無菌氯化鈉

2、溶液制成每1ml含菌小于100cfu(菌落形成單位)的菌懸液金黃色葡萄球菌CMCC(B)260033營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基枯草芽孢桿菌CMCC(B)653013營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基銅綠假單胞菌CMCC(B)101043營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基生孢梭菌CMCC(B)649413硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基白色念珠菌CMCC(F)980013改良馬丁液體培養(yǎng)基黑曲霉菌CMCC(F)980033改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基加入0.9%無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫，再同上制成每1ml含菌小于100cfu的菌懸液活菌預實驗-活菌計數(shù)菌 名大腸埃希菌金黃色葡萄球菌銅綠假單胞菌枯草芽孢桿菌生孢梭菌白色念珠菌黑曲霉代 數(shù)第三代第三代第三代第三代第三代第

3、三代第三代稀釋級12平均值4培養(yǎng)基靈敏度檢查取每管裝量為12ml 的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基9 支，分別接種小于100 cfu 的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌各2 支，另1支不接種作為空白對照，培養(yǎng)3 天； 取每管裝量為9ml 的改良馬丁培養(yǎng)基5 支,分別接種小于100 cfu 的白色念珠菌、黑曲霉各2 支，另1 支不接種作為空白對照，培養(yǎng)5 天。逐日觀察結果。結果見表表：培養(yǎng)基靈敏度檢查結果培養(yǎng)基菌種管數(shù)觀察結果1d2d3d4d5d硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基金黃色葡萄球菌12銅綠假單胞菌12枯草芽孢桿菌12生孢梭菌12空白組改良馬丁培養(yǎng)基白色念珠菌12黑曲霉12空白組“”表示無

4、菌生長。“+”表示生長良好結果判定：檢驗方法驗證薄膜過濾法：取供試品0.5g，加0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋至20ml，無菌濾紙濾過，然后再用0.9%無菌氯化鈉溶液20ml，沖洗殘渣，合并濾液，按照薄膜過濾法過濾， 0.9%無菌氯化鈉溶液沖洗3次，每次100ml，最后一次沖洗液中加入小于100cfu的試驗菌，分別加入相應硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基或改良馬丁培養(yǎng)基100ml，作為樣品驗證管。另取樣品驗證管用試驗菌加入至40ml0.9%無菌氯化鈉溶液中，無菌濾紙濾過，濾液按照薄膜過濾法過濾， 0.9%無菌氯化鈉溶液沖洗3次，每次100ml，最后加入同體積培養(yǎng)基，作為陽性對照管?？瞻捉M：取供試品按照樣品驗證

5、管制備方法，不加試驗菌，分別加入相應硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基或改良馬丁培養(yǎng)基100ml，作為樣品管，同時以同體積的培養(yǎng)基的培養(yǎng)器作為空白對照組。按規(guī)定溫度培養(yǎng)35天。各試驗菌同法操作。結果見表無菌檢查法驗證（薄膜過濾法）培養(yǎng)基名稱菌種樣品驗證管陽性對照管1d2d3d4d5d1d2d3d4d5d硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基大腸埃希菌金黃色葡萄球菌銅綠假單胞菌枯草芽孢桿菌生孢梭菌空白組改良馬丁培養(yǎng)基白色念珠菌黑曲霉空白組“+”表示有菌生長；“+”表示生長良好，“”表示無菌生長無菌檢查驗證結論：根據(jù)以上檢驗結果，經(jīng)方法學驗證試驗： 驗證結論 按照中國藥典（2005年版）無菌檢查法的方法驗證，供試品褥瘡康的無菌檢查法為：取本品規(guī)定量，每瓶取0.5g，分別加0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋至20ml，無菌濾紙濾過