巴比妥類藥物的分析-藥物分析

1、第1章巴比妥類藥物的分析1.1 藥物的基本結(jié)構(gòu)與特征1.1.1 巴比妥類藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)巴比妥類藥物為環(huán)狀酰月尿類鎮(zhèn)靜催眠藥，是巴比妥酸的衍生物，其基本結(jié)構(gòu)通式為:Rixz?-NVcC5、6iR=OR2CNOH二R3由于5位取代基巳和R2不同，形成不同巴比妥藥物，具有不同的理化性質(zhì)。臨床上常用的本類藥物多為巴比妥酸的5,5-二取代衍生物，少數(shù)為1,5,5-三取代物或C2位為硫取代的硫代巴比妥酸的5,5-二取代衍生物。中國(guó)藥典(2010年版)收載的本類藥物有苯巴比妥及其鈉鹽，異戊巴比妥及其鈉鹽，司可巴比妥鈉以及注射用硫噴妥鈉等。表1-1常見(jiàn)巴比妥類藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)藥物R1R2備注巴比妥(Barbi

2、tal)C2H5C2H5苯巴比妥(Phenobarbital)一C2H5C6H5異戊巴比妥(Amobarbital)一C2H5CH2CH2CH(CH3)2司可巴比妥鈉(Secobarbitalsodium)CH2CH=CH(CH3)2一CH(CH3)(CH2)2CH3硫噴妥鈉(ThiopentalSodium)一C2H5C2H5C2位S取代物的鈉鹽巴比妥類藥物的母核為巴比妥酸環(huán)狀丙二酰月尿結(jié)構(gòu)。此結(jié)構(gòu)是巴比妥類藥物的共同部分，決定巴比妥類藥物的特性，可用于與其他類藥物相區(qū)別。另一部分是取代基部分，即R1和R2。根據(jù)取代基不同，可以形成各種具體的巴比妥類的各種具體藥物，并具有不同的理化性質(zhì)。這些

3、理化性質(zhì)可用于各種巴比妥類藥物之間的相互區(qū)別。1.1.2 巴比妥類藥物的特征巴比妥類藥物一般為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，具有一定的熔點(diǎn)。在空氣中較穩(wěn)定，加熱多能升華。此類藥物一般微溶或極微溶于水，易溶于乙醇等有機(jī)溶劑；其鈉鹽則易浴于水，而難溶于有機(jī)溶劑。相對(duì)穩(wěn)定的六元環(huán)結(jié)構(gòu)，遇酸、氧化劑、還原劑時(shí)，一般不會(huì)破裂，但與堿液共沸時(shí)則水解開(kāi)環(huán)，并產(chǎn)生氨氣。巴比妥類藥物具體的理化性質(zhì)如下。1 .弱酸性巴比妥類藥物的母核環(huán)狀結(jié)構(gòu)中含有1,3-二酰亞胺基團(tuán)，能使其分子發(fā)生酮式-烯醇式互變異構(gòu)，在水溶液中發(fā)生二級(jí)電離。pKi=8pK2=12由于本類藥物為弱酸性物質(zhì)（pKa值為7.38.4）,故可與強(qiáng)堿反應(yīng)生成水

4、溶性的鹽類，一般為鈉鹽。由弱酸與強(qiáng)堿形成的巴比妥鈉鹽，其水溶液顯堿性，加酸酸化后，則析出結(jié)晶性的游離巴比妥類藥物，可用有機(jī)溶劑將其提取出來(lái)。上述這些性質(zhì)可用于巴比妥類藥物的分離、鑒別、檢查和含量測(cè)定。2 .水解反應(yīng)1）巴比妥類藥物的水解本類藥物的分子結(jié)構(gòu)中具有酰亞胺結(jié)構(gòu)，與堿溶液共沸即水解產(chǎn)生氨氣，可使紅色石蕊試紙變藍(lán)。5NaOH十2NH34+2Na2CO32）巴比妥類藥物鈉鹽的水解下，在室溫和pH10以下水解較慢;3.與重金屬離子的反應(yīng)本類藥物的鈉鹽，在吸濕的情況下也能水解。一般情況pH11以上隨著堿度的增加水解速度加快。巴比妥類藥物的母核為丙二酰月尿（CONHCONHCO-）或酰亞胺基團(tuán)，

5、在適宜的pH值溶液中，可與某些重金屬離子如Ag+、Cu2+、Co2+、Hg2+等反應(yīng)呈色或產(chǎn)生有色沉淀。雖然這類化學(xué)反應(yīng)的專屬性不強(qiáng)，但仍常用于本類藥物的鑒別和含量測(cè)定。1）與銅鹽的反應(yīng)巴比妥類藥物在口比咤溶液中生成的烯醇式異構(gòu)體與銅離子毗咤溶液反應(yīng)，形成穩(wěn)定的配位化合物，產(chǎn)生類似雙縮月尿的呈色反應(yīng)。水-口比咤CuSO4在此反應(yīng)中，巴比妥類藥物呈紫堇色或生成紫色沉淀，含硫巴比妥藥物呈綠色。在不同pH的溶液中，5,5-二取代基不同的巴比妥類藥物與銅鹽生成的紫色化合物，在氯仿中則溶解度不同。在pH較高的溶液中，5,5-取代基的親脂性越強(qiáng)，與銅鹽生成的紫色物質(zhì)越容易溶于氯仿中。此反應(yīng)可用于本類藥物的

6、鑒別，也可以用來(lái)區(qū)別巴比妥類和硫代巴比妥類藥物。2）與銀鹽的反應(yīng)巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有酰亞胺基團(tuán)，在碳酸鈉溶液中，生成鈉鹽而溶解，再與硝酸銀溶液反應(yīng)，首先生成可溶性的一銀鹽，加入過(guò)量的硝酸銀溶液，則生成難溶性的二銀鹽白色沉淀。此反應(yīng)可用于本類藥物的鑒別和含量測(cè)定。+NaNO3+NaHCO33）與鉆鹽的反應(yīng)巴比妥類藥物在堿性溶液中可與鉆鹽反應(yīng)，生成紫堇色配位化合物,可用于本類藥物的鑒別和含量測(cè)定。此反應(yīng)在無(wú)水條件下進(jìn)行，能使反應(yīng)較靈敏，而且生成的有色產(chǎn)物也較穩(wěn)定。因此所用試劑均應(yīng)不含水分。常用試劑為無(wú)水甲醇或乙醇；所用鉆鹽為醋酸鉆、硝酸鉆或氧化鉆；堿以有機(jī)堿為好，一般采用異丙胺。HOCoOO

7、O4CHOOMe2+2OHCHOMeR1R2NIHR1R2R1R22005)異戊巴比妥采用此反應(yīng)進(jìn)行鑒別香草醛(Vanillin)的反應(yīng)Co2+-H2OH5CHOCH3OCH3OCH3(CH3)2CHNH2CCH3(CH2)C2H5CH3(CH2)2CHNHCH(CH3)2NHCH(CH3)2HOINHOC2H5CH3(CH2)2CHHONON-NoNoHN0NIHN0NIHN0N.0OH5 .紫外吸收光譜特征巴比妥類藥物的紫外吸收光譜隨著電離級(jí)數(shù)不同，而發(fā)生顯著的變化。在酸性溶液中,5.5- 二取代和1,5,5-三取代巴比妥類藥物不電離，無(wú)明顯的紫外吸收峰。在pH10的堿性溶液中，發(fā)生一級(jí)電

8、離，形成共軻體系結(jié)構(gòu)，在240nm處出現(xiàn)最大吸收峰；在pH13的強(qiáng)堿性溶液中，5,5-二取代巴比妥藥物發(fā)生二級(jí)電離，引起共軻體系延長(zhǎng)，導(dǎo)致吸收峰紅移至255nm；1,5,5-三取代巴比妥類藥物，因1位取代基的存在，故不發(fā)生二級(jí)電離，最大吸收峰仍位于240nm。硫代巴比妥類藥物的紫外吸收光譜則不同，在酸性或堿性溶液中均有較明顯的紫外吸收。硫噴妥的紫外吸收光譜：在鹽酸溶液（0.1mol/L）中，兩個(gè)吸收峰分別在287nm和238nm;在氫氧化鈉溶液（0.1mol/L）中，兩個(gè)吸收峰分別移至304nm和255nm。另外，在pH13的強(qiáng)堿性溶液中，硫代巴比妥類藥物在255nm處的吸收峰消失，只存在30

9、4nm處的吸收峰。巴比妥類藥物在不同pH值溶液中的紫外吸收光譜發(fā)生的特征性變化，可用于本類藥物的鑒別、檢查和含量測(cè)定。6 .色譜行為特征巴比妥類藥物具有不同的分子結(jié)構(gòu)，其色譜行為亦不同，可用于鑒別，常用方法有薄層色譜法和高效液相色譜法。1）薄層色譜法取巴比妥類藥物約50dg點(diǎn)于硅膠GF254薄層板上，以氯仿-丙酮（4：1）混合液作流動(dòng)相。展開(kāi)后，薄層板用溫?zé)峥諝饬鬟M(jìn)行干燥，然后噴灑2%的氯化汞乙醇溶液，繼之再噴灑2%的l,5-二苯卡巴腺乙醇溶液。此時(shí)則在紫色的背景上觀察到巴比妥類藥物的白色斑點(diǎn)。常見(jiàn)的巴比妥類藥物的Rf值如下：巴比妥，Rf=0.59;苯巴比妥，Rf=0.59;硫噴妥，Rf=0.

10、92。2）高效液相色譜法取巴比妥類藥物的乙醇溶液（1mg/ml）2小注入ODS柱（250mmx4.6mm,填充5師的SpherisorbODS）中，用磷酸二氫鈉（0.1mol/L）用氫氧化鈉溶液（5mol/L）調(diào)節(jié)pH至8.5-甲醇（4：1）混合溶液作為流動(dòng)相，流速0.8ml/min，以UV檢測(cè)器于210nm波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè)，其保留行為應(yīng)與對(duì)照品一致。7 .顯微結(jié)晶巴比妥類藥物可根據(jù)其本身或與某種試劑的反應(yīng)產(chǎn)物的特殊晶型，進(jìn)行同類或不同類藥物的鑒別。此法亦適用于生物樣品中微量巴比妥藥物的檢驗(yàn)。1.2 鑒別試驗(yàn)巴比妥類藥物的結(jié)構(gòu)特征和具有的理化特性，如分子結(jié)構(gòu)中含有的酰亞胺基，硫元素與不同取代基等均

11、可用于本類藥物的鑒別實(shí)驗(yàn)。常用的鑒別實(shí)驗(yàn)方法有丙二酰月尿類鑒別實(shí)驗(yàn)，制備衍生物測(cè)定熔點(diǎn)，芳環(huán)反應(yīng)，不飽和鍵反應(yīng)，硫和鈉元素反應(yīng)等。另外，巴比妥類藥物光譜和色譜行為特征也可用于本類藥物的鑒別。1 .2.1丙二酰月尿類鑒別試驗(yàn)丙二酰月尿類反應(yīng)是巴比妥類藥物母核的反應(yīng)，因而是本類藥物共有的反應(yīng)，收載在藥典附錄中“一般鑒別試驗(yàn)”項(xiàng)下。丙二酰月尿類的鑒別反應(yīng)有銀鹽反應(yīng)和銅鹽反應(yīng)，其試驗(yàn)原理前已闡述，鑒別試驗(yàn)已用于苯巴比妥、異戊巴比妥及其鹽和司可巴比妥鈉的鑒別。2 .2.2熔點(diǎn)測(cè)定熔點(diǎn)是一種物質(zhì)在規(guī)定的測(cè)定方法下，由固態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)橐簯B(tài)的溫度。純物質(zhì)的熔點(diǎn)是一定的，可作為一項(xiàng)鑒別藥物的物理常數(shù)，常用于藥物的鑒別

12、；熔點(diǎn)也能反映藥物的純雜程度。巴比妥類藥物本身可直接用藥典方法測(cè)定熔點(diǎn)，其鈉鹽可利用它易溶于水，酸化后析出相應(yīng)的游離巴比妥母體，將沉淀過(guò)濾干燥后，測(cè)定熔點(diǎn)。也可以將本類藥物制備成衍生物后，再測(cè)定衍生物的熔點(diǎn)。利用熔點(diǎn)測(cè)定法可鑒別苯巴比妥及其鈉鹽、異戊巴比妥及其鈉鹽、司可巴比妥鈉及注射用硫噴妥鈉等。3 .2.3利用特殊取代基或元素的鑒別試驗(yàn)4 .利用不飽和取代基的鑒別試驗(yàn)具有不飽和取代基的巴比妥類藥物，中國(guó)藥典收載有司可巴比妥鈉。因其結(jié)構(gòu)中含有丙烯基，分子中的不飽和鍵可與碘、澳或高鎰酸鉀作用，發(fā)生加成或氧化反應(yīng)，而使碘、澳或高鎰酸鉀褪色。5min內(nèi)消失。1）與碘試液的反應(yīng)取供試品加水溶解后，加碘

13、試液所顯棕黃色應(yīng)在司可巴比妥與澳試液，也可發(fā)生加成反應(yīng)，使澳試液褪色。2）與高鎰酸鉀反應(yīng)含不飽和煌取代基的巴比妥類藥物，具有還原性，在堿性溶液中與高鎰酸鉀反應(yīng)，使紫色的高鎰酸鉀轉(zhuǎn)變?yōu)樽厣亩趸劇?4H2OHNaOyN、O0HOH3H/CH2N、+2MnO2+2KOHCH3CH55 .利用芳環(huán)取代基的鑒別試驗(yàn)1）硝化反應(yīng)含芳香取代基的巴比妥類藥物，與硝酸鉀及硫酸共熱，可發(fā)生硝化反應(yīng),生成黃色硝基化合物。Ho>n、oH3CHon、oHjCNH+2KNO3+H2SQQN一NH+K2SQ+2H2OONQ2）與硫酸-亞硝酸鈉的反應(yīng)苯巴比妥與硫酸一亞硝酸鈉反應(yīng)生成橙黃色產(chǎn)物，并隨即轉(zhuǎn)變?yōu)槌燃t色。

14、本反應(yīng)確切的原理不清，可能為苯環(huán)上的亞硝基化反應(yīng)。此鑒別試驗(yàn)為中國(guó)藥典收載的方法，可用于區(qū)別苯巴比妥和其它不含芳環(huán)取代基的巴比妥類藥物。3）與甲醛-硫酸的反應(yīng)苯巴比妥與甲醛-硫酸反應(yīng)，生成玫瑰紅色產(chǎn)物。此鑒別方法也為中國(guó)藥典收載，可用于區(qū)別苯巴比妥和其它巴比妥類藥物。6 .利用硫元素的鑒別試驗(yàn)硫代巴比妥類分子結(jié)構(gòu)中含有硫元素，如硫噴妥鈉，可將其硫元素轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)機(jī)硫離子，而顯硫化物的反應(yīng)。如硫噴妥鈉在氫氧化鈉試液中與鉛離子反應(yīng)，生成白色沉淀；加熱后，沉淀轉(zhuǎn)變?yōu)楹谏牧蚧U。此鑒別試驗(yàn)可用于硫代巴比妥類與巴比妥類藥物的區(qū)別。1.3 特殊雜質(zhì)檢查一苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查苯巴比妥的合成工藝為:HCONH

15、水偶，酯化QHOH,HSO-CHCOO&O=C縮吩O(shè)CH、OcHC2HaCOOCC=C-ONa酸化,梢除COOH5HCl(I)/COO&乙雌化CHCOOC5QHBrzCOOCtCCOOC5OH(II)由以上合成工藝過(guò)程可以看出，苯巴比妥中的特殊雜質(zhì)主要是合成中產(chǎn)生的中間體（I）和（n）以及副反應(yīng)產(chǎn)物，常通過(guò)檢查酸度、乙醇溶液的澄清度、有關(guān)物質(zhì)及中性或堿性物質(zhì)來(lái)加以控制（中國(guó)藥典2010版二部）。1.3.1 酸度酸度的檢查主要是控制副產(chǎn)物苯基丙二酰月尿。苯基丙二酰月尿是由于中間體（n）的乙基化反應(yīng)不完全，而與月尿素縮合生成的。因其分子中5位碳原子上的氫受相鄰兩竣基的影響，致使酸性

16、比苯巴比妥強(qiáng)，能使甲基橙指示劑顯紅色。檢查方法為：取本品0.2g,加水10ml,煮沸攪拌1min,放冷，濾過(guò)，取濾液5ml,加甲基橙指示劑1滴，不得顯紅色。1.3.2 乙醇溶液的澄清度本項(xiàng)檢查主要是控制苯巴比妥中乙醇不溶性雜質(zhì)，利用苯巴比妥酸這些雜質(zhì)在乙醇溶液中的溶解度比苯巴比妥小的特性進(jìn)行檢查。檢查方法為：取本品1.0g,加乙醇5ml,加熱回流3min,溶液應(yīng)澄清。1.3.3 有關(guān)物質(zhì)取本品，加流動(dòng)相溶解并稀釋成每ml中含1mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取1ml,置200ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。照高效液相色譜法（藥典附錄VD）試驗(yàn)，用辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑

17、。以乙睛-水（25:75）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm；理論塔板數(shù)按苯巴比妥峰計(jì)算不低于2500,苯巴比妥峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。取對(duì)照溶液5科注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的15%;精密量取供試品溶液與對(duì)照品溶液各5川分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的3倍，供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積（0.5%）,各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液主峰面積的2倍（1.0%）。1.3.4 中性或堿性物質(zhì)中性或堿性物質(zhì)是由中間體（I）形成的副產(chǎn)物2-苯基丁二酰胺、2-苯基丁二酰月尿或分解產(chǎn)物等雜質(zhì)，不溶于氫氧化鈉試

18、液但溶于乙醛；而苯巴比妥具有酸性，溶于氫氧化鈉試液，利用這些雜質(zhì)與苯巴比妥在氫氧化鈉試液和乙醛中的溶解度不同，采用萃取重量法測(cè)定雜質(zhì)含量。檢查方法為：取本品1.0g,置分液漏斗中，加氫氧化鈉試液10ml溶解后，加水5ml與乙醛25ml,振搖lmin,分取醛層，用水振搖洗滌3次，每次5ml,取醛液經(jīng)干燥濾紙濾過(guò)，濾液置105c恒重的蒸發(fā)皿中，蒸干，在105c干燥1h,遺留殘?jiān)坏贸^(guò)3mg。1.4 含量測(cè)定方法1.4.1 銀量法采用銀量法測(cè)定本類藥物及其制劑的含量，主要基于巴比妥類藥物在適當(dāng)?shù)膲A性溶液中，可與銀離子定量成鹽。如苯巴比妥及其鈉鹽、異戊巴比妥及其鈉鹽以及它們的制劑，中國(guó)藥典均采用銀量

19、法測(cè)定其含量。在滴定過(guò)程中，巴比妥類藥物首先形成可溶性一銀鹽，被測(cè)定的巴比妥類藥物完全形成一銀鹽后，稍過(guò)量的銀離子就和巴比妥類藥物形成難溶性的二銀鹽沉淀，使溶液變渾濁，以此指示滴定終點(diǎn)。本法雖然操作簡(jiǎn)便，專屬性強(qiáng)，巴比妥類藥物的分解產(chǎn)物或其他一些可能存在的雜質(zhì)不與硝酸銀反應(yīng)，但本法受溫度影響較大，而且是以溶液的出現(xiàn)渾濁指示滴定終點(diǎn)的到達(dá)難于觀察。為了克服滴定過(guò)程中溫度變化的影響和改善終點(diǎn)的觀察，歷版藥典對(duì)測(cè)定方法進(jìn)行了不斷修訂，本法首先用一定濃度丙酮作為溶劑，克服了溫度變化的影響，但未解決終點(diǎn)觀察問(wèn)題，結(jié)果不夠滿意。中國(guó)藥典（1985年版）進(jìn)行了修訂，改用甲醇作溶劑，并用銀-玻璃電極系統(tǒng)電位法

20、指示終點(diǎn)，使本法獲得明顯改進(jìn)，因此繼續(xù)為2010年版藥典沿用。具體測(cè)定方法如下：苯巴比妥及其鈉鹽的測(cè)定：取本品約0.2g,精密稱定，加甲醇40ml使溶解，再加新制的3%無(wú)水碳酸鈉溶液15m1,照電位滴定法，用硝酸銀滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml硝酸銀滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于23.22mg的C12H12N2O3。1.4.2 澳量法基于巴比妥類藥物在5位取代基含有雙鍵，其不飽和鍵可與澳定量地發(fā)生加成反應(yīng)，可采用澳量法測(cè)定其含量。中國(guó)藥典（2010版）收載的司可巴比妥鈉采用本法測(cè)定。其測(cè)定原理可用下列反應(yīng)式表示：司可巴比妥鈉的測(cè)定方法：取本品約0.1g,精密稱定，置250ml碘瓶中

21、，加水10m1,振搖使溶解，精密加澳滴定液（0.05mol/L）25m1,再加鹽酸5m1,立即密塞并振搖1min,在暗處?kù)o置15min后，注意微開(kāi)瓶塞，加碘化鉀試液10ml,立即密塞，搖勻后，用硫代硫酸納滴定液（0.1mol/L）滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml澳滴定液（0.05mol/L）相當(dāng)于13.01mg的Ci2H小2。3。1.4.3 酸堿滴定法巴比妥類藥物的母核結(jié)構(gòu)決定了該類藥物呈弱酸性，可作為一元酸直接被標(biāo)準(zhǔn)堿溶液滴定，或在非水溶液中用強(qiáng)堿溶液直接滴定。此法雖然未被中國(guó)藥典收載，但也可用于本類藥物的含量測(cè)定，常用的方法如下：1

22、.非水滴定法巴比妥類藥物在非水溶液中的酸性增強(qiáng)，用堿性滴定液滴定時(shí)，終點(diǎn)較為明顯，可得到比較滿意的結(jié)果。測(cè)定時(shí)常用的有機(jī)溶劑有二甲基甲酰胺、甲醇、氯仿、丙酮、無(wú)水乙醇、苯、口比%甲醇-苯（15：85）、乙醇-氯仿（1：10）等；常用的滴定液有甲醇鉀（鈉）的甲醇（或乙醇）溶液、氫氧化四丁基俊的氯苯溶液等；常用的指示劑為麝香草酚藍(lán)等，也可用玻璃甘汞電極電位法指示終點(diǎn)。2 .在水-乙醇混合溶劑中的滴定法本類藥物在水中的溶解度較小，故滴定時(shí)多在醇溶液或含水的醇溶液中進(jìn)行，這樣可避免反應(yīng)中產(chǎn)生的弱酸鹽易于水解而影響滴定終點(diǎn)。常以麝香草酚酬:為指示劑，滴定至談藍(lán)色為終點(diǎn)。測(cè)定方法：取本品約0.5g,精密稱

23、定，加乙醇20m1溶解后，加麝香草酚Mt指示劑6滴,用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1m1氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于22.63mg的C11H18N2O3。本法操作簡(jiǎn)便，但終點(diǎn)較難判斷，為了便于確定終點(diǎn)，可采用空白對(duì)照。由于操作過(guò)程中吸收二氧化碳會(huì)使終點(diǎn)的淡藍(lán)色較易褪去，采用空白對(duì)照也難以克服。因此可采用電位法指示終點(diǎn)。3 .在膠束水溶液中進(jìn)行的滴定法本法是在有機(jī)表面活性劑的膠束水溶液中進(jìn)行滴定，用指示劑或電位法指示終點(diǎn)。因表面活性劑能改變巴比妥藥物的離解平衡，使藥物的Ka增大，即使巴比妥藥物酸性增強(qiáng)，因此使滴定終點(diǎn)變化明顯。常用的有機(jī)表面活

24、性劑有：澳化十六烷基三甲基芳鏤（CTMA）和氯化四癸基二甲基芳鏤（TDBA）。采用本法測(cè)定測(cè)定巴比妥和苯巴比妥的結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）均小于0.3%,并優(yōu)于在水-乙醇混合溶液中的滴定法。1.4.4紫外分光光度法巴比妥類藥物因其在酸性介質(zhì)中幾乎不電離，紫外吸收不明顯。但在堿性介質(zhì)中電離為具有紫外吸收特征的結(jié)構(gòu)，故可采用紫外分光光度法測(cè)定其含量。本法靈敏度高，專屬性強(qiáng)，廣泛應(yīng)用于巴比妥類藥物的原料及其制劑的含量測(cè)定，以及固體制劑的溶出度和含量均勻度檢查，也常用于巴比妥藥物的體內(nèi)分析檢測(cè)。1 .直接紫外分光光度法本法是將樣品溶解后，根據(jù)溶液的pH值，在最大吸收波長(zhǎng)（Amax）處，直接測(cè)定對(duì)照品溶液和供試品溶液的吸收度，再計(jì)算藥物的含量。中國(guó)藥典2010版對(duì)注射用硫噴妥鈉的含量測(cè)定采用方法。2 .經(jīng)提取分離后的紫外分光光度法根據(jù)