中性粒細胞吞噬試驗

1、 實驗六實驗六 中性粒細胞的吞噬作用中性粒細胞的吞噬作用臨床微免教研室 實驗目的實驗目的 1.1.熟悉中性粒細胞的吞噬作用原理熟悉中性粒細胞的吞噬作用原理和方法。和方法。 2.2.通過本實驗理解機體的非特異性通過本實驗理解機體的非特異性免疫機制。免疫機制。 實驗原理實驗原理 血液中的中性粒細胞即小吞噬細胞，血液中的中性粒細胞即小吞噬細胞，通過趨化、調(diào)理、吞入和殺菌等幾個通過趨化、調(diào)理、吞入和殺菌等幾個步驟，能吞噬和消化衰老、死亡細胞步驟，能吞噬和消化衰老、死亡細胞及病原微生物等異物，是機體非特異及病原微生物等異物，是機體非特異性免疫的重要組成部分。性免疫的重要組成部分。 實驗材料實驗材料 1.

2、1.白色葡萄球菌白色葡萄球菌8h8h培養(yǎng)物培養(yǎng)物 2.2.抗凝人血（肝素抗凝管）、瑞氏抗凝人血（肝素抗凝管）、瑞氏染液、蒸餾水染液、蒸餾水 3.3.試管、玻片、采血針、酒精棉球、試管、玻片、采血針、酒精棉球、吸管、滴管、顯微鏡、香柏油吸管、滴管、顯微鏡、香柏油 試驗步驟試驗步驟1.1.白色葡萄球菌培養(yǎng)物的準備白色葡萄球菌培養(yǎng)物的準備2.2.采血（采血（2 2滴）滴）3.3.加菌液（用微量加樣器取準備好的加菌液（用微量加樣器取準備好的菌液菌液40ul40ul加入肝素抗凝血試管內(nèi)，加入肝素抗凝血試管內(nèi)，輕輕混勻）輕輕混勻）4.374.37溫育溫育30min30min5.5.推片推片6.6.瑞氏染色

3、瑞氏染色7.7.鏡檢鏡檢油鏡檢查：尋找中性粒細胞，如果染油鏡檢查：尋找中性粒細胞，如果染 色結果正確，可見色結果正確，可見細胞核細胞核 及被吞噬的細菌染成紫色及被吞噬的細菌染成紫色， 而而粒細胞的細胞漿則為淡紅色粒細胞的細胞漿則為淡紅色。 8.8.計數(shù)計數(shù) 吞噬百分率：觀察吞噬百分率：觀察200200個中性粒細個中性粒細胞，計算其中吞噬有細菌的中性粒胞，計算其中吞噬有細菌的中性粒細胞數(shù)，計算出吞噬細胞百分率。細胞數(shù)，計算出吞噬細胞百分率。 200200個中性粒細胞中吞噬細菌的細胞數(shù)數(shù)個中性粒細胞中吞噬細菌的細胞數(shù)數(shù)200X100%X100%參考值：參考值：61.4%-64.2%61.4%-64.2%8.8.計數(shù)計數(shù) 吞噬指數(shù)：觀察吞噬指數(shù)：觀察200200個中性粒細胞，個中性粒細胞，計算其中被吞噬的細菌總數(shù)，平均計算其中被吞噬的細菌總數(shù)，平均每個中性粒細胞吞噬的細菌數(shù)即為每個中性粒細胞吞噬的細菌數(shù)即為吞噬指數(shù)。吞噬指數(shù)。吞噬指數(shù)吞噬指數(shù)= =200200個中性