黃芩中黃芩苷類化合物的提取

1、黃芩中黃芩中黃芩苷類黃芩苷類化合物的提取、化合物的提取、分離與鑒定分離與鑒定2022-5-4黃黃芩芩苷苷（B Ba ai ic ca al li in n）O OO OO OO OH HO OH HO OH HO OH HH HO OC CO OO OH HO O漢漢黃黃芩芩苷苷（W Wo og go on no os si id de e）O OO OO OO OH HO OH HO OH HO OH HC CO OO OH HO OO OC CH H3 3O OO OH HO OH HO OH HO O黃黃芩芩素素（B Ba ai ic ca al le ei in n）O OO OH H

2、O OO OC CH H3 3H HO O漢漢黃黃芩芩素素（W Wo og go on ni in n）水解水解黃芩中黃酮類化合物的基本結(jié)構(gòu)黃芩中黃酮類化合物的基本結(jié)構(gòu)葡萄糖醛酸葡萄糖醛酸苷元苷元黃芩苷的相關(guān)特性黃芩苷的相關(guān)特性淡黃色淡黃色的針晶，因含有的針晶，因含有-OH-OH、-COOH-COOH而顯酸性，可溶于堿性而顯酸性，可溶于堿性試劑中。試劑中。理化性質(zhì)藥理價(jià)值抗氧化抗氧化-清除氧自由基及抗氧化作用清除氧自由基及抗氧化作用抗菌抗菌-對(duì)微生物的抑制作用對(duì)微生物的抑制作用抗抗HIV-HIV-對(duì)人類免疫病毒對(duì)人類免疫病毒HIVHIV的抑制的抑制免疫調(diào)節(jié)免疫調(diào)節(jié)-對(duì)免疫功能的調(diào)節(jié)作用對(duì)免疫功

3、能的調(diào)節(jié)作用張喜平，田華，程琪輝.黃芩苷的藥理作用研究現(xiàn)狀.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2003,19（11）：12121215提提取取流流程程黃芩粗粉（100g）濾液1濾渣投入8倍量的沸水中，煎煮20min,用脫脂棉過(guò)濾（第一次）投入6倍量沸水煎煮2次（第二次、第三次），每次20min,用脫脂棉過(guò)濾濾液2、3濾渣合并濾液1、2、3，滴加濃硫酸至pH 1-2,充分?jǐn)嚢?，加熱?0，保溫30min，濾過(guò)濾液沉淀原理：黃芩苷和苷元在熱水中的溶解度較大，在酸中不溶而析出。離心機(jī)的使用4 3000 34 3000 3轉(zhuǎn)子數(shù)轉(zhuǎn)子數(shù) 轉(zhuǎn)速轉(zhuǎn)速 時(shí)間時(shí)間原理：通過(guò)離心機(jī)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的強(qiáng)大原理：通過(guò)離心機(jī)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)

4、產(chǎn)生的強(qiáng)大離心力離心力，懸浮液與，懸浮液與懸浮顆粒之間因?yàn)橹亓Φ牟町?，而?dǎo)致不同的懸浮顆粒之間因?yàn)橹亓Φ牟町?，而?dǎo)致不同的沉降速度沉降速度。樣品要對(duì)稱放置樣品要對(duì)稱放置停止后才能打開(kāi)停止后才能打開(kāi)離心機(jī)使用注意樣品瓶外面無(wú)水樣品瓶外面無(wú)水打開(kāi)打開(kāi)交交叉叉對(duì)對(duì)稱稱第二次下進(jìn)下進(jìn)上出上出索式提取器索式提取器沉淀轉(zhuǎn)入錐形瓶中，加濃度95%的乙醇超聲洗滌2-3次，每次50 mL,離心乙醇液沉淀（主含黃芩苷）將其置于索式提取器中，加甲醇提取至液色極淡為止甲醇提取液結(jié)晶濃縮至10 mL，放置析晶，抽濾結(jié)晶結(jié)晶結(jié)晶法結(jié)晶法1.結(jié)晶法的操作結(jié)晶法的操作2.結(jié)晶溶劑的選擇結(jié)晶溶劑的選擇將需要結(jié)晶處理的固體物質(zhì)或

5、粗晶加熱溶解在一定量的溶劑中，制成過(guò)飽和溶液，趁熱過(guò)濾，除去不溶性雜質(zhì)，將濾液慢慢冷卻放置，析出結(jié)晶，過(guò)濾即得。結(jié)晶溶劑的選擇是關(guān)鍵。對(duì)結(jié)晶溶劑的要求：對(duì)欲純化成分加熱時(shí)溶解，冷卻時(shí)析出； 對(duì)雜質(zhì)則冷熱都不溶或都溶； 溶劑的沸點(diǎn)適中； 與欲結(jié)晶的成分不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)； 盡可能安全、價(jià)廉、易得等。常用結(jié)晶溶劑：水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷等等。第三次第三次結(jié)晶（黃芩苷）取結(jié)晶1g置圓底燒瓶中，加甲醇100 mL,加熱回流20 min，趁熱過(guò)濾甲醇溶液濃縮至10 mL，放置析晶，抽濾精制黃芩苷由于上節(jié)課得到的黃芩苷結(jié)晶太少，回流這一步就暫時(shí)不做。鑒鑒 定定1.1.顯色反應(yīng)顯色反應(yīng)鹽酸鎂粉

6、反應(yīng)：取樣品少許，加稀乙醇熱溶，加鎂粉少許，滴加濃鹽酸數(shù)滴，觀察溶液顏色的變化。 三氯化鐵反應(yīng)：取樣品少許，溶于水或乙醇中，加1%三氯化鐵醇溶液一滴，觀察溶液顏色的變化。Molish反應(yīng)：取樣品少許置于試管中，加0.5 ml 乙醇溶解，再加入1%-萘酚溶液數(shù)滴；然后沿管壁加入濃鹽酸約0.5ml，觀察兩溶液界面處顏色的變化。ABC上節(jié)課的黃芩苷結(jié)晶2.色譜鑒定（1 1）樣品的制備（黃芩苷的水解）：樣品的制備（黃芩苷的水解）： 精密稱取黃芩苷約0.5g，置干燥25ml錐形瓶中，加入濃硫酸3ml，用玻棒攪拌均勻，滴加蒸餾水約2ml使黃芩苷溶解，得透明橙紅色溶液。水浴加熱15min左右，放冷。將此溶液

7、在攪拌下傾入20ml冰水中，析出黃色沉淀，抽濾并用水洗滌至無(wú)酸性反應(yīng)，干燥。 水解所得黃色沉淀，用氯仿反復(fù)提取，合并氯仿溶液，濃縮回收氯仿至干，殘留物再用甲醇重結(jié)晶得黃色針晶，為黃芩素，供苷元的鑒定。(不做) 濾去苷元后的水溶液，加固體碳酸鋇使水溶液至中性，濾去碳酸鋇沉淀。濾液濃縮至23ml，供糖的鑒定。酚羥基的酚羥基的鑒別鑒別10 mL左右左右2 2個(gè)點(diǎn)個(gè)點(diǎn)樣品：水解所得糖的溶液。對(duì)照品：葡萄糖醛酸展開(kāi)劑：正丁醇-醋酸-水（4:1:5，上層）顯色劑：苯胺-鄰苯二甲酸試液于105烘10min，顯色。（2）糖的紙色譜鑒定黃芩苷的聚酰胺薄層色譜鑒定 樣品：自制黃芩苷的乙醇溶液 對(duì)照品：黃芩苷對(duì)照品的乙醇溶液 展開(kāi)劑：冰乙酸（610 mL） 顯色劑：2%的三氯