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1、血站血液檢測(cè)工程血站血液檢測(cè)工程及各檢測(cè)工程的意義及各檢測(cè)工程的意義 根據(jù)中華人民共和國(guó)國(guó)家規(guī)范根據(jù)中華人民共和國(guó)國(guó)家規(guī)范GB 18467-2019獻(xiàn)血者安康檢查要求,保證獻(xiàn)血者的獻(xiàn)血者安康檢查要求,保證獻(xiàn)血者的身體安康和受血者的輸血平安。對(duì)獻(xiàn)血者身體安康和受血者的輸血平安。對(duì)獻(xiàn)血者血液檢驗(yàn)要求做了規(guī)定,主要包括以下七血液檢驗(yàn)要求做了規(guī)定,主要包括以下七項(xiàng)內(nèi)容項(xiàng)內(nèi)容:血紅蛋白檢測(cè)血紅蛋白檢測(cè)血型檢測(cè)血型檢測(cè)ABO血型檢測(cè)和血型檢測(cè)和RhD血型檢血型檢測(cè)測(cè)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)ALT乙型肝炎病毒外表抗原檢測(cè)乙型肝炎病毒外表抗原檢測(cè)HBsAg丙型肝炎病毒抗體檢測(cè)丙型肝炎病毒抗體檢
2、測(cè)HCV抗體抗體艾滋病病毒抗體檢測(cè)艾滋病病毒抗體檢測(cè)HIV抗體抗體梅毒螺旋體抗體檢測(cè)梅毒螺旋體抗體檢測(cè)TP 下面就分別引見這七個(gè)檢測(cè)工程如下:下面就分別引見這七個(gè)檢測(cè)工程如下: 一、血紅蛋白檢測(cè):一、血紅蛋白檢測(cè): 方法:方法:1、硫酸銅法、硫酸銅法 2、血紅蛋白分析儀檢測(cè)法、血紅蛋白分析儀檢測(cè)法 規(guī)范:規(guī)范:1、硫酸銅法:、硫酸銅法: 男男1.0520 女女1.0500 2、血紅蛋白分析儀檢測(cè)法:、血紅蛋白分析儀檢測(cè)法: 男男120g/l 女女110g/l 意義:意義:1、保證獻(xiàn)血者安康的要求:、保證獻(xiàn)血者安康的要求: 經(jīng)過血紅蛋白的檢測(cè)可以反映獻(xiàn)血者的血經(jīng)過血紅蛋白的檢測(cè)可以反映獻(xiàn)血者的血
3、紅蛋白程度能否符合獻(xiàn)血要求,由于獻(xiàn)血紅蛋白程度能否符合獻(xiàn)血要求,由于獻(xiàn)血本身就是一個(gè)失血的過程,假設(shè)讓一個(gè)本本身就是一個(gè)失血的過程,假設(shè)讓一個(gè)本身就貧血的人去獻(xiàn)血的話,就會(huì)給獻(xiàn)血者身就貧血的人去獻(xiàn)血的話,就會(huì)給獻(xiàn)血者的身體呵斥更大的損害,所以說血紅蛋白的身體呵斥更大的損害,所以說血紅蛋白檢測(cè)是保證獻(xiàn)血者安康的要求。檢測(cè)是保證獻(xiàn)血者安康的要求。 2、保證血液質(zhì)量的要求:、保證血液質(zhì)量的要求: 這一點(diǎn)從何說起呢?這一點(diǎn)從何說起呢? 中有這樣一項(xiàng)規(guī)定:血中有這樣一項(xiàng)規(guī)定:血細(xì)胞比容壓實(shí)紅細(xì)胞占全血的百分比:細(xì)胞比容壓實(shí)紅細(xì)胞占全血的百分比: ACD方方0.30 CPD方方0.35 (125g/l相當(dāng)
4、于相當(dāng)于0.38) 采集的血液加上保養(yǎng)液,假設(shè)是貧血的話,血細(xì)采集的血液加上保養(yǎng)液,假設(shè)是貧血的話,血細(xì)胞比容很難到達(dá)上述要求,所以說血紅蛋白檢測(cè)胞比容很難到達(dá)上述要求,所以說血紅蛋白檢測(cè)是保證血液質(zhì)量的要求。是保證血液質(zhì)量的要求。 二、血型檢測(cè)二、血型檢測(cè)ABO血型檢測(cè)和血型檢測(cè)和RhD血型血型檢測(cè)檢測(cè) 方法:方法:1、試管法、試管法 2、玻片法紙板法、玻片法紙板法 3、微柱凝膠血型卡法臨床上用的、微柱凝膠血型卡法臨床上用的較多較多 規(guī)范:規(guī)范:ABO及及Rh血型相符血型相符 意義:正確鑒定血型,保證用血者同型輸意義:正確鑒定血型,保證用血者同型輸血,保證輸血平安。血,保證輸血平安。 三、丙
5、氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)三、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)ALT 方法:方法:1、酮體粉法僅限于初檢運(yùn)用、酮體粉法僅限于初檢運(yùn)用 2、賴氏法、賴氏法 3、速率法、速率法 規(guī)范:規(guī)范:1、酮體粉法:陰性、酮體粉法:陰性 2、賴氏法:、賴氏法:25單位單位 3、速率法:、速率法:40單位單位 意義:意義:1、肝膽疾病、肝膽疾病 傳染性肝炎、肝癌、中毒性傳染性肝炎、肝癌、中毒性肝炎、脂肪肝和膽管炎待等。肝炎、脂肪肝和膽管炎待等。 2、心血管疾病、心血管疾病 心肌梗死、心肌炎、心力心肌梗死、心肌炎、心力衰竭時(shí)肝淤血和腦出血等。衰竭時(shí)肝淤血和腦出血等。 3、藥物和毒物、藥物和毒物 氯丙嗪、異菸肼、奎寧、氯丙嗪、異菸肼、
6、奎寧、水楊酸制劑及乙醇,鉛、汞、四氯化碳或有機(jī)磷水楊酸制劑及乙醇,鉛、汞、四氯化碳或有機(jī)磷等。等。 4、創(chuàng)傷、運(yùn)動(dòng)、飲酒、疲勞等多種緣由。、創(chuàng)傷、運(yùn)動(dòng)、飲酒、疲勞等多種緣由。 5、在檢測(cè)過程中,血樣的運(yùn)輸、保管、溫、在檢測(cè)過程中,血樣的運(yùn)輸、保管、溫度等多種條件也可以引起度等多種條件也可以引起ALT的升高。的升高。 四、乙型肝炎病毒外表抗原檢測(cè)四、乙型肝炎病毒外表抗原檢測(cè)HBsAg 方法:方法:1、膠體金法初篩時(shí)運(yùn)用、膠體金法初篩時(shí)運(yùn)用 2、放射免疫法因有放射污染,已很少、放射免疫法因有放射污染,已很少用用 3、酶聯(lián)免疫法采供血單位運(yùn)用、酶聯(lián)免疫法采供血單位運(yùn)用 4、化學(xué)發(fā)光法臨床在用,本錢較
7、高、化學(xué)發(fā)光法臨床在用,本錢較高 規(guī)范:陰性規(guī)范:陰性 意義:意義:1、急性乙肝、急性乙肝 2、慢性乙肝、慢性乙肝 3、無病癥攜帶者、無病癥攜帶者 五、丙型肝炎病毒抗體檢測(cè)五、丙型肝炎病毒抗體檢測(cè)HCV抗體抗體 方法:方法:1、重組免疫印跡實(shí)驗(yàn)測(cè)定、重組免疫印跡實(shí)驗(yàn)測(cè)定HCV-IgG抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn)抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn) 2、ELISA法測(cè)定法測(cè)定HCV-IgG抗體抗體 規(guī)范:陰性規(guī)范:陰性 意義:丙型肝炎病毒意義:丙型肝炎病毒HCV是輸血后肝炎和分是輸血后肝炎和分發(fā)性非甲非乙型肝炎的主要病原。發(fā)性非甲非乙型肝炎的主要病原。HCV感染后,感染后,可導(dǎo)致慢性肝炎、肝硬化和肝細(xì)胞癌等多種肝臟可導(dǎo)致慢性肝炎、肝硬
8、化和肝細(xì)胞癌等多種肝臟疾病。疾病。 如今用的如今用的ELISA法測(cè)定法測(cè)定HCV-IgG抗體,主要用于抗體,主要用于獻(xiàn)血員的獻(xiàn)血員的HCV感染篩查和臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),抗感染篩查和臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),抗HCV檢測(cè)陽性提示感染過檢測(cè)陽性提示感染過HCV;對(duì)大部分病例而;對(duì)大部分病例而言,抗言,抗HCV陽性常伴有陽性常伴有HCV RNA的存在。因此,的存在。因此,抗抗HCV是判別是判別HCV感染的一個(gè)重要標(biāo)志。抗感染的一個(gè)重要標(biāo)志。抗HCV陽性而血清中沒有陽性而血清中沒有HCV RNA提示既往感染。有極提示既往感染。有極少數(shù)病例少數(shù)病例HCV陰性仍可檢測(cè)到陰性仍可檢測(cè)到HCV RNA。另外,。另外,某些慢
9、性某些慢性HCV感染者的抗感染者的抗HCV可繼續(xù)存在??衫^續(xù)存在。 六、艾滋病病毒抗體檢測(cè)六、艾滋病病毒抗體檢測(cè)HIV抗體抗體 方法:方法:1、乳膠顆粒凝集實(shí)驗(yàn)測(cè)定抗、乳膠顆粒凝集實(shí)驗(yàn)測(cè)定抗HIV抗抗體初篩時(shí)運(yùn)用體初篩時(shí)運(yùn)用 2、ELISA法測(cè)定抗法測(cè)定抗HIV抗體采供抗體采供血單位運(yùn)用血單位運(yùn)用 3、免疫印跡法測(cè)定抗、免疫印跡法測(cè)定抗HIV抗體確抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn)認(rèn)實(shí)驗(yàn) 規(guī)范:陰性規(guī)范:陰性 意義:抗意義:抗HIV抗體陽性提示如下抗體陽性提示如下 1、感染了、感染了HIV,可作為傳染源將,可作為傳染源將HIV傳播他人。傳播他人。 2、抗、抗HIV陽性者除外陽性者除外18個(gè)月的嬰兒,個(gè)月的嬰兒,5年
10、年之內(nèi)將有之內(nèi)將有10%30%的人開展為艾滋病。的人開展為艾滋病。 3、對(duì)抗、對(duì)抗HIV陽性的母親所生嬰兒,如陽性的母親所生嬰兒,如18個(gè)月個(gè)月內(nèi)檢測(cè)血清抗內(nèi)檢測(cè)血清抗HIV陽性,不能診斷為陽性,不能診斷為HIV感染,尚感染,尚需用需用HIV核酸檢測(cè)或核酸檢測(cè)或18個(gè)月后的血清抗體檢測(cè)來個(gè)月后的血清抗體檢測(cè)來判別。判別。 七、梅毒螺旋體抗體檢測(cè)七、梅毒螺旋體抗體檢測(cè)TP 方法:方法:1、甲苯胺紅不加熱血清實(shí)驗(yàn)、甲苯胺紅不加熱血清實(shí)驗(yàn)TRUST 2、ELISA法測(cè)定抗梅毒螺旋體法測(cè)定抗梅毒螺旋體TP抗抗體采供血單位運(yùn)用體采供血單位運(yùn)用 3、密螺旋體顆粒凝集實(shí)驗(yàn)、密螺旋體顆粒凝集實(shí)驗(yàn)TPPA測(cè)定測(cè)
11、定抗抗TP抗體抗體 4、金標(biāo)志免疫層析測(cè)定抗、金標(biāo)志免疫層析測(cè)定抗TP抗體初篩抗體初篩時(shí)運(yùn)用時(shí)運(yùn)用 規(guī)范:陰性規(guī)范:陰性 意義:意義:1、甲苯胺紅不加熱血清實(shí)驗(yàn)、甲苯胺紅不加熱血清實(shí)驗(yàn)TRUST,為非特異性實(shí)驗(yàn),陰性結(jié)果,為非特異性實(shí)驗(yàn),陰性結(jié)果不能排除梅毒感染,陽性結(jié)果需進(jìn)一步做不能排除梅毒感染,陽性結(jié)果需進(jìn)一步做抗梅毒螺旋體抗體實(shí)驗(yàn)確認(rèn)。抗梅毒螺旋體抗體實(shí)驗(yàn)確認(rèn)。 2、梅毒的血清學(xué)實(shí)驗(yàn)陽性,只提示所、梅毒的血清學(xué)實(shí)驗(yàn)陽性,只提示所測(cè)標(biāo)本中有抗類脂抗體或抗測(cè)標(biāo)本中有抗類脂抗體或抗TP抗體存在,抗體存在,不能作為患者感染梅毒螺旋體的絕對(duì)根據(jù),不能作為患者感染梅毒螺旋體的絕對(duì)根據(jù),陰性結(jié)果也不能
12、排除梅毒螺旋體感染,檢陰性結(jié)果也不能排除梅毒螺旋體感染,檢測(cè)結(jié)果應(yīng)結(jié)合臨床綜合分析。測(cè)結(jié)果應(yīng)結(jié)合臨床綜合分析。引起引起ELISA實(shí)驗(yàn)假陽性或假陰性實(shí)驗(yàn)假陽性或假陰性結(jié)果的主要標(biāo)本要素:結(jié)果的主要標(biāo)本要素: 1、內(nèi)源性物質(zhì)、內(nèi)源性物質(zhì) 由于一些人體內(nèi)含有內(nèi)源性物質(zhì),可以不由于一些人體內(nèi)含有內(nèi)源性物質(zhì),可以不同程度地影響檢測(cè)結(jié)果。常見的內(nèi)源性物同程度地影響檢測(cè)結(jié)果。常見的內(nèi)源性物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原的本身抗體、高免疫球蛋白血、嗜靶抗原的本身抗體、高免疫球蛋白血、超氧化物歧化酶、交叉反響物質(zhì)和其它的超氧化物歧化酶、交叉反響物質(zhì)和其它的物質(zhì)等
13、。另外,標(biāo)本中脂質(zhì)過高、膽紅素、物質(zhì)等。另外,標(biāo)本中脂質(zhì)過高、膽紅素、血紅蛋白等,均對(duì)血紅蛋白等,均對(duì)ELISA檢測(cè)結(jié)果有干擾檢測(cè)結(jié)果有干擾作用。作用。 2、外源性物質(zhì)、外源性物質(zhì) 外源性物質(zhì)經(jīng)常是由于標(biāo)本采集、運(yùn)輸或外源性物質(zhì)經(jīng)常是由于標(biāo)本采集、運(yùn)輸或儲(chǔ)存不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、儲(chǔ)存不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、儲(chǔ)存不當(dāng)、凝集不全、抗凝劑等的影響。儲(chǔ)存不當(dāng)、凝集不全、抗凝劑等的影響。 (1)標(biāo)本溶血標(biāo)本溶血 各種緣由引起的標(biāo)本溶血,均各種緣由引起的標(biāo)本溶血,均會(huì)因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過會(huì)因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧氧化物酶活性的血
14、紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為標(biāo)志物的化物酶為標(biāo)志物的ELISA檢測(cè)中,會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)中,會(huì)導(dǎo)致非特性顯色,從而呵斥假陽性結(jié)果,因此,非特性顯色,從而呵斥假陽性結(jié)果,因此,在標(biāo)本采集、運(yùn)輸或儲(chǔ)存過程中要盡量防在標(biāo)本采集、運(yùn)輸或儲(chǔ)存過程中要盡量防止標(biāo)本溶血。止標(biāo)本溶血。 (2)細(xì)菌污染細(xì)菌污染 一此菌體中能夠含有內(nèi)源性過一此菌體中能夠含有內(nèi)源性過氧化物酶,能夠會(huì)干擾檢測(cè),因此,在標(biāo)氧化物酶,能夠會(huì)干擾檢測(cè),因此,在標(biāo)本采集、運(yùn)輸或儲(chǔ)存過程中要盡量防止標(biāo)本采集、運(yùn)輸或儲(chǔ)存過程中要盡量防止標(biāo)本被細(xì)菌污染。本被細(xì)菌污染。 (3)儲(chǔ)存不當(dāng)儲(chǔ)存不當(dāng) 在冰箱中儲(chǔ)存時(shí)間過長(zhǎng)的標(biāo)本,在冰箱中儲(chǔ)存時(shí)間過長(zhǎng)的標(biāo)本,血清中
15、的血清中的IgG可聚合成多聚體、可聚合成多聚體、AFP可構(gòu)成可構(gòu)成二聚體,在間接法二聚體,在間接法ELISA檢測(cè)中可導(dǎo)致本檢測(cè)中可導(dǎo)致本底過高,呵斥假陽性結(jié)果;標(biāo)本儲(chǔ)存時(shí)間底過高,呵斥假陽性結(jié)果;標(biāo)本儲(chǔ)存時(shí)間過長(zhǎng),有時(shí)抗原或抗體的免疫活性減弱,過長(zhǎng),有時(shí)抗原或抗體的免疫活性減弱,也可呵斥假陰性結(jié)果。為了防止上述干擾,也可呵斥假陰性結(jié)果。為了防止上述干擾,ELISA檢測(cè)的標(biāo)本最好為新穎采集,如不檢測(cè)的標(biāo)本最好為新穎采集,如不能立刻檢測(cè),能立刻檢測(cè),5天內(nèi)檢測(cè)的標(biāo)本需分別出血天內(nèi)檢測(cè)的標(biāo)本需分別出血清或血漿,于清或血漿,于4冰箱中儲(chǔ)存,冰箱中儲(chǔ)存,1周后檢測(cè)周后檢測(cè)的標(biāo)本要低溫冰凍儲(chǔ)存。的標(biāo)本要低
16、溫冰凍儲(chǔ)存。 (4)凝集不全凝集不全 標(biāo)本在采集后,需求一定時(shí)間標(biāo)本在采集后,需求一定時(shí)間的凝集,才可以分別出血清。在實(shí)踐任務(wù)的凝集,才可以分別出血清。在實(shí)踐任務(wù)中,為了爭(zhēng)取快速檢測(cè),常在標(biāo)本未完全中,為了爭(zhēng)取快速檢測(cè),常在標(biāo)本未完全凝集時(shí)開場(chǎng)分別,使血清中含有纖維蛋白凝集時(shí)開場(chǎng)分別,使血清中含有纖維蛋白原,在原,在ELISA檢測(cè)過程中構(gòu)成肉眼可見的檢測(cè)過程中構(gòu)成肉眼可見的纖維蛋白凝塊,呵斥假陽性結(jié)果,這類標(biāo)纖維蛋白凝塊,呵斥假陽性結(jié)果,這類標(biāo)本在完全凝集后復(fù)查時(shí)變?yōu)殛幮越Y(jié)果。為本在完全凝集后復(fù)查時(shí)變?yōu)殛幮越Y(jié)果。為了防止上述干擾,這類標(biāo)本要在完全凝集了防止上述干擾,這類標(biāo)本要在完全凝集后在進(jìn)展檢測(cè)或采集時(shí)參與促凝劑。后在進(jìn)展檢測(cè)或采集時(shí)參與促凝劑。 (5)抗凝劑抗凝劑 為了快速進(jìn)展檢測(cè),常在標(biāo)本采為了快速進(jìn)展檢測(cè),常在標(biāo)本采集時(shí)參與一些抗凝劑,得到血漿進(jìn)展檢測(cè)。集時(shí)參與一些抗凝劑,得到血漿進(jìn)展檢測(cè)。常用抗凝劑有肝素、常用抗凝劑有肝素、EDTA、枸櫞酸鈉等,、枸櫞酸鈉等,這些抗凝劑均會(huì)對(duì)這些抗凝劑均會(huì)對(duì)ELISA檢測(cè)存在一定的檢測(cè)存在一定的干擾。為了防止上述干擾,在進(jìn)展檢測(cè)時(shí)干擾。為了防止上
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