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1、高中生物單克隆抗體知識(shí)點(diǎn)高中生物單克隆抗體基礎(chǔ)知識(shí)點(diǎn)一、區(qū)別單克隆抗體和多克隆抗體多克隆抗體:抗原刺激機(jī)體,產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),由機(jī)體的漿細(xì)胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。當(dāng)病原體入侵人體,能夠刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生大量的多種抗體,那么這一堆抗體就是多克隆的。單克隆抗體(MAb):是針專一的抗原決定簇產(chǎn)生的抗體,單克隆技術(shù)又名雜交瘤技術(shù),起源于1975年,由G.KÖhler和Milstein創(chuàng)立。主要原理是利用產(chǎn)生抗體的B細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞雜交融合成雜交瘤細(xì)胞,生產(chǎn)抗體。此類抗體是專一的,或者說是同一種
2、蛋白質(zhì),因此是單克隆的。二、雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體的主要步驟(1)抗原制備;(2)免疫動(dòng)物;(3)免疫脾細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的制備;(4)細(xì)胞融合;(5)雜交瘤細(xì)胞的選擇培養(yǎng);(6)雜交瘤細(xì)胞的篩選;(7)雜交瘤細(xì)胞的克隆化;(8)單克隆抗體的檢定;(9)分泌單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞系的建立;(10)單克隆抗體的大量制備。三、雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體的具體過程1、免疫動(dòng)物免疫動(dòng)物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠產(chǎn)生致敏B淋巴細(xì)胞的過程。一般選用6-8周齡雌性Balb/c小鼠,按照預(yù)先制定的免疫方案進(jìn)行免疫注射。抗原通過血液循環(huán)或淋巴循環(huán)進(jìn)入外周免疫器官,刺激相應(yīng)B淋巴細(xì)胞克隆,使其活化、增殖,并分化成為
3、致敏B淋巴細(xì)胞。2、細(xì)胞融合采用眼球摘除放血法處死小鼠,無菌操作取由脾臟,在平皿內(nèi)擠壓研磨,制備脾細(xì)胞懸液。將準(zhǔn)備好的同系骨髓瘤細(xì)胞與小鼠脾細(xì)胞按一定比例混合,并加入促融合劑聚乙二醇。在聚乙二醇作用下,各種淋巴細(xì)胞可與骨髓瘤細(xì)胞發(fā)生融合,形成雜交瘤細(xì)胞。3、選擇性培養(yǎng)選擇性培養(yǎng)的目的是篩選融合的雜交瘤細(xì)胞,一般采用HAT選擇性培養(yǎng)基。在HAT培養(yǎng)基中,未融合的骨髓瘤細(xì)胞因缺乏次黃喋吟-鳥喋吟-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,不能利用補(bǔ)救途徑合成DNAM死亡。未融合的淋巴細(xì)胞雖具有次黃喋吟-鳥喋吟-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,但其本身不能在體外長期存活也逐漸死亡。只有融合的雜交瘤細(xì)胞由于從脾細(xì)胞獲得了次黃喋吟鳥喋吟磷酸核糖
4、轉(zhuǎn)移酶,并具有骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖的特性,因此能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖。高中生物易錯(cuò)知識(shí)點(diǎn)使能量持續(xù)高效的流向?qū)θ祟愖钣幸饬x的部分 能量在2個(gè)營養(yǎng)級(jí)上傳遞效率在10獷20% 單向流動(dòng)逐級(jí)遞減 真菌PH5.06.0名田菌PH6.57.5放線菌PH7.58.5 物質(zhì)作為能量的載體使能量沿食物鏈?zhǔn)澄锞W(wǎng)流動(dòng) 物質(zhì)可以循環(huán),能量不可以循環(huán) 河流受污染后,能夠通過物理沉降化學(xué)分解微生物分解,很快消除污染 生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu):生態(tài)系統(tǒng)的成分+食物鏈?zhǔn)澄锞W(wǎng) 淋巴因子的成分是糖蛋白、病毒衣殼的是16多肽分子個(gè)、原核細(xì)胞的細(xì)胞壁:肽聚糖 過敏:抗體吸附在皮膚,黏膜,血液中的莫些細(xì)胞表面,再次進(jìn)入人體后使細(xì)胞釋放組
5、織胺等物質(zhì). 生產(chǎn)者所固定的太陽能總量為流入該食物鏈的總能量 效應(yīng)B細(xì)胞沒有識(shí)別功能萌發(fā)時(shí)吸水多少看蛋白質(zhì)多少、大豆油根瘤菌不用氮肥、脫氨基主要在肝臟但也可以在其他細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行 水腫:組織液濃度高于血液 尿素是有機(jī)物,氨基酸完全氧化分解時(shí)產(chǎn)生有機(jī)物 是否需要轉(zhuǎn)氨基是看身體需不需要 藍(lán)藻:原核生物,無質(zhì)粒、醉母菌:真核生物,有質(zhì)粒、高爾基體合成纖維素等 生物導(dǎo)彈是單克隆抗體是蛋白質(zhì) 淋巴因子:白細(xì)胞介素 原腸胚的形成與囊胚的分裂和分化有關(guān) 受精卵(未分裂)一一卵裂一一囊胚(以分裂)一一原腸胚 高度分化的細(xì)胞一般不增殖。例如:腎細(xì)胞;有分裂能力并不斷增的:干細(xì)胞、形成層細(xì)胞、生發(fā)層;無分裂能力的:紅
6、細(xì)胞、篩管細(xì)胞(無細(xì)胞核)、神經(jīng)細(xì)胞、骨細(xì)胞高中生物學(xué)習(xí)方法預(yù)習(xí)預(yù)習(xí)是在老師講課前,先瀏覽一遍講課內(nèi)容,在瀏覽時(shí),應(yīng)用筆將自己認(rèn)為是重點(diǎn)的內(nèi)容劃由來,將自己看不懂的內(nèi)容標(biāo)由來,將瀏覽后產(chǎn)生的問題記下來,有能力、有條件的還可以自己做由預(yù)習(xí)筆記。通過這樣的預(yù)習(xí),為下一步聽講奠定基礎(chǔ),使自己的聽講更加有的放矢,聽講時(shí)就可以對(duì)自己已經(jīng)弄懂的或重點(diǎn)知識(shí)重新加深印象,并比較一下老師的理解與自己的理解有什么差距,如果自己理解得不深,則可以進(jìn)一步加深理解。對(duì)于自己預(yù)習(xí)時(shí)還不懂的問題,則是聽講的重要內(nèi)容,一定要當(dāng)堂弄清楚。對(duì)于在預(yù)習(xí)中產(chǎn)生的問題,如果老師講到了,則要聽懂,如果老師沒有講到,一定要向老師問清楚。預(yù)
7、習(xí)也為將來的自學(xué)能力打下了良好的基礎(chǔ).聽講很多優(yōu)秀學(xué)生的經(jīng)驗(yàn)都說明了一個(gè)共同點(diǎn),即學(xué)生的主要功夫應(yīng)下在課堂上。我們的學(xué)習(xí)過程,實(shí)際上是解決一種矛盾,即已知與未知的矛盾,通過學(xué)習(xí)把未知轉(zhuǎn)化為已知,然后又有新的未知的由現(xiàn),我們?cè)賮硗瓿蛇@個(gè)轉(zhuǎn)化過程。而由未知轉(zhuǎn)化為已知的過程是在課堂上,在老師的指導(dǎo)下完成的,因此應(yīng)該是很順利的。有很多學(xué)生就是課上認(rèn)真聽講,在45分鐘的時(shí)間里完成學(xué)習(xí)任務(wù)。但是,總有些人,課堂上不認(rèn)真完成由未知向已知的轉(zhuǎn)化,白白浪費(fèi)掉45分鐘,反而在課下再花時(shí)間去完成轉(zhuǎn)化,此時(shí)已沒有老師的指導(dǎo),只有課本上的內(nèi)容,顯然是不會(huì)有好效果的。如此花雙倍或更多的時(shí)間,去完成效果不好的學(xué)習(xí)任務(wù),就是
8、常說的事倍功半。只要我們把主要功夫下在課上,那么,課下的負(fù)擔(dān)也就會(huì)減輕,而且學(xué)習(xí)效果也會(huì)提高,時(shí)間上也會(huì)更加充裕,這就是常說的事半功倍。所以,聽講這一步驟是極為關(guān)鍵的o復(fù)習(xí)和作業(yè)每節(jié)課上,一般老師都要留一定量的作業(yè),這些作業(yè)的內(nèi)容多是講課的重點(diǎn)內(nèi)容,是應(yīng)該認(rèn)真對(duì)待的。作業(yè)的過程就是復(fù)習(xí)鞏固聽學(xué)知識(shí)的過程,但是,很多同學(xué)把作業(yè)僅僅當(dāng)成是一種任務(wù),甚至當(dāng)成是個(gè)負(fù)擔(dān)。因此,急急忙忙趕完作業(yè),就認(rèn)為當(dāng)天的任務(wù)完成了,殊不知,這種做法對(duì)學(xué)習(xí)的幫助是微小的。無論課上老師是否留有作業(yè),課下都應(yīng)該先進(jìn)行復(fù)習(xí),及時(shí)將當(dāng)天老師所講的知識(shí)復(fù)習(xí)一遍,這可以加強(qiáng)記憶,克服遺忘。心理學(xué)家對(duì)遺忘和記憶都進(jìn)行過實(shí)驗(yàn)和研究,德國的心理學(xué)家艾賓浩斯的實(shí)驗(yàn)研究成果中,提由了一個(gè)著名的“遺忘曲線”表明了遺忘發(fā)展的一條規(guī)律,即遺忘的進(jìn)程是先快后慢,先多后少。就是說,剛剛學(xué)習(xí)完知識(shí)后,遺忘很快就開始,而且一開始遺忘得較多,過一段時(shí)間間隔之后,遺忘的發(fā)展越來越慢,遺忘得也就慢了。根據(jù)這一遺忘規(guī)律,我們應(yīng)該進(jìn)行及時(shí)的復(fù)習(xí),不要等到遺忘得差不多時(shí),再進(jìn)行復(fù)習(xí),那樣,學(xué)習(xí)效果是不會(huì)好的。由于遺忘進(jìn)程是不均衡的,所以我們復(fù)習(xí)得越及時(shí)越好。每天的復(fù)習(xí)
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