強(qiáng)噪聲暴露所致耳蝸帶狀體突觸損失與修復(fù)

1、強(qiáng)噪聲暴露所致耳蝸帶狀體突觸損失強(qiáng)噪聲暴露所致耳蝸帶狀體突觸損失與修復(fù)與修復(fù)周丹丹、梁金子、德吉措姆、央吉、黃鄭麗實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康膗確定強(qiáng)噪聲暴露對耳蝸結(jié)構(gòu)和功能的影響;u探究強(qiáng)噪聲暴露對的耳蝸IHC-SGN之間帶狀體突觸結(jié)構(gòu)損傷的程度與聽覺功能建立的關(guān)系;實(shí)驗(yàn)對象實(shí)驗(yàn)對象u成年豚鼠,給予120dB SPL白噪聲暴露2h。u自由飲食進(jìn)水，飼養(yǎng)室恒溫（18-24）恒濕(55%)。u噪聲后1天，1天,1周，1個月測試聽覺功能，觀察與對照組之間的差別。u功能測試結(jié)束后，取耳蝸進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察。實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟u一、各組將實(shí)驗(yàn)動物豚鼠在噪聲下暴露一天，一周，一個月。u二、對照組進(jìn)行ABR測量。u三、各組

2、在噪聲暴露后對豚鼠進(jìn)行ABR/CAP的測量。u1.豚鼠腹腔注射巴比妥鈉麻醉。u2.在豚鼠的兩耳后及頭頂正中連上電極，打開音源。u3.測量豚鼠的ABR。u四、將老鼠處死。u五、取出老鼠兩耳蝸，進(jìn)行固定。u六、形態(tài)學(xué)觀察，對各組動物進(jìn)行ribbon計數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果u噪聲前后各組動物平均ABR閾值u 10002000 4000 8000 1600032000u 噪聲前 26.6727.6728.6729.6730.6731.67u噪聲后1天70.83656567.5 7572.5u噪聲后1周6061.4363.5760.7152.8670.71u噪聲后1月52.5 47.5 54.1751.4

3、74065.83實(shí)驗(yàn)分析實(shí)驗(yàn)分析u聽覺閾值的升高（閾移）是判斷聽覺損傷和制定噪聲安全標(biāo)準(zhǔn)的主要依據(jù)聽覺閾值不同程度的升高對應(yīng)聽覺相應(yīng)程度的損傷。本實(shí)驗(yàn)中由圖表一可知，噪聲后一天，一周，一個月豚鼠ABR閾值較噪聲前均有不同程度的增高，表示有不同程度損傷。噪聲后一天ABR閾值增高最為明顯，提示噪聲一天后豚鼠聽力損傷最為嚴(yán)重。噪聲后一周，一個月ABR閾值依次比噪聲后一天的ABR閾值低，說明噪聲后時間越久損傷的程度越輕。u噪聲前后各組ribbon計數(shù)結(jié)果 CtBP2染色u00.1KHz0.25KHz 0.5KHz1KHz2KHz4KHz8KHz16KHz24KHz32KHzu噪聲前14.35515.8

4、876839817.1965909116.2054545516.3083333315.42517.2944444418.9136363617.1077777816.89285714u噪聲后1天9.45946969710.1636363611.9034174212.7431818212.0593434313.089194147.7510.072727279.4277777789.761363636u噪聲后1周10.7266666710.4912.1212.4525 13.3525 10.0175 9.710.9566666710.8910.29u噪聲后4周10.6067340110.103030

5、313.5217171712.2153846213.6128205111.2918300710.066666679.6052631589.6848484859.751515152u平均數(shù)11.2869675911.6610876613.6854313813.4041302413.8332493212.4558810511.2027777812.3870733711.7776010111.67393398u不引起永久性聽覺閾移的低強(qiáng)度噪聲，在成年動物損傷耳蝸內(nèi)毛細(xì)胞和I型螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（SGN）之間的突觸（ribbon synapse）和SGN退行性死亡。u本實(shí)驗(yàn)中通過ribbon計數(shù)來表示損傷的恢復(fù)程度，兩者成正比關(guān)系。由圖表二可知，在相同頻率的噪聲下，噪聲后一天，一周，一個月的ribbon計數(shù)較噪聲前均有不同程度的下降，說明耳蝸帶狀體突觸均受到損傷。但一個月后的ribbon計數(shù)相比噪聲后一天、噪聲后一周的ribbon計數(shù)略有回升，說明隨著時間推移耳蝸帶狀體突