微生物的實驗室培養(yǎng)完成稿ppt課件

1、知識回想：知識回想： 果酒果酒- 果醋果醋- 腐乳腐乳- 泡菜泡菜-酵母菌酵母菌醋酸菌醋酸菌毛毛 霉霉乳酸菌乳酸菌微生物的實驗室培育微生物的實驗室培育病病 毒毒蘑蘑 菇菇一、根底知識：一、根底知識：一培育基一培育基 培育基是由人工方法配制而成的，培育基是由人工方法配制而成的，專供微生物生長繁衍運用的營養(yǎng)基質(zhì)。專供微生物生長繁衍運用的營養(yǎng)基質(zhì)。1 1按物理形狀：固體培育基和液體培育基按物理形狀：固體培育基和液體培育基2 2按功能來分：選擇培育基和鑒別培育基按功能來分：選擇培育基和鑒別培育基3 3按成分來分：天然培育基和合成培育基按成分來分：天然培育基和合成培育基1.1.培育基的分類培育基的分類瓊

2、瓊 脂脂 2、培育基的營養(yǎng)成分、培育基的營養(yǎng)成分1000mL牛肉膏蛋白胨培育基的營養(yǎng)構(gòu)成牛肉膏蛋白胨培育基的營養(yǎng)構(gòu)成培育基組分培育基組分提供的主要營養(yǎng)提供的主要營養(yǎng)牛肉膏牛肉膏5g蛋白胨蛋白胨10gNaCl5gH2O定容至定容至1000mL碳源、磷酸鹽和維生素碳源、磷酸鹽和維生素氮源和維生素氮源和維生素?zé)o機鹽無機鹽氫元素、氧元素氫元素、氧元素 (1) (1)水水 (2) (2)碳源碳源 (3) (3)氮源氮源 (4) (4)無機鹽無機鹽(1)pH(1)pH值值 如如: :培育霉菌需酸性、培育細菌需中性或培育霉菌需酸性、培育細菌需中性或 微堿性。微堿性。(2)(2)特殊營養(yǎng)物質(zhì)特殊營養(yǎng)物質(zhì)-生長

3、因子生長因子 如：培育乳酸桿菌需求在培育基中添加維如：培育乳酸桿菌需求在培育基中添加維 生素。生素。(3)(3)氧氣的含量氧氣的含量 如如: :培育厭氧微生物時需求提供無氧的條件培育厭氧微生物時需求提供無氧的條件3 3、培育基內(nèi)所需的其他條件、培育基內(nèi)所需的其他條件單個單個或少數(shù)菌體或少數(shù)菌體1.1.定義：定義：4 4、菌落、菌落鑒定菌種的重要根據(jù)鑒定菌種的重要根據(jù)固體培育基固體培育基子細胞群體子細胞群體(二二)無菌技術(shù)無菌技術(shù)1 1、獲得純真培育物的關(guān)鍵、獲得純真培育物的關(guān)鍵: : 2 2、無菌技術(shù)包括的四大方面：、無菌技術(shù)包括的四大方面：防止外來雜菌的入侵防止外來雜菌的入侵1 1對實驗操作

4、空間、操作者的穿著和手進對實驗操作空間、操作者的穿著和手進展清潔和消毒展清潔和消毒 ；2 2將培育器皿、接種器具和培育基等器具將培育器皿、接種器具和培育基等器具進展滅菌進展滅菌 ；3 3為防止周圍微生物污染，實驗操作應(yīng)在為防止周圍微生物污染，實驗操作應(yīng)在 酒精燈火焰附近旁進展；酒精燈火焰附近旁進展；4 4防止已滅菌處置的資料器具與周圍物品防止已滅菌處置的資料器具與周圍物品相接觸。相接觸。消毒定義：消毒定義：運用較為溫暖的物理或化學(xué)方法，僅運用較為溫暖的物理或化學(xué)方法，僅殺死物體外表或內(nèi)部的部分微生物的過程。殺死物體外表或內(nèi)部的部分微生物的過程。不包括芽孢和孢子。不包括芽孢和孢子。 2 2 滅菌

5、的定義：滅菌的定義： 運用劇烈的理化要素殺死物體內(nèi)外一運用劇烈的理化要素殺死物體內(nèi)外一切微生物，包括一切細菌的繁衍體、芽孢、切微生物，包括一切細菌的繁衍體、芽孢、霉菌及病毒，而到達完全無菌的過程。霉菌及病毒，而到達完全無菌的過程。消毒與滅菌消毒與滅菌1 1、煮沸消毒法：、煮沸消毒法：2 2、巴氏消毒法：、巴氏消毒法：3 3、化學(xué)藥劑消毒法：、化學(xué)藥劑消毒法：4 4、紫外線消毒、紫外線消毒 (1)(1)消毒的方法：消毒的方法：常用的消毒與滅菌的方法常用的消毒與滅菌的方法 100 100煮沸煮沸5-6min5-6min70-75 70-75 下煮下煮30min30min或或80 80 下煮下煮15

6、min15min用用75%75%酒精、新潔爾滅等進展皮膚消酒精、新潔爾滅等進展皮膚消毒毒; ;氯氣消毒水源。氯氣消毒水源。 紫外燈照射紫外燈照射1 1、灼燒滅菌、灼燒滅菌 接種環(huán)、接種針、接種環(huán)、接種針、 試管口試管口2 2、干熱滅菌、干熱滅菌160-170 160-170 下加熱下加熱1-2h1-2h玻璃器皿的滅菌玻璃器皿的滅菌3 3、高壓蒸氣滅菌、高壓蒸氣滅菌100kPa100kPa、121 121 下維持下維持15-30min15-30min培育基的滅菌培育基的滅菌滅菌的方法：滅菌的方法：耐高溫需堅持枯燥的耐高溫需堅持枯燥的 物品，物品，160170 12小時小時接種環(huán)、接種針等接種環(huán)、

7、接種針等 金屬器具金屬器具7075、30min 80、15min100、56min消毒消毒滅菌滅菌定義定義方法方法較為溫暖理化方法，較為溫暖理化方法，殺死部分有害菌體殺死部分有害菌體不包括芽孢、孢子不包括芽孢、孢子劇烈的理化方法，劇烈的理化方法，殺死一切微生物殺死一切微生物包括芽孢、孢子包括芽孢、孢子煮沸消毒法煮沸消毒法巴氏消毒法巴氏消毒法化學(xué)藥劑化學(xué)藥劑紫外線紫外線灼燒滅菌灼燒滅菌干熱滅菌干熱滅菌酒精、氯氣、石炭酸等酒精、氯氣、石炭酸等高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌培育基，培育基，100KPa、121、1530min消毒與滅菌的比較消毒與滅菌的比較二、實驗操作二、實驗操作一制備牛肉膏蛋白胨固體培育

8、基一制備牛肉膏蛋白胨固體培育基 計算稱量溶化滅菌倒平板計算稱量溶化滅菌倒平板二純化大腸桿菌二純化大腸桿菌 接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法三將接種后的培育基和一個未接種的培三將接種后的培育基和一個未接種的培育基放入育基放入3737恒溫箱中培育恒溫箱中培育12h12h和和24h24h后，后，察看并記錄。察看并記錄。1 1、以下有關(guān)培育基的表達正確的選項是、以下有關(guān)培育基的表達正確的選項是 ( ( ) ) A A培育基是為微生物的生長繁衍提供營養(yǎng)的基質(zhì)培育基是為微生物的生長繁衍提供營養(yǎng)的基質(zhì) B B培育基只需兩類：液體培育基和固體培育基培育基只需兩類：液體培

9、育基和固體培育基 C C固體培育基中參與少量水即可制成液體培育基固體培育基中參與少量水即可制成液體培育基 D D微生物在固體培育基上生長時，可以構(gòu)成肉眼微生物在固體培育基上生長時，可以構(gòu)成肉眼 可見的單個細菌可見的單個細菌 2 2、不同培育基的詳細配方不同，但普通都含有、不同培育基的詳細配方不同，但普通都含有( ( ) ) A A碳源、磷酸鹽和維生素碳源、磷酸鹽和維生素 B B氮源和維生素氮源和維生素 C C水、碳源、氮源和無機鹽水、碳源、氮源和無機鹽 D D碳元素、氧元素、氫元素、氮元素碳元素、氧元素、氫元素、氮元素 3 3以下常用的無菌操作中錯誤的選項是以下常用的無菌操作中錯誤的選項是 (

10、 ( ) ) A A用酒精擦拭雙手用酒精擦拭雙手 B B用氯氣消毒水源用氯氣消毒水源 C C實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進展實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進展 D D玻璃器皿玻璃器皿( (吸管、培育皿吸管、培育皿) )可用酒精擦拭可用酒精擦拭 4 4有關(guān)倒平板的操作錯誤的選項是有關(guān)倒平板的操作錯誤的選項是 ( ( ) ) A A將滅過菌的培育皿放在火焰旁的桌面上將滅過菌的培育皿放在火焰旁的桌面上 B B使翻開的錐形瓶瓶口迅速經(jīng)過火焰使翻開的錐形瓶瓶口迅速經(jīng)過火焰 C C將培育皿翻開，培育皿蓋倒放在桌子上將培育皿翻開，培育皿蓋倒放在桌子上 D D等待平板冷卻凝固后需求倒過來放置等待平板冷卻凝固后需求倒過來放置 思索思索1 1 溶化時為什么要將牛肉膏連同稱量紙溶化時為什么要將牛肉膏連同稱量紙一同加熱一同加熱? ? 加瓊脂的目的是什么加瓊脂的目的是什么? ? 可保證粘附在稱量紙上的牛肉膏可保證粘附在稱量紙上的牛肉膏也能溶于水中也能溶于水中, ,減少誤差減少誤差. .作為凝固劑作為凝固劑思索思索2 2 在滅菌前在滅菌前, , 用牛皮紙、舊報紙包緊盛有用牛皮紙、舊報紙包緊盛有培育基的錐形瓶的目的是什么？培育基的錐形瓶的目的是什么？ 培育皿能否用高壓蒸汽滅