醫(yī)學(xué)科研(2006-11)

1、醫(yī)學(xué)科研的基本程序與方法科學(xué)研究：提出問題和解決問題的過程當(dāng)今世界三大項(xiàng)目 宇宙的探索 基本粒子 生命的奧秘人類的發(fā)展、社會的進(jìn)步伴隨著科學(xué)的發(fā) 展進(jìn)步一、基本概念科學(xué)研究：提出問題和解決問題的過程如何提出問題1、觀察與思考美國麻省工學(xué)院致謝皮羅： 水流漩渦地球自轉(zhuǎn)1928弗萊明青霉素，英國斯特一、基本概念科學(xué)研究：提出問題和解決問題的過程如何提出問題2、繼承發(fā)展創(chuàng)新蘇聯(lián)巴甫洛夫?qū)嶒?yàn)室體液調(diào)節(jié)一、基本概念1、任務(wù)性研究2、學(xué)科性研究學(xué)科中存在的基本理論 一、基本概念1、提出問題 原則：從大處著眼 小處著手從臨床實(shí)際出發(fā)（做一個(gè)有心的人） 尚待改進(jìn)、需要更新、出現(xiàn)的新問題、新線索、 新啟示等從專

2、業(yè)知識出發(fā) 傳統(tǒng)理論受到挑戰(zhàn)的，文獻(xiàn)上沒有解決的，知識 的延伸與發(fā)展等二、基本程序（一）選題2、查閱文獻(xiàn)他人研究過沒有，結(jié)果是什么？應(yīng)對文中的思路方法數(shù)據(jù)及結(jié)論一一推敲，仔細(xì)分析建立工作假說：依據(jù)科學(xué)事實(shí)，已知理論知識作出推想，即確立自己的研究方向，然后主動地，有計(jì)劃地觀察和實(shí)驗(yàn)，并在科研實(shí)踐中不斷補(bǔ)充修正自己的假說二、基本程序（一）選題3、選題的基本要求目的明確、具體、有的放矢解決什么問題及問題的解決范圍二、基本程序（一）選題3、選題的基本要求根據(jù)已知理論建立科學(xué)假說例如：異丙酚有無鎮(zhèn)痛作用？驗(yàn)證，機(jī)理與NMDA、GABA關(guān)系等切實(shí)可行，人力、財(cái)力、物力等的保證二、基本程序（一）選題4、選題

3、的種類調(diào)查研究性質(zhì)的：流行病學(xué) 如麻醉后認(rèn)知功能障礙，麻醉中的知曉等實(shí)驗(yàn)研究性質(zhì)的 如藥物的臨床療效與對動物病理模型的作用資料分析性質(zhì)的：多屬回顧性的研究二、基本程序（一）選題Thomas “我要做的是讓我的愿望符合事實(shí)，而不是試圖讓事實(shí)與我的愿望調(diào)和。你們要像一個(gè)學(xué)生那樣坐在事實(shí)面前，準(zhǔn)備放棄一切先入之見，恭恭敬敬地照著大自然指的路走，否則，將一無所得。”二、基本程序（一）選題方法要有權(quán)威性，穩(wěn)定、重復(fù)性好不要盲目追求方法學(xué)的先進(jìn)性 高水平假說 + 高精尖手段=高水平 高水平假說 + 一般手段=高水平 低水平假說 + 高精尖手段= 一般水平 低水平假說 + 低水平手段=低水平二、基本程序（二

4、）選擇可行的科學(xué)的研究方法在文獻(xiàn)檢索、假說建立、選擇可行手段的基礎(chǔ)上，經(jīng)過嚴(yán)謹(jǐn)?shù)臉?gòu)思可確立具體的科研題目，題目應(yīng)包括受試對象與效果反應(yīng)兩部分 例如：異丙酚抗傷害作用與NMDA受體的關(guān)系（NMDA受體激動劑、拮抗劑對異丙酚抗傷害作 用的影響） 二、基本程序（三）立題題目命的越具體，說明研究者的思維越清楚一個(gè)題目最好解決一、兩個(gè)問題，不要貪大求全，不要言過其實(shí)二、基本程序（三）立題1、受試因素受試因素：多是外加因素，例如：藥物、手術(shù)方法、醫(yī)療技術(shù)、致病因素等。性別、年齡也可作為受試因素受試因素的數(shù)目及水平：觀察某一藥物的影響叫單因素設(shè)計(jì)多個(gè)藥物的影響叫多因素設(shè)計(jì)三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（一）基本要素1、受試因

5、素一個(gè)藥物不同劑量叫水平，單因素單水平比較少用多因素間的“相互作用”應(yīng)設(shè) 甲藥組、乙藥組、甲乙藥組及對照組因素的標(biāo)準(zhǔn)化：化學(xué)合成藥：同一廠家，同一批號；中草藥：種屬、產(chǎn)地、采收季節(jié)、加工炮制三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（一）基本要素2、受試對象整體：人、動物、微生物離體：組織器官、細(xì)胞、血液、大小便等人 ：年齡、性別、病種、病情、病程以及有無夾雜癥等動物：種屬、品系、年齡、體重、性別、營養(yǎng)狀況等受試對象應(yīng)對受試因素敏感 例如：腦缺血沙土鼠；組胺豚鼠；垂體-腎上腺皮質(zhì)大白鼠；嘔吐貓整體和離體的結(jié)合三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（一）基本要素2、受試對象 標(biāo)準(zhǔn)化：動物（同一品系）；病例（標(biāo)準(zhǔn)化） 例數(shù)： 計(jì)數(shù)指標(biāo)（質(zhì)反應(yīng)）少 計(jì)量

6、指標(biāo)（量反應(yīng)）多 一般大動物（狗、羊、豬、猴）510只 中等動物（兔、豚鼠）1020只 小動物（大、小鼠）1030只三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（一）基本要素2、受試對象臨床觀察：難治病癥且療效顯著時(shí)（癌癥）51例；急重癥死亡率高的（如心衰、休克）3050例；慢性?。儾?、慢支）100500例；流行病學(xué)調(diào)查需千例三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（一）基本要素3、觀察指標(biāo)是鑒定的尺度，至關(guān)重要指標(biāo)的性質(zhì)計(jì)數(shù)指標(biāo)：質(zhì)反應(yīng) “陽性”“陰性”，“死和不死”回答，常 用%表示； 臨床：治愈、好轉(zhuǎn)、顯效、無效計(jì)量指標(biāo)：量反應(yīng)含量、細(xì)胞數(shù)等三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（一）基本要素3、觀察指標(biāo)指標(biāo)的數(shù)目：指標(biāo)多少不反映科研水平的高低；要反映本質(zhì)的東西，圍繞

7、一個(gè)中心做文章例如：異丙酚抗傷害作用的機(jī)制（NMDA、GABA、Gly）如研究與NMDA的關(guān)系，可應(yīng)用NMDA、非NMDA受體的激動劑、拮抗劑對Na+、K+流的影響如研究對GABA的影響，可應(yīng)用GABAA、GABAB的受體的激動劑、拮抗劑對Cl-流的影響三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（一）基本要素3、觀察指標(biāo)指標(biāo)的基本要求特異性：有本質(zhì)的聯(lián)系，“經(jīng)典”、“高新尖”客觀性：主觀指標(biāo)（人為判斷）客觀指標(biāo)（儀器記錄）精確性：正確性：能否如實(shí)地反映客觀存在 精密性：數(shù)據(jù)的精密程度靈敏性：分光光度計(jì)（mol），），HPLC(pmol), 放射免疫（pmol,fmol） 注意消除干擾三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（一）基本要素 二十世紀(jì)初提

8、出：對照、隨機(jī)、重復(fù)1981年，WHO在北京舉行的生物醫(yī)學(xué)研究方法學(xué)習(xí)班，提出4R：合理性（rational）、 代表性（representativeness)重復(fù)性（replication)、 隨機(jī)化（randomization)三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（二）基本原則 1、對照 目的 消除或減少實(shí)驗(yàn)誤差（排除非實(shí)驗(yàn)因素的影響） 消除生物變異誤差 應(yīng)用純種、同窩動物 消除主觀誤差 同一步驟要求同一人完成 消除時(shí)辰誤差 各組都應(yīng)按ABCD、BCDA、 CDBA且同時(shí)進(jìn)行三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（二）基本原則 1、對照 原則 寧可組內(nèi)有差異，不得有組間差異；例如雌雄比例 消除心理因素的影響；例如：雙盲、單盲 各組例數(shù)相等

9、 尤其是對照組不能少三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（二）基本原則 基本形式空白對照：不加任何措施，觀察受試對象的自然變化實(shí)驗(yàn)對照：實(shí)驗(yàn)操作條件的對照組 如：生理鹽水組、溶媒組、假手術(shù)組、安慰劑組有效（標(biāo)準(zhǔn)）對照：已知有效藥物或標(biāo)準(zhǔn)品（方法）作對照配對對照： 同體：同一個(gè)體不同時(shí)期作對照或?qū)嶒?yàn)（交叉）或同體 左右兩側(cè)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。異體：同窩動物、一卵雙胎等三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（二）基本原則1、對照基本形式組間對照：誤差較大歷史對照與正常對照：應(yīng)十分重視，必須在條件、背景、指標(biāo)、技術(shù)方法相同的條件下，否則將得出錯(cuò)誤結(jié)論潛在對照：不設(shè)對照組的對照，如死亡率100%的疾病三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（二）基本原則1、對照三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（二）基本原則

10、1、對照 有兩個(gè)條件不同時(shí)，實(shí)驗(yàn)就不純潔了 有三個(gè)條件不同時(shí)，這說明實(shí)驗(yàn)者不學(xué)無術(shù)目的：使組間趨于一致或均衡，使研究樣本由總體中均衡的被抽取，同等機(jī)會被抽取，保證各種未知因素均等的分配到各組中。三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（二）基本原則2.隨機(jī)隨即數(shù)字 抓鬮等（見統(tǒng)計(jì)學(xué)）分層隨機(jī) 按非被試因素中的幾個(gè)主要因素（性別、體重、病情等）先分為若干層，然后再按隨機(jī)的原則將各個(gè)層次的動物分到各組中去。隨即不是“萬全”的，可以造成年齡性別等差異，需要調(diào)整（加入主觀意志）臨床研究樣本量小，很難做到真正的隨機(jī)化確保病人的安全近年來動物實(shí)驗(yàn)中主張配對研究創(chuàng)造一個(gè)臨床研究更合理更實(shí)際的“分配”方案三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（二）基本原則2.隨

11、機(jī)目的：消除非處理因素所造成的偏差樣本量越大，重復(fù)次數(shù)越多，越能反映客觀真實(shí)規(guī)律。但不得無原則地追求大樣本；應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)的方法（依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)差）使樣本量減到最小限度；一般生物學(xué)差異在15%左右指標(biāo)的重復(fù)性，穩(wěn)定性要好，化學(xué)分析的誤差一般在5%左右三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（二）基本原則3、重復(fù) 1、單組比較自身對照設(shè)計(jì)：測基礎(chǔ)值后，給藥測實(shí)驗(yàn)值（如測痛閾）交叉設(shè)計(jì)：第一次用A藥處理第一組，B藥處理第二組，間隔一段時(shí)間，用B藥處理第一組，A藥處理第二組（如生物利用度測定） 2、組間比較兩組或多組比較：常用，對比鮮明、設(shè)計(jì)簡單、應(yīng)用廣泛缺點(diǎn)：抽樣誤差大三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（三）常見的方法 三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（三）常見的方法3、配對

12、設(shè)計(jì)以年齡、性別、體重、窩別相同的動物配成對子，每對中的一個(gè)分別分配到對照組和實(shí)驗(yàn)組中優(yōu)點(diǎn)：受試對象均衡4、正交設(shè)計(jì) 多因素多水平設(shè)計(jì)，高效、快速和經(jīng)濟(jì)三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（三）常見的方法5、序貫設(shè)計(jì) 循環(huán)逐個(gè)地進(jìn)行，一旦達(dá)到所規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，即可停止，做出結(jié)論，適用于短時(shí)間獲得結(jié)果的研究。 如LD50的測定：某藥可按0.60.7的組間比例配成56個(gè)左右的不同濃度：實(shí)驗(yàn)中可首選一個(gè)濃度，如動物不死，換一只動物，提高一個(gè)濃度，如動物還是不死，再另取一只動物，再提高一個(gè)濃度后動物死亡，另取一只動物降一個(gè)濃度給藥這樣循環(huán)地進(jìn)行，來回4次即可判斷。四、科研工作的實(shí)施（一）觀察立題與設(shè)計(jì)付諸實(shí)踐的保證客觀、認(rèn)真、仔

13、細(xì)、準(zhǔn)確，注意發(fā)現(xiàn)相似事物中的微小差異，即有相同點(diǎn)、不同點(diǎn)（抑制、過度興奮的抑制；青霉素的發(fā)現(xiàn)）四、科研工作的實(shí)施（一）觀察直觀：以人的感覺直接感知對象，帶有主觀成分；借助儀器的客觀記錄培養(yǎng)疑而多思的思想方法，系統(tǒng)的觀察、及時(shí)捕捉值得追蹤的線索，不斷修改其假說和設(shè)計(jì)原始資料妥善保存是研究工作最后進(jìn)行理論概括的物質(zhì)基礎(chǔ)和前提。巴甫洛夫：“觀察、觀察、再觀察”四、科研工作的實(shí)施（二）實(shí)驗(yàn)1、預(yù)備實(shí)驗(yàn)?zāi)康模菏煜?shí)驗(yàn)設(shè)備，掌握操作方法， 做到標(biāo)準(zhǔn)化，探索科學(xué)假說的方向熟悉方法、條件先獲得一些資料和數(shù)據(jù)，供制定和修改設(shè)計(jì)作參考驗(yàn)證科研構(gòu)思和假說有無可能成立做好此項(xiàng)工作，下一步僅是擴(kuò)大樣本量四、科研工作的

14、實(shí)施（二）實(shí)驗(yàn) 四、科研工作的實(shí)施（二）實(shí)驗(yàn)2、正式實(shí)驗(yàn)通過預(yù)備實(shí)驗(yàn)，調(diào)整實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、進(jìn)行的大批實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)方法一定要穩(wěn)定、重復(fù)性好、否則可導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)論四、科研工作的實(shí)施（三）資料整理和統(tǒng)計(jì)分析1、資料的系統(tǒng)化 對原始資料的整理和歸納，按分組情況進(jìn)行資料統(tǒng)一2、統(tǒng)計(jì)方法的選擇 t檢驗(yàn)、方差分析、卡方檢驗(yàn)、秩和分析3、資料的取舍 沒有違反實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)要求和實(shí)驗(yàn)條件的資料不準(zhǔn)舍棄 記錄不確切、有遺漏無法改正的可舍棄四、科研工作的實(shí)施（三）資料整理和統(tǒng)計(jì)分析3、資料的取舍過大、過小的資料可按以下方法舍棄某組10個(gè)樣本，其中有一個(gè)樣本的值過大或過小，可先將這一樣本放在一邊，計(jì)算其余9個(gè)樣本的均值標(biāo)準(zhǔn)差。再將過

15、大（?。┑臉颖竞蜕鲜鼍登蟛畹慕^對值，該差值是上述標(biāo)準(zhǔn)差的3倍以上，此過大（小）的樣本可以舍棄，否則不得舍棄原則：尊重實(shí)驗(yàn)結(jié)果 不能修改結(jié)果 四、科研工作的實(shí)施（四）結(jié)果判斷根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)的結(jié)果服從客觀事實(shí)，不能強(qiáng)求實(shí)驗(yàn)事實(shí)去服從主觀愿望和假說不能漫無邊際地推論五、論文撰寫有鮮明的論點(diǎn)、充分的論據(jù)、說理性強(qiáng)的論證過程；不要憑主觀想象加以推測，不要離題太遠(yuǎn)，圍繞論點(diǎn)去討論重新命題：客觀、完整、合理地反映全文的核心與特點(diǎn)內(nèi)容：前言、材料與方法、結(jié)果、討論、結(jié)論、參考文獻(xiàn)全文可一氣呵成，修改可三思而行五、論文撰寫1.圖表自明題名、注腳、三線式、照片選擇相似部位、放大倍數(shù)相同等2.有效數(shù)字測量儀表的最小分值后再估讀一位