滅菌制劑和無菌制劑

1、第三章第三章 滅菌制劑和無菌制劑滅菌制劑和無菌制劑第一節(jié) 概 述第二節(jié)第三節(jié) 注射劑第四節(jié) 輸 液第五節(jié) 注射用無菌粉末第六節(jié) 眼用液體制劑 1、掌握滅菌的要領(lǐng)及各種物理滅菌法和化學(xué)滅菌法的含義、要求及應(yīng)用； 2、掌握注射劑的含義、分類、特點(diǎn)及質(zhì)量要求、注射用水的含義、制備方法和質(zhì)量要求、注射劑的附加劑； 3、熱原的含義、性質(zhì)、污染途徑及除去方法。掌握滲透壓的調(diào)節(jié)、注射劑的制備過程； 4、掌握輸液的含義、制備過程、質(zhì)量要求及存在問題； 5、掌握注射用無菌粉末含義、冷凍干燥特點(diǎn)、注射用無菌分裝工藝中存在的問題及解決辦法； 6、掌握注射用凍干制品的制備工藝、存在的問題及處理方法。 7、掌握眼用液體

2、制劑的含義和質(zhì)量要求。熟悉D、Z、F、F。值的含義、空氣濾過的原理及影響因素、冷凍干燥的基本原理及影響因素；熟悉注射劑的質(zhì)量檢查、熟悉眼用液體制劑的附加劑和制備過程。熟悉制藥環(huán)境的空氣凈化標(biāo)準(zhǔn)，測定方法及潔凈室的設(shè)計(jì)。了解空氣濾過的常用設(shè)備、了解常用干燥設(shè)備的基本構(gòu)造與操作要求、了解注射用油及非水溶劑；了解無菌操作法、物理滅菌法的常用設(shè)備。了解注射劑新產(chǎn)品試制的主要工作、無菌分裝的過程及主要設(shè)備、眼用液體制劑的藥物吸收途徑及影響因素。了解其他滅菌與無菌制劑的含義、制備工藝。 滅菌（sterilization)：系指用物理或化學(xué)等方法殺滅或除去所有致病和非致病微生物繁殖體和芽孢的手段?；靖拍罨?/p>

3、本概念 無菌（sterility)：系指在指定物體、介質(zhì)或環(huán)境中，不得存在任何活的微生物。 無菌操作（asepic technique)：系指整個(gè)操作過程在無菌環(huán)境中制備無菌制劑的方法或技術(shù)?；靖拍罨靖拍?防腐（antisepsis)：系指用物理或化學(xué)方法抑制微生物的生長與繁殖的手段，亦稱抑菌。對微生物的生長與繁殖具有抑制作用的物質(zhì)稱抑菌劑或防腐劑。 消毒（disinfection)：系指用物理或化學(xué)方法殺滅或除去病原微生物的手段。對病原微生物具有殺滅或除去作用的物質(zhì)稱消毒劑。基本概念基本概念一、滅菌制劑與無菌制劑的定義與分類一、滅菌制劑與無菌制劑的定義與分類藥物制劑規(guī)定無菌制劑： 不得檢

4、出活菌。非規(guī)定無菌制劑（限菌制劑）： 限定染菌的種類與數(shù)量。定義定義 滅菌制劑：系指采用某一物理、化學(xué)方法殺滅或除去所有活的微生物的一類藥物制劑。 無菌制劑：系指在無菌環(huán)境中采用無菌操作方法或無菌技術(shù)制備不含任何活的微生物的一類藥物制劑。無菌制劑注射用制劑眼用制劑植入型制劑創(chuàng)傷用制劑手術(shù)用制劑注射劑、輸液、注射粉針滴眼劑、眼用膜劑、軟膏劑、凝膠劑植入片潰瘍、燒傷及外傷用溶劑止血海棉、骨蠟(1) 無菌 注射劑成品中不應(yīng)含有任何活的微生物和芽孢。不管用什么方法制備，都必須達(dá)到藥典無菌檢查的要求。 (2) 無熱原 無熱原是注射劑的重要質(zhì)量指標(biāo)，特別是用大量的，供靜脈注射及脊椎腔注射的藥物制劑，均需進(jìn)

5、行熱原檢查。 (3) 澄明度 注射溶液要在規(guī)定條件下檢查，不得有肉眼可見的混濁或異物。鑒于微粒引入人體所造成的危害，目前對澄明度的要求更嚴(yán)。(4) 安全性 注射劑不能引起對組織刺激或發(fā)生毒性反應(yīng)，特別是非水溶劑及一些附加劑，必須經(jīng)過必要的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，確保使用安全。(5) 滲透壓 注射劑要有一定的滲透壓，其滲透壓要求與血漿的滲透壓相等或接近。供靜脈注射的大劑量注射劑還應(yīng)具有等張性。(6) pH 注射劑的pH要求與血液相等或接近，血液pH7.4，注射劑一般控制在49的范圍內(nèi)。 (7) 穩(wěn)定性 注射劑多系水溶液，所以穩(wěn)定性問題比其它劑型突出，故要求注射劑具有必要的物理穩(wěn)定性和化學(xué)穩(wěn)定性，確保產(chǎn)品在貯存

6、期內(nèi)安全有效。(8) 降壓物質(zhì) 有些注射液，如復(fù)方氨基酸注射液，其降壓物質(zhì)必須符合規(guī)定，以保證用藥安全。q 原水處理方法有離子交換法與電滲析法及反滲透法q離子交換法制得的離子交換水主要供蒸餾法制備注射用水使用，也可用于洗瓶，但不得用來配制注射液，因其在除熱原方面還不如蒸餾法那樣可靠，有時(shí)還帶有乳光。q電滲析法與反滲透法廣泛用于原水預(yù)處理，供離子交換法使用，以減輕離子交換樹脂的負(fù)擔(dān)。q 熱原(Pyrogens)是微生物的代謝產(chǎn)物。大多數(shù)細(xì)菌都能產(chǎn)生，致熱能力最強(qiáng)的是革蘭氏陰性桿菌所產(chǎn)生的熱原。霉菌甚至病毒也能產(chǎn)生熱原。q 含有熱原的輸液注入人體，大約半小時(shí)以后，就使人體發(fā)冷、寒戰(zhàn)、體溫升高、身痛

7、、出汗、惡心嘔吐等不良反應(yīng)，有時(shí)體溫可升至40，嚴(yán)重者出現(xiàn)昏迷、虛脫，甚至有生命危險(xiǎn)。 q一般經(jīng)過一個(gè)短的潛伏期后，溫度略微上升，然后又略微下降，接著又很快上升，并出現(xiàn)一個(gè)高峰q這種現(xiàn)象導(dǎo)致一個(gè)假設(shè)：即細(xì)菌性熱原本身不引起發(fā)熱反應(yīng)。但熱原使多型核白細(xì)胞(polymorphonucler leucocyte)及其他細(xì)胞釋放一種內(nèi)源性熱原(endogenous pyrogen)q內(nèi) 源 性 熱 原 可 能 是 蛋 白 質(zhì) 或 脂 蛋 白(lipoprotein)組成，但其確切組成尚未肯定，它作用于視丘下部體溫調(diào)節(jié)中樞，可引起5-羥色胺的升高而導(dǎo)致發(fā)熱，熱原的致熱量因菌種而異，注射途徑不同，引起發(fā)熱

8、反應(yīng)的程度也有差異。q內(nèi)毒素是由磷脂、脂多糖和蛋白質(zhì)所組成 的 復(fù) 合 物 ， 其 中 脂 多 糖(lipopolysaccharide)是內(nèi)毒素的主要成分，具有特別強(qiáng)的熱原活性，大致可以認(rèn)為內(nèi)毒素=熱原=脂多糖。q脂多糖的化學(xué)組成因菌種不同而異，從大腸桿菌分出來的脂多糖中有68%69%的糖(葡萄糖、半乳糖、庚糖、氨基葡萄糖等)，1213%的類脂化合物，7%的有機(jī)磷和其它成分。q(1) 耐熱性 熱原在60加熱1h不受影響，100也不會(huì)發(fā)生熱解，在18034h，2503045min或6501min可使熱原徹底破壞。q某些熱原具有熱不穩(wěn)定性，但在通常注射劑滅菌的條件下，往往不足以使熱原破壞，這點(diǎn)必

9、須引起注意q(2) 濾過性 熱原體積小，約在15nm之間，故一般濾器均可通過。即使微孔濾膜，也不能截留。q但活性炭可以吸附熱原；q(3) 水溶性 熱原能溶于水；q(4) 不揮發(fā)性 熱原本身不揮發(fā)，但在蒸餾時(shí)，往往可隨水蒸汽霧滴帶入蒸餾水，故應(yīng)設(shè)法防止；q(5) 其它 熱原能被強(qiáng)酸、強(qiáng)堿破壞，也能被強(qiáng)氧化劑如高錳酸鉀或過氧化氫所鈍化，超聲波也能破壞熱原。 q (1) 從溶劑中帶入 是注射劑出現(xiàn)熱原的主要原因。蒸餾器結(jié)構(gòu)不合理，操作不當(dāng)，注射用水貯藏時(shí)間過長都會(huì)污染熱原。 q(2) 從原料中帶入 容易滋長微生物的藥物，如葡萄糖因貯存年久包裝損壞常致污染熱原。用生物方法制造的藥品如右旋糖酐、水解蛋白

10、或抗生素等常因致熱物質(zhì)未除盡而引起發(fā)熱反應(yīng)；q(3) 從容器、用具、管道和裝置等帶入 在生產(chǎn)中對這些容器用具等物要認(rèn)真處理，合格后方能使用；q1. 污染熱原的途徑q (4) 制備過程中的污染 制備過程中，由于室內(nèi)衛(wèi)生條件差，操作時(shí)間長，裝置不密閉，均增加污染細(xì)菌的機(jī)會(huì)，而可能產(chǎn)生熱原；q(5) 從輸液器帶入 有時(shí)輸液本身不含熱原，但仍發(fā)現(xiàn)熱原反應(yīng)。這往往是由于輸液器具(如輸液吊瓶、膠皮管等)污染所致。 q(1) 高溫法 注射用的針筒或其他玻璃器皿，在洗滌干燥后，250加熱30分鐘以上，可破壞熱原；q(2) 酸堿法 玻璃容器、用具還可用重鉻酸鉀硫酸清潔液或稀氫氧化鈉處理，將熱原破壞；q(3) 吸

11、附法 常用的吸附劑有活性炭，活性炭對熱原有較強(qiáng)的吸附作用，同時(shí)有助濾脫色作用，在注射劑中使用較廣。常用量為0.1%0.5%。q此外還可用活性炭與白陶土合用除熱原；q(4) 離子交換法 國內(nèi)有用#301弱堿性陰離子交換樹脂10%與#122弱酸性陽離子交換樹脂8%成功地除去丙種胎盤球蛋白注射液中的熱原；q(5) 凝膠濾過去 國內(nèi)有用二乙氨基乙基葡聚糖凝膠(分子篩)制備無熱原去離子水；q(6) 反滲透法通過三醋酸纖維膜除去熱原 是近幾年發(fā)展起來有實(shí)用價(jià)值的新方法。此外，超濾法也能除去熱原。 等滲溶液（isoosmotic solution）：與血漿滲透壓相等的溶液。注入低滲溶液會(huì)溶血，注入高滲溶液紅

12、細(xì)胞會(huì)萎縮（慢可）。 等張溶液（isototlic solution）：滲透壓與紅細(xì)胞膜張力相等的溶液。 冰點(diǎn)降低數(shù)據(jù)法 氯化鈉等滲當(dāng)量法W =0.52 - ab 氯化鈉等滲當(dāng)量系指與1g藥物呈等滲的氯化鈉質(zhì)量。五、滅菌與無菌技術(shù)五、滅菌與無菌技術(shù) 提高藥物制劑的安全性 保護(hù)制劑的穩(wěn)定性 保證制劑的臨床療效目的目的滅菌法物理滅菌法化學(xué)滅菌法 無菌操作法（一）物理滅菌技術(shù)（一）物理滅菌技術(shù) 利用蛋白質(zhì)與核酸具有遇熱、射線不穩(wěn)定的特性，采用加熱、射線和過濾方法，殺滅或除去微生物的技術(shù)稱為物理滅菌法，亦稱物理滅菌技術(shù)。1. 干熱滅菌法2. 濕熱滅菌法3. 過濾滅菌法4. 射線滅菌法1. 干熱滅菌法干

13、熱滅菌法 系指在干燥環(huán)境中進(jìn)行滅菌的技術(shù)。 包括： 滅菌溫度和時(shí)間： 135 145滅菌 3 5h； 160 170滅菌 2 4h； 180 200滅菌 0.5 1h 火焰滅菌法火焰滅菌法干熱空氣滅菌法干熱空氣滅菌法火焰滅菌法火焰滅菌法 系指用火焰直接灼燒滅菌的方法。 該法適用于耐火焰材質(zhì)（如金屬、玻璃及瓷器等）的物品與用具的滅菌，不適合藥品的滅菌。不適合藥品的滅菌。干熱空氣滅菌法干熱空氣滅菌法 系指用高溫干熱空氣滅菌的方法。 該法適用于耐高溫的玻璃和金屬制品以及不允許濕氣穿透的油脂類（如油性軟膏基質(zhì)、注射用油等）和耐高溫的粉末化學(xué)藥品的滅菌，不適于橡膠、不適于橡膠、塑料及大部分藥品的滅菌。塑

14、料及大部分藥品的滅菌。2. 濕熱滅菌法濕熱滅菌法 系指用飽和蒸氣 、沸水或流通蒸氣進(jìn)行進(jìn)行滅菌的方法。 包括：熱壓滅菌法熱壓滅菌法流通蒸氣滅菌法流通蒸氣滅菌法煮沸滅菌法煮沸滅菌法低溫間歇滅菌法低溫間歇滅菌法熱壓滅菌法熱壓滅菌法 系指用高壓飽和水蒸氣加熱殺滅微生物的方法。能殺滅所有細(xì)菌繁殖體和芽孢，適用于耐高溫和耐高壓蒸汽的所有藥物制劑 、玻璃容器、金屬容器、瓷器、橡膠塞、濾膜過濾器等。 滅菌溫度（蒸氣表壓）和時(shí)間： 115(67kPa)、30min； 121(97kPa)、20min； 126(139kPa)、15min濕熱滅菌法濕熱滅菌法流通蒸氣滅菌法流通蒸氣滅菌法 系指在常壓下，采用100

15、流通蒸氣加熱殺滅微生物的方法。滅菌時(shí)間通常為3060min。該法適用于消毒及不耐高熱制劑的滅菌。但不能保證殺滅所有的芽孢，不是可靠的滅菌法。濕熱滅菌法濕熱滅菌法煮沸滅菌法煮沸滅菌法 系指將待滅菌物品置沸水中加熱滅菌的方法。煮沸 時(shí)間通常為3060min。該法滅菌效果較差，常用于注射劑、注射針等器皿的消毒。必要時(shí)加入適量的抑菌劑，如三氯叔丁醇、甲酚、氯甲酚等，以提高滅菌效果。濕熱滅菌法濕熱滅菌法低溫間歇滅菌法低溫間歇滅菌法 將待滅菌物置6080的水或流通蒸氣中加熱60min，殺滅微生物繁殖體后，在室溫條件下放置24h，讓待滅菌物中的芽孢發(fā)育成繁殖體，再次加熱滅菌、放置，反復(fù)多次，直至殺滅所有芽孢

16、。 該法適用于不耐高溫、熱敏感物料和制劑的滅菌。 缺點(diǎn)是費(fèi)時(shí)、工效低、滅菌效果差，加入適量抑菌劑可提高滅菌效率。濕熱滅菌法濕熱滅菌法 微生物的種類和數(shù)量 耐熱、壓次序： 芽孢繁殖體衰老體 微生物數(shù)量 滅菌時(shí)間 蒸氣性質(zhì)蒸氣飽和蒸氣濕飽和蒸氣過熱蒸氣熱含量熱穿透力滅菌效率影響濕熱滅菌因素影響濕熱滅菌因素 藥物性質(zhì)和滅菌時(shí)間 滅菌溫度愈高，滅菌時(shí)間愈長。藥品被破壞的可能性愈大。原則：在達(dá)到有效滅菌的前提下，盡可能降低滅菌溫度和縮短滅菌時(shí)間。影響濕熱滅菌因素影響濕熱滅菌因素 其他介質(zhì)pH值介質(zhì)的營養(yǎng)成分中性 最耐熱堿性 次之酸性 最弱抗熱性強(qiáng)營養(yǎng)高3. 過濾滅菌法過濾滅菌法 系指采用過濾法除去微生物

17、的方法。該法屬于機(jī)械除菌方法，該機(jī)械稱為除菌過濾器。該法適用于對熱不穩(wěn)定的藥液、氣體、水等物品的滅菌。 對滅菌用過濾器應(yīng)有較高要求。 常用的除菌過濾器：0.22m的微孔濾膜器和0.3 mG6垂熔玻璃濾器。4. 射線滅菌法射線滅菌法 系指采用輻射、微波和紫外線殺滅微生物和芽孢的方法。包括：（1）輻射滅菌法（2）微波滅菌法（3）紫外線滅菌法（1）輻射滅菌法）輻射滅菌法 系指采用放射線同位素（60Co和137Cs）放射的 射線殺滅微生物和芽孢的方法。輻射滅菌劑量一般為2.5104Gy。 本品適用于熱敏物料和制劑的滅菌，常用于維生素、抗生素、激素、生物制品、中藥材和中藥制劑、醫(yī)療器械、藥用包裝材料及藥

18、用高分子材料等物質(zhì)的滅菌。射線滅菌法射線滅菌法（1）輻射滅菌法）輻射滅菌法 優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)： 不升高產(chǎn)品溫度，穿透力強(qiáng)，滅菌效率高。 缺點(diǎn)：缺點(diǎn)： 設(shè)備費(fèi)用較高，對操作人員存在潛在的危險(xiǎn)性，對某些藥物（特別是溶液型）可能產(chǎn)生藥效降低或產(chǎn)生毒性物質(zhì)和發(fā)熱物質(zhì)等。射線滅菌法射線滅菌法（2）微波滅菌法）微波滅菌法 采用微波（頻率為300MHz300kMHz)照射產(chǎn)生的熱能殺滅微生物和芽孢的方法。 該法適用于液體和固體物料的滅菌，且對固體物料具有干燥作用。 特點(diǎn)：微波能穿透到介質(zhì)和物料的深部，可使介質(zhì)和物料表里一致地加熱；且具有低溫、常壓、高效、快速、低能耗、無污染、易操作、易維護(hù)、產(chǎn)品保質(zhì)期長等特點(diǎn)。射

19、線滅菌法射線滅菌法（2）微波滅菌法）微波滅菌法熱效應(yīng)熱效應(yīng)使微生物中蛋白質(zhì)變性而失活。微波殺菌微波殺菌機(jī)理機(jī)理非熱效應(yīng)非熱效應(yīng)干擾了微生物正常的新陳代謝，破壞微生物的生長環(huán)境。低溫（低溫（7080）即可殺滅微生物，）即可殺滅微生物，不影響藥物的穩(wěn)定性。不影響藥物的穩(wěn)定性。射線滅菌法射線滅菌法（3）紫外線滅菌法）紫外線滅菌法 系指用紫外線（能量）照射殺滅微生物和芽孢的方法。用于紫外滅菌的波長一般為200300nm，最強(qiáng)滅菌力的波長為254nm。 該法適用于照射物表面滅菌、無菌室空氣及蒸餾水的滅菌。不適合于藥液的滅菌及固體物料深部的滅菌。射線滅菌法射線滅菌法（3）紫外線滅菌法）紫外線滅菌法 滅菌機(jī)

20、理滅菌機(jī)理：紫外線可導(dǎo)致核酸蛋白變性，又能使空氣中氧氣產(chǎn)生微量臭氧。 紫外線穿透能力弱，并能被普通玻璃吸收，裝于容器中的藥物不能用紫外線滅菌。 紫外線對人體有一定的傷害，照射過久易引起結(jié)膜炎、紅斑及皮膚燒灼。射線滅菌法射線滅菌法（二）化學(xué)滅菌法（二）化學(xué)滅菌法 系指用化學(xué)藥品直接作用于微生物而將其殺滅的方法。 殺菌劑是指對微生物具有觸殺作用的化學(xué)藥品。分為氣體殺菌劑和液體殺菌劑。 殺菌劑只對微生物繁殖體有效，不能殺滅芽孢。 殺菌效能決定于微生物的種類與數(shù)量、物體表面光潔度或多孔性以及殺菌劑的性質(zhì)等。（二）化學(xué)滅菌法（二）化學(xué)滅菌法 氣體滅菌法氣體滅菌法 該法適用于環(huán)境消毒和不耐熱的醫(yī)用器具、設(shè)

21、備和設(shè)施等的消毒，亦用于粉末注射劑的消毒。 常用的氣態(tài)殺菌劑：環(huán)氧乙烷、甲醛、丙二醇、甘油和過氧乙酸。 藥液滅菌法藥液滅菌法 該法常作為其他滅菌法的輔助措施，適用于皮膚、無菌器具和設(shè)備的消毒。 常用的消毒液：75%乙醇、1%聚維酮碘溶液、0.10.2%新潔爾滅溶液、酚或煤酚皂溶液等。（三）無菌操作法（三）無菌操作法 系指整個(gè)過程控制在無菌條件下進(jìn)行的一種操作方法。 該法適用于一些不耐熱藥物的注射液、眼用制劑、皮試液、海綿劑和創(chuàng)傷制劑的制備。 無菌操作法包括無菌操作室的滅菌無菌操作室的滅菌和無菌操作無菌操作兩個(gè)環(huán)節(jié)。1. 無菌操作室的滅菌無菌操作室的滅菌 常采用紫外線、液體和氣體滅菌法對無菌操作

22、室環(huán)境進(jìn)行滅菌。 常用甲醛溶液加熱熏蒸法。氣體發(fā)生裝置（蒸氣加熱夾層鍋）液態(tài)甲醛甲醛蒸氣鼓風(fēng)機(jī)無菌室關(guān)閉熏蒸1224h濕度60%溫度2525%氨水除氣2. 無菌操作無菌操作 無菌操作的場所無菌操作的場所 無菌操作室、層流潔凈工作臺(tái)、無菌操作柜。 無菌操作的所用物品、器具、環(huán)境無菌操作的所用物品、器具、環(huán)境 操作人員操作人員（四）滅菌參數(shù)（四）滅菌參數(shù)（F值和值和F0值）值） D值為降低被滅菌物品中微生物數(shù)至原來1/10或降低一個(gè)對數(shù)單位（lg100降至lg10）所需的時(shí)間。1.D值 在一定溫度下，殺滅90%微生物（或殘存率為10%）所需的滅菌時(shí)間。lgN0-lgNt=kt/2.303微生物死亡

23、的速度:D = t = 2.303/k(lg100-lg10)不同滅菌法不同微生物的不同滅菌法不同微生物的D值值滅菌方法微生物溫度介質(zhì)或樣品 D值（min）蒸氣滅菌嗜熱脂肪芽孢桿菌1055葡萄糖水溶液87.8蒸氣滅菌嗜熱脂肪芽孢桿菌1215葡萄糖水溶液2.4蒸氣滅菌嗜熱脂肪芽孢桿菌121注射用水3.0蒸氣滅菌產(chǎn)芽胞梭狀芽孢桿菌1055葡萄糖水溶液1.3干熱滅菌枯草芽胞桿菌135紙16.6紅外線滅菌枯草芽胞桿菌160玻璃板18秒滅菌參數(shù)滅菌參數(shù) ZT2T1logD2logD12.Z值 降低一個(gè)lgD值所需升高的溫度,即滅菌時(shí)間減少到原來的1/10所需升高的溫度或在相同滅菌時(shí)間內(nèi),殺滅99%的微生物所需提高的溫度. 在一定滅菌溫度（T）下給定的Z值所產(chǎn)生的滅菌效果與在參比溫度（ To）下給定的F值所產(chǎn)生的滅菌效果相同時(shí)所相當(dāng)?shù)臅r(shí)間。常用于干熱滅菌，單位：min。 F = t 10 滅菌參數(shù)滅菌參數(shù)3.F值TT0Z 在一定滅菌溫度（T）、Z值為10所產(chǎn)生的滅菌效果與121 、 Z值為10所產(chǎn)生的滅菌效果相同時(shí)所相當(dāng)?shù)臅r(shí)間。4.F0值滅菌參數(shù)滅菌參數(shù) F0 = t 10 T-121Z物理F0值數(shù)學(xué)表達(dá)式：生物F0值數(shù)學(xué)表達(dá)式：F0=D121(lgN0-lgNt)為滅菌后預(yù)計(jì)達(dá)到的為滅菌后預(yù)計(jì)達(dá)到的微生物殘存數(shù)，即染微生物