幾種常見(jiàn)疾病的造模方法

1、幾種常見(jiàn)疾病的造模方法1 .血管性癡呆大鼠模型動(dòng)物選取選用健康II級(jí)SD雄性大鼠，體重280-320g,動(dòng)物于安靜環(huán)境下分籠飼養(yǎng)，室溫控制在(22±1)C的范圍內(nèi)，相對(duì)濕度60%,光線自動(dòng)控制，明(07:00-19:00)暗(19:00-07)交替，給予充足清潔飲水、攝食。處理大鼠10%水合氯醛腹腔注射(1g/kg)麻醉后，將其仰臥固定。分離右頸總動(dòng)脈(CCA，頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA及頸外動(dòng)脈(ECA)并掛線備用，結(jié)扎ECA與CCA用動(dòng)脈夾夾閉ICA遠(yuǎn)心端后，迅速于ECA與ICA分義處作一切切口，從切口處插入一端加熱成光滑球形尼龍線(直徑為0.25mm,距球端2cm處作標(biāo)記)。線插入ICA

2、后，于入日處稍稍結(jié)扎尼龍線與入口處ICA段，然后松開(kāi)夾閉ICA的動(dòng)脈夾，繼續(xù)插入尼龍線至稍有阻力后略回撤，至線插入深度為(18.5±0.5)mm左右，實(shí)現(xiàn)大腦中動(dòng)脈阻塞導(dǎo)致腦缺血。再次結(jié)扎入口處，尼龍線外留約1縫合皮膚。2h后輕輕提拉所留線頭至有阻力，實(shí)現(xiàn)大腦中動(dòng)脈再灌，則造模完成。納入動(dòng)物入選的標(biāo)準(zhǔn)(按照Z(yǔ)eaLonga5級(jí)評(píng)分法取評(píng)分為2,3,4分的動(dòng)物，動(dòng)物于缺血2h后出現(xiàn)對(duì)側(cè)前肢倦曲或行走轉(zhuǎn)圈或行走向?qū)?cè)倒體征則納入，動(dòng)物無(wú)此體征或于缺血2h后仍不清醒者棄去。2 .大鼠酒精性肝病模型取材體重125-155g雄性SD大鼠，環(huán)境溫度18c200c濕度70%左右，自由采食全價(jià)營(yíng)養(yǎng)顆

3、粒飼料，墊料為紫外線消毒后的衛(wèi)生紙。將酒精體積分?jǐn)?shù)為0.52的紅星二鍋頭自灑(北京釀酒總廠生產(chǎn))，按體積比分別稀釋成400Io.450Io.500Io(v/v臨用。處理按每周所測(cè)得的體重給子每日早晚白酒灌胃各1次。第1周將稀釋成40%的白酒按劑量4g/(kg.d)、每次0.5m1/100g灌胃，第2周按劑量8g/(kg.d)、每次1.0ml/100g,灌胃，第5周開(kāi)始將稀釋成45%的自7S按9g/(kg.d),每次1.0m1/100g灌胃，第9周將稀釋成50%的白7S按10g/(kg.d)、每次1.0m1/100g灌胃，第11周起改用自由飲酒至第12周，以濃度50%白酒作為主要飲料，日供給量4

4、0ml,同時(shí)限制飲水。納入棄去死亡的大鼠，即為模型大鼠。3 .肝郁脾虛證大鼠模型取材健康雄性SD大鼠，體重(230±10)g,SPF級(jí)，所有動(dòng)物提前購(gòu)入，適應(yīng)性飼養(yǎng)3d,5只/籠。光照節(jié)律12L:12D(6:0018:00)，室溫(22±2)C,保持動(dòng)物室安靜。相對(duì)濕度保持3%40%,喂常規(guī)顆粒飼料及飲用水。處理大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3d后進(jìn)行初步篩選，將過(guò)于活躍和過(guò)于安靜的大鼠排除，以慢性束縛方法制作慢性應(yīng)激大鼠模型，束縛架自制(T型束縛臺(tái):底座寬10cm,長(zhǎng)20cm,厚28cm)上端束縛臺(tái)長(zhǎng)22cm,最寬處66cm,兩側(cè)分別有適合四肢放置的四槽及一條可調(diào)節(jié)的粘貼軟帶)，將大鼠束

5、縛于束縛架上，兩條粘貼軟帶分別固定大鼠的胸部和腹部，放入飼養(yǎng)箱中，每日3h,早8點(diǎn)到11點(diǎn)，連續(xù)21d,.納入棄去死亡大鼠，即為模型大鼠。4 .糖尿病大鼠模型取材健康SD大鼠60只，SPF級(jí)，雄性，體重190230g.大鼠預(yù)先飼養(yǎng)3d.處理造模前動(dòng)物禁食16h,按50mg/kg的劑量一次性快速腹腔注射0.5%的鏈月尿佐菌素。注射完后給食給水，2h后灌胃給予25%的葡萄糖水，防止大鼠低血糖的發(fā)生。于造模后第3天、第10天分別測(cè)定尿糖和空腹6h的血糖。尿糖陽(yáng)性且空腹6h血糖16.7mmol/L者為糖尿病大鼠。納入如上所述。5 .類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎腎虛證大鼠模型取材選用6周齡無(wú)特殊病原體級(jí)SD大鼠，雌雄各

6、半。正常飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1周。處理去勢(shì)法:按常規(guī)方法做去勢(shì)手術(shù)，即摘除雙側(cè)卵巢與睪丸，術(shù)后28d,取適量牛ll型膠原溶液（濃度為2g/L）逐滴加入至等容積的不完全弗氏佐劑中，牛1型膠原終濃度為1g/L;冰浴中用勻漿器充分乳化以滴入水中不打擴(kuò)散為度；取乳化后的混合物，按0.2mL/只，即200ug牛ll型膠原/只，于尾根部皮下注射7d后按0.1mL/只，即100ug牛11型膠原/只，于尾根部皮下加強(qiáng)免疫一次。納入棄去死亡大鼠，即為模型大鼠。6 .虛寒證大鼠模型取材SPF級(jí)雄性SD大鼠雌雄各半，體質(zhì)量（240±10）go處理以注射用氫化可的松琥珀酸鈉（20mg/kg）肌肉注射，每天1次，連

7、續(xù)14d。納入棄去死亡大鼠，即為模型大鼠。7 .骨質(zhì)疏松大鼠模型取材健康SPFa雄性SD大鼠，12月齡，體質(zhì)量(330±10)g。室溫1923c室內(nèi)飼養(yǎng)，每日12h光照，定量給食，自由飲水。處理經(jīng)苯巴比妥鈉(110mg/kg)ip麻醉后，經(jīng)腰背部切口切除雙側(cè)卵巢，手術(shù)后分籠飼養(yǎng)。納入手術(shù)4周后，棄去死亡大鼠，即為模型大鼠。8 .血瘀型頸椎病大鼠模型取材健康SPFa雄性SD大鼠，3月齡，體質(zhì)量(330±10)g。處理首先采用動(dòng)靜力失衡造大鼠頸椎間盤(pán)退變模型。將大鼠頸后部剪毛和清潔后，按氯氨酮0.1/kg體質(zhì)量行腹腔注射麻醉，取頸背部正中縱向切口，長(zhǎng)約22.5cm,切開(kāi)皮膚后，

8、橫向切斷頸夾肌和頭、頸、寰最長(zhǎng)肌，切除頸骼肋肌與頭半棘肌，然后依次切除棘上和棘間韌帶，建立動(dòng)靜力失衡性大鼠頸椎間盤(pán)退變模型。觀察2.5個(gè)月后，采用腎上腺皮質(zhì)激素加腎上腺素應(yīng)用法造出血瘀癥型，氫化可的松10mg/kg體質(zhì)量肌肉注射，用藥13d,然后腎上腺素0.36mg/kg體質(zhì)量皮下注射，用藥1do納入棄去死亡大鼠，即為模型大鼠。9 .激素性股骨頭壞死大鼠模型取材4月齡健康Wistar大白鼠雌雄各半。以正常飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)2周。處理精確稱重后，肌肉注射地塞米松磷酸鈉(10mg/kg),每周1次，共注射14周.納入棄去死亡大鼠，即為模型大鼠10 .膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎兔模型取材健康6月齡新西蘭大白兔52只，雌雄各半，空腹體重22.5kg.處理先剪去兔左后肢踩關(guān)節(jié)以上1cm一腹股溝下1.5cm區(qū)域兔毛，樹(shù)