植物細胞工程復(fù)習資料

1、頁眉植物細胞工程復(fù)習資料名詞解釋1、農(nóng)業(yè)生物技術(shù)：是指運用基因工程、細胞工程、酶工程、發(fā)酵工程以及分子標記輔助選擇等生物技術(shù)， 改良動植物、微生物品種生產(chǎn)性狀、培育動植物及微生物新品種、生產(chǎn)生物農(nóng)藥、獸藥與疫苗等產(chǎn)品的新技術(shù)。2、植物細胞工程： 是指應(yīng)用細胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的方法，通過類似于工程學(xué)的步驟，在細胞整體水平或細胞器水平上， 按照人們的意愿來改變植物細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)以獲得特定的細胞、新型生物或特種細胞產(chǎn)品的一門綜合性科學(xué)技術(shù)。3、細胞工程：在細胞水平上研究改造生物遺傳特性和生物學(xué)特性，以獲得特定的細胞、細胞產(chǎn)品或新生物體的相關(guān)理論和技術(shù)方法的學(xué)科。4、滅菌： 是指用物理或化學(xué)的方法

2、，殺死或者去除物品上所有生活的微生物的方法。5、消毒： 是指用消毒劑對活的植物材料進行處理，以殺死其上所有生活的微生物的方法。6、植物細胞的全能性：即是每個植物的體細胞或性細胞都具有該植物的全套遺傳基因，因此在一定培養(yǎng)條件下每個細胞都可發(fā)育成一個與母體一樣的植株。7、細胞脫分化： 培養(yǎng)條件下使一個已分化的細胞回復(fù)到原始無分化狀態(tài)或分生細胞狀態(tài)的過程。8、細胞分化：是指導(dǎo)致細胞形成不同結(jié)構(gòu)，引起功能改變或潛在發(fā)育方式改變的過程。9、極性： 是指植物的器官、組織，甚至單個的細胞在不同軸向上存在的某種形態(tài)結(jié)構(gòu)及生理生化上的梯度差異。10 、中間繁殖體：在離體培養(yǎng)過程中形成的具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的中間繁殖

3、材料。11 、愈傷組織 : 在離體培養(yǎng)過程中形成的具有分生能力的一團不規(guī)則細胞，多在外植體切面上產(chǎn)生。12 、再分化： 脫分化后具有分生能力的細胞再經(jīng)過與原來相同的分化過程，重新形成各類組織和器官的過程。13 、植物的器官發(fā)生：是指在離體培養(yǎng)下的組織或細胞團分化形成不定根、不定芽等器官的過程。14 、體細胞胚胎發(fā)生：是指體細胞在未經(jīng)性細胞融合的情況下，模擬有性胚胎發(fā)生的各個階段而形成胚的類似物的形態(tài)發(fā)生過程。15 、懸浮培養(yǎng)： 是指將離體的細胞或小細胞團懸浮在液體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)的方法。16 、固體培養(yǎng)：在培養(yǎng)基中加入一定量的凝固劑（如瓊脂、明膠等）形成固體培養(yǎng)基，將植物的植物器官、組織、細胞

4、或原生質(zhì)體接種于培養(yǎng)基上（中）的組織培養(yǎng)方法。17 、靜止液體培養(yǎng)：是指在培養(yǎng)基中不加入凝固劑，而直接將培養(yǎng)物接種到液體中或其他支持物上進行培養(yǎng)的方法。18 、成批培養(yǎng)：是指在一個培養(yǎng)體積中接種細胞和添加培養(yǎng)基后，中途不再添加培養(yǎng)基也不更換培養(yǎng)基的方式。19、連續(xù)培養(yǎng)： 是在培養(yǎng)過程中不斷加入培養(yǎng)基，使培養(yǎng)液中的營養(yǎng)物質(zhì)能夠連續(xù)得到補充的培養(yǎng)方法。20、半連續(xù)培養(yǎng)： 是介于成批培養(yǎng)和連續(xù)培養(yǎng)之間的一種培養(yǎng)方法。是在完成成批培養(yǎng)一個周期后， 只從反應(yīng)器中取出大部分的細胞懸浮液，保留小部分細胞懸浮液作為下一次培養(yǎng)的種子細胞，然后加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)的方法。21、光自養(yǎng)培養(yǎng)： 光自養(yǎng)微繁殖技術(shù)又稱

5、無糖培養(yǎng)微繁殖技術(shù)，是指培養(yǎng)容器中的植物在人工光照條件下，吸收CO2 進行光合作用，通過完全自養(yǎng)的方法進行生長和繁殖的方法。頁腳頁眉22 、外植體： 是指用于離體培養(yǎng)的活的植物組織、器官等材料，它是植物離體培養(yǎng)的基礎(chǔ)材料。23 、快速繁殖：就是應(yīng)用組織和細胞培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖植物新品種或新品系，使其在一定時間內(nèi)繁衍出一定數(shù)量與母本相同的植株。24 、污染： 污染是指在組織培養(yǎng)過程中，微生物進入培養(yǎng)體系，在培養(yǎng)的材料上或培養(yǎng)容器內(nèi)的其他部位繁殖和生長的現(xiàn)象。25 、植物脫毒： 就是利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，脫除植物細胞中侵染的病毒，生產(chǎn)健康的繁殖材料。26 、褐變： 外植體在脫分化和再分化過程中，分泌

6、褐色物質(zhì)使培養(yǎng)基和外植體本身變褐的現(xiàn)象。27 、玻璃化： 植物組織培養(yǎng)中分化出半透明的畸形試管植株（玻璃化苗）的現(xiàn)象。28、29 、指示植物鑒定：將待測植物的汁液接種到指示植物上，如果被測植物帶有病毒，指示植物就會出現(xiàn)特定癥狀30 、指示植物： 是指具有能夠辨別某種病毒的?；园Y狀的寄主植物。31 、花藥培養(yǎng)：是指把發(fā)育到一定階段的花藥接種到人工培養(yǎng)基上，使其發(fā)育和分化成植株的過程。32 、花粉培養(yǎng)：又叫小孢子培養(yǎng)，是從花藥中分離出花粉粒，使之成為分散的或游離的狀態(tài)，通過培養(yǎng)使花粉粒脫分化，進而發(fā)育成完整植株的過程。33 、雄核發(fā)育： 在離體條件下由花粉產(chǎn)生單倍體胚和植株的過程。34 、花粉二

7、型性：在天然花粉群體中，除正常花粉外，還存在一部分發(fā)育遲緩、體積小、染色淺的異?；ǚ鄣默F(xiàn)象。35 、 E 花粉： 具有雄核發(fā)育的潛力（胚胎發(fā)生能力）的異?；ǚ?。36 、胚性發(fā)育： 幼胚接種到培養(yǎng)基上以后，仍然按照在活體內(nèi)的發(fā)育方式發(fā)育，最后形成成熟胚 (有時甚至可能類似種子 )，然后再按種子萌發(fā)途徑出苗形成完整植株。37 、成熟胚培養(yǎng)：是指成熟的胚培養(yǎng)，實質(zhì)是胚的離體萌發(fā)生長38 、幼胚培養(yǎng)： 是指未發(fā)育成熟的胚培養(yǎng)39 、早熟萌發(fā)： 幼胚接種后，離體胚不繼續(xù)胚性生長，而是在培養(yǎng)基上迅速萌發(fā)成幼苗40 、植物胚乳培養(yǎng)：采用人工的方法將胚乳從種子中分離出來，在人工培養(yǎng)的條件下，使其發(fā)育成正常植株

8、。41 、離體授粉：在離體培養(yǎng)的胚珠、胎座或柱頭上授粉，然后通過胚珠或子房培養(yǎng)形成有萌發(fā)能力的種子的過程。42 、離體受精： 應(yīng)用人工培養(yǎng)的方法在人工控制的條件下分離精卵細胞，并使其融合形成合子的過程。43 、雌核發(fā)育： 在離體條件下由未授粉胚囊產(chǎn)生單倍體胚和植株的過程44 、薄層細胞培養(yǎng)：是從外植體的表皮撕下數(shù)層細胞（表皮細胞和薄壁組織）于合適的培養(yǎng)基上進行的離體培養(yǎng)。現(xiàn)在也將外植體橫切成1mm 厚的薄片進行的培養(yǎng)統(tǒng)稱為薄層培養(yǎng)。45、單細胞培養(yǎng)： 分離植物的單個細胞接種到培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)的方法.46、細胞懸浮培養(yǎng)：是指將單個的游離細胞或小細胞團在液體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)增殖的技術(shù)。47、平板培

9、養(yǎng)法：將一定量的細胞接種或混合到裝有一薄層固體培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿內(nèi)進行培養(yǎng)的方法。特點：篩選效率高、篩選量大、操作簡單。48 、看護培養(yǎng)：在固體培養(yǎng)基上置入一塊活躍生長的愈傷組織，再在愈傷組織放一小片濾紙，待濾紙濕潤后將細胞接種于濾紙上培養(yǎng)的方法。特點：簡單方便，不能在顯微鏡下追蹤頁腳頁眉細胞的分裂。49 、初生代謝物：維持細胞生命活動所必須的化合物。次生代謝物： 利用初級代謝產(chǎn)物經(jīng)不同的生物代謝途徑生產(chǎn)的不同代謝中間產(chǎn)物和終產(chǎn)物的過程。50 、激發(fā)子： 是指能夠誘導(dǎo)植物細胞的一個反應(yīng)并形成細胞特征性自身防御反應(yīng)的分子。51 、生長偶聯(lián)型：產(chǎn)物生產(chǎn)和細胞生長呈正比的類型。52 、非生長偶聯(lián)型：產(chǎn)物

10、只在細胞停止生長后合成。53 、植物原生質(zhì)體：是指除去細胞壁后，被質(zhì)膜包圍的“裸露細胞”。54 、原生質(zhì)體培養(yǎng)：是指將原生質(zhì)體放在人工配制的培養(yǎng)基上和人工控制的條件下培養(yǎng)成再生植株的過程。55 、出芽： 在原生質(zhì)體培養(yǎng)初期新細胞壁形成，由于細胞壁的一部分變?nèi)趸蛘卟煌暾?，使原生質(zhì)體出現(xiàn)細胞質(zhì)的局部膨脹，由于細胞的內(nèi)壓而使細胞質(zhì)突出呈芽狀。56 、植物細胞融合（體細胞雜交）：指把兩種不同基因型個體或不同種、屬、科生物細胞的原生質(zhì)體分別分離出來， 再用一定的技術(shù)融合成一個新的雜種細胞， 乃至發(fā)育成雜種植株的過程。57 、細胞質(zhì)雜種：只含有親本一方的核基因組而含有親本雙方的細胞質(zhì)基因（葉綠體和線粒體基

11、因）的細胞雜種58 、無性系變異：植物的組織、細胞、原生質(zhì)體在離體培養(yǎng)的條件下所得的培養(yǎng)物及再生植株中出現(xiàn)的變異59 、變異體： 不加任何選擇壓力而篩選出的變異個體稱為變異體。60 、突變體： 經(jīng)過施加選擇壓力所選出的無性系變異，稱為突變體。61 、突變體篩選： 從離體培養(yǎng)的植物材料中，篩選擬定目標突變體的方法，稱為突變體篩選。62 、正選擇： 是指在培養(yǎng)物中加入對正常細胞有毒的化學(xué)物質(zhì)，使正常細胞不能生長，而突、變體可以生長，從而選出突變體的方法。63 、負選擇： 在特定的培養(yǎng)基上或培養(yǎng)條件下使突變的細胞死亡，而正常細胞可以生長，從而選出突變體的方法。64 、超低溫保存：在冰凍保護劑的保護下

12、，將生物材料在超低溫（ -80 以下）下保存，最大限度地抑制生理代謝活動，降低劣變頻率，達到長期保存種質(zhì)資源的目的方法。65 、植物遺傳轉(zhuǎn)化：是指利用重組DNA 技術(shù)，將外源基因?qū)胫参锛毎?，外源基因與受體植物染色體整合并穩(wěn)定遺傳和表達的過程或技術(shù)。66 、組織器官受體系統(tǒng)：是指以植物的組織器官為轉(zhuǎn)基因的受體，然后通過脫分化和再分化獲得再生植株的受體系統(tǒng)。簡答題1、植物細胞工程在植物育種上的應(yīng)用答：（ 1）種質(zhì)資源的保存和創(chuàng)新（ 2 ）植物新品種的培育（ 3 ）植物新品種的快繁和種性的保持2、接種時防止污染的方法：答：（ 1 ）環(huán)境無菌控制頁腳頁眉（ 2 ）呼吸控制（ 3 ）交叉污染控制（ 4

13、 ）接種動作快3、植物組織和細胞培養(yǎng)的基本程序答：（ 1 ）選擇實驗材料（ 2 ）對實驗材料進行消毒（ 3 ）中間繁殖體誘導(dǎo)（ 4 ）中間繁殖體繁殖（ 5 ）中間繁殖體分化（ 6 ）試管苗移栽4、污染的類型答：真菌污染、細菌污染、酵母、螨蟲、混合污染5、器官發(fā)生形成再生植株的方式。答：（ 1 ）先芽后根：多數(shù)植物（ 2 ）先根后芽：顛茄（ 3 ）在愈傷組織的不同部位形成根和芽，再通過維管組織的聯(lián)系形成完整的植株。6、影響器官形成的因素?答：（ 1 ）外植體類型、基因型（2 ）激素種類與比例，生長素 / 細胞分裂素比值高，誘導(dǎo)生根；比值低，誘導(dǎo)生芽；比值合適，有利于誘導(dǎo)愈傷組織繁殖。（ 3 ）培

14、養(yǎng)基種類：固態(tài)、液態(tài)（ 4 ）環(huán)境條件：光照、溫度（ 5 ）培養(yǎng)方法7、植物組織和細胞培養(yǎng)的主要方法答：（ 1 ）固體培養(yǎng)：瓊脂培養(yǎng)、固體平板培養(yǎng)、看護培養(yǎng)。（2 ）液體培養(yǎng)：靜止液體培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)、反應(yīng)器大規(guī)模培養(yǎng) -分批培養(yǎng)、半連續(xù)培養(yǎng)、連續(xù)培養(yǎng)。8、細胞脫分化過程中生理活動與細胞結(jié)構(gòu)的變化。答：分化細胞：細胞核較小，核位于細胞邊緣，細胞中央有大液泡，細胞體內(nèi)核糖體密度較低，多聚核糖體數(shù)目較少。脫分化后：細胞質(zhì)顯著變濃，大液泡消失，核體積增加并逐漸位移至細胞中央。9、固體培養(yǎng)有什么特點？答：（ 1 ）適合于各種外植體和組織培養(yǎng)的各個階段（ 2 ）有利于氣體交換（ 3 ）防止或減少玻璃化（

15、4 ）不利于代謝物的擴散頁腳頁眉10 、靜止液體培養(yǎng)有什么特點？答：（ 1 ）可用于組織培養(yǎng)的各個階段（2 ）減少成本（淺層液體培養(yǎng)）（3 ）利于代謝物的擴散 ,減小自體抑制效應(yīng)（4 ）擴大營養(yǎng)接觸面（5 ）不利于氣體交換（6 ）易誘導(dǎo)玻璃化11 、懸浮培養(yǎng)有什么特點？答：（ 1 ）可用于組織培養(yǎng)的誘導(dǎo)、繁殖和分化階段（ 2 ）增加培養(yǎng)物與液體接觸面，促進營養(yǎng)吸收（ 3 ）利于代謝物的擴散（ 4 ）有利于氣體交換（ 5 ）需要一定的設(shè)備12 、成批培養(yǎng)有什么特點？答：（ 1 ）是一個放大的懸浮培養(yǎng)（2 ）培養(yǎng)裝置和操作簡單（3 ）培養(yǎng)周期短（4 ）檢測困難（5 ）成本高13 、連續(xù)培養(yǎng)有什么特

16、點？答：（ 1 ）延長細胞生長周期，增加目的產(chǎn)物產(chǎn)量（ 2 ）便于對系統(tǒng)的檢測（ 3 ）裝置復(fù)雜，對反應(yīng)器設(shè)計要求高14 、半連續(xù)培養(yǎng)有什么特點？答：（ 1 ）節(jié)約種子細胞生產(chǎn)產(chǎn)成本（2 ）保留的培養(yǎng)液有利于細胞啟動（3 ）下一輪培養(yǎng)細胞的同步性差15 、光自養(yǎng)培養(yǎng)的特點答： 1）生長速度快，生長發(fā)育均勻。（ 2 ）減少了因高濕 ,弱光等引起的生理及形態(tài)的異常。（ 3 ）可以簡化或省略馴化過程，移栽成活率高。（ 4 ）不需糖，減少了因污染引起的植物損失。（ 5 ）光合成和發(fā)根得以促進，可減少生根植物生長調(diào)節(jié)劑的使用。（ 6 ）需要特殊的設(shè)備16 、影響體細胞遺傳與變異的因素答：（ 1 ）供體植

17、物（2 ）培養(yǎng)基及培養(yǎng)方式（3 ）繼代培養(yǎng)次數(shù)頁腳頁眉17 、什么叫快速繁殖？組織培養(yǎng)快速繁殖有何特點？答：快速繁殖就是應(yīng)用組織和細胞培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖植物新品種或新品系，使其在一定時間內(nèi)繁衍出一定數(shù)量與母本相同的植株。優(yōu)點：（ 1）快速（2 ）周年生產(chǎn)（3 ）省地、省勞力（4 ）提高種苗質(zhì)量（5 ）固定雜種優(yōu)勢（6 ）適合于各種類型的作物18 、怎樣進行外植體選擇？中間繁殖體誘導(dǎo)培養(yǎng)、芽分化培養(yǎng)、 根分化培養(yǎng)、 試管苗移栽？答：（一）培養(yǎng)材料的選擇（ 1 ）健壯無病蟲害、具有該品種的典型性狀、生命力旺盛（ 2 ）植物在自然條件下繁殖特點（ 3 ）外植體的取材部位、大小和生理狀態(tài)（ 4 ）易培養(yǎng)

18、、易消毒（二）中間繁殖體誘導(dǎo)培養(yǎng)（ 1 ）外植體消毒（誘導(dǎo)階段）（ 2 ）接種培養(yǎng)（ 3 ）觀察記錄和污染材料的處理（ 4 ）選擇無污染的材料（繼代培養(yǎng)階段）（ 5 ）確定繁殖培養(yǎng)方法、配制培養(yǎng)基（ 6 ）切割接種（ 7 ）培養(yǎng)和繼代（三）芽（根）分化培養(yǎng)（ 1 ）選擇無污染的繼代培養(yǎng)材料（芽分化材料）（ 2 ）確定繁殖培養(yǎng)方法、配制芽（根）分化培養(yǎng)基（ 3 ）接種與培養(yǎng)，誘導(dǎo)芽（根）分化（四）試管苗移栽（ 1 ）移栽基質(zhì)的選擇、消毒（ 2 ）試管苗出瓶（ 3 ）試管苗移栽（ 4 ）移栽后的管理19 、影響植物快繁的因素？怎樣進行香蕉苗的快速繁殖？答：（ 1 ）基因型（2 ）外植體的種類（3

19、）激素種類和配比香蕉苗快速繁殖的步驟：（ 1 ）選擇健壯無病蟲害、具有該品種的典型性狀、生命力旺盛的植株（ 2 ）取幼嫩的莖尖作為外植體（ 3 ）確定繁殖培養(yǎng)方法、配制繼代培養(yǎng)培養(yǎng)基頁腳頁眉（ 4 ）切割接種（ 5 ）繼代培養(yǎng)，生產(chǎn)脫毒材料（ 6 ）選擇無污染的長勢良好的中間繁殖體（ 7 ）配制芽分化培養(yǎng)基（ 8 ）接種，誘導(dǎo)芽分化（ 9 ）選取無污染、芽分化良好的材料（ 10 ）配制根分化培養(yǎng)基（ 11 ）接種，誘導(dǎo)根分化，形成完整的香蕉苗20 、植物快速繁殖過程中存在的問題及其解決方案是什么？答：問題：污染、褐化、玻璃化、變異污染的控制：（1 ）材料帶菌選擇帶菌少或不帶菌材料材料的預(yù)處理建

20、立可靠高效消毒技術(shù)體系培養(yǎng)基中加入抗生素（2 ）接種污染防止呼吸污染維護超凈工作臺的功能防止交叉污染減少接種室的菌源（3 ）環(huán)境污染及時清理污染物經(jīng)常對環(huán)境進行滅菌處理環(huán)境溫濕度控制用塑料袋代替培養(yǎng)瓶(4) 培養(yǎng)基帶菌按滅菌要求進行培養(yǎng)基滅菌培養(yǎng)基放置三天后選用無菌培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入足量的抑菌物質(zhì)防止玻璃化的措施：（ 1 ）加強氣體交換（ 2 ）提高光強（ 3 ）采用適宜的培養(yǎng)基（ 4 ）采用適宜的激素、糖和固化劑（ 5 ）采用其他化學(xué)物質(zhì)如青霉素、氯化膽堿，激素合成前體等。減少試管苗變異的措施：（ 1 ）選擇合適的基因型（ 2 ）選擇合適的外植體（ 3 ）采用適宜的植物生長調(diào)節(jié)劑（ 4 ）采

21、用適宜的培養(yǎng)條件（ 5 ）控制繼代次數(shù)頁腳頁眉防止外植體褐變的措施：（ 1 ）選擇適當?shù)耐庵搀w（ 2 ）對外植體進行預(yù)處理（ 3 ）選用適當培養(yǎng)基配方（ 4 ）控制培養(yǎng)條件（ 5 ）抗褐變劑和吸附劑21 、植物脫毒和快速繁殖的意義？（植物組織培養(yǎng)在生產(chǎn)脫毒苗木上有何意義？）答：（ 1 ）能夠有效保持優(yōu)良品種特性。（2 ）生產(chǎn)無病毒種苗，防止品種退化（3 ）快速繁殖新品種，加速優(yōu)良品種推廣（4 ）節(jié)約耕地，提高農(nóng)產(chǎn)品商品產(chǎn)出率（5 ）便于運輸22 、植物脫毒的主要方法有哪些？各有何優(yōu)缺點？應(yīng)如何選擇應(yīng)用?答：（ 1 ）芽增殖（2）不定芽增殖（3）體細胞胚增殖（4）愈傷組織增殖24 、論述莖尖培養(yǎng)

22、脫毒的原理，方法及影響其脫毒效果的因素。答：原理： 病毒在植物體內(nèi)的分布是不均一的，越靠近生長點，病毒濃度越稀，因此，采用小的莖尖進行離體培養(yǎng)有可能消除植物病毒。方法：（ 1 ）被脫毒植物攜帶病毒的診斷（ 2 ）脫毒母體材料的選擇（ 3 ）材料預(yù)處理以鈍化病毒（ 4 ）莖尖分生組織培養(yǎng)再生植株（ 5 ）莖尖分生組織苗病毒檢驗（ 6 ）脫毒苗保存及脫毒苗組織快繁因素：（ 1 ）病毒種類（ 2 ）莖尖大?。?3 ）快繁途徑（ 4 ）脫毒方法（ 5 ）其他病毒干擾25 、什么叫脫毒苗? 怎樣生產(chǎn)脫毒苗？答：脫毒苗是指利用脫毒技術(shù)生產(chǎn)的不含目標病毒的種苗。利用植物組織和細胞培養(yǎng)的保守性來生產(chǎn)大量優(yōu)質(zhì)種

23、苗。26 、如何鑒定莖尖培養(yǎng)而成的苗確實是無毒的？答、主要運用指示植物鑒定和血清鑒定兩種方法頁腳頁眉27 、怎樣保存和利用無毒苗？答：保存在試管中不斷繼代培養(yǎng)脫毒苗，利用：建立脫毒脫毒種苗生產(chǎn)繁殖網(wǎng)絡(luò)體系；木本植物建立隔離的脫毒苗母本園28 、為什么要進行花藥和花粉培養(yǎng)？答：進行花藥和花粉培養(yǎng)的目的是為了獲得單倍體。29 、簡述單倍體的特點和應(yīng)用.答：特點：、（ 1 ）體細胞染色體數(shù)減半；（ 2 ）生長發(fā)育弱，體形小、各器官明顯減小；（ 3 ）雌雄配子嚴重敗育，有的甚至不能進入有性世代。應(yīng)用：（ 1 ）迅速獲得純合型材料，縮短育種年限（ 2 ）獲得育種中間材料 ;（ 3 ）與誘變育種相結(jié)合可以

24、提高誘變頻率;（4 ）與細胞融合相結(jié)合，使這一育種途徑更具有實際應(yīng)用意義;（ 5 ）作為遺傳工程受體更為有效 ;（ 6 ）用作基礎(chǔ)遺傳研究的各個領(lǐng)域.30 、怎樣進行花藥和花粉培養(yǎng)？31 、影響花藥和花粉培養(yǎng)的因素？答： (1) 供試材料的基因型(2) 供試材料的生理狀態(tài)頁腳頁眉(3) 花粉發(fā)育時期 ,最適宜的時期為：單核中晚期到雙核早期(4) 花藥預(yù)處理(5) 培養(yǎng)基成分、激素配比(6) 培養(yǎng)條件(7) 有機附加物、活性炭(8) 接種密度32 、怎樣進行植株的倍性鑒定和染色體加倍？答：形態(tài)分析和染色體分析浸泡法、涂抹法：用一定濃度的秋水仙素處理植株愈傷組織加倍法： 取合適外植體進行誘導(dǎo)愈傷組

25、織， 經(jīng)過繼代培養(yǎng)和分化培養(yǎng)后得到的再生植株中有可能有染色體加倍植株。33 、花藥培養(yǎng)中存在的問題和解決方法答： 1）愈傷組織誘導(dǎo)率和植株再生率不高（2 ）白化苗2、何謂胚培養(yǎng)？簡述胚培養(yǎng)的意義。答：胚培養(yǎng)就是采用人工的方法將胚從種子中分離出來， 在人工培養(yǎng)的條件下， 使其他發(fā)育成正常植株。（ 1 ）克服雜交育種中雜種胚的早期夭折（ 2 ）打破種子休眠，克服核果類胚的后熟作用（ 3 ）克服珠心胚干擾，提高育種效率（ 4 ）種子生活力測定（ 5 ）獲得單倍體（ 5 ）理論研究3、離體幼胚培養(yǎng)胚發(fā)育有幾種類型？各有何特點？答：胚性發(fā)育：一個幼胚將來就是一個植株。早熟萌發(fā)：可獲得大量植株愈傷組織：可

26、獲得大量胚性細胞，良好的遺傳受體，分離原生質(zhì)體的來源4、怎樣進行幼胚培養(yǎng)？影響離體幼胚培養(yǎng)的主要因素有哪些？答：（ 1 ）培養(yǎng)基設(shè)計與配制（ 2 ）幼胚剝離： 取材時期：球形胚 -魚雷形胚（ 3 ）接種培養(yǎng)，培養(yǎng)條件的控制（是否需要特殊處理）（ 4 ）試管苗移栽影響因素：（ 1 ）基因型（ 2 ）胚齡和放置方式（ 3 ）培養(yǎng)基：滲透壓、激素水平、附加成分、蔗糖濃度（ 4 ）培養(yǎng)條件：光照、溫度頁腳頁眉5、簡述胚乳培養(yǎng)的意義。答：研究胚乳細胞的全能性。在離體培養(yǎng)條件下，胚乳細胞是否與其它體細胞和花粉一樣，具有全能性而再生植株。6、怎樣進行胚乳培養(yǎng)？答：種子消毒、胚乳的分離、接種培養(yǎng)、試管苗移栽7

27、、簡述影響胚乳培養(yǎng)的因素。答：（ 1 ）胚乳的發(fā)育時期（ 2 ）基因型（ 3 ）預(yù)處理（ 4 ）培養(yǎng)條件：高濃度的生長素、較高的pH（ 5 ）胚因子2、為什么要進行子房或胚珠培養(yǎng)？答：（ 1 ）可以獲得單倍體（ 2 ）獲得種子（ 3 ）建立離體受精系統(tǒng)3、怎樣進行子房或胚珠培養(yǎng)答：（ 1 ）選取適宜大小的花蕾（ 2 ）消毒以獲得無菌的花蕾（ 3 ）分離子房或胚珠（ 4 ）接種培養(yǎng)（ 5 ）試管苗移栽（ 6 ）植株倍性鑒定4、影響子房或胚珠培養(yǎng)的因素有哪些？答：（ 1 ）胚囊的發(fā)育時期（2 ）基因型（3 ）激素影響、蔗糖濃度（4 ）接種方式（5 ）胚因子6、怎樣進行離體授粉？（簡述離體受精的一般

28、程序。）答：未授粉的子房花蕾或花藥消毒消毒分離胚珠分離花粉胚珠培養(yǎng)、授粉合子種子頁腳頁眉7、影響單細胞培養(yǎng)的因素答：（ 1 ）條件培養(yǎng)基的作用（ 2 ）細胞密度（ 3 ）生長激素（ 4 ）二氧化碳濃度（ 5 ）適當調(diào)節(jié) pH 值和提高培養(yǎng)基中鐵的含量有時能提高置板率8、生物反應(yīng)器的類型及其特點答：（ 1 ）攪拌式生物反應(yīng)器，混合程度高、適應(yīng)性廣、反應(yīng)器內(nèi)溫度、 PH、溶氧及營養(yǎng)液濃度較易控制；易對植物細胞造成傷害。培養(yǎng)周期長，易污染。（ 2 ）氣動式生物反應(yīng)器，剪切力小、結(jié)構(gòu)簡單、避免污染（ 3 ）固定化細胞生物反應(yīng)器，較易控制培養(yǎng)系統(tǒng)理化環(huán)境、有利于次生代謝產(chǎn)物的合成，可以連續(xù)生產(chǎn)（ 4 ）

29、光照生物反應(yīng)器，（ 5 ）轉(zhuǎn)鼓式生物反應(yīng)器懸浮系統(tǒng)均一、低剪切環(huán)境、供養(yǎng)效率高、防止細胞粘壁的優(yōu)點。2、怎樣進行種細胞的選擇、增殖和擴大培養(yǎng)種細胞的篩選：外植體愈傷組織的誘導(dǎo)和培養(yǎng)單細胞分離和培養(yǎng)細胞系的篩選單細胞克隆結(jié)合誘變和壓力篩選是種細胞篩選的常用方法種細胞的培養(yǎng)目的 :獲得大量活躍生長的細胞群體方法 :采用懸浮培養(yǎng)注意事項 :防止細胞株的退化和變異3、簡述利用細胞大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)次生代謝物程序及其關(guān)鍵工程技術(shù)。工程技術(shù)：成批培養(yǎng)、半連續(xù)培養(yǎng)、連續(xù)培養(yǎng)頁腳頁眉4、怎樣提高細胞次生代謝物的產(chǎn)量?答：（ 1 ）選擇適宜的起始材料（ 2 ）培養(yǎng)基成分（ 3 ）在培養(yǎng)基中補加適當?shù)那绑w物質(zhì)、中間代

30、謝物或旁路抑制劑，可以有效的提高目的次生代謝物的產(chǎn)量。5、次生代謝物分離的方法有哪些？答：沉淀分離、層析分離、萃取分離6、簡述次生代謝物生產(chǎn)意義和現(xiàn)狀答：各種生物體在一定條件下合成各種各樣的物質(zhì)，支撐著人類生存和發(fā)展7、如何生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物的具體流程。答：（ 1 ）選擇自然狀態(tài)下產(chǎn)生天然產(chǎn)物的器官、組織作為外植體（ 2 ）確定實驗方案，配制相應(yīng)培養(yǎng)基（ 3 ）處理外植體得到相應(yīng)的單細胞（ 4 ）運用懸浮培養(yǎng)，誘導(dǎo)單個細胞形成愈傷組織（ 5 ）將單個細胞形成的愈傷組織取一半進行成分含量分析，另一半保留培養(yǎng)（ 6 ）選出高產(chǎn)的細胞系后，及對對應(yīng)的愈傷組織進行增殖培養(yǎng)，再進入懸浮培養(yǎng)過程，為進一步規(guī)

31、?；囵B(yǎng)提供種子細胞（ 7 ）運用氣動式生物反應(yīng)器進行培養(yǎng)（ 8 ）分離次生代謝產(chǎn)物8、原生質(zhì)體培養(yǎng)的意義？答：（ 1 ）是體細胞雜交育種的材料（ 2 ）是轉(zhuǎn)基因的良好受體（ 3 ）是開展基礎(chǔ)理論研究的良好材料（ 4 ）是分離細胞器的良好材料9、分離原生質(zhì)體的方法哪些？答：（ 1 ）機械分離法優(yōu)點：可避免酶制劑對原生質(zhì)體的破壞作用。缺點：獲得完整的原生質(zhì)體數(shù)量較少。（ 2 ）酶解分離法優(yōu)點：可獲得大量原生質(zhì)體，幾乎所有植物均適用。缺點：酶制劑會影響所獲原生質(zhì)體的活力。10 、影響原生質(zhì)體數(shù)量和活力的因素有哪些？答：（ 1 ）細胞降解酶的種類和組合（2 ）滲透壓穩(wěn)定劑（3 ）質(zhì)膜穩(wěn)定劑頁腳頁眉（

32、 4 ） pH 值的影響（ 5 ）溫度（ 6 ）植物材料的生理狀態(tài)11 、原生質(zhì)體的純化方法有哪些？答：（ 1）沉降法：利用比重原理，在具有一定滲透壓的溶液中先進行過濾后低速離心，使純凈完整的原生質(zhì)體沉積于試管底部。優(yōu)點：純化收集方便，操作簡單，原生質(zhì)體丟失少。缺點：易造成原生質(zhì)體相互擠壓而引起破碎，且純度不高。（ 2 ）漂浮法：采用比原生體比重大的高滲溶液，使原生質(zhì)體漂浮在溶液表面。優(yōu)點：可收集到較純凈的原生質(zhì)體。可避免離心引起的原生質(zhì)體破裂或損傷，所用試劑簡單，成本低廉。缺點：原生質(zhì)體獲得率較低。（ 3 ）界面法：采用兩種比重不同的溶液，使原生質(zhì)體牌兩液相的界面之中。優(yōu)點：可收集到數(shù)量較大

33、的純凈原生質(zhì)體，同時可避免收集過程中原生質(zhì)體因相互擠壓而破碎。12 、原生質(zhì)體活力測定方法答：（ 1 ）熒光素雙醋酸酯染色法（2 ）酚藏花紅染色法（3 ）熒光增白劑染色法（4 ）伊凡藍染色法13 、原生質(zhì)體的培養(yǎng)有哪些方法？答： 1、飼養(yǎng)層培養(yǎng)法2、微室培養(yǎng)法3、懸滴培養(yǎng)法14 、原生質(zhì)體的培養(yǎng)程序答：（ 1 ）原生質(zhì)體分離（2 ）原生質(zhì)體純化（3 ）原生質(zhì)體培養(yǎng)（4 ）細胞壁再生（ 5 ）細胞分裂形成細胞團（ 6 ）器官形成植株再生15 、影響原生質(zhì)體培養(yǎng)的因素？答：（ 1 ）原生質(zhì)體的活力（2 ）原生質(zhì)體密度（3 ）細胞壁再生速度（ 4 ）原生質(zhì)體培養(yǎng)的營養(yǎng)和環(huán)境（ 5 ）基因型（ 6 ）

34、分離的材料（ 7 ）培養(yǎng)方法頁腳頁眉（8 ）原生質(zhì)體粘連16 、植物細胞融合的意義?答：（ 1 ）克服種、屬間有性雜交不親和性障礙，擴大遺傳物質(zhì)的重組范圍。（ 2 ）為攜帶外源遺傳物質(zhì)（信息）的大分子滲入細胞創(chuàng)造條件。（ 3 ）創(chuàng)造新的遺傳變異、新的育種材料甚至新物種。17 、細胞融合的誘導(dǎo)方法及融合劑?答：（ 1 ） NaNO 3 融合法（ 2 ）多聚化合物法（ 3 ）高 PH 高 Ca 2+法（ 4 ）聚乙二醇法（ PEG ）（ 5 ）電融合法18 、植物細胞融合的程序?答：（ 1 ）原生質(zhì)體分離（ 7 ）原生質(zhì)體純化（ 8 ）原生質(zhì)體融合（ 9 ）細胞雜種的選擇（ 10 ）傷組織形成器官

35、分化植株再生（ 11 ）雜種植株鑒定19 、融合體的類型?答：自體融合發(fā)生在親本原生質(zhì)體自身，結(jié)果是獲得“同核體”。異體融合由不同種的雙親原生質(zhì)體融合而得到“異核體”。20 、細胞雜種的選擇和鑒定?答：（一）互補選擇法（）激素自養(yǎng)型互補選擇（）葉綠體缺失互補選擇（）營養(yǎng)缺陷型互補選擇（）抗性互補選擇（）抗光性互補選擇（二）機械選擇法（）利用天然顏色標記分離雜種細胞（）利用熒光素標記分離雜種細胞（）應(yīng)用熒光激活細胞分選儀自動分離雜種細胞（）應(yīng)用流式細胞儀分離雜種細胞（三）組織培養(yǎng)篩選法雜種植株的鑒定方法：頁腳頁眉（）雜種植物形態(tài)特征、特性鑒定（）雜種植物的核型分析（染色體顯帶技術(shù)）（）生化分析（

36、同工酶）（）分子標記鑒定21 、細胞質(zhì)雜種產(chǎn)生的途徑答：（ 1 ）一個正常的原生質(zhì)體與一個去核的原生質(zhì)體融合；（ 2 ）一個正常的原生質(zhì)體與一個核失活的原生質(zhì)體融合；（ 3 ）用原生質(zhì)體與亞原生質(zhì)體或微原生質(zhì)體融合；（ 4 ）在雜種細胞的增殖過程中一個親本的染色體丟失；（ 5 ）用抑制劑處理得到胞質(zhì)雜種等。22 、無性系變異產(chǎn)生的原因、類型和影響因素答：原因：（1 ）外植體本身產(chǎn)生的變異（2 ）生長環(huán)境改變造成的（3 ）自然變異和誘變（4 ）可轉(zhuǎn)位基因的激活類型：（1 ）染色體數(shù)目變異（2 ）染色體結(jié)構(gòu)變異（3 ）基因結(jié)構(gòu)變異（4 ）基因表達的改變影響因素：（ 1 ）供體植株（ 2 ）培養(yǎng)基和培養(yǎng)方式（ 3 ）繼代次數(shù)23 、突變體篩選的程序和方法？答： 1、誘變材料的準備（預(yù)處理）2、材料培養(yǎng)：（ 1 ）植株再生 -選擇變異（ 2 體突變細胞系的篩選植株再生3、突變體鑒定方法：（1 ）細胞水平篩選A 直接篩選法：是指在設(shè)計的選擇條件下，使培養(yǎng)細胞和再生植株獲得直接感觀上的差異，將突變個體和非突變個體分離開來。B 間接篩選法：是一種借助于與突變表現(xiàn)型有關(guān)的性狀作為選擇指標的篩選方法。（ 2 ）組織水平篩選“綠島法”是指在個體水平上誘