實驗診斷學標本采集方法2017

1、 實驗診斷學實驗診斷學 標本采集注意事項標本采集注意事項 李全亭李全亭 2017.2 主要內(nèi)容主要內(nèi)容：v標本采集的意義標本采集的意義v標本采集的原則標本采集的原則v標本采集的方法標本采集的方法 （痰標本、血標本（痰標本、血標本 尿標本、糞標本）尿標本、糞標本） 血液血液排泄物排泄物（糞、尿）（糞、尿）分泌物分泌物（痰、鼻分泌物）（痰、鼻分泌物）嘔吐物嘔吐物、體液體液（胸腔積液、腹腔積液）（胸腔積液、腹腔積液）脫落細胞脫落細胞（食道、陰道）（食道、陰道） 經(jīng)過經(jīng)過實驗診斷學實驗診斷學技術(shù)和方法對其進行檢驗，作為技術(shù)和方法對其進行檢驗，作為判斷患者有無異常存在的依據(jù)判斷患者有無異常存在的依據(jù) 標

2、本采集：采取少許的標本采集：采取少許的實驗診斷學實驗室的專業(yè)設置4 標本采集的意義標本采集的意義v明確診斷明確診斷v觀察病情觀察病情v指導制定治療措施指導制定治療措施 遵照醫(yī)囑遵照醫(yī)囑 嚴格嚴格核對核對正確采集正確采集及時送檢及時送檢 認真認真準備準備標本采集的原則標本采集的原則v遵照醫(yī)囑遵照醫(yī)囑v認真準備：認真準備： 1）患者準備）患者準備 2）用物準備）用物準備 3）護士自身準備）護士自身準備v嚴格查對：嚴格查對：檢查項目、患者姓名、床號、檢查項目、患者姓名、床號、住院號住院號v正確采集：正確采集：方法、時間、量、容器方法、時間、量、容器v及時送檢及時送檢各種標本的采集各種標本的采集一、痰

3、標本的采集一、痰標本的采集二、咽拭子標本的采集二、咽拭子標本的采集三、尿標本的采集三、尿標本的采集四、糞便標本的采集四、糞便標本的采集五、血液標本的采集五、血液標本的采集 一、痰標本采集的區(qū)別一、痰標本采集的區(qū)別 分類分類 目的目的痰常規(guī)痰常規(guī)痰液一般形狀，涂片查細胞、痰液一般形狀，涂片查細胞、細菌、蟲卵等細菌、蟲卵等痰培養(yǎng)痰培養(yǎng)痰中的致病菌痰中的致病菌 痰標本痰標本留取留取能自理的患者：能自理的患者： 晨起后用清水漱口晨起后用清水漱口 以清晨第一口痰為宜以清晨第一口痰為宜 深吸氣后用力咳出氣管深處的痰液深吸氣后用力咳出氣管深處的痰液 不可混入漱口液、唾液、鼻涕等不可混入漱口液、唾液、鼻涕等

4、無法咳痰或不合作者：無法咳痰或不合作者： 用吸痰法收集（集痰器）用吸痰法收集（集痰器）痰標本采集注意事項痰標本采集注意事項1、不可將唾液、漱口水、鼻涕等混入痰液中、不可將唾液、漱口水、鼻涕等混入痰液中2、收集痰液宜在清晨，因此時痰量較多，痰內(nèi)細、收集痰液宜在清晨，因此時痰量較多，痰內(nèi)細菌也較多，提高陽性率菌也較多，提高陽性率痰培養(yǎng)：下呼吸道感染病原診斷細菌真菌病毒支原體、衣原體與立克次體原蟲寄生蟲咳痰途經(jīng)口咽部咳痰途經(jīng)口咽部v唾液中口咽部定植菌的濃度可達108-109/ml。v國內(nèi)常規(guī)痰標本中約半數(shù)存在唾液嚴重污染現(xiàn)象。不可避免地受到污染關(guān)于咳痰標本v在抗生素應用前采集痰標本v標本采集后12h

5、內(nèi)必須及時送檢v取標本前應摘去牙托，清潔口腔如刷牙和漱口v深咳，采集標本過程中要有專業(yè)的醫(yī)務人員指導痰培養(yǎng)的送檢次數(shù)v對于普通細菌性肺炎，痰標本送檢每天1次，連續(xù)23天。不建議24h內(nèi)多次采集，除非痰液外觀性狀出現(xiàn)改變；v懷疑分枝桿菌感染者，應連續(xù)收集3天清晨痰液送檢；v懷疑軍團菌或深部真菌感染，痰標本理想的送檢次數(shù)尚無定論。二、咽拭子標本采集二、咽拭子標本采集 目標：從目標：從咽部和扁桃體咽部和扁桃體取分泌物作細菌培取分泌物作細菌培養(yǎng)或病毒分離，協(xié)助診斷。養(yǎng)或病毒分離，協(xié)助診斷。操作步驟及要點操作步驟及要點操作前準備操作前準備 核對核對點燃酒精燈，指導患者張口發(fā)點燃酒精燈，指導患者張口發(fā)“啊

6、啊”音，音，用長棉簽蘸用長棉簽蘸 以敏捷、輕柔的動作擦拭以敏捷、輕柔的動作擦拭兩側(cè)腭弓、咽扁桃體上的分泌物，兩側(cè)腭弓、咽扁桃體上的分泌物，取畢，取畢，將試管口及棉塞在酒精燈火焰上消毒后將試管口及棉塞在酒精燈火焰上消毒后插入棉簽，塞緊。插入棉簽，塞緊。將棉簽插入將棉簽插入試管中送檢試管中送檢上呼吸道標本上呼吸道標本 咽拭子標本采集注意事項咽拭子標本采集注意事項v作真菌培養(yǎng)時，須在口腔潰瘍面采集分泌物作真菌培養(yǎng)時，須在口腔潰瘍面采集分泌物v避免交叉感染避免交叉感染v注意棉簽注意棉簽不要觸及其它部位不要觸及其它部位，防止污染標本，影，防止污染標本，影響其他結(jié)果響其他結(jié)果v避免在進食避免在進食2小時內(nèi)

7、采集標本，以小時內(nèi)采集標本，以防嘔吐防嘔吐抑菌區(qū)域的產(chǎn)生抑菌區(qū)域的產(chǎn)生由于棉中所含的由于棉中所含的脂肪酸以及從木脂肪酸以及從木棒中滲出的樹脂棒中滲出的樹脂和甲醛。和甲醛。三、尿標本的采集三、尿標本的采集 尿標本的分類尿標本的分類v尿常規(guī)標本尿常規(guī)標本v尿培養(yǎng)標本尿培養(yǎng)標本v12h或或24h尿標本尿標本1、尿常規(guī)標本、尿常規(guī)標本尿液的性狀：顏色、透尿液的性狀：顏色、透明度明度尿沉渣：管型、細胞、尿沉渣：管型、細胞、細菌細菌尿干化學：尿蛋白、尿尿干化學：尿蛋白、尿糖、酮體糖、酮體用物準備：一次性尿杯用物準備：一次性尿杯+尿沉渣管尿沉渣管標本量：標本量：8-10ml2、尿培養(yǎng)標本、尿培養(yǎng)標本 清潔外

8、陰、尿道口清潔外陰、尿道口囑患者排去前段尿囑患者排去前段尿用無菌尿杯留取用無菌尿杯留取 5-10ml中段尿液中段尿液避免污染避免污染 以晨起第一次尿液立即送檢不能用尿袋內(nèi)的尿液3、12h或或24h尿標本尿標本 尿生化或尿濃縮查結(jié)核桿菌尿生化或尿濃縮查結(jié)核桿菌 7pm(am)排空膀胱尿液排空膀胱尿液棄去棄去留取留取翌日翌日7am 全部留取存于帶蓋的清潔容器內(nèi)。全部留取存于帶蓋的清潔容器內(nèi)。 記錄尿量記錄尿量 混勻后混勻后 取取10ml送檢送檢 尿標本采集注意事項尿標本采集注意事項女患者女患者月經(jīng)期月經(jīng)期不宜留取尿標本不宜留取尿標本會陰部會陰部分泌物過多時分泌物過多時，應先清潔再沖洗，再收集。，應

9、先清潔再沖洗，再收集。做做早孕檢查早孕檢查試驗應留晨尿試驗應留晨尿留留取尿培養(yǎng)標本時，無菌操作取尿培養(yǎng)標本時，無菌操作留取留取12h或或24h尿標本，集尿瓶應放在陰涼處尿標本，集尿瓶應放在陰涼處 四、糞便標本采集四、糞便標本采集目的：目的：1、了解消化道炎癥、梗阻、出血、寄生蟲感染、了解消化道炎癥、梗阻、出血、寄生蟲感染2、了解消化道狀況，判斷胰腺的外分泌功能、了解消化道狀況，判斷胰腺的外分泌功能3、糞便隱血可作為消化道惡性腫瘤的篩查、糞便隱血可作為消化道惡性腫瘤的篩查4、檢查糞便中有無細菌判斷腸道感染、檢查糞便中有無細菌判斷腸道感染 種類種類 目的目的 容器容器常規(guī)常規(guī)查一般形狀查一般形狀便

10、盒便盒細菌培養(yǎng)細菌培養(yǎng)查致病菌查致病菌培養(yǎng)瓶培養(yǎng)瓶隱血標本隱血標本查肉眼不能察見的查肉眼不能察見的微量血液微量血液便盒便盒寄生蟲或蟲卵標本寄生蟲或蟲卵標本查寄生蟲查寄生蟲便盒便盒v便常規(guī)、大便培養(yǎng)便常規(guī)、大便培養(yǎng)種類種類操作要點操作要點常規(guī)標本常規(guī)標本排空膀胱。異常糞便挑取有排空膀胱。異常糞便挑取有膿血、粘液膿血、粘液的部分；外觀無異常的糞便應從中央取的部分；外觀無異常的糞便應從中央取材，材，2-5g大小大小細菌培養(yǎng)標本細菌培養(yǎng)標本用用無菌棉簽無菌棉簽取取糞便糞便中央部分或膿血、粘中央部分或膿血、粘液部分液部分2-5g致培養(yǎng)瓶內(nèi)，塞緊瓶蓋。致培養(yǎng)瓶內(nèi)，塞緊瓶蓋。隱血標本（隱血標本（OB） 檢查

11、前檢查前3天禁食肉類、肝、血、含大量天禁食肉類、肝、血、含大量綠葉素的食物或含鐵劑藥物綠葉素的食物或含鐵劑藥物，三天后留，三天后留取標本送檢。取標本送檢。寄生蟲或蟲卵標寄生蟲或蟲卵標本本蟲卵：不同部位的異常糞便蟲卵：不同部位的異常糞便5-10g蟯蟲：用透明膠帶粘肛門周圍蟯蟲：用透明膠帶粘肛門周圍阿米巴：便器加熱致人體體溫阿米巴：便器加熱致人體體溫五、血液標本的采集五、血液標本的采集v1、血液標本的種類：、血液標本的種類：全血全血、血清血清、血漿血漿v全血：全血：血常規(guī)血常規(guī)血沉血沉v血清血清：生化、免疫生化、免疫v血漿：凝血項目、血血漿：凝血項目、血流變、血栓彈力圖流變、血栓彈力圖v血培養(yǎng)：血

12、培養(yǎng)：血液中的致血液中的致病菌病菌30常用采血管類型 真空采血管產(chǎn)品基本類型真空采血管產(chǎn)品基本類型 頭蓋顏色臨床用途標本類型制 備 步 驟添 加 劑 紅色血清生化血清采血后輕顛倒混勻2-3次靜置1小時 離心 無（內(nèi)壁硅化處理，防止血液附壁） 黃色快速血清生化 血清采血后立即顛倒混勻8次靜置20分鐘離心 分離膠、促凝劑（內(nèi)壁硅化處理，防止血液附壁） 橙色快速血清生化血清采血后立即顛倒混勻 8次靜置20分鐘離心促凝劑：纖維蛋白酶（內(nèi)壁硅化處理，防止血液附壁） 淺藍色血凝試驗血漿采血后立即顛倒混勻 8次離心抗凝劑：檸檬酸鈉與血樣比為1:9 灰色血糖試驗血漿采血后立即顛倒混勻 8次離心抗凝劑：EDTA

13、，氟化鈉 綠色血流變、血栓彈力圖試驗血漿采血后立即顛倒混勻 8次離心抗凝劑：肝素鋰或肝素鈉 淺綠色快速血漿生化試驗血漿采血后立即顛倒混勻 8次離心肝素鋰 紫色血常規(guī) 血型 糖化血紅蛋白全血采血后立即顛倒混勻 8次試驗前混勻標本抗凝劑：EDTA-2K或EDTA-3K 黑色血沉全血采血后立即顛倒混勻 8次使用前混勻標本抗凝劑：檸檬酸鈉與血樣比為1：4全國臨床檢驗操作規(guī)程推薦多管血時采集順序33WS-T 225-2002推薦多管血時采集順序v特別注意特別注意:vEDTA管（紫）絕對不能放在管（紫）絕對不能放在血清管前血清管前，因其中，因其中的鉀可能對血清造成污染，特別會使血鉀增高。的鉀可能對血清造成

14、污染，特別會使血鉀增高。v采血管數(shù)較多時，凝血管先采十分必要，因為隨采血管數(shù)較多時，凝血管先采十分必要，因為隨著采血時間的延長，凝血因子會發(fā)生變化。著采血時間的延長，凝血因子會發(fā)生變化。口服葡萄糖耐量（OGTT）試驗v早餐空腹取血（空腹早餐空腹取血（空腹8-12小時后），取血后于小時后），取血后于5分鐘內(nèi)服完溶于分鐘內(nèi)服完溶于250-300ml水內(nèi)的無水葡萄糖水內(nèi)的無水葡萄糖75gv實驗過程中不喝任何飲料，不吸煙、不做劇烈運實驗過程中不喝任何飲料，不吸煙、不做劇烈運動、無須臥床動、無須臥床v從口服第一口糖水記時，于服糖后從口服第一口糖水記時，于服糖后30分鐘、分鐘、1小小時、時、2小時及小時及

15、3小時取血標本小時取血標本v試驗前試驗前3日每日碳水化合物攝入量不少于日每日碳水化合物攝入量不少于150g（3兩）兩）v試驗前停用影響試驗前停用影響OGTT的藥物，如避孕藥、利尿的藥物，如避孕藥、利尿劑、劑、-腎上腺能阻滯劑、苯妥因鈉、煙酸腎上腺能阻滯劑、苯妥因鈉、煙酸3-7天，天，服用糖皮質(zhì)激素者不做服用糖皮質(zhì)激素者不做OGTT試驗試驗 v血脂類測定血脂類測定v要求患者素食三天，空腹抽血，抽血前要求患者素食三天，空腹抽血，抽血前24小時小時不要做劇烈運動及飲酒不要做劇烈運動及飲酒v內(nèi)分泌系列檢測內(nèi)分泌系列檢測v注意患者生理期的變化，避免情緒過分激動，抽注意患者生理期的變化，避免情緒過分激動，

16、抽血前應休息一段時間（一般約血前應休息一段時間（一般約20分鐘）分鐘）血培養(yǎng)381.采血時機采血時機寒戰(zhàn)和發(fā)寒戰(zhàn)和發(fā)熱初期熱初期使用抗菌使用抗菌藥物前藥物前停藥停藥6-86-8小小時后或下時后或下次用藥前次用藥前血血培培養(yǎng)養(yǎng)的的采采集？集？39Text1Text2Text3Text4Text52.采血流程采血流程皮膚消毒皮膚消毒保持手的衛(wèi)生保持手的衛(wèi)生準備血培養(yǎng)瓶準備血培養(yǎng)瓶抽取血標本抽取血標本血標本采集的血標本采集的量量402.采血流程采血流程（一） 在每個血培養(yǎng)瓶上都有表明液體容量的刻度，在容積刻度上標明采集血液應該達到的液面高度。 8-10ml412.采血流程采血流程（二） 培養(yǎng)瓶消毒7

17、5%酒精酒精消毒，消毒，待干待干60s勿用含碘的勿用含碘的消毒液消毒消毒液消毒422.采血流程采血流程（三） 皮膚消毒：從穿刺部位由內(nèi)向外圓圈擦拭，直徑1-2英寸5-10cm穿刺部位風干，不能再觸摸穿刺部位風干，不能再觸摸432.采血流程采血流程（四） 采集血培養(yǎng)標本1）采用真空采血裝置能降 低污染(持針器+采血針）2）培養(yǎng)瓶放在采血部位旁 邊，垂直放置。3）持針器套于培養(yǎng)瓶頸部，將另一頭穿刺針刺入培養(yǎng)瓶。4）采集足夠血量。442.采血流程采血流程（五） 血培養(yǎng)瓶輕輕顛倒混勻6-8次。452.采血流程采血流程（六） 標注兩組信息病人條形碼信息（采血時間和部位）瓶身的條形碼揭一條貼于檢測申請單上

18、4647假陽性：假陽性：污染率污染率3-5%嚴格無菌技術(shù)操嚴格無菌技術(shù)操作作存在問題？存在問題？解決辦法？解決辦法？假陰性：假陰性：采血適應癥及時采血適應癥及時機機48血培養(yǎng)假陽性的危害 1、增加患者抗生素用量，破壞其微生態(tài)環(huán)境 2、延長了住院天數(shù) 3、延誤病情診斷 4、增加經(jīng)濟負擔 防止皮膚寄生菌或環(huán)境微生物污染493.采血套數(shù)及采血間隔 CLSI要求每次采集2-3套標本 每套應包括一個需氧培養(yǎng)瓶,一個厭氧培養(yǎng)瓶 一個靜脈穿刺點只能采集1套血培養(yǎng) 采集第2套血培養(yǎng)應該選擇第2個靜脈穿刺點503.采血套數(shù)及采血間隔 由于多數(shù)病例中，細菌和真菌均一過性存在于血液中,單次血培養(yǎng)檢測的敏感性有限 取

19、兩對以上血培養(yǎng)是必要的 污染通常只出現(xiàn)在一個血培養(yǎng)瓶中；對于真正的血流感染，多個血培養(yǎng)瓶都會呈陽性 51血培養(yǎng)套數(shù)與陽性檢出率（）血培養(yǎng)套數(shù)與陽性檢出率（）6565808096969999血培養(yǎng)套數(shù)與陽性檢出率（）血培養(yǎng)套數(shù)與陽性檢出率（）524.血培養(yǎng)采血量血培養(yǎng)采血量 對于成人，每瓶血培養(yǎng)需要對于成人，每瓶血培養(yǎng)需要8 8-10ml-10ml血液。血液。 對于兒童，每瓶需要對于兒童，每瓶需要2-4ml2-4ml血液。血液。 對于嬰幼兒，采血量不應超過患兒總血量的對于嬰幼兒，采血量不應超過患兒總血量的1%1% (1 (1- -2 2mlml) )534.血培養(yǎng)采血量 血標本采集的量是影響檢出率的最重要的因素。 成人血培養(yǎng)采血量在230ml之間，病原菌檢出率與采血量成正比例增長。 每增加1ml的血液，病原菌的檢出率增加3.2% 兒童患者因為血液中病原菌濃度較高，血培養(yǎng)量無需等同于成人。 對血液病患者或者血容量相對較低的患者建議使用兒童瓶來