實(shí)驗(yàn)三 細(xì)菌的分離培養(yǎng)及移植

1、 兩個(gè)概念兩個(gè)概念： 在細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)中，細(xì)菌的分離培養(yǎng)是重要的基在細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)中，細(xì)菌的分離培養(yǎng)是重要的基本技術(shù)之一。本技術(shù)之一。 分離：分離：從混雜微生物中獲得單一菌株純培養(yǎng)的從混雜微生物中獲得單一菌株純培養(yǎng)的方法；方法； 純培養(yǎng)：純培養(yǎng)：一株菌種或一個(gè)培養(yǎng)物中所有的細(xì)菌一株菌種或一個(gè)培養(yǎng)物中所有的細(xì)菌都是由一個(gè)細(xì)胞分裂、繁殖而產(chǎn)生的后代。都是由一個(gè)細(xì)胞分裂、繁殖而產(chǎn)生的后代。1 1 掌握細(xì)菌分離培養(yǎng)的基本要領(lǐng)和方法掌握細(xì)菌分離培養(yǎng)的基本要領(lǐng)和方法2 2 掌握挑菌、純培養(yǎng)及移植技術(shù)掌握挑菌、純培養(yǎng)及移植技術(shù)3 3 了解細(xì)菌的菌落形態(tài)及其在各種培養(yǎng)基上的培養(yǎng)性了解細(xì)菌的菌落形態(tài)及其在各種培養(yǎng)基上的

2、培養(yǎng)性狀狀球球1 1 菌種：大腸桿菌斜面、大腸桿菌與金黃色葡萄球菌種：大腸桿菌斜面、大腸桿菌與金黃色葡萄球菌的混合培養(yǎng)肉湯等；菌的混合培養(yǎng)肉湯等；2 2 培養(yǎng)基：普通肉湯、普通瓊脂斜面、普通瓊脂平培養(yǎng)基：普通肉湯、普通瓊脂斜面、普通瓊脂平板板3 3 器械：剪刀、記號(hào)筆、酒精燈、接種環(huán)器械：剪刀、記號(hào)筆、酒精燈、接種環(huán)1. 1. 平板劃線(xiàn)分離法平板劃線(xiàn)分離法 菌種菌種被其他被其他雜菌污染雜菌污染時(shí)或時(shí)或混合菌懸液混合菌懸液常用平板劃線(xiàn)法進(jìn)行純常用平板劃線(xiàn)法進(jìn)行純種分離。種分離。 此法是借助將蘸有混合菌懸液的接種環(huán)在平板表面此法是借助將蘸有混合菌懸液的接種環(huán)在平板表面多方向連多方向連續(xù)劃線(xiàn)續(xù)劃線(xiàn)，

3、使混雜的微生物細(xì)胞在，使混雜的微生物細(xì)胞在平板表面分散平板表面分散，以求得到分散，以求得到分散的由的由單個(gè)微生物細(xì)胞繁殖單個(gè)微生物細(xì)胞繁殖而成的菌落，從而達(dá)到純化目的。而成的菌落，從而達(dá)到純化目的。 劃線(xiàn)培養(yǎng)時(shí)注意問(wèn)題：劃線(xiàn)培養(yǎng)時(shí)注意問(wèn)題：左手持皿，用左手拇指、食指及中指將平皿左手持皿，用左手拇指、食指及中指將平皿揭揭開(kāi)約呈開(kāi)約呈20的角度的角度(圖圖1)；右手持接種環(huán)，右手持接種環(huán)，灼燒冷卻灼燒冷卻后從混合培養(yǎng)肉湯中后從混合培養(yǎng)肉湯中取取少量涂布少量涂布于培養(yǎng)基邊緣，開(kāi)始劃線(xiàn)于培養(yǎng)基邊緣，開(kāi)始劃線(xiàn)(圖圖2)；劃線(xiàn)前先將劃線(xiàn)前先將接種環(huán)稍稍彎曲接種環(huán)稍稍彎曲，使之易，使之易與瓊脂面與瓊脂面平行

4、，不致劃破培養(yǎng)基；平行，不致劃破培養(yǎng)基；劃線(xiàn)中劃線(xiàn)中不易不易過(guò)多的過(guò)多的重復(fù)舊線(xiàn)重復(fù)舊線(xiàn)，以免形成菌苔；，以免形成菌苔；接種完畢，在皿底接種完畢，在皿底作好標(biāo)記作好標(biāo)記（菌名、日期、接（菌名、日期、接種者等），種者等），平皿倒扣平皿倒扣，置于，置于37培養(yǎng)。培養(yǎng)。 圖圖2 2 連續(xù)劃線(xiàn)法連續(xù)劃線(xiàn)法 區(qū)劃線(xiàn)法區(qū)劃線(xiàn)法圖圖1 劃線(xiàn)分離示意圖劃線(xiàn)分離示意圖2.2.純培養(yǎng)的獲得與移植法純培養(yǎng)的獲得與移植法 -瓊脂斜面分離法瓊脂斜面分離法 將將37下培養(yǎng)下培養(yǎng)24h的平板從溫箱取出，挑取的平板從溫箱取出，挑取單個(gè)菌落，鏡檢單個(gè)菌落，鏡檢不含雜菌不含雜菌，即用接種環(huán)，即用接種環(huán)挑取挑取單個(gè)菌落單個(gè)菌落移植

5、于瓊脂斜面培養(yǎng)，所得的培養(yǎng)移植于瓊脂斜面培養(yǎng)，所得的培養(yǎng)物即為物即為純培養(yǎng)物。純培養(yǎng)物。圖圖3 3 斜面接種時(shí)試管的拿法斜面接種時(shí)試管的拿法 圖圖4 4 斜面接種時(shí)無(wú)菌操作的程序斜面接種時(shí)無(wú)菌操作的程序 左手左手斜持菌種管斜持菌種管和和被接種瓊脂斜面管被接種瓊脂斜面管，使，使管口相互并齊，管底部放在拇指和食指之間，管口相互并齊，管底部放在拇指和食指之間，松動(dòng)兩管塞子松動(dòng)兩管塞子，以便接種時(shí)易拔出（圖，以便接種時(shí)易拔出（圖3）。）。 右手持接種棒，右手持接種棒，火焰滅菌火焰滅菌后，用右手小指和無(wú)名指并齊同時(shí)拔出兩管塞，將管口進(jìn)行火后，用右手小指和無(wú)名指并齊同時(shí)拔出兩管塞，將管口進(jìn)行火焰滅菌，使其

6、靠近火焰。焰滅菌，使其靠近火焰。 將接種環(huán)將接種環(huán)深入菌種管內(nèi)深入菌種管內(nèi)，先在無(wú)菌生長(zhǎng)的，先在無(wú)菌生長(zhǎng)的瓊脂上接觸瓊脂上接觸使之使之冷卻冷卻，再，再挑取少許細(xì)菌挑取少許細(xì)菌后拉出后拉出接種環(huán)立即接種環(huán)立即放入另一斜面培養(yǎng)基放入另一斜面培養(yǎng)基上，勿碰及斜面和管壁，直達(dá)斜面底部。上，勿碰及斜面和管壁，直達(dá)斜面底部。 從從斜面底部開(kāi)始劃曲線(xiàn)，向上至斜面頂端為止斜面底部開(kāi)始劃曲線(xiàn)，向上至斜面頂端為止，管口通過(guò)火焰滅菌，塞好棉塞，滅菌接，管口通過(guò)火焰滅菌，塞好棉塞，滅菌接種環(huán)，作好標(biāo)記，置于種環(huán)，作好標(biāo)記，置于3737溫箱培養(yǎng)。（圖溫箱培養(yǎng)。（圖4 4）2.1 2.1 兩試管間的斜面移植兩試管間的斜面

7、移植2.2 2.2 平板到試管斜面移植平板到試管斜面移植 手執(zhí)接種棒，火焰滅菌，手執(zhí)接種棒，火焰滅菌，左手打開(kāi)平皿蓋左手打開(kāi)平皿蓋，將接種，將接種環(huán)置于平皿蓋上使之冷卻；環(huán)置于平皿蓋上使之冷卻； 挑取可疑的菌落挑取可疑的菌落，左手蓋上平皿蓋后立即取斜面管，左手蓋上平皿蓋后立即取斜面管，深入斜面管中，從深入斜面管中，從斜面底部開(kāi)始劃曲線(xiàn)，向上至斜面斜面底部開(kāi)始劃曲線(xiàn)，向上至斜面頂端為止頂端為止； 管口通過(guò)火焰滅菌，塞好棉塞，滅菌接種環(huán)，作好管口通過(guò)火焰滅菌，塞好棉塞，滅菌接種環(huán)，作好標(biāo)記，置于標(biāo)記，置于3737溫箱培養(yǎng)。溫箱培養(yǎng)。 當(dāng)組織當(dāng)組織病料中含病原菌少病料中含病原菌少，或有，或有抗菌藥殘

8、留抗菌藥殘留時(shí)，用時(shí)，用瓊脂斜面或平板分離法可能無(wú)菌落長(zhǎng)出，為瓊脂斜面或平板分離法可能無(wú)菌落長(zhǎng)出，為提高提高由病由病料中料中分離培養(yǎng)細(xì)菌的機(jī)會(huì)分離培養(yǎng)細(xì)菌的機(jī)會(huì)，這時(shí)可以無(wú)菌操作剪取一，這時(shí)可以無(wú)菌操作剪取一小塊病料直接投入小塊病料直接投入肉湯肉湯，經(jīng)，經(jīng)3737培養(yǎng)培養(yǎng)，在肉湯中長(zhǎng)出，在肉湯中長(zhǎng)出細(xì)菌后，觀(guān)察其在液體培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)表現(xiàn)，再用瓊細(xì)菌后，觀(guān)察其在液體培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)表現(xiàn)，再用瓊脂斜面或瓊脂平板分離。脂斜面或瓊脂平板分離。3.3.營(yíng)養(yǎng)肉湯增菌培養(yǎng)法營(yíng)養(yǎng)肉湯增菌培養(yǎng)法 4.4.穿刺培養(yǎng)法穿刺培養(yǎng)法 半固體移植半固體移植多用穿刺法接種。多用穿刺法接種。 方法基本與純培養(yǎng)接種相同，不同的是

9、用接方法基本與純培養(yǎng)接種相同，不同的是用接種針挑取菌落，種針挑取菌落，垂直刺入培養(yǎng)基垂直刺入培養(yǎng)基內(nèi)。從培養(yǎng)基內(nèi)。從培養(yǎng)基表面的表面的中部一直刺入管底中部一直刺入管底，然后按，然后按原方向退出原方向退出即可。即可。5.5.傾注培養(yǎng)法傾注培養(yǎng)法 取三支預(yù)先準(zhǔn)備的普通瓊脂培養(yǎng)基試管，加熱融化，冷至約取三支預(yù)先準(zhǔn)備的普通瓊脂培養(yǎng)基試管，加熱融化，冷至約5050用火焰滅菌用火焰滅菌接種環(huán)釣取待分離物接種至第一管內(nèi)，充分搖勻后，自第一管取一接種環(huán)內(nèi)容物接種環(huán)釣取待分離物接種至第一管內(nèi)，充分搖勻后，自第一管取一接種環(huán)內(nèi)容物至第二管，以同樣方法自第二管移種至第三管。然后分別傾注一個(gè)已滅菌的平皿，至第二管，以

10、同樣方法自第二管移種至第三管。然后分別傾注一個(gè)已滅菌的平皿，凝固后倒轉(zhuǎn)置于凝固后倒轉(zhuǎn)置于3737溫箱內(nèi)培養(yǎng)溫箱內(nèi)培養(yǎng)24h24h。結(jié)果。結(jié)果多數(shù)細(xì)菌在瓊脂內(nèi)生長(zhǎng)成菌落，僅少多數(shù)細(xì)菌在瓊脂內(nèi)生長(zhǎng)成菌落，僅少數(shù)菌落出現(xiàn)在表面數(shù)菌落出現(xiàn)在表面，通常第一個(gè)平板內(nèi)的菌落數(shù)較多而密集，第二、三個(gè)平板則，通常第一個(gè)平板內(nèi)的菌落數(shù)較多而密集，第二、三個(gè)平板則逐漸減少，可見(jiàn)單個(gè)菌落。逐漸減少，可見(jiàn)單個(gè)菌落。6.6.芽胞需氧菌分離培養(yǎng)法芽胞需氧菌分離培養(yǎng)法 如果被檢材料中如果被檢材料中可疑有帶芽孢可疑有帶芽孢的細(xì)菌，可先將被檢材料加少量生理鹽水或肉湯，的細(xì)菌，可先將被檢材料加少量生理鹽水或肉湯，置于置于8080水

11、浴箱中維持水浴箱中維持15152020分鐘分鐘，再進(jìn)行培養(yǎng)。材料中若有，再進(jìn)行培養(yǎng)。材料中若有帶芽孢帶芽孢的細(xì)菌仍可的細(xì)菌仍可存活而生長(zhǎng)繁殖存活而生長(zhǎng)繁殖，不耐熱的不耐熱的細(xì)菌繁殖體則細(xì)菌繁殖體則被殺滅被殺滅。7.7.利用化學(xué)藥品的分離培養(yǎng)法利用化學(xué)藥品的分離培養(yǎng)法 (1)(1)抑菌作用抑菌作用: : 有些藥品對(duì)某些細(xì)菌有極強(qiáng)的抑制作用，而對(duì)另外一些細(xì)菌沒(méi)有有些藥品對(duì)某些細(xì)菌有極強(qiáng)的抑制作用，而對(duì)另外一些細(xì)菌沒(méi)有抑制作用，所以可利用這種特性進(jìn)行細(xì)菌的分離。抑制作用，所以可利用這種特性進(jìn)行細(xì)菌的分離。(2)(2)殺菌作用殺菌作用: : 將病料如結(jié)核病料用將病料如結(jié)核病料用1515硫酸溶液處理，其

12、他雜菌均被殺死，而硫酸溶液處理，其他雜菌均被殺死，而結(jié)核桿菌因具有抗酸性而存活。結(jié)核桿菌因具有抗酸性而存活。(3)(3)鑒別作用鑒別作用: : 利用細(xì)菌對(duì)某種糖的分解能力，通過(guò)培養(yǎng)基中指示劑的變化來(lái)鑒利用細(xì)菌對(duì)某種糖的分解能力，通過(guò)培養(yǎng)基中指示劑的變化來(lái)鑒別某種細(xì)菌。別某種細(xì)菌。8.8.通過(guò)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分離法通過(guò)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分離法 被檢病料中疑有某種病原菌存在，將病料無(wú)菌取出，無(wú)菌研磨后加被檢病料中疑有某種病原菌存在，將病料無(wú)菌取出，無(wú)菌研磨后加3 35 5倍量無(wú)倍量無(wú)菌生理鹽水制成混懸液，吸取一定量混懸液注射（肌肉、腹腔、皮下或靜脈）入菌生理鹽水制成混懸液，吸取一定量混懸液注射（肌肉、腹腔、皮下或靜

13、脈）入易感實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物死后，取其臟器，?？煞蛛x到純的病原菌。易感實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物死后，取其臟器，?？煞蛛x到純的病原菌。 細(xì)菌接種后，直接放在恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)，可以使需氧菌與兼性細(xì)菌接種后，直接放在恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)，可以使需氧菌與兼性厭氧菌生長(zhǎng)繁殖；但對(duì)厭氧菌生長(zhǎng)繁殖；但對(duì)厭氧菌厭氧菌，則需將培養(yǎng)環(huán)境或培養(yǎng)基中的，則需將培養(yǎng)環(huán)境或培養(yǎng)基中的氧氣除去氧氣除去，或?qū)⒀趸臀镔|(zhì)還原，或?qū)⒀趸臀镔|(zhì)還原，降低其氧化還原電勢(shì)降低其氧化還原電勢(shì)，才能，才能生長(zhǎng)繁殖。在有氧的環(huán)境下，培養(yǎng)基的氧化還原電勢(shì)較高，不生長(zhǎng)繁殖。在有氧的環(huán)境下，培養(yǎng)基的氧化還原電勢(shì)較高，不適于厭氧菌的生長(zhǎng)。為使培養(yǎng)基降低電勢(shì)，降低

14、培養(yǎng)環(huán)境的氧適于厭氧菌的生長(zhǎng)。為使培養(yǎng)基降低電勢(shì)，降低培養(yǎng)環(huán)境的氧分壓是十分必要的。分壓是十分必要的。 現(xiàn)有的厭氧培養(yǎng)法很多，主要有現(xiàn)有的厭氧培養(yǎng)法很多，主要有生物學(xué)法、化學(xué)法和物理學(xué)生物學(xué)法、化學(xué)法和物理學(xué)法法，可根據(jù)各實(shí)驗(yàn)室的具體情況而選用。，可根據(jù)各實(shí)驗(yàn)室的具體情況而選用。(1) (1) 動(dòng)物組織及其他物質(zhì)加入法：在液體培養(yǎng)基內(nèi)加入肝臟、腎臟等動(dòng)動(dòng)物組織及其他物質(zhì)加入法：在液體培養(yǎng)基內(nèi)加入肝臟、腎臟等動(dòng)物臟器，因其中的半胱氨酸的一物臟器，因其中的半胱氨酸的一SHSH基極不穩(wěn)定，為強(qiáng)還原劑?；鶚O不穩(wěn)定，為強(qiáng)還原劑。(2) (2) 共棲培養(yǎng)法：將厭氧菌與需氧菌共同培養(yǎng)在同一個(gè)平皿內(nèi)，利用需共

15、棲培養(yǎng)法：將厭氧菌與需氧菌共同培養(yǎng)在同一個(gè)平皿內(nèi)，利用需氧菌的生長(zhǎng)繁殖將氧氣消耗后，造成厭氧環(huán)境利于厭氧菌生長(zhǎng)。氧菌的生長(zhǎng)繁殖將氧氣消耗后，造成厭氧環(huán)境利于厭氧菌生長(zhǎng)。1. 1. 生物學(xué)法生物學(xué)法2. 2. 化學(xué)方法化學(xué)方法 利用還原能力強(qiáng)的化學(xué)物質(zhì)，將環(huán)境或培養(yǎng)基內(nèi)的氧氣消耗，或還利用還原能力強(qiáng)的化學(xué)物質(zhì)，將環(huán)境或培養(yǎng)基內(nèi)的氧氣消耗，或還原氧化型物質(zhì)，降低氧化原氧化型物質(zhì)，降低氧化- -還原電勢(shì)。還原電勢(shì)。焦性沒(méi)食子酸法焦性沒(méi)食子酸法: : 平板培養(yǎng)法、平板培養(yǎng)法、BuchnerBuchner氏試管法、史氏厭氧培養(yǎng)氏試管法、史氏厭氧培養(yǎng)法、平皿厭氧培養(yǎng)法法、平皿厭氧培養(yǎng)法 、玻罐或干燥器法、

16、玻罐或干燥器法李伏夫（李伏夫（B.M.JIbBOBB.M.JIbBOB）氏法）氏法 (1)(1) 硫乙醇酸鈉法：液體培養(yǎng)基法、固體培養(yǎng)基法硫乙醇酸鈉法：液體培養(yǎng)基法、固體培養(yǎng)基法 3. 3. 物理學(xué)方法物理學(xué)方法 厭氧罐法、真空干燥器法、加熱密封法、高層瓊脂柱厭氧罐法、真空干燥器法、加熱密封法、高層瓊脂柱（一）細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)表現(xiàn)（一）細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)表現(xiàn)瓊脂平皿上的生長(zhǎng)表現(xiàn)瓊脂平皿上的生長(zhǎng)表現(xiàn) ：細(xì)菌于固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)繁殖，形成單個(gè)肉眼細(xì)菌于固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)繁殖，形成單個(gè)肉眼可見(jiàn)的細(xì)菌集落群體，稱(chēng)為菌落。各種細(xì)菌的菌落，按其特征的不同，可可見(jiàn)的細(xì)菌集落群體，稱(chēng)為菌落。各種

17、細(xì)菌的菌落，按其特征的不同，可以在一定程度上鑒別某種細(xì)菌。以在一定程度上鑒別某種細(xì)菌。 葡萄球菌在瓊脂平皿上，由于產(chǎn)生色素的不同，形成各種顏色的圓形而突起葡萄球菌在瓊脂平皿上，由于產(chǎn)生色素的不同，形成各種顏色的圓形而突起的菌落的菌落；炭疽桿菌形成扁平干燥，邊緣不整齊的火焰狀菌落，用放大鏡觀(guān)；炭疽桿菌形成扁平干燥，邊緣不整齊的火焰狀菌落，用放大鏡觀(guān)察時(shí)，呈卷發(fā)樣構(gòu)造；腸道桿菌屬的細(xì)菌，形成圓形、濕潤(rùn)、粘稠、扁平、察時(shí)，呈卷發(fā)樣構(gòu)造；腸道桿菌屬的細(xì)菌，形成圓形、濕潤(rùn)、粘稠、扁平、大小不等的菌落；巴氏桿菌和豬丹毒桿菌，形成細(xì)小露珠狀菌落。觀(guān)察菌大小不等的菌落；巴氏桿菌和豬丹毒桿菌，形成細(xì)小露珠狀菌落

18、。觀(guān)察菌落的方法除肉眼外，還可用放大鏡，必要時(shí)也可用低倍顯微鏡進(jìn)行檢查。落的方法除肉眼外，還可用放大鏡，必要時(shí)也可用低倍顯微鏡進(jìn)行檢查。( (見(jiàn)圖見(jiàn)圖5-6)5-6)圖圖5 5 菌落的形態(tài)菌落的形態(tài)從左到右，從上到下分別是：從左到右，從上到下分別是：1.1.圓形、邊緣整齊、表面光滑；圓形、邊緣整齊、表面光滑；2 2圓形、邊圓形、邊緣整齊、表面有同心圓；緣整齊、表面有同心圓；3 3圓形、葉狀邊緣、表面有放射狀皺褶；圓形、葉狀邊緣、表面有放射狀皺褶；4 4圓圓形、鋸齒狀邊緣、表面較不光滑；形、鋸齒狀邊緣、表面較不光滑；5 5不規(guī)則形、波浪狀邊緣、表面有不規(guī)不規(guī)則形、波浪狀邊緣、表面有不規(guī)則皺紋；則

19、皺紋；6 6圓形、邊緣殘缺不全、表面呈顆粒狀；圓形、邊緣殘缺不全、表面呈顆粒狀；7 7毛狀毛狀 ；8 8根狀根狀圖圖6 6 菌落的隆起度菌落的隆起度左到右，上到下：左到右，上到下：1 1扁平狀；扁平狀； 2 2低隆起；低隆起；3 3隆起；隆起；4 4臺(tái)臺(tái)狀；狀； 5 5臍狀；臍狀；6 6紐扣狀；紐扣狀；7 7乳頭狀；乳頭狀；8 8褶皺凸面褶皺凸面2.2.瓊脂斜面上生長(zhǎng)表現(xiàn)瓊脂斜面上生長(zhǎng)表現(xiàn) 將各種細(xì)菌分別以接種針直線(xiàn)接種于瓊脂斜面上（自底部將各種細(xì)菌分別以接種針直線(xiàn)接種于瓊脂斜面上（自底部向上劃一直線(xiàn)），培養(yǎng)后觀(guān)察其生長(zhǎng)表現(xiàn)。向上劃一直線(xiàn)），培養(yǎng)后觀(guān)察其生長(zhǎng)表現(xiàn)。( (見(jiàn)圖見(jiàn)圖7 )7 )3 3瓊脂柱穿刺培養(yǎng)中的生長(zhǎng)表現(xiàn)瓊脂柱穿刺培養(yǎng)中的生長(zhǎng)表現(xiàn) 將各種細(xì)菌分別以接種針穿刺接種于瓊脂柱中將各種細(xì)菌分別以接種針穿刺接種于瓊脂柱中，培養(yǎng)后觀(guān)察其生長(zhǎng)表現(xiàn)。，培養(yǎng)后觀(guān)察其生長(zhǎng)表現(xiàn)。( (見(jiàn)圖見(jiàn)圖8)8)圖圖7 7 瓊脂斜面培養(yǎng)的菌落表現(xiàn)瓊脂斜面培養(yǎng)的菌落表現(xiàn)圖圖8 8 瓊脂柱穿刺培養(yǎng)的菌落表現(xiàn)瓊脂柱穿刺培養(yǎng)的菌落表現(xiàn)1.1.線(xiàn)狀；線(xiàn)狀；2 2棘狀；棘狀；