胸膜肺炎放線桿菌的分離鑒定與藥物敏感性的檢測(cè)

1、胸膜肺炎放線桿菌的分離鑒定胸膜肺炎放線桿菌的分離鑒定與藥物敏感性檢測(cè)與藥物敏感性檢測(cè)報(bào)告人：邵健QQ：6446368622012.10.19報(bào)告內(nèi)容報(bào)告內(nèi)容 胸膜肺炎放線桿菌簡(jiǎn)介 分離細(xì)菌的豬場(chǎng)背景 分離APP的鑒定 藥物敏感性的檢測(cè) 防治方案的確定 豬 胸 膜 肺 炎 放 線 桿 菌 ( A c t i n o b a c i l l u s p l e u r o -pneumoniae,APP)為革蘭氏陰性球桿菌，有莢膜，大多溶血，APP有兩個(gè)生物型，生物型是煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)依賴(lài)性細(xì)菌，有13個(gè)血清型，是主要的致病血清型(Barbara，2008)。 該病主要以急性出血和慢

2、性的纖維素性壞死性胸膜炎病變?yōu)橹饕卣?，主要侵?5月齡、體重3060 kg的豬,且具高度傳染性，常呈急性或最急性經(jīng)過(guò)，發(fā)病率、死亡率均在50%以上（馮學(xué)平，1987；任光澄，1981）一一 胸膜胸膜肺炎放線桿菌簡(jiǎn)介肺炎放線桿菌簡(jiǎn)介分離細(xì)菌的豬場(chǎng)背景 湖南XX豬場(chǎng)3月齡左右的豬發(fā)病并出現(xiàn)大量死亡。臨床主要表現(xiàn)為體溫升高,呼吸困難，迅速死亡，死亡時(shí)口鼻流出少量的泡沫狀血性液體。剖檢可見(jiàn)病豬肺呈紫紅色肝變，肺炎區(qū)表面有纖維素性附著物，胸膜增厚，表現(xiàn)為明顯的胸膜炎病理變化。 今年三月份該豬場(chǎng)也發(fā)生過(guò)豬胸膜肺炎，采用疫苗控制收效甚微，后采用抗生素預(yù)防加治療才有所改善，在10月份保育豬再次大量發(fā)病胸膜肺

3、炎。二二 分離分離細(xì)菌的豬場(chǎng)背景細(xì)菌的豬場(chǎng)背景發(fā)病豬肺充血、出血呈紫紅色發(fā)病稍慢的表現(xiàn)為嚴(yán)重的纖維素性胸膜炎，在肺臟表面有黃白色的纖維素性滲出物發(fā)病豬肺臟的病理變化發(fā)病豬肺臟的病理變化（刁有祥，豬胸膜肺炎放線桿菌分子流行病學(xué)研究，2005）組織 細(xì)菌胸膜肺炎放線桿菌鏈球菌肺1- -+ +肺2+ +- -肺3+ +- -肺4+ +- -心血1- -+ +心血2- - -送檢病原菌分離情況送檢病原菌分離情況表一 送檢病原菌分離統(tǒng)計(jì)表菌落形態(tài)的觀察三三 胸膜肺炎放線桿菌的鑒定胸膜肺炎放線桿菌的鑒定分離菌在TSA.V.S培養(yǎng)基上均為邊緣整齊、圓形、表面稍隆起、半透明濕潤(rùn)、針尖至中等大小的菌落 細(xì)菌培養(yǎng)

4、基CS1016F2-APPCS1016F3-APPCS1016F4-APPCS1016F1-SSTSA.V.S+血瓊脂+SS瓊脂APPAPP在不同培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況在不同培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況表二 分離得到細(xì)菌在不同培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況 分離培養(yǎng)物經(jīng)涂片、染色、鏡檢，均能見(jiàn)革蘭氏陰性，單在、成雙或鏈狀的球菌或球桿菌革蘭氏染色鏡檢革蘭氏染色鏡檢糖 菌株CS1016F2-APPCS1016F3-APPCS1016F4-APP棉子糖木糖+ + + +甘露醇+ + + +鼠李糖麥芽糖+ + +阿拉伯糖乳糖山梨醇-半乳糖苷+ + + +蔗糖+ + + +生化生化鑒定鑒定結(jié)果結(jié)果注：代表陰性；+代表陽(yáng)性；代表反

5、映不明顯表三 生化鑒定結(jié)果統(tǒng)計(jì)表PCR鑒定鑒定 M 1 2 3 4 5M為T(mén)rans DNA Marker 1為鏈球菌；2、3、4 150bp條帶為胸膜肺炎放線桿菌；5為H2O對(duì)照200100圖一 PCR特異性檢測(cè)細(xì)菌名稱(chēng)： APP 菌株編號(hào)：CS1016F2-APP藥敏試紙抑菌圈（mm）敏感性藥敏試紙抑菌圈（mm） 敏感性頭孢噻肟26S先鋒霉素V24S阿莫西林26S青霉素20R復(fù)方新諾明18S氨芐西林24S阿奇霉素26S鏈霉素10R阿米卡星24S慶大霉素14I多粘菌素B10I氟苯尼考10R四環(huán)素14R強(qiáng)力霉素14I卡那霉素14I痢特靈16I萘啶酸24S壯觀霉素14R新霉素12R四四 藥物敏感

6、性的檢測(cè)藥物敏感性的檢測(cè)表四 CS1016F2-APP藥物敏感性統(tǒng)計(jì)表細(xì)菌名稱(chēng)：APP 菌株編號(hào)：CS1016F3-APP藥敏試紙抑菌圈（mm）敏感性藥敏試紙抑菌圈（mm）敏感性頭孢噻肟28S先鋒霉素V26S阿莫西林28S青霉素34S復(fù)方新諾明18S氨芐西林30S阿奇霉素20S鏈霉素12I阿米卡星26S慶大霉素13I多粘菌素B10I氟苯尼考12R四環(huán)素14R強(qiáng)力霉素14I卡那霉素14I痢特靈16I萘啶酸26S壯觀霉素16I新霉素12R表五 CS1016F3-APP藥物敏感性統(tǒng)計(jì)表細(xì)菌名稱(chēng)：APP 菌株編號(hào)：CS1016F4-APP藥敏試紙抑菌圈（mm）敏感性藥敏試紙抑菌圈（mm） 敏感性頭孢噻

7、肟28S先鋒霉素V28S阿莫西林28S青霉素22R復(fù)方新諾明20S氨芐西林28S阿奇霉素20S鏈霉素14I阿米卡星28S慶大霉素15S多粘菌素B12S氟苯尼考11R四環(huán)素12R強(qiáng)力霉素14I卡那霉素16I痢特靈16I萘啶酸22S壯觀霉素17I新霉素12R表六 CS1016F4-APP藥物敏感性統(tǒng)計(jì)表 藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明，頭孢類(lèi)藥物、氨基糖甙類(lèi)藥物可作為治療本場(chǎng)豬傳染性胸膜肺炎的首選藥物。若豬采食和飲水正常,可采取注射與口服同時(shí)給藥。應(yīng)注意交替用藥，按療程投藥，這樣才能收到較好的治療效果。同時(shí)注意豬場(chǎng)內(nèi)的消毒與衛(wèi)生。 考慮到本場(chǎng)之前大規(guī)模發(fā)病時(shí)采取各種預(yù)防措施收效甚微，后來(lái)通過(guò)抗生素才得以控制，而且分離株對(duì)比較多的藥物敏感，本次發(fā)病依然可以采用抗生素解決，選擇藥敏試驗(yàn)敏感菌株。 五五 防治方案的確定防治方案的確定 各年齡豬均可感染豬胸膜肺炎放線桿菌，3月齡豬最易感。本病多發(fā)于每年的4-5月或9-11月，具有明顯