血液科出科PPT

1、淺談血常規(guī)2014級 彭濱目目 錄錄01血常規(guī)儀器檢測原理02常見誤差原因03常見血液病散點圖討論血常規(guī)儀器檢測原理三種通道DIFFDIFF通道通道（粒系及單核系）（粒系及單核系）光散射光散射（紅細胞、血小板）（紅細胞、血小板）1 1 光散射光散射與細胞化學染色法白細胞分類計數(shù)與細胞化學染色法白細胞分類計數(shù)（SYSMEX,SYSMEX,邁瑞邁瑞) )1 1）過氧化物酶檢測通道（）過氧化物酶檢測通道（DIFFDIFF通道）：通道）： 過氧化物酶活性過氧化物酶活性; ; 嗜酸性粒細胞陽性最強，嗜中性粒細胞強陽性嗜酸性粒細胞陽性最強，嗜中性粒細胞強陽性 單核細胞弱陽性單核細胞弱陽性 淋巴細胞、嗜堿粒

2、細胞無過氧化物酶活性。淋巴細胞、嗜堿粒細胞無過氧化物酶活性。 樣本樣本+ +溶血劑溶血劑+過氧化酶過氧化酶(MPO)底物及現(xiàn)色劑底物及現(xiàn)色劑 光散射光散射 不同顏色的散點圖不同顏色的散點圖散射圖定位：散射圖定位：X X軸為吸光率（酶反應軸為吸光率（酶反應強度）強度）Y Y軸為光散射（細胞大?。╋@軸為光散射（細胞大小）顯示檢測結果。示檢測結果。 鞘流技術使細胞單個通過檢測區(qū)鞘流技術使細胞單個通過檢測區(qū)，從而識別和計算細胞個數(shù)。，從而識別和計算細胞個數(shù)。BS5800BS5800和和SYSMEXSYSMEX在這通道計算白細在這通道計算白細胞總數(shù)，胞總數(shù)，BS5300BS5300有專門的有專門的WBC

3、WBC通道，通道，利用阻抗法計算總數(shù)利用阻抗法計算總數(shù)2 2）嗜堿性粒細胞）嗜堿性粒細胞/ /分葉核檢測通道分葉核檢測通道（WBC/BASOWBC/BASO通道通道) ) 溶血劑溶血劑StrmatolyzerStrmatolyzer-BA-BA將除嗜堿將除嗜堿細胞以外的細胞溶解，細胞以外的細胞溶解，光散射光散射 得到得到WBC/BASOWBC/BASO散點圖散點圖2 2 光散射法紅細胞體積和光散射法紅細胞體積和HGBHGB檢測原理檢測原理低角度低角度(2(2-3-3) )光散射：測量紅細胞體積光散射：測量紅細胞體積高角度高角度(5(5-15-15) )光散射：測定紅細胞血紅蛋白濃度光散射：測定

4、紅細胞血紅蛋白濃度得到得到MCVMCV、MCHMCH、MCHCMCHC測定值，計算出測定值，計算出RDWRDW、紅細胞血紅、紅細胞血紅蛋白分布寬度（蛋白分布寬度（red blood cell hemoglobin red blood cell hemoglobin distribution widthdistribution width，HDWHDW）MieMie理論（理論（Mie theory of light scatter for Mie theory of light scatter for homogeneous sphereshomogeneous spheres）：當球形化的血小

5、板一個一個）：當球形化的血小板一個一個通過激光照射區(qū)時：通過激光照射區(qū)時：高角度（高角度（5 5 1515）光散射：檢測細胞折射指數(shù)）光散射：檢測細胞折射指數(shù)（reactive indexreactive index，RIRI）；）；低角度（低角度（2 23 3）光散射：測量細胞大小。）光散射：測量細胞大小。大血小板與各種碎片如果體積相似，但由于內容物不大血小板與各種碎片如果體積相似，但由于內容物不同，同，RIRI相差較大，故能鑒別。相差較大，故能鑒別。3.3.光散射法血小板檢測原理光散射法血小板檢測原理文 本 內 容低低角角度度散散射射信信號號 體體積積大大小小巨大未成熟細胞區(qū)LIC中性粒+

6、嗜堿粒細胞區(qū)NEU+BAS異型淋巴細胞區(qū)ALY中性粒核左移細胞區(qū)LEF SHIF嗜酸性粒細胞區(qū)EOS嗜堿性粒細胞區(qū)BAS（淋巴細胞區(qū)LYM單核細胞區(qū)MON02常見誤差原因1 白細胞計數(shù)假性增高白細胞計數(shù)假性增高 1.1 由于標本采血不順利，或抗凝劑不足，或混勻不充分，致使標本產生凝血，血小板凝集。解決方法：加適量的抗凝劑，重新采血，充分混勻標本后重新檢測。1.2 天氣寒冷，由于室溫低，產生蛋白沉淀小塊，這時儀器直方圖血小板右邊曲線下不來。解決方法：37 加溫，離心后等量生理鹽水兌換血漿，充分混勻標本后重新檢測。1.3 標本紅細胞溶解不徹底 見于肝病、異常血紅蛋白癥、高脂血癥、紅細胞膜變化而無法

7、完全溶血（肝硬化）等患者，這時儀器直方圖左邊淋巴峰抬高。解決方法：標本二倍稀釋，離心后等量生理鹽水兌換血漿，充分混勻標本后重新檢測，記得結果要乘以稀釋倍數(shù)。1.4 標本出現(xiàn)幼紅細胞 見于新生兒、臍帶血、溶血性貧血等，這時直方圖淋巴峰雙峰。解決方法：手工計數(shù)。1.5 標本出現(xiàn)大型血小板 見于脾亢、血小板減少癥等，由于疾病，這些患者的老中青血小板同時釋放出來參加血液循環(huán)。解決方法：手工計數(shù)。 文 本 內 容02常見誤差原因2 白細胞計數(shù)假性降低白細胞計數(shù)假性降低2.1 寒冷性白細胞凝集 解決方法：37 加溫，充分混勻標本后重新檢測。2.2 非寒冷性白細胞凝集 這時直方圖右邊出現(xiàn)小山峰，涂片有凝集。

8、解決方法：37 加溫或等量生理鹽水兌換血漿，充分混勻標本后重新檢測。3 紅細胞計數(shù)假性增高，一般系人為因素，不存在真正原因紅細胞計數(shù)假性增高，一般系人為因素，不存在真正原因標本久置后未充分混勻，底部吸樣。解決方法：充分混勻可避免。人體大量脫水，使血液濃縮，此時另一個參數(shù)紅細胞壓積會升高。解決方法：脫水糾正后重新采集標本檢測。4 紅細胞計數(shù)假性降低紅細胞計數(shù)假性降低紅細胞凝集，這時MCV值很大，鏡下有凝集小塊。解決方法：37 水浴孵5 min1,輕輕混勻,再檢測。5 血紅蛋白假性增高血紅蛋白假性增高5.1 乳糜標本 由于溶液渾濁,引起吸光度增加,造成Hb結果假性增高。解決方法：等量生理鹽水兌換血

9、漿。5.2 白細胞異常增高 當大于100.010個L時2，由于白細胞過高,溶液渾濁,引起吸光度增加,造成Hb結果假性增高。解決方法：用HiCN分光光度法測定Hb,比色前要高速離心取上清液比色。文 本 內 容02常見誤差原因6 MCV假性增高假性增高6.1 高血糖、高氮質血癥、高能量輸液，鉆入紅細胞內后腫大。解決方法：離心比積測定，二倍稀釋后5 min再測定。6.2 小淋巴細胞大量出現(xiàn)，被當作紅細胞。6.3 紅細胞凝集，MCV 值升高，紅細胞計數(shù)降低。6.4 紅細胞長時間放置產生球狀化。7 血小板計數(shù)假性增高血小板計數(shù)假性增高7.1 標本原因 標本中存在大血小板小紅細胞、細胞碎片、冷凝集素引起細

10、胞凝集等。小細胞是引起血小板計數(shù)結果產生誤差的常見原因 ，現(xiàn)代化血細胞計數(shù)儀可采用自動設置浮標界限方法進行排除。對于冷凝集素引起的干擾，可以37 水浴孵5 min后重新上機檢測。7.2 儀器在安裝時出現(xiàn)的一些問題 如接頭松動、地線安裝不好，對血小板均產生干擾，特別是地線連接出了問題，血小板基數(shù)可達15010個L以上，在這種情況下，必須馬上查清原因，清洗調整儀器，裝好地線，使血小板的基數(shù)為0，或手工復查后方可發(fā)報告，避免錯誤報告產生。7.3 試劑不合格(如沉淀很多) 不配套試劑，均可引起錯誤結果的出現(xiàn)。解決辦法就是更換合格試劑。文 本 內 容02常見誤差原因8 血小板計數(shù)假性降低血小板計數(shù)假性降

11、低8.1 采血后不能及時測定是血小板減少的一個重要原因 目前大部分血常規(guī)均用自動血球儀測定，由于一些原因，導致標本久置，這樣會因血小板離體時間太長，發(fā)生變形、自溶、體積變小，太小的血小板，機器也會漏過，致使計數(shù)減少。因此采集的標本應該及時檢測。8.2 靜脈采血 必須一針見血，順利采到標本，且與抗凝劑迅速搖勻，否則血小板體積小，離開血管后易粘附于血管破損處及組織(也會粘附于玻璃等部位)，并相互聚集，使血小板計數(shù)減少。解決方法：重新采血，及時檢測。8.3 巨大血小板現(xiàn)象 解決方法：手工計數(shù)。8.4 抗凝劑有時也會影響血小板計數(shù) 如EDTA可引起非特異性血小板凝集，使血小板計數(shù)減少。換用肝素、枸櫞酸

12、鈉抗凝可消除干擾。文 本 內 容低低角角度度散散射射信信號號 體體積積大大小小巨大未成熟細胞區(qū)LIC中性粒+嗜堿粒細胞區(qū)NEU+BAS異型淋巴細胞區(qū)ALY中性粒核左移細胞區(qū)LEF SHIF嗜酸性粒細胞區(qū)EOS嗜堿性粒細胞區(qū)BAS（淋巴細胞區(qū)LYM單核細胞區(qū)MON文 本 內 容03常見血液病散點圖討論正常樣本正常樣本正常樣本正常樣本老化樣本老化樣本中性粒細胞增多中性粒細胞增多中性粒細胞增多中性粒細胞增多嗜酸性粒細胞增加嗜酸性粒細胞增加嗜酸性粒細胞增加嗜酸性粒細胞增加嗜堿性粒細胞增加嗜堿性粒細胞增加嗜堿性粒細胞增加嗜堿性粒細胞增加血小板增加血小板增加血小板增加血小板增加血小板增加血小板增加血小板增

13、加血小板增加核左移，未成熟細胞核左移，未成熟細胞-LIC核左移，未成熟細胞核左移，未成熟細胞-LIC核左移，未成熟（有核紅核左移，未成熟（有核紅？）？）核左移，未成熟（有核紅核左移，未成熟（有核紅？）？）異常異常/異性淋巴細胞異性淋巴細胞-ALY異常異常/ /異性淋巴細胞異性淋巴細胞-ALY-ALY人工鏡檢結果缺鐵性貧血缺鐵性貧血-IDA缺鐵性貧血缺鐵性貧血-IDA-地中海貧血地中海貧血維生素維生素B12缺乏癥缺乏癥寄生蟲感染寄生蟲感染粒細胞缺乏癥粒細胞缺乏癥粒細胞缺乏癥粒細胞缺乏癥慢性粒細胞白血病慢性粒細胞白血病-CML慢性粒細胞白血病慢性粒細胞白血病-CML慢性淋巴細胞白血病慢性淋巴細胞白血病-CLL慢性淋巴細胞白血病慢性淋巴細胞白血病-CLL急性淋巴細胞白血病急性淋巴細胞白血病-ALL急性淋巴細胞白血病急性淋巴細胞白血病-ALL急性原始粒細胞白血病急性原始粒細胞白血病-M2急性